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天龙仿生酶解制备小分子肽优选工艺
目的:优选天龙仿生酶解工艺.方法:采用福林酚比色法测定样品中小分子肽的含量,并以此为指标,分别对胃蛋白酶和胰蛋白酶的加酶量及酶解时间进行考察.结果:加5倍量去离子水,加热至沸腾,放至室温,用稀盐酸调pH 2.0,加入药材质量2.0％的胃蛋白酶,37℃保温振荡2.0h,用10％氢氧化钠溶液调pH 8.0,加入药材质量2.0％的胰蛋白酶,50℃保温振荡4.0h,放至室温,离心(5000r·min-1 ×5 min),分离上清液,微滤(0.22 μm),超滤,收集相对分子质量＜3000的滤液.结论:所优选的仿生酶解工艺稳定.
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淫羊藿苷仿生酶解过程的多因素考察
本实验对影响淫羊藿苷仿生酶解成宝藿苷Ⅰ的多种因素进行考察,并选择佳反应条件,为构建新型的淫羊藿苷仿生酶解给药系统提供研究基础.以酶解温度为37℃、缓冲溶液为人工肠液和人工胃液模拟体内环境,并以宝藿苷Ⅰ转化率为指标,考察酶的种类、酶活力、水解底物浓度、反应时间、人工肠液中胰酶及表面活性剂对宝藿苷Ⅰ生成的影响.结果表明:在人工胃液中纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和蜗牛酶均失活,基本没有宝藿苷Ⅰ生成;人工肠液中胰酶对β-葡萄糖苷酶、蜗牛酶酶解反应没有明显影响(P＞0.05),但显著降低纤维素酶的活性(P＜0.05).人工肠液中β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷得到的宝藿苷Ⅰ多,佳反应条件为酶活力10 U·mL-1、底物浓度1 mg·mL-1和3 g·L-1鼠李糖脂,反应时间3h,此条件下宝藿苷Ⅰ转化率达99.8％.
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淫羊藿总黄酮仿生酶解肠溶胶囊的制备及评价
目的 以淫羊藿总黄酮为模型药物,蜗牛酶为水解酶,加入制剂辅料制备可实时酶解、实时吸收的淫羊藿总黄酮仿生酶解肠溶胶囊,对其处方工艺进行优化和评价.方法 以淫羊藿总黄酮释放度为评价指标,采用UV法和单因素实验筛选制备淫羊藿总黄酮仿生酶解肠溶胶囊所需的填充剂种类、用量,崩解剂种类、用量及润湿剂种类等关键因素,并采用响应面法优化其制剂处方,同时采用HPLC法对肠溶胶囊中4种主要黄酮苷(淫羊藿苷及朝藿定A、B、C)的酶解过程进行考察.结果 淫羊藿总黄酮仿生酶解肠溶胶囊的优处方为淫羊藿总黄酮提取物100 mg,蜗牛酶68 mg,α-乳糖65 mg,低取代羟丙纤维素11.7 mg,该制剂在人工肠液中45 min内的总黄酮累积释放率可达85.43％,同时能够在肠道排空时间内(3～6h)酶解完全.结论 所制备的淫羊藿总黄酮仿生酶解肠溶胶囊有利于促进淫羊藿总黄酮在体内的水解转化,为研发高效的淫羊藿总黄酮新制剂提供研究基础.
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蜈蚣不同提取工艺抗凝血及溶栓作用的比较研究
目的:比较蜈蚣的不同提取工艺对抗凝血、溶栓作用的影响.方法:比较原粉冷浸、水煎煮、水煎醇沉、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同提取工艺对凝血酶原时间(PT)、纤溶活性(FA)、大鼠凝血时间(CT)及静脉血栓重量(TW)的影响.结果:6种工艺的PT、FA、CT、TW4项指标与空白对照组相比较均有显著性差异(P<0.05),3种酶解工艺组与空白对照组相比有极显著性差异(P<0.01),其中仿生酶解组与原粉冷浸组相比有极显著性差异(P<0.01).结论:仿生酶解方法所得样品液抗凝血及溶栓作用较常规方法有极大提高,具有广阔的应用前景.
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土鳖虫不同工艺提取物抗凝作用的比较研究
目的 研究土鳖虫的酶解法提取工艺.方法 以提取液的得膏量、总肽含量、抗凝血酶活性及大鼠在体抗凝血作用为指标,检测各工艺提取液的成分含量及活性.结果 仿生酶解法提取得膏量大,总肽含量高,抗凝血酶活性强,大鼠血瘀模型凝血时间长.结论 与传统技术相比,仿生酶解技术提取土鳖虫提取更充分,效率更高,活性更强.
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阿胶仿生酶解前后提高免疫力作用对比研究
目的 研究阿胶仿生酶解前后提高免疫力的作用,为提高阿胶产品生物利用度提供理论和实验依据.方法 采用仿生酶解法体外酶解阿胶,采用紫外分光光度法测定仿生酶解前后肽含量的变化,采用SDS-PAGE电泳法测定仿生酶解前后肽分子量的变化,采用小鼠免疫功能测试实验考察阿胶仿生酶解前后提高免疫力作用强弱.结果 阿胶经仿生酶解后分子量在3000以下的小肽含量增加,分子量降低,提高免疫的作用增强.结论 阿胶经过仿生酶解后,更易于人体吸收,提高免疫力的作用增强.
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土鳖虫仿生酶解法提取工艺研究
目的 研究土鳖虫的仿生酶解法提取工艺.方法 采用正交实验优选仿生酶解的佳工艺条件.结果 土鳖虫仿生酶解佳工艺条件为:药材粉碎过80目筛,加10倍量水煮沸15 min,待冷至40℃,以稀盐酸溶液调节pH1.5～2.0,加入1％土鳖虫量的胃蛋白酶,40℃保温酶解1h,以20％氢氧化钠溶液调节pH7.5 ～ 8.0,加入1％土鳖虫量的胰蛋白酶,40℃保温酶解3h,加热煮沸15 min,即得.结论 优选出的提取工艺条件合理、可行、提取效率高.
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仿生酶解法提取颠茄草的研究
目的 观察仿生酶解法提取颠茄草的效果.方法 应用酸性胃蛋白酶溶液模拟人体生物环境,使用渗漉装置提取颠茄草,用pH值为2.0、体外消化活力为24~30μ/mL的酸性胃蛋白酶溶液为介质,提取温度35~38℃,渗漉法提取颠茄草,以80%乙醇渗漉提取物为对照,用高效液相色谱法测定两组提取液中莨菪碱的含量,比较其提取率.结果 仿生酶解法对颠茄草中莨菪碱提取结果 为4.87 mg/g,乙醇渗漉提取法提取结果 为3.66 mg/g,仿生酶解法比乙醇渗漉法提取率高33.1%.结论 应用仿生酶解法不仅能显著提高颠茄草中莨菪碱得率,节约提取时间,还能降低成本,具有实用价值.
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全蝎不同工艺提取物抗凝血及溶栓作用的比较研究
目的 比较全蝎不同工艺提取物对抗凝血、溶栓作用的影响.方法 比较原粉冷浸、水煎煮、水煎醇沉、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同提取工艺对凝血酶原时间(PT)、纤溶活性(FA)、大鼠凝血时间(CT)及静脉血栓重量(TW)的影响.结果 4项指标中以上6种工艺与空白对照组相比较均有显著性差异(P<0.05);3种酶解工艺组与空白对照组相比有极显著性差异(P<0.01),其中仿生酶解组与原粉冷浸组相比有极显著性差异(P<0.01).结论 仿生酶解方法 所得样品液抗凝血及溶栓作用较常规方法 有极大提高,具有广阔的应用前景.
