叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞增殖及细胞信号传导通路的影响

目的 观察叶下珠复方药物血清对人肝癌HePG2细胞体外增殖的抑制作用并探讨其机制.方法 用叶下珠复方药物血清处理HePG2人肝癌细胞株,MTT法检测该药对肝癌细胞株增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测该复方诱导肿瘤细胞凋亡情况.通过RT-PCR检测该药对细胞信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其下游靶基因bcl-2的表达.结果 叶下珠复方药物血清对HePG2细胞有抑制增殖和促进凋亡作用,该抑制作用与药物呈时间浓度关系.不同浓度的叶下珠复方处理HePG2细胞后bcl-2、stat3的mRNA水平明显下调(P＜0.05).结论 叶下珠复方在体外能抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与抑制肿瘤细胞增殖的不同信号通路有关.

叶下珠对雌性小鼠的避孕作用

基于聚类分析和主成分分析的叶下珠多酚部位HPLC指纹图谱研究

目的:建立基于聚类分析和主成分分析的不同产地叶下珠多酚部位高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法.方法:采用HPLC法测定9个不同产地叶下珠多酚部位指纹图谱,对其进行相似度分析、聚类分析和主成分分析,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)指认主要成分.结果:叶下珠多酚部位指纹图谱检出7个共有峰,指认了其中5个共有峰,9个不同产地叶下珠多酚部位相似度达到0.972-0.998,聚类分析和主成分分析从化学成分上说明了9批样品的相似性及差异性.结论:以指纹图谱数据为基础,将聚类分析与主成分分析结合起来进行识别,为叶下珠药材的资源利用提供依据.

叶下珠和苦味叶下珠指纹图谱的建立及比较

目的：建立叶下珠和苦味叶下珠指纹图谱，为其是否可以混用或代替使用提出物质基础的依据。方法：采用高效液相色谱法（HPLC），色谱柱为INDUSTRIES Epic C18120A（5μm，250 mm×4.6 mm）；流动相为乙腈（A）-水（0.1%磷酸，V/V）二元梯度洗脱；检测波长为254 nm；流速为1 mL·min-1；柱温为30℃；进样量为10μL。结果：建立了叶下珠和苦味叶下珠指纹图谱。结论：该方法简便、准确、重现性好，为其混用或代替使用提出物质基础的依据。

不同产地叶下珠药材中总酚含量测定

目的:建立不同产地叶下珠药材中总酚的含量测定方法.方法:以柯里拉京为对照品,三氯化铁-铁氰化钾为显色剂,检测波长744 nm,采用UV测定11个不同产地叶下珠药材中总酚的含量.结果:柯里拉京在0.604 ～ 3.02 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 1),平均加样回收率99.79％,RSD 2.72％.不同产地叶下珠药材中总酚质量分数5.00％ ～ 12.16％.结论:该方法简单准确、重复性好,可用于叶下珠药材中总酚含量的测定.

叶下珠高效液相色谱指纹图谱研究

目的:建立叶下珠药材的高效液相色谱指纹图谱.方法:采用反相高效液相色谱法,以柯里拉京为内参比峰.色谱条件为Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5μm),流动相乙腈-体积分数为0.1％的磷酸水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm.采用SPSS 16.0软件进行系统聚类分析；采用国家药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)进行相似度评价.结果:在色谱指纹图谱中,确立了21个共有峰,指认了其中6个色谱峰,系统聚类分析将14批叶下珠药材分为两类,建立了叶下珠药材的共有模式,在14批叶下珠药材中有12批样品的指纹图谱相似度在0.90以上.结论:该方法简便、准确、重复性好,为评价叶下珠药材的质量提供了依据.

内部沸腾法提取叶下珠没食子酸

目的:优选内部沸腾法提取叶下珠没食子酸工艺条件.方法:用少量乙醇溶液为解吸剂润湿叶下珠粉末,使没食子酸充分解吸,加一定量热提取剂,使渗透到叶下珠组织内部的乙醇沸腾,强化提取过程.选取乙醇体积分数、解吸时间、乙醇用量、提取时间和提取温度等5个因素,4水平进行正交试验,采用高效液相色谱法测定没食子酸含量.结果:内部沸腾法提取叶下珠没食子酸的佳工艺条件为1.6倍量60％乙醇解吸30 min,80℃提取15 min.结论:在佳提取工艺条件下,叶下珠没食子酸提取得率可达0.970％,该法有较好的应用前景.

叶下珠的薄层鉴别及其多酚类成分的含量测定

目的:建立叶下珠的薄层鉴别及其多酚类成分的含量测定方法.方法:采用聚酰胺薄膜色谱法鉴别叶下珠药材,采用紫外可见分光光度法测定叶下珠中多酚类成分的含量.结果:供试品色谱中,在与没食子酸对照品色谱相应的位置上显相同的蓝色斑点;没食子酸在40.2～160.8μg的范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 7,n=5),平均回收率为96·8%,RSD为O.7%.结论:该文建立的鉴别方法快速、简便,专属性强;含量测定方法准确、灵敏,重复性好.

HPD100大孔树脂纯化叶下珠总多酚的工艺研究

目的:研究HPD100大孔树脂纯化叶下珠总多酚的工艺条件和参数.方法:采用紫外分光光度法测定总多酚含量,研究HPD100大孔树脂对叶下珠总多酚的吸附、解吸附特性和纯化效果.结果:HPD100大孔树脂对叶下珠总多酚有良好的纯化性能,适宜的工艺条件为:上样浓度为0.2g/mL(生药量),药液pH值为3.0,上样生药质量与树脂体积比为1:1,吸附流速为1BV/h,洗脱溶剂为50％乙醇,4倍量的柱体积(BV),洗脱速度为2BV/h.结论:HPD100大孔树脂可用于叶下珠总多酚的纯化.

叶下珠治疗病毒性肝炎失眠患者临床疗效观察

目的:观察叶下珠对病毒性肝炎失眠患者睡眠质量的影响.方法:77例病毒性肝炎失眠患者随机分成治疗组39例和安慰剂组38例.两组均在基础治疗的同时,治疗组口服叶下珠浓煎剂,安慰剂组口服野菊花煎剂,治疗3周,停药后观察l周.采用睡眠状况自评量表(SRSS)、SPIEGEL量表,在治疗前、治疗第1、2、3周及停药后1周进行评分以评价睡眠改善情况,同时观察患者治疗前后肝功能的变化.结果:治疗后治疗组睡眠质量总有效率显著高于安慰剂组(P＜0.01),SRSS评分与肝功能改善均优于安慰剂组(P＜0.01).结论:叶下珠可有效改善病毒性肝炎失眠症患者睡眠质量,同时能有效改善患者肝功能.

叶下珠抑制人肾癌786-0细胞增殖作用的研究

目的 观察叶下珠提取物对人肾癌786-0细胞增殖抑制作用并探讨叶下珠提取物发挥该作用的机制,为叶下珠的临床应用更进一步的提供理论依据.方法 用不同浓度的叶下珠(浓度分别为1、10、100、1000μg/mL)作用于人肾癌786-0细胞株,采用CCK-8法检测叶下珠对肾癌786-0细胞增殖效应的影响,采用流式细胞术(FCM)检测叶下珠对肾癌786-0细胞周期的影响,采用蛋白印迹法检测叶下珠对Survivin蛋白表达水平的影响.结果 CCK-8法结果提示,不同浓度的叶下珠均可显著抑制肾癌786-0细胞的增殖,且抑制率呈时间、剂量依赖关系.FCM检测发现叶下珠可使肾癌786-0细胞周期中的G0/G1期比例增加,S期缩短.蛋白印迹法显示,叶下珠可使肾癌786-0细胞中Survivin蛋白表达水平降低.结论 通过建立人肾癌786-0细胞的体外抗肿瘤实验模型,预试验结果表明叶下珠乙醇提取物对人肾癌786-0细胞增殖具有抑制作用.

叶下珠汤治疗乙肝肝纤维化50例临床观察

肝纤维化是各种原因所致慢性肝病共同的病理变化,在我国以乙型肝炎为多见.能否阻止慢性肝病发展为肝硬化,抗肝纤维化的治疗至关重要,抑制乙肝病毒的复制又是减缓肝纤维化的重要途径.西医治疗在目前尚无有效的抗肝纤维化的药物.中药叶下珠清肝抑毒,对乙肝有较好的治疗作用,其抗病毒作用亦已被实验研究所证实.

叶下珠人工种植正交实验研究

目的:研究人工种植条件下叶下珠的生长发育规律、产量构成及影响因素,为叶下珠规范化种植提供依据.方法:3因素3水平正交设计田间实验,并将种植叶下珠与野生叶下珠进行性状比较.结果与结论:人工种植条件下叶下珠的株高、分枝数、单株干重等性状均比野生叶下珠有极大的提高,其中单株产量提高达3.27倍;播种期是影响叶下珠单位面积产量和单株性状的敏感因素,不同播种密度和施肥水平对产量也有显著影响;叶下珠4月中旬前期播种,20 cm行距条播,1周左右开始出苗,6至8月为生长旺盛期,9月份生长减缓,10月下旬采收,每公顷产量可达5 750kg.

叶下珠新鞣花鞣质的分离与鉴定

目的研究叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)的化学成分.方法用多种色谱法进行分离纯化,现代波谱法鉴定结构.结果分离得到一个新的鞣花鞣质叶下珠素G,结构为1-O-galloyl-2-phyllanthoyl-3,6-(R)-HHDP-β-D-glucose.结论叶下珠素G(phyllanthusiin G)为一个新化合物.

叶下珠中新多酚化合物的分离与鉴定

目的:研究植物药叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)的化学成分.方法:用各种色谱技术进行分离纯化,经MS,1H,13CNMR和HMBC光谱分析鉴定其结构.结果:分得4个多酚类化合物,其结构分别鉴定为1-O-没食子酰基-3,6-六羟基联苯二甲酰基-2,4-去羟甲基诃子酰基-吡喃葡糖(I),焦酚(pyrogallol, II),咖啡酸(caffeic acid, III)和(brevifolincarboxylic acid, IV).结论:化合物I为一新的鞣花单宁(命名为phyllanthusiin U),II,III,IV为首次从该植物中分得.

肝丹治疗慢性乙型肝炎的药效学研究

目的：探讨与肝丹主治功能有关的药理药效学作用及其特点。方法：2.2.15细胞株模型及改进方法；大鼠CCl4慢性肝损伤模型；小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清溶血素含量实验。结果：动态观察13 d肝丹对HB-sAg，HBeAg的大抑制率为76.47％(d 7)，71.43％(d 5)，且呈现HBV分泌、复制越是旺盛，抑制作用越强的特点；肝丹组与模型组相比，肝功能明显改善[ALT(U/L)：39.80±7.91，72.00±17.42，P<0.01；AST(U/L)：32.20±3.55，53.90±11.35，P<0.001]，肝组织结构破坏轻，纤维组织增生程度轻，与乙肝宁组相比，各项指标变化略占优势；小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能增强，羊红细胞致敏的小鼠血清溶血素含量提高，显著优于空白对照组，与阳性对照组左旋咪唑相似。

叶下珠提取物对Beagle犬长期毒性实验研究

目的 研究连续口服给予叶下珠提取物对Beagle犬产生的毒性反应.方法 叶下珠提取物125、250、500mg·kg-1(低、中、高剂量)连续灌胃给药26wk,于给药26wk及停药6wk时取部分犬进行血液学指标、血液生化学指标、尿液指标、病理组织学检查.结果 高剂量组Beagle犬出现食量减少、间歇性呕吐等症状.与空白对照组比较,中、高剂量在给药结束时导致Beagle犬ALT、AST、ALP、T-Bil、BUN、γ-GT等血液生化学指标明显升高(P＜0.05或P＜0.01),停药6wk后,以上指标均恢复正常.给药结束时,高剂量组Beagle犬尿液出现蛋白质和胆红素阳性.病理检查显示,中、高剂量均可导致Beagle犬肝脏和肾脏实质脏器出现可逆性组织病理学改变.结论 长期大剂量口服给予叶下珠提取物,可导致Beagle犬出现肝脏和肾脏功能以及病理组织学可逆性改变.

叶下珠提取物对大鼠长期毒性实验研究

目的 研究连续口服给予叶下珠提取物对SD大鼠产生的毒性反应.方法 叶下珠提取物4.0、1.3、0.4 g·kg-1(高、中、低剂量)连续灌胃给药26wk,分别于给药13wk、给药26wk及停药后6wk时取部分大鼠进行血液学指标、血液生化学指标、病理组织学检查.结果 高剂量组大鼠皮毛无光泽,精神萎靡.与空白对照组比较,高剂量在给药26wk时导致大鼠血液WBC、NE％、ALT、AST、CR明显升高,LY％、PLT、ALB明显降低(P＜0.05或P＜0.01),停药后6wk时,除NE％、LY％之外,其他指标均恢复正常.高剂量组的大鼠肝脏、肾脏组织出现可逆性病变,中剂量组的大鼠肾脏组织出现可逆性病变.结论 长期大剂量给予叶下珠提取物,可导致SD大鼠出现肝脏和肾脏功能以及病理组织学可逆性改变.

柯里拉京分子印迹聚合物固相萃取叶下珠中的柯里拉京及结构类似物

目的 采用柯里拉京分子印迹聚合物固相萃取(Cor-MISPE)中药叶下珠中的柯里拉京及其结构类似物.方法 将柯里拉京分子印迹聚合物(Cor-MIP)装于自制的固相萃取柱中,对叶下珠提取液进行固相萃取,采用高分辨质谱仪进行检测.结果 由于Cor-MIP本身所特有的高选择性,它能特异性地将柯里拉京及老鹳草素从叶下珠提取液中萃取出来.结论 CorMIP对柯里拉京具有良好的选择性,可用于富集、萃取中药中的柯里拉京及其结构类似物.

RP-HPLC法测定叶下珠中没食子酸、柯里拉京和鞣花酸的含量

目的 建立RP-HPLC法同时测定叶下珠中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸含量的方法.方法 采用Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.2%醋酸为流动相,梯度洗脱,检测波长为270 nm,流速1 mL/min,柱温30℃.结果 没食子酸、柯里拉京、鞣花酸的线性范围分别是:0.2～1.0 μg、0.8-4.0 μg、0.4～3.2 μg,平均回收率分别是:100.76%、99.13%、99.77%.结论 测定方法简便、准确、重现性好,可用于叶下珠中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸的含量测定.