首页 > 文献资料
-
新生儿苯丙氨酸荧光分析法的建立及其试剂盒的临床评价
目的 建立新生儿苯丙氨酸荧光分析法并评价其试剂盒性能.方法 以滤纸为载体制备标准品和质控品干血片,琥珀酸盐缓冲液、L-亮氨酸-L-丙氨酸二肽和茚三酮溶液作为反应液,硫酸铜为主要成分的溶液作为增强剂和稳定剂,应用荧光定量法检测新生儿滤纸干血片中的苯丙氨酸,并对方法进行性能评价.比对试验采用线性回归分析,配对计数资料结果的一致性采用Kappa 检验分析.结果 自研试剂的曲线线性相关系数r 大于0.99,检测限不高于0.5 mg /dl,标准品的效价比在0.9667 ～1.0060,批内、批间的变异系数均不高于10%,20 mg /dl 以内的常见的氨基酸干扰物对检测方法无明显影响;2 ～8 ℃保存的试剂可以稳定13 个月;与国外试剂比对,回归方程为Y (自研试剂盒)＝0.8565 X (AniLabsystems KIT)+0.1448,r ＝0.9853 ;不同包装规格的试剂比对检测,线性回归方程Y (96 人份/盒)＝1.0101 X (960 人份/盒)-0.0098,r ＝0.9854.国内外的检测仪器比对检测,回归方程为Y (TAKEEN)＝1.011 X (1420)-0.0058,r ＝0.9948 ;Y (TAKEEN)＝1.027 X (FLUOROSKAN)-0.011,r ＝0.9937 ;参考值定为2.0 mg /dl;临床研究评价一致程度百分比可达99.81 %.结论 自研试剂盒灵敏度高,特异性强,准确度好,精密度好,稳定性良好,与AniLabsystems 的试剂盒比对试验检测结果的相关性好,符合率高,不同包装规格的试剂盒分析性能一致,并且适合于国内外的检测仪器,自建方法和自研试剂盒能满足临床新生儿苯丙酮尿症筛查的需要.
-
不同方法测定PKU随访患者干血滤纸片Phe浓度的比较
目的 比较串联质谱(MS/MS),包括非衍生标准曲线定量法(简称"标曲法")和衍生法、非衍生法及荧光法在苯丙酮尿症(PKU)随访患者血苯丙氨酸(Phe)浓度测定中的应用.方法 收集上海新华医院随访的204例PKU患者干血滤纸片(DBS)样本;MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法及荧光法测定Phe浓度,分为低、中、高,即<360、360~600和>600 μmol/L 3组,对Phe检测值进行一致性检验及非参数检验.结果 MS/MS标曲法批内和批间精密度为4.0%~7.2%,回收率为93.2%~97.3%.一致性检验显示各组Phe检测值在95%一致性界限外的值不超过8.1%.低、中浓度组,荧光法、MS/MS标曲法和衍生法Phe检测值四分位数分别为176(118,251)μmol/L、174(94, 273)μmol/L、153(94,242)μmol/L,和540(478,578)μmol/L、485(414,529)μmol/L、466(402,513) μmol/L;荧光法较MS/MS标曲法高4.8%~9.0%,(Z=-3.787~-2.674,P<0.01);MS/MS非衍生法较标曲法低3.9%~5.2%,(Z=-7.474~-5.747,P<0.01);高浓度组,MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法和荧光法检测值为807(695,924)μmol/L,700(575,785)μmol/L,680(623,771)μmol/L和711(674,794)μmol/L,MS/MS标曲法较其他方法高10.9%~16.2%,(Z=-4.458~-4.356,P<0.01).结论 MS/MS标曲法测定DBS中Phe浓度特异性和准确度较好,4种方法测定血Phe浓度一致性较好,虽检测值存在差异,但均可用于多数PKU患者的Phe浓度监测.
-
苯丙酮尿症一家系的基因诊断及产前诊断研究
目的 对有苯丙酮尿症(PKU)家族史的孕妇(先证者姨妈)提供遗传咨询,为家系内的先证者进行基因诊断,明确致病突变及家系成员基因型,为孕妇提供产前诊断.方法 临床实验诊断研究,对2016年10月在海军总医院就诊、进行遗传咨询的孕妇及家系成员进行基因诊断.应用Sanger测序方法,对患儿的苯丙氨酸羟化酶基因(PAH)进行序列分析,针对检测到的突变对家庭成员进行检测,明确致病突变.患儿母亲的妹妹(姨妈)妊娠,对其胎儿进行相应位点的突变分析,同时采用片段长度多态性方法,对家系成员PAH基因3号内含子的短串联重复(STR)位点进行单体型分析.结果 序列分析显示患儿PAH基因IVS4-1G>A/c.770G>T复合杂合突变,分别来自其母亲和父亲;患儿姨妈同为IVS4-1G>A杂合突变携带者,其丈夫为c.827T>A杂合突变携带者;为胎儿进行了产前基因诊断显示仅遗传了其父亲的c.827T>A杂合突变,且STR单体型与先证者不同.结论 对于常染色体隐性遗传病,同一家系中的携带者组成的不同家庭,在遗传咨询中,均需要明确配偶是否为致病基因携带者,充分评估胎儿发病风险.(中华检验医学杂志,2018,41:312-315)
-
尿蝶呤分析在四氢生物蝶呤缺乏症筛查中的应用
目的通过尿蝶呤分析从高苯丙氨酸血症(HPA)患儿中筛检出四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症.方法采用高效液相层析仪对96例HPA患儿进行尿新蝶呤和生物蝶呤分析,并对尿蝶呤异常者结合BH4负荷试验以辅助诊断.结果筛检出11例6-丙酮酰四氢蝶呤合成酶缺乏所致的BH4缺乏症,患儿尿新蝶呤(N)与生物蝶呤(B)值之比极度增高(N/B:197±250),B百分率极低为(1.0±0.8)%.其中4例口服BH4后,血苯丙氨酸浓度由(720～1 200) μmol/L降至(120～240) μmol/L.结论 BH4缺乏症在HPA中发生率约12%,尿蝶呤分析是用于BH4缺乏症筛检的有效方法.
-
PCR限制性内切酶法在苯丙酮尿症突变基因诊断中的应用
苯丙酮尿症(PKU)是一种常染色体隐性遗传病,由苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变导致肝脏PAH酶活性降低或丧失所致.临床表现为不可逆的智力发育迟滞、癫痫等症状.新生儿筛查显示,PKU在中国人群中发病率为1/11 000[1].在中国人pah基因的已知突变中,一些突变改变了基因序列中限制性内切酶的酶切位点.为此,我们应用PCR限制性内切酶法(PCR-RFLP)直接检测一些改变了限制性内切酶酶切位点的突变基因.
-
新疆少数民族苯丙酮尿症患者的突变基因分析
目的 探讨新疆少数民族苯丙酮尿症(PKU)患者的基因突变特征,为有针对性的防治策略提供科学依据.方法 采用单链构象多态性分析技术和PCR产物直接测序方法 ,检测12例少数民族PKU患者的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变.结果 从12例维吾尔族、回族和哈萨克族PKU患者(24个PAH等位基因)中,检出13种基因突变,包括错义突变8种、无义突变1种、剪切位点突变3种,其中突变频率高的是EX6-96A＞G和P281L,EX6-96A＞G常见于国内和亚洲地区,P281L多见于欧洲各地.突变频率较高的R243Q、R111X、R176X和F161S 4种突变中,其中R243Q是我国北方地区居首位的突变,R111X处于第3位.而R176X和F161S在世界范围内都极为少见,尤其F161S是具有中国特色的基因突变,是第2次在中国人中发现.结论 新疆少数民族中的PAH突变基因不仅与亚洲黄种人和欧洲及拉美人种表现出密切的联系,而且也存在着明显的差异,形成了自身独立的遗传规律和特点,是我国一个十分特殊的PAH突变基因分布区域.
-
内蒙古地区苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因突变的检测
目的了解内蒙古地区苯丙酮尿症(PKU)病人苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变类型和频率.方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增,单链构象多态性分析(SSCP)、DNA直接测序的方法,对内蒙古地区22个PKU家系PAH基因外显子3、5、6、7、10、11、12,进行检测分析.结果检出10种苯丙氨酸羟化酶基因的点突变.R243Q(8/44)、R252Q(1/44)、R261Q(1/44)、G239D(1/44)、IVS7nt(2)(1/44)、Y204C(5/44)、Y356X(6/44)、R413P(1/44)、R111X(1/44)、Y161S(1/44),经检索国际PAH基因突变数据统计库,确认G239D(G→A)为首次发现的新突变. 结论 R243Q、Y356X、Y204C是内蒙地区人群中PAH基因的主要突变位点.以Y356X的突变率明显高于、R413P低于北方人群为特征.
-
聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳在苯丙酮尿症产前基因诊断中的应用
苯丙酮尿症(PKU)是常染色体隐性遗传病,因苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变致酶活性降低或丧失而造成高苯丙氨酸血症和智力低下.为进一步提高PKU产前基因诊断率,我们用s聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)对PCR短串联重复序列(PCR-STR)连锁分析,对家系的PAH基因的相对突变热点区域外显子6(e6)、e7和e12作突变检测,以探讨其在PKU产前基因诊断的应用价值.
-
苯丙酮尿症患儿四种苯丙氨酸羟化酶基因新突变分析
目的 了解新疆地区PKU患儿中PAH基因突变的分子分布情况,为该地区PKU基因诊断和产前诊断提供参考.方法 应用PCR结合测序技术对在兰州军区乌鲁木齐总医院就诊的新疆地区15例Phe浓度大于700 μmol/L,且年龄为2～10岁的PKU患儿进行PAH基因启动子区和13个外显子及其旁侧内含子区域的全序列分析.结果 用PCR分别扩增15例PKU患者PAH基因序列,然后对PCR产物直接测序,发现5′-Flanking -626G>A基因突变、5′-Flanking -480DelACT基因突变、S196fsX4基因突变和IVS8+1G>C 基因突变各1例,这4种PAH基因突变经逆向测序予以确认,证实其分别在调控区第626位核苷酸发生了G>A突变、在调控区第480位发生了ACT 3个核苷酸的缺失突变、在编码区第584位发生了核苷酸A的插入突变及在外显子8与内含子8交界处发生了核苷酸G>C突变.经查询PAH专业网站和国际PAH数据库(www.pahdb.mcgill.ca),确认这4种基因突变为PAH基因新突变.此外,携带这4种基因突变的4例患儿年龄在3～5岁,其Phe浓度在1 572～1 782 μmol/L之间,且均表现出智力低下、头发发黄、全身鼠臭味等典型的PKU临床症状.结论 5′-Flanking -626G>A、5′-Flanking -480DelACT、S196fsX4和IVS8+1G>C为典型PKU患儿中的4种PAH基因新突变,这4种PAH基因突变可改变PAH酶蛋白的三维结构,影响酶的催化活性,或限制酶蛋白翻译及表达.这些新突变基因的发现将对今后PKU基因诊断及科学研究积累有价值的资料.
-
高分辨熔解曲线检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的临床价值
目的 研究用HRM分析技术检测经典型PKU患者PAH基因突变的临床应用价值。方法采用HRM分析技术对17例经典型PKU患者PAH基因的13个外显子及外显子-内含子交界区域进行检测，并采用DNA测序验证HRM检测结果。同时评价HRM诊断PKU的敏感度和特异度。另外，对其中2个家系的风险胎儿进行产前诊断。结果采用HRM分析技术从17例经典型PKU患者中检出有2个致病突变的患者16例，检出有3个致病突变患者l例。同时检出194V(c.280A＞G)、IVS4nt-1G＞A(c.442-1G＞A)、R158Q(c.473G＞ A)、Q160X(c.478C＞ T)、W187X(c.561G＞ A)、E6nt-96A＞ G(c.611A＞ G)、G239D(c.716G＞ A)、R241C(c.721C＞ T)、R243Q(c.728G＞ A)、G247R (c.739C-＞ C)、G247V(c.740G＞ T)、R261X(c.781C ＞T)、R261Q(c.782G＞ A)、H264R(c.791A ＞G)、F302 fsX39(c.904delT)、E305K(c.913G＞ A)、G312V(c.935G＞ T)、Y356X(c.1068C＞A)、V399V (c.1197A ＞T)、R408Q(c.1223G＞ A)、T418P(c.1252A ＞C)、A434D(c.1301C＞ A) 22种致病突变；Q232Q(c.696G＞A)、V245V(c.735G＞ A)、L385L(c.1155C＞G)3种沉默突变；1种单核苷酸多态点rs2280615(c.402A＞ C)。其中194V(c.280A＞ G)、Q160X(c.478C＞ T)、H264R(c.791A ＞G)、G312V (c.935G＞T)和E305K(c.913G＞ A)为PAH基因新发现的突变。2例风险胎儿经产前诊断，1例未发现致病突变，1例诊断为携带者。HRM突变筛查经典型PKU的敏感度和特异度均为100％，其检测结果与DNA测序结果完全一致。结论HRM分析技术是一种简单、准确、快速、高通量、低成本的遗传学分析方法，可用于经典型PKU的PAH基因突变筛查，并可用于已知父母突变的经典型PKU家系快速产前诊断。
-
新疆地区苯丙氨酸羟化酶基因外显子7的突变研究
目的 研究分析新疆地区苯丙酮尿症(PKU)患者中苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7的突变特征.方法 用PCR及单链构象多态性(SSCP)分析技术结合基因序列测定法,对37例PKU患者进行PAH基因外显子7突变筛查和鉴定.结果 从37例PKU患者(共74条染色体)中,发现20条染色体等位基因异常,经测序鉴定共检出5种错义突变,即R243Q、L255S、E280G、E280K和P281L,等位基因突变检出率为27%.其中R243Q频率高(18.9%),L255S次之(4.1%),而E280G、E280K和P281L仅为1.4%.在5种基因突变中,E280G为在国际上第2次发现,L255S、E280K和P281L为在国内第2次检出.维吾尔族群体也检出了2例突变,分别是P281L和R243Q,均为在本地区维吾尔族中首次报道.查阅国内外研究结果结合本结果分析后发现,R243Q是亚洲黄种人常见的突变体,P281L和E280K是欧洲及拉美等国较为普遍存在的突变型,而E280G与L255S则是具有中国特色的基因突变.结论 新疆PKU基因突变类型及频率具有明显的地区特点,是我国与欧亚地区之间相互区别、又相互联系的一个较为特殊的PAH突变基因分布带,也是研究基因突变多样性、PAH基因异质性特点以及人类起源、迁徙等的理想资源地.
-
揭秘糖尿病的遗传性
糖尿病的遗传性有多大在所有类型的糖尿病中,1型与2型糖尿病是常见的,其中又以2型糖尿病为常见,且有家族聚集倾向.虽然1型和2型糖尿病都具有遗传性,但均属于多基因遗传病,故其遗传率并不像符合孟德尔遗传定律的苯丙酮尿症等遗传病一样精确.国内外也有一些小型研究总结出的糖尿病遗传率可供我们参考(如下表).此外,研究还发现2型糖尿病患者的1级亲属(包括其父母、子女和同父同母所生的兄弟姐妹)患糖尿病的几率是背景人群的3.5倍;同卵双胎发生2型糖尿病的一致率为70％,异卵双胎仅为10％;而一些特定的少数民族和纯种土著人也表现出了极高的2型糖尿病患病率(其中Pima印第安人可高达21％).
-
新农合大病保障范围将扩容
至此,纳入新农合保障范围的重大疾病已达22种.具体包括儿童先天性心脏病、急性白血病、终末期肾病、乳腺癌、宫颈癌、重性精神疾病、艾滋病机会性感染、耐多药肺结核、肺癌、食道癌、胃癌、结肠癌、直肠癌、慢性粒细胞白血病、急性心肌梗死、脑梗塞、血友病、1型糖尿病、甲亢、唇腭裂、苯丙酮尿症、尿道下裂.各地新农合对重大疾病医疗保障范围内相关病种的实际补偿比例原则上应当达到本省(区、市)限定费用的70％左右.
-
PKU患者PAH基因突变分析
目的 通过对苯丙酮尿症(Phenylketonuria,PKU)患者苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因突变的分析,为苯丙酮尿症的产前诊断、遗传咨询、治疗和采取干预措施提供一定的科学依据.方法 应用PCR产物直接测序法对123例PKU患者PAH基因第1～13外显子及其两侧内含子进行序列分析.结果 在123例患者的246个PAH等位基因中检测出了216个PAH基因突变位点,总检出率为87.8％(216/246),其中外显子3、6、7、10、11和12检出率相对较高.共发现59种突变,包括42种错义突变、8种剪接突变、5种无义突变、2种移码突变、2种同义突变.高频突变位点主要是p.R243Q(23.15％),p.R111X(8.33％),EX6-96A>G(7.87％),p.R413P(7.87％)、p.V1399V(6.48％).结论 PKU患者具有明显的突变热点(R243Q、R111X、EX6-96A>G、R413P、V1399V)和突变热点区域(外显子3、6、7、10、11、12).通过PAH基因直接测序可对大部分的PKU家系进行产前诊断.
-
细菌抑制法筛查新生儿苯丙酮尿症的分析
目的 分析细菌抑制法筛查新生儿苯丙酮尿症(PKU)情况,以促进新生儿苯丙酮尿症的早期干预及指导.方法 回顾性分析2012年1月-6月11 950例新生儿采用细菌抑制法筛查苯丙酮尿症的临床资料.结果 所有的日龄中以3～5 d的复查率低,但是其有1例检出有苯丙酮尿症,检出率为0.22‰,而低体重出生儿苯丙酮尿症的发生率高,复查率18.5％.结论 细菌抑制法筛查新生儿苯丙酮尿症操作简单、成本低廉、结果可靠,但应注意选择筛查时机,确保得到更为准确可靠的结果.
-
苯丙酮尿症的基因诊断和产前诊断
苯丙酮尿症是一种常染色体隐形遗传病,多由苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase PAH)基因突变引起.未经治疗的患儿可表现严重的智力障碍和癫痫.本文综述了PAH 基因的研究现状,并深入探讨了苯丙酮尿症基因诊断和产前诊断的方案.
-
PTPS基因检测在6丙酮酰四氢蝶呤合成酶缺乏症出生后诊断和产前诊断中的应用
目的：探讨PTPS基因检测在6丙酮酰四氢蝶呤合成酶缺乏症（PTPSD）出生后诊断和产前诊断中的应用。方法（1）2009年1月至2016年3月郑州大学第一附属医院、郑州大学第三附属医院和郑州市妇幼保健院共收治656例高苯丙氨酸血症（HPA）患儿，采用化学荧光法测定其血苯丙氨酸（Phe）浓度，对其中22例血Phe>120μmol/L者进行尿蝶呤谱分析和红细胞二氢蝶呤还原酶（DHPR）活性测定，对临床初步诊断为四氢生物蝶呤缺乏症（BH4D）的患儿，应用PCR技术进行PTPS基因检测。（2）22例中有7例先证者的母亲再次妊娠时，抽取其胎儿绒毛或羊水标本经PCR技术进行产前PTPS基因诊断。结果（1）PTPSD患儿的出生后基因诊断结果：656例HPA患儿中，22例临床诊断为PTPSD ，共发现16种PTPS基因变异类型，其中5种为新变异（包括p.Lys77Arg、p.Ile84Phe、c.315-2A>G、c.244-2A>T、c.187-1G>T）。（2）产前基因诊断结果：7例PTPSD先证者的母亲再次妊娠，对其胎儿进行产前PTPS基因诊断，其中2例胎儿携带与先证者相同的PTPS基因变异，考虑为PTPSD胎儿可能性大，选择终止妊娠；3例胎儿携带1种PTPS基因变异，考虑为PTPS基因携带者，2例胎儿未携带PTPS基因变异，此5例胎儿出生后新生儿筛查结果阴性，随访3个月～3岁，其生长发育未见异常。结论对HPA患儿进行PTPS基因检测是患儿确诊PTPSD的必要手段，产前基因诊断是避免PTPSD患儿出生的有效预防措施。
-
江苏省苏州市苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变特点
目的 探讨江苏省苏州市苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变特点.方法 选择2008-2011年,于上海新华医院通过串联质朴技术、苯丙氨酸负荷试验及尿蝶呤检测确诊分型的江苏省苏州市内25例PKU患儿及其父母为研究对象,通过SNaPShot基因分型技术和二代测序(NGS)技术,检测25例PKU患儿及其父母的PAH基因的突变.采用Sanger测序验证上述2种测序的结果,并分析苏州市PKU患儿PAH基因突变特点.本研究遵循的程序符合南京医科大学附属苏州医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并与患儿监护人签署临床研究知情同意书.结果 SNaPShot基因分型技术、NGS技术检测本组受试者PAH基因突变结果与Sanger测序结果一致.25例PKU患儿中,运用SNaPShot基因分型技术,共检测出PAH基因的9种突变类型,分别为Exon7-R243Q、Exon6-Y204X、Exon7 R241C、Exon5-IVS4-1、Exon12-R413P、Exon3-R11 1X、Exon7-R261Q、Exon10-W326X及Exon1 1-Y356X,PAH基因突变检出率为58.0％ (29/50).其中10例患儿可通过SNaPShot基因分型技术检测到PAH基因纯合突变或复合杂合突变,家系分析可提供100％的基因诊断信息.对另15例不能提供100％基因诊断信息的PKU患儿运用NGS技术进行检测,在其中12例患儿中检测到PAH基因复合杂合突变,家系分析可提供100％的基因诊断信息;其余3例患儿仅检测到PAH基因单位点杂合突变.运用NGS技术发现了PAH基因的另外15种突变,包括突变频率为4％的A434D、V399V和Y325X.上述2种方法对PAH基因总突变的检出率为94％ (47/50).结论 江苏省苏州市PKU患儿的PAH基因热点突变包括R243Q、Y204X、R241C、IVS4-1、R413P、R111X、A434D、V399V和Y325X.运用SNaPShot基因分型技术检测PAH基因突变,具有一定临床应用价值.
-
采血时间与新生儿先天性甲状腺功能低下与苯丙酮尿症筛查结果的关系
目的 探讨新生儿先天性甲状腺功能低下(CH)与苯丙酮尿症(PKU)筛查结果与采血时间的关系.方法 选择2012年1月1日至2014年6月30日,在北京市海淀区19家医院产科分娩的111 098例新生儿为研究对象.采用回顾性研究方法,按照新生儿出生并完成新生儿CH与PKU筛查的医院级别,将其分为二级医院组(n=62 626)与三级医院组(n=48 472).对于2组受试儿分娩胎龄、采血时间比较,采用成组t检验;受试儿性别与分娩方式构成比、血清促甲状腺激素(TSH)值≥10 μU/mL的疑似CH与血清苯丙氨酸(Phe)值≥2mg/dL的疑似PKU患儿检出率、血清TSH值=10μU/mL的疑似CH和血清Phe值=2mg/dL的疑似PKU患儿检出率的组间比较,采用x2检验.本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求.结果 ①2组受试儿的性别与分娩方式构成比及分娩胎龄分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).②二级医院组受试儿接受新生儿CH与PKU筛查时的采血时间为出生后(123.5±13.5)h,较三级医院组出生后的(138.6±20.0)h更早,2组比较,差异有统计学意义(t=442.345,P＜0.001).③2组血清TSH值≥10 μU/mL的疑似CH与血清Phe值≥2mg/dL的疑似PKU患儿检出率分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).④二级医院组血清TSH值=10 μU/mL的疑似CH患儿检出率为0.251％(157/62 626),显著高于三级医院组的0.140％(69/48 472),2组比较,差异有统计学意义(x2=15.799,P＜0.001);而2组血清Phe值=2 mg/dL的疑似PKU息儿检出率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).⑤本研究CH患儿确诊率为0.057％(63/111 098),PKU患儿确诊率为0.014％(15/111 098).结论 二级医院进行新生儿CH与PKU筛查的采血时间早于三级医院,而血清TSH值=10μU/mL的疑似CH息儿检出率显著高于三级医院.因为本研究仅为回顾性研究,采血时间与新生儿疾病筛查疑似CH患儿检出率的关系,尚需开展前瞻性随机对照试验进一步探讨,从而降低新生儿CH与PKU筛查疑似患儿的检出率,提高疑似患儿的确诊率.
-
新疆南疆地区苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因第7,11,12外显子突变研究
目的：探讨新疆南疆地区苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH )基因第7,11,12外显子突变特征。方法选择2009年3月至2013年12月在新疆南疆地区,经各级医疗机构确诊的42例 PKU患儿(均于新生儿 PKU 筛查时即被确诊)为研究对象,采集其足跟血或静脉血,采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序法进行 PAH 基因第7,11,12外显子的基因突变分析。本研究遵循的程序符合新疆维吾尔自治区人民医院等各级医疗机构人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象或其监护人知情同意,并与监护人签署临床研究知情同意书。结果在42例患儿的42对 PAH 等位基因中,检测出7种PAH 基因突变类型,共计46个 PAH 基因突变位点,其分别为：23个第7外显子 c.735G>A(p.Val245Val)静默突变位点；8个第7外 显 子 c.728G> A(p.Arg243Gln)错义突变位点；2个第7外 显 子 c.781C >T(p.Arg261X)无义突变位点；1个第7外 显 子 c.782G>A(p.Arg261Gln)错义突变位点；6个第11外显子c.1155G>C(p.Leu385Leu)静默突变位点；5个第12外显子 c.1238G>C(p.Arg413Pro)错义突变位点及1个第12外显子 c.1252A>C(p.Thr418Pro)错义突变位点。其中,第7外显子 c.735G>A (p.Val245Val)突变位点占此次检出突变位点比例高,为50.00%(23/46),其突变频率为27.38%(23/84)。PAH 基因的等位基因突变检出率为54.76%(46/84)。结论新疆南疆地区 PKU 患儿 PAH 基因第7,11,12外显子的突变特征为：静默突变和错义突变为主要突变,第7外显子出现的突变类型和数量多。
