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脱落酸对人SACC-2细胞增殖作用的实验研究
目的：观察天然植物激素ABA对SACC-2癌细胞抑制增殖的影响。方法：从细胞增殖活力、DNA合成和周期分布等方面研究 ABA 对 SACC-2细胞增殖的影响。结果：不同浓度的 ABA 对 SACC-2细胞增殖的影响不同。结论：ABA在浓度(≥1×10-1 mmol/L)下有较强抑制增殖作用。
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不同浓度脱落酸对雷公藤悬浮细胞萜类次生代谢产物累积的影响
目的:研究不同浓度脱落酸(Abscisic acid,ABA)对雷公藤悬浮细胞中萜类次生代谢产物的诱导效应,探讨脱落酸的毒物效应(Hormesis).方法:雷公藤悬浮细胞继代培养10 d后,分别加入不同浓度(10 μM,20 μM,50 μM,100 μM,150 μM,200 μM,500 μM)的ABA诱导,并设置空白对照组,每组生物学重复4次.分别采用HPLC和UPLC检测诱导后0 h和240 h的样品,测定悬浮细胞中雷公藤甲素、雷酚内酯、雷公藤红素和雷公藤内酯甲4种萜类成分的含量.结果:当ABA浓度为10 μM和20 μM时,诱导组与对照组无差异;50 μM时,与对照组比较,雷酚内酯含量明显升高,雷公藤红素含量升高至2.4倍,雷公藤内酯甲含量升高至4.7倍;当诱导浓度超过100 μM时,与对照组比较,除雷公藤内酯甲外,雷公藤甲素、雷酚内酯、雷公藤红素含量均显著降低.结论:ABA在10~500 μM范围内对不同的雷公藤萜类成分影响作用不同,从整体趋势看,呈现为β曲线,符合Hormesis效应特点;50 μM时ABA对雷公藤红素含量的积累有显著促进作用,为后期研究ABA影响雷公藤红素合成机制奠定基础.
关键词： 脱落酸 雷公藤 悬浮细胞 萜类成分 Hormesis效应 -
干旱胁迫下甘草苷与脱落酸的相关性研究
目的:研究干旱胁迫下甘草苷与脱落酸含量的变化,分析二者相关关系.方法:以人工培育甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch．为材料,按照外源钙叶面喷施浓度、喷施季节与干旱胁迫程度3因素3水平设计正交试验处理,检测不同试验处理下的甘草苷与脱落酸含量变化,分析各试验因素对甘草苷、脱落酸含量变化的影响,以及两者含量间的相关性.结果:干旱胁迫对甘草苷和脱落酸均具有显著影响,且二者含量间具有显著的正相关.结论:干旱胁迫下甘草苷的合成积累,与抗旱信号传导物质脱落酸的合成密切相关.
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药用植物组织培养与脱落酸
脱落酸在植物的许多生理过程中起着至关重要的作用,而且它在药用植物生物技术领域研究中的地位不断提升.文章对脱落酸在药用植物组织培养和种质离体保存、改变药用植物次级代谢物的积累等方面的各种作用进行了综述.
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ABA及其生物合成抑制剂对丹参毛状根酚酸类成分和关键酶的影响
目的:研究脱落酸(ABA)及其生物合成抑制剂氟啶酮(fluridone),对丹参毛状根酚酸类成分和关键酶的影响.方法:继代培养18d的丹参毛状根添加不同浓度的ABA及ABA与氟啶酮组合,处理1d后测定关键酶PAL和TAT活性；处理6d后测定不同处理的丹参毛状根中酚酸类物质的含量.结果:在一定浓度范围内,低浓度的ABA促进丹参毛状根的生长,高浓度的ABA抑制丹参毛状根的生长；ABA显著促进酚酸类物质的积累,对咖啡酸的诱导表现出正相关,但是迷迭香酸和丹酚酸B的效果,表现出在低浓度效果较好,随浓度增大,诱导效果降低,直到ABA浓度至200 μmol· L-1,含量开始上升；当ABA与氟啶酮组合处理时,氟啶酮抑制ABA对丹参毛状根酚酸类的积累,但是有差异；不同浓度的ABA会不同程度的提高PAL和TAT酶的活性,添加ABA生物合成抑制剂,酶活性诱导效果降低.结论:ABA能诱导丹参毛状根中酚酸类化合物积累,同时也能激活合成相关酶的活性；ABA生物合成抑制剂氟啶酮不同程度抑制ABA的诱导效果.
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脱落酸对甘草化学成分含量和颜色的影响
该试验拟以栽培甘草为材料,不同浓度ABA叶面喷施,5个时间点取样,研究ABA对甘草化学成分含量和颜色的影响.结果发现,ABA施加后甘草45 d内甘草酸、甘草苷的含量均有一定程度的提高,以甘草苷含量变化更为显著.其中高浓度ABA(3.96 mg·L-1)施加使得甘草酸的质量分数30 d内从(1.099 ±0.108)％上升至(1.665±0.319)％,上升幅度为52％;甘草苷的质量分数30 d内从(0.353 ±0.090)％上升至(1.738±0.428)％,上升幅度为392％,二者均在45 d时有明显的下降趋势.高浓度ABA(3.96 mg·L-1)施加后45 d内甘草粉末的颜色指标a*,b*较对照组有显著的升高,即甘草粉末色泽加深,偏红黄两色.由此得出结论为高浓度ABA (3.96 mg·L-)叶面施加不仅能够提高以颜色为指标传统认知上的质量,又能提高以甘草酸、甘草苷含量为指标现代认知上的质量.
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太子参分解代谢关键酶8'羟化酶基因的克隆及生物信息学分析
ABA 8'羟化酶是脱落酸(abscisic acid,ABA)分解代谢中的关键酶基因之一.采用同源检索的方法从太子参转录组数据库中获得7个ABA 8'羟化酶(abscisic acid 8'-hydroxylase)基因家族成员,对各家族成员进行转录分析组数据以及ABA 8'羟化酶关键基因ABA8ox1编码区(coding sequence,CDS)的克隆与生物信息学分析.ABA8ox1基因CDS全长1 401 bp,编码480个氨基酸残基,等电点为8.55,相对分子质量为53 kDa,跨膜分析显示其为膜蛋白,1～21个氨基酸残基位于胞内,22～466个氨基酸残基位于胞外.转录组数据分析及定量PCR技术共同证明ABA8ox1在块根的韧皮部及须根中有较高的表达.多序列比对及聚类分析显示与其他植物CYP707A蛋白具有较高的同源性,且与模式植物拟南芥中ABA分解关键基因AtCYP707A1和AtCYP707A3聚为一类.该研究为太子参块根膨大及对逆境胁迫响应的分子机制奠定基础.
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脱落酸抑制人肝癌细胞增殖
目的 探讨脱落酸抑制SMMC-7721人肝癌细胞增殖作用的机制.方法 免疫细胞化学检测P53、Ki-67、Cyelin D1蛋白表达;RT-PCR检测P53和端粒酶mRNA表达.结果 经脱落酸(ABA)、环六亚甲基二乙酰胺(HMBA)和ABA+HMBA作用后细胞内mt P53、Cyelin D1、Ki-67及细胞内眦P53、hTERT mRNA表达水平均明显降低(P<0.05).结论 ABA抑制SMMC-7721人肝癌细胞增殖,其作用机制可能是调控细胞周期,降低mtP53、Ki-67、Cyclin D1蛋白及mtP53,hTERT mRNA表达.
关键词： 脱落酸 环六亚甲基二乙酰胺 SMMC-721人肝癌细胞 细胞增殖 抑制 -
脱落酸对盐藻SZ-05药理活性成分积累的影响
目的 阐明脱落酸对盐藻SZ-05药理活性成分积累的影响.方法 以脱落酸加入盐藻SZ-05培养体系,在盐胁迫条件下检测盐藻SZ-05药理活性成分.其中β-胡萝卜素用HPLC法检测,多糖用硫酸-蒽酮法检测.结果 脱落酸明显的促进了盐藻的生长,使盐藻SZ-05的生物量提高了16.94%,β-胡萝卜素提高了11.16%;多糖提高了22.31%,其中胞外多糖的增长量为8.01%.结论 脱落酸能显著提高盐藻SZ-05药理活性物质的积累并能显著降低藻细胞在胁迫条件下的脂质过氧化,提高氧化酶的活性.
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山银花化学成分研究
目的 研究华南忍冬Lonicera confusa干燥花蕾(山银花)的化学成分.方法 利用反复硅胶柱色谱,Sephadex LH-20、中压柱色谱及半制备液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构.结果 分离得到10个化合物,分别鉴定为绿原酸(1)、槲皮素(2)、木犀草素(3)、木犀草素-3'-O-α-L-鼠李糖苷(4)、芹菜素-7-O-α-L-鼠李糖苷 (5)、反式桂皮酸(6)、对羟基苯甲醛(7)、2,5-二羟基苯甲酸-5-O-p-D-吡喃葡萄糖苷(8)、苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、脱落酸(10).结论 化合物4～10首次从山银花中分离得到.
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滇重楼种子层积后脱落酸和赤霉素相关基因表达水平的研究
目的 研究脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)相关的6个基因(NCED、CYP707A、ABI2、PP2C、GA20ox2、GA20ox3)在滇重楼种子休眠解除过程中的表达特点.方法 分别选取20℃层积和20℃转4℃层积处理后处于不同休眠解除阶段的滇重楼种子为材料,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析不同层积处理后6个基因在胚和胚乳中的表达水平.结果 在滇重楼种子层积过程中CYP707A、NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2基因在胚和胚乳中表达有差异,而PP2C表达水平无明显变化规律；CYP707A在低温层积后表达水平显著高于高温层积,尤其是在胚中,而NCED、GA20ox2、GA20ox3和ABI2在高温和低温层积后均有较高的表达水平,且在胚中的表达水平高于胚乳中.结论 所筛选出的NCED、CYP707A、ABI2、GA20ox2、GA20ox3基因参与滇重楼种子休眠解除过程,可以作为研究滇重楼种子休眠过程的重要基因.
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茉莉酸甲酯对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力以及内源激素含量的影响
目的 研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律.方法 以0.01、0.10、1.00、10.00 mmol/L的茉莉酸甲酯(MeJA)作为外源诱导剂,艾纳香不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)为实验对象,以生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)4种内源激素含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标.结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好;不同浓度的MeJA诱导下,抗氧化酶的变化比较复杂.对于POD来说,除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外,其他浓度处理下,POD在72 h均显著高于对照(P＜0.05).对于CAT来说,10.00 mmol/L MeJA诱导下,艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到高,之后随着时间的推移,CAT活力极速下降.在其他浓度处理下,嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h,显著低于对照,而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理,均在72 h时高于对照.对于SOD来说,除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后,SOD含量均高于对照,且与对照组有显著差异(P＜0.05)外,其余浓度处理下的SOD均低于对照.低浓度的MeJA(≤0.10 mmol/L)可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA3和ZT的积累,而高浓度的MeJA(≥10.00 mmol/L)促进ABA的积累.结论 艾纳香植株在外源MeJA(1.00 mmol/L)诱导下可以促进活性成分积累,为其栽培生产提供理论依据.
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脱落酸诱导Tca8113细胞株的动物实验研究
目的:检测不同剂量的植物激素脱落酸对人舌鳞癌Tca8113细胞株细胞凋亡的体内诱导.方法:通过人舌鳞癌Tca8113细胞株建立裸鼠移植瘤并随机分为对照组和实验组,实验组(0.5mmol/L和1mmol/L)局部肿瘤内直接注射脱落酸.检测其肿瘤生长抑制率,常规HE组织学观察和Caspase-3 mRNA原位杂交检测.结果:实验组移植瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,癌组织分化渐成熟,出现角化细胞,有角化珠形成趋势;间质结缔组织增多,淋巴细胞浸润.对照组瘤周组织中,有大量新生血管形成.0.5mmol/L和1mmol/L脱落酸对裸鼠移植瘤的抑制率分别为26.7%、36.1%,两者间存在显著差异(P＜0.01).实验组脱落酸作用后的瘤重与对照组间存在显著差异(P＜0.001).0.5mmol/L和1mmol/L脱落酸实验组经原位杂交检测Caspase-3 mRNA阳性表达位于胞浆呈棕黄色,部分细胞胞核也呈棕黄色,其阳性表达率分别为0.27±0.02、0.22±0.02,两者间有统计学意义(P＜0.001);而对照组移植瘤的胞浆基本上不着色.实验组间与对照组间Caspase-3 mRNA的表达量也存在着统计学意义(P＜0.01).裸鼠的全身重要脏器(如肺、肾等)无器质性改变.结论:脱落酸不仅能抑制人舌癌Tca8113移植瘤的生长,而且还对移植瘤有分化诱导作用,导致Caspase-3的活性增加,促进细胞发生凋亡,为以后的临床应用研究提供了实验数据.
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高效液相色谱法测定甘草植物体内脱落酸含量的研究
目的:建立甘草植物抗旱信号传导物质脱落酸的含量测定方法,为揭示甘草抗旱性与有效成分积累相关机制奠定理论依据.方法:甘草须根中的脱落酸用80%的甲醇抽提,抽提液经过盐酸酸化、乙酸乙酯萃取终得到供试品溶液,应用Waters-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,进行二元梯度洗脱;流速:0.6mL·min-1,紫外检测波长为260nm,柱温:25℃.结果:脱落酸在0.0336～0.672μg线性关系良好(r=0.9999),甘草样品平均回收率90.35%,RSD为1.70%,甘草须根中的ABA含量为0.077～0.188mg·g-1.结论:该法灵敏度高、专一性强、重复性好,为进一步开展甘草抗旱性与有效成分积累相关机制的研究提供依据.
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类胡萝卜素等物质对灰葡萄孢霉菌产脱落酸的影响
目前认为真菌中脱落酸生物合成是经甲羟戊酸、焦磷酸法尼酯的直接合成途径.高等植物中脱落酸的生物合成除可能存在直接途径外,更主要的是经类胡萝卜素等四十碳前体降解转化的间接合成途径,然而真菌中是否存在类胡萝卜素为前体的间接生物合成途径尚未见报道.该文报道了在脱落酸产生菌培养过程中添加类胡萝卜素及维生素A等物质,能够促进脱落酸的合成,表明在真菌中脱落酸的生物合成也可能存在经类胡萝卜素降解的间接途径,并可通过添加类胡萝卜素等前体的方法提高脱落酸发酵产量,降低生产成本.该实验还应用正交设计法考察了前体及营养物质的适添加浓度,经优化脱落酸液体发酵产量可比对照提高122.3%.
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西红柿籽发芽是被辐射了?——NO
流言:西红柿籽发芽是转基因或者受到辐射,因为之前“受到福岛核电站辐射”的番茄有这样的情况,所以这样的番茄有问题!真相:种子萌发是自然规律,无需担心.番茄属于浆果,一般来说,它的种子会有一个休眠期,主要取决于两个因素:一是番茄的胎座内脱落酸的浓度,二是番茄的胎座本身的有机酸含量.
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脱落酸作用后人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用的实验研究
[目的]观察脱落酸(ABA)对移植瘤成瘤能力的影响.[方法]分为对照组和ABA组、环六亚甲基二乙酰胺(HMBA)组ABA+HMBA三种不同浓度处理组,采用免疫组化方法研究所形成肿瘤中细胞增殖及恶性生长的变化,并检测脏器有无转移.[结果]HE常规病理切片观察处理组可见组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟.与对照组比较,处理组移植瘤瘤组织块体积变小、重量明显减轻,有统计学意义(P＜0.05).对照组外周血甲胎蛋白(AFP)明显减少(P＜0.05),细胞核中的Ki-67的表达均明显降低(P＜0.05).全部裸鼠均未发现体表淋巴结及腹腔淋巴结转移,亦未发现转移灶的存在.[结论]ABA对人原发性肝癌裸鼠移植瘤成瘤性有抑制作用,使肿瘤细胞在体内增殖活性下降同时肿瘤细胞形态趋于正常,是一种作用效果良好肿瘤分化诱导剂.
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体外探究脱落酸对肺腺癌细胞系Spc-A1自噬的影响
目的 观察脱落酸(ABA)作用于肺腺癌细胞株Spc-A1引起自噬方面的变化,研究ABA对Spc-A1细胞自噬的影响.方法 以人肺腺癌细胞系Spc-A1为研究对象,ABA给药浓度分别为0.8、20、100 μmol/L,采用MTT法检测ABA作用后Spc-A1细胞的活力;激光共聚焦显微镜观察ABA作用于Spc-A1细胞后自噬现象;提取培养细胞mRNA及蛋白质,分别采用荧光实时定量PCR、蛋白印迹法检测自噬相关基因Beclin-1及LC3-Ⅱ的表达.结果 ABA作用后,肺腺癌细胞Spc-A1活力随着ABA浓度的增高而下降,各处理组之间差异具有统计学意义(P<0.001);ABA可诱导Spc-A1细胞自噬,自噬现象随药物浓度增高而增加;ABA处理后Beclin-1及LC3-Ⅱ的mRNA表达量随着ABA浓度的增加而增高,各处理组表达量差异具有统计学意义(P<0.05);蛋白表达结果 显示ABA 100 μmol/L处理组与对照组Beclin-1表达量差异具有显著性(P=0.04);ABA 100 μmol/L处理组与对照组LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.005),ABA 0.8 μmol/L组与ABA 100 μmol/L组之间LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.039),余处理组表达量两两之间未见显著性差异.结论 ABA可通过调节自噬信号转导通路中相关基因的表达诱导肺腺癌细胞Spc-A1自噬,随着自噬的增加,可能抑制肿瘤的生长.
关键词： 脱落酸 肺腺癌细胞系Spc-A1 自噬 Beclin-1 LC3 -
脱落酸抑制剂氟啶酮对小鼠弓形虫病的影响
目的 观察脱落酸抑制剂氟啶酮对小鼠弓形虫病的影响.方法 给感染弓形虫RH株的小鼠腹腔注射氟啶酮,观察小鼠生存延长率、体重变化;光镜及电镜观察腹腔中弓形虫形态;脏器组织印片评估体内弓形虫扩散情况.结果 与对照组相比,氟啶酮治疗的小鼠弓形虫病症状出现晚且程度较轻,生存时间延长(P<0.05),生存延长率为45%,体重减少率为6.13%,而对照组体重减少率为7.23%;对照组小鼠腹腔中以游离速殖子为主,实验组则以细胞内虫体为主;实验组小鼠脏器受虫体累及的时间稍晚,感染程度也比对照组轻.结论 氟啶酮能对小鼠弓形虫病起抑制作用.
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从反季节蔬菜到植物激素
植物激素VS植物生长调节剂植物激素,准确地说是植物内源激素,是植物体内自行产生的一种具有生理活性的有机化合物.它可由产生的部位或组织运送到其他器官.这类物质在植物体内含量虽极微,但作用却很大,是生命活动不可缺少的物质.目前公认的植物内源激素有生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素甾醇六大类.新增的植物激素内源还有茉莉酸、多胺和水杨酸等.
