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RP-HPLC同时测定藏药手掌参中4种活性成分的含量及气候因子相关分析
目的:建立同时测定不同产地手掌参药材中多指标成分的质量控制方法,分析气候因子对手掌参分布活性成分含量的影响.方法:采用HPLC,Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.1％醋酸水溶液和甲醇为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长270 nm,柱温30℃.结果:4种有效成分的线性关系均良好,精密度、稳定性和重复性的RSD均＜2.50％,平均加样回收率为96.97％ ～ 101.55％,RSD均＜1.46％;同时使用Diva-Gis提取不同产地手掌参药材的19个气候数据和3个地理数据进行聚类分析,经与样品有效成分含量测定的计量化学结果比较,表明不同产地手掌参药材各指标成分含量差异较大,通过气候因子的主成分分析和聚类分析,发现其与手掌参的活性成分的含量具有一定的相关性.结论:该方法准确,重复性好,可为科学、全面评价手掌参药材的品质提供参考,对进一步研究手掌参资源的可持续利用具有指导意义.
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左上肢血管神经肌腱变异1例
在局部解剖学操作中发现1例成年男性尸体左上肢(该部位无手术、外伤及疤痕)同时出现桡动脉、桡神经浅支和拇短伸肌腱变异,现报道如下.左桡动脉在大圆肌下缘下5.5cm即从肱动脉分出(取上肢外展90°位测量,下同),肱深动脉在大圆肌下3.8cm从肱动脉分出.桡动脉在距桡骨茎突上4.3cm分出1支跨肱桡肌肌腱表面到前臂背侧,沿桡骨背侧向下走行,而后进入第1掌骨间隙后,穿第1骨间背侧肌人手掌参与掌深弓的组成,见其发出第1掌背动脉,"鼻烟窝"处未发出桡动脉茎突返支和桡动脉腕背支;桡动脉本干仍向下走行,分出掌浅支参与掌浅弓,深支绕桡骨茎突进"鼻烟窝",随后分出许多分支,包括桡动脉腕背支、桡动脉茎突返支等,未发出第一掌背动脉,也不参与掌深弓的组成.
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暖宫七味丸的质量标准研究
目的 修订暖宫七味丸的质量标准.方法 采用显微鉴别方法,鉴别暖宫七味丸中豆蔻、天冬、肉豆蔻、沉香、手掌参及丁香；采用GC法,鉴别暖宫七味丸中豆蔻的主成分桉油精；采用HPLC法,测定暖宫七味丸的总丁香酚含量.结果 显微鉴别及气相色谱鉴别专属性强.含量测定丁香酚线性范围为0.08560～3.264μg;样品的平均加样回收率为95.87％(n=6).结论 此方法简便、准确,重复性好,可作为暖宫七味丸的质量控制方法.
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蒙药材手掌参中总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究
目的 优选手掌参总黄酮的佳提取丁艺,并建立其含量测定方法,同时对手掌参总黄酮的抗氧化活性进行研究.方法 通过正交试验选择手掌参总黄酮的提取工艺;采用比色法以芦丁为对照测定手掌参中总黄酮的含量.采用羟基自由基清除法评价其抗氧化活性.结果 佳提取工艺为90％乙醇,料液比1∶20,回流提取2次,每次60 min;芦丁在0.1094～0.8752 mg范周内与吸光度呈良好的线性关系,平均回收率为98.8％,RSD为1.05％.手掌参总黄酮对羟基自由基有较强的清除作用.结论 优选的提取工艺稳定可靠,含量测定方法简便,准确、重复性好,不同产地手掌参中总黄酮的含量差异较大.手掌参总黄酮具有一定的抗氧化活性.
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蒙药材手掌参总皂苷的提取及抗氧化活性研究
目的 优化手掌参中总皂苷的提取工艺并建立其含量测定方法,同时对其抗氧化活性进行研究.方法 采用超声提取法,应用正交试验优化手掌参总皂苷的提取工艺,并以薯蓣皂苷元为对照,采用分光光度法测定总皂苷的含量.采用DPPH自由基清除法评价总皂苷的抗氧化活性.结果 手掌参总皂苷佳提取条件:95％乙醇提取、料-液比1∶50(g/mL)、提取2次,每次90 min,薯蓣皂苷元在6.14～21.49 μg/mL浓度范围内与吸光度呈良好线性关系,平均回收率为103.6％,RSD=1.77％(n=6),总皂苷含量在0.22％～1.09％.手掌参总皂苷对DPPH自由基有清除作用,且清除能力与总皂苷的含量有关.结论 该提取工艺稳定,含量测定方法简便、快速、准确,手掌参总皂苷有一定的抗氧化活性.
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Militarine对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用及机制研究
目的:研究从手掌参中分离的Militarine对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用并探讨其可能的机制.方法:记录去甲肾上腺素(NE)和KCl预收缩的离体大鼠主动脉环张力变化,观察Militarine的舒血管作用及不同工具药对其作用的影响.结果:Militarine可以抑制去甲肾上腺素(NE,1×10-4 mol·L-1)和KCl(1.8 mol·L-1)引起去内皮和内皮完整的离体大鼠胸主动脉环的收缩作用,但二者有明显差别;L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME,1×10-4mol·L-1)、亚甲蓝(MB,1×10-5mol· L-1)、吲哚美辛(INDO,1×10-5 mol·L-1)均能一定程度抑制Militarine对胸主动脉环的舒张作用;钾离子通道阻断剂四乙基胺(TEA,1×10-3 mol·L-1)、格列苯脲(glibenclamide,1×10-5mol·L-1)、BaCl2(1×10-4mol·L-1)可明显减弱Militarine对血管环的舒张作用;在无钙环境下,预孵育Militarine对去甲肾上腺素引起的血管环收缩有明显抑制作用.结论:Militarine有内皮依赖性和非内皮依赖性的血管舒张作用,其作用机制可能涉及激活内皮细胞中NO/cGMP通路,开放钾离子通道和抑制钙离子内流.
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HPLC测定青藏高原不同地区藏药手掌参中天麻素
目的 建立高效液相色谱法测定青藏高原不同地区手掌参中天麻素含量.方法 采用Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm,5 μn)色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.04%的磷酸)=8:92,体积流量1 mL/min,检测波长222 nm),柱温30℃.结果 天麻素进样量在1.400～8.400μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.14%,RSD为0.69%(n=9).结论 所建方法快速、简便、准确、重复性好,天麻素可作为手掌参质量控制指标.
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拇指桡掌侧固有动脉穿经籽骨关节面变异一例
在制作1件成人右上肢血管神经标本过程中,见拇主要动脉在手背发出,拇指桡掌侧固有动脉穿桡侧籽骨关节面走行,示指桡侧动脉由掌浅弓与掌深弓的分支吻合而成.为积累国人解剖学资料,现报道如下.该标本中,桡动脉未在腕掌侧桡腕关节处发出掌浅支,而是斜过拇长伸肌腱和拇短伸肌腱深面,至第1骨间背侧肌两头处,发出外径为1.72 mm的拇主要动脉,主干穿第1骨间背侧肌人手掌参与构成掌深弓,桡动脉分支前后的外径为2.38 mm和2.04 mm.
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变异拇主要动脉吻合掌浅弓一例
在制作1成年男性右上肢血管神经标本时,发现变异拇主要动脉吻合掌浅弓1例.为积累国人解剖学资料,现报道如下.该标本中桡动脉在腕掌侧桡腕关节处未发出掌浅支,而是以单干斜向内下走行,在距桡骨茎突0.97 cm处入鼻烟窝并走行2.87 cm穿出,然后继续走行0.83 cm,至第1骨间背侧肌两头之间,穿人手掌参与构成掌深弓.其在穿人手掌前发出1分支称为变异支即拇主要动脉,其外径为1.56 mm,分支前后桡动脉外径分别为2.14 mm和1.90 mm.变异支在第1骨间背侧肌浅面走行5.02 cm至第1掌指关节内侧、第1骨间背侧肌下缘,发出示指桡侧固有动脉,其外径为0.94 mm,分支前后变异支外径分别为1.44 mm和1.40 mm.变异支绕向手掌走行0.86 cm至第1掌指关节手掌侧,发出拇指尺侧固有动脉,其外径为1.24 mm,分支前后变异支外径分别为1.30 mm和1.26 mm.
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利用组织芯片观察手掌参醇提物对染矽尘大鼠肺组织TNF-α表达的影响
目的 探讨手掌参醇提物(Gymnadenia conopsea Alcohol Extract,GcAE)对染矽尘大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表达的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组、GcAE治疗组,每组40只.采用气管暴露法建立大鼠矽肺模型.灌胃给予GcAE(8g·kg-1·d-1)治疗后,在第7、14、21、28和60天时每组分别随机取8只大鼠宰杀,制作大鼠肺组织芯片,用免疫组织化学PV法检测组织芯片TNF-α的表达,用Image-Pro Plus Version 4.5 for windows TM图像分析系统对TNF-α的表达做定量分析.结果 矽尘组TNF-α的积分光密度各时间点均高于对照组,在第7、14、21、28天时有统计学意义(P＜0.01).手掌参组各时间点肺组织TNF-α的积分光密度低于染矽尘组,在第7、14、21、28天时有统计学意义(P＜0.01).结论 GcAE能够明显抑制矽尘诱导的大鼠肺组织TNF-α的过度表达.
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手掌参不同溶剂提取物清除自由基活性评价
目的:筛选手掌参清除自由基活性的有效部位.方法:手掌参经不同溶剂:水,酸性水(pH3),60%乙醇,95%乙醇,水饱和正丁醇,正丁醇,乙酸乙酯在恒温振荡器上室温振摇8 h,得手掌参不同溶剂提取物.采用UV-DPPH·法对手掌参不同溶剂提取物进行清除自由基活性测定.结果:水、pH3水提取物清除自由基活性较弱;95%乙醇、水饱和正丁醇、正丁醇、乙酸乙酯提取物自由基清除率IC50值分别为0.1266mg/ml、0.4537mg/ml、0.3151mg/mJ、0.1305mg/ml.结论:手掌参不同溶剂提取物均有清除自由基活性,其中,95%乙醇提取物清除自由基活性强.
关键词： 手掌参 1 1-二苯基-2-苦肼自由基(DPPH·) 清除自由基活性 提取物 -
手掌参临床应用进展
手掌参(Gymnadenia R.B r.)为兰科多年生草本植物手参Gymnadenia conopsea R.Br.的块根,藏医名旺拉.在各地种类繁多,但数量稀少,主要分布于西藏东部、青海东部、内蒙古、四川等海拔在1,300～3,600米的草甸、林间等地区[1],其块根在藏医、蒙医、中医等民族医疗中被广泛用来防病治病及养生保健,根据各地中医药、藏医药、蒙医药研究等文献记载报道,手掌参主要作用有[2,3-4]:①补益气血;②生津止渴、食少纳差;③补肾壮阳、遗精阳痿、身体虚弱、神经衰弱;④理气行血;⑤润肺、治肺病、咳喘等;⑥安神、镇惊、增智;⑦收敛止血、消瘀止痛;⑧解肉食中毒;⑨治痛风、糖尿病、更年期综合症、子宫内膜异位症、慢性乙肝、疔肿;⑩抗衰老、肿瘤化疗放疗后的辅助治疗等;现将此传统中药在临床中的应用作一综述.
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藏药手掌参药材HPLC指纹图谱研究
目的:建立青藏高原不同地区藏药手掌参药材的HPLC指纹图谱.方法:采用反相高效液相色谱法,测得12批不同产地手掌参样品的指纹图谱.色谱条件:Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇和水(含0.04％磷酸)梯度洗脱,流速0.7 mL/min,检测波长222 nm,柱温30℃.结果:建立了手掌参药材的HPLC指纹图谱,标定了13个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,12批手掌参药材的相似度为0.904～0.989;运用系统聚类分析法和主成分分析法对手掌参药材进行分类.结论:该方法简便、实用、可靠,为手掌参药材的鉴别和质量的全面控制提供了技术和理论依据.
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简述蒙药材手掌参
查阅文献记载,对蒙药材手掌参的品种、采集时间、炮制、性味、功能、化学成分、药理作用等方面简述,为进一步开发利用蒙药材手掌参提供参考资料.
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蒙药手掌参研究进展
对蒙药手掌参进行了化学成分、药理作用、质量控制等方面的文献研究综述,并提出具体应用中存在的问题及下一步研究思路.
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手掌参醇提物的药效学研究
目的:初步研究手掌参的药理活性,为其进一步临床应用奠定基础.方法:先对手掌参进行乙醇提取,得到手掌参醇提物,再通过小鼠镇静试验、小鼠热板镇痛试验、醋酸所致小鼠扭体试验、负重游泳试验、DPPH和ABTS 自由基清除试验来考察手掌参的镇静、镇痛、抗疲劳以及抗氧化活性.结果:手掌参高、中、低剂量组对小鼠的自发活动抑制率分别为51.2％、44.9％以及22.5％.对醋酸所致的小鼠扭体反应抑制率分别为48.7％、32.9％、24.3％.对热板法小鼠痛阈值的提高率分别为43.8％、24.5％、13.6％.对小鼠游泳力竭时间延长率分别为37.1％、29.0％、14.5％;对DPPH自由基清除率分别为86.1％、51.3％、24.8％;ABTS自由基清除率分别为88.7％、59.6％、29.3％.结论:手掌参具有的镇静,镇痛、抗疲劳和抗氧化活性的作用,为其进一步临床应用奠定基础.
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不同炮制方法对手掌参抗疲劳和抗氧化活性的影响
目的：探讨不同炮制方法对手掌参抗疲劳和抗氧化活性的影响。方法：利用羊奶炮制法、冷浸炮制法和蜜制炮制法来制备手掌参样品。通过小鼠的游泳实验和吊网实验来考察三种炮制品不同剂量的抗疲劳作用。利用药物对DPPH自由基和ABTS自由基的清除作用来考察三种炮制品不同浓度的抗氧化活性。结果：与空白对照组相比，服用三种炮制品不同剂量的小鼠，其游泳时间和悬网时间均明显延长，且呈现出剂量依赖性。服用三种炮制品不同浓度的小鼠，其对DPPH自由基和ABTS自由基均有清除作用，且呈现出浓度依赖性。同时无论是延长作用还是清除作用，其作用效果均稍有不同，顺序为羊奶炮制品大于蜜制炮制品大于冷浸炮制品。除了冷浸泡制品以外，羊奶泡制品和蜜制炮制品的作用效果与空白对照组比均具有显著的差异。结论：手掌参有良好的抗疲劳和抗氧化活性，且羊奶炮制法可以很好的保留手掌参的药效成分。
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手掌参多糖延缓衰老作用的研究
目的 观察手掌参多糖对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的作用.方法 60只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为6组:空白对照组、衰老模型组、阳性对照组(21.6mg·kg-1)和手掌参多糖高、中、低剂量组(0.20,0.10和0.05g·kg-1).除空白对照组外,其余各组小鼠每日颈背部皮下注射0.5g·kg-1D-半乳糖溶液.60d后,测定小鼠血清、肝组织和脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性以及丙二醛(MDA)的含量,称量小鼠体质量和计算肝脏指数.结果 手掌参多糖高剂量组能提高衰老小鼠血清、脑组织和肝组织中T-SOD、CAT和GSH-PX活性(P<0.01,P<0.05),降低MDA含量(P<0.01,P<0.05),还能显著增加衰老小鼠体质量(P<0.01),提高衰老小鼠肝脏指数(P<0.05).结论 手掌参多糖具有一定的延缓衰老作用,其机制可能与提高机体抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化物的产生有关.
