艾纳香资源研究进展

艾纳香资源是开展艾纳香品种收集保存与选育、品质鉴定、遗传研究、生物活性研究和开发利用的重要物质基础,也是艾纳香产业持续发展的物质基础.本文查阅了国内艾纳香资源的相关研究,同时探讨了艾纳香资源存在的问题,并对今后需要重点研究的方向提出建议,以供同行在进一步推动艾纳香资源研究与利用提供参考与商榷.

艾纳香中的黄酮类化学成分

目的:研究艾纳香Blumea balsamifera中的黄酮类化学成分.方法:运用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱对艾纳香中的化学成分进行分离,通过理化常数和波谱数据分析鉴定化合物.结果:从艾纳香中分离并鉴定了12个化合物,分别为3,3’,5,5’,7-五羟基二氢黄酮(1),3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基二氢黄酮(2),金圣草素(3),3’,4’,5-三羟基-3,7-二甲氧基黄酮(4),香叶木素(5),3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基黄酮(6),3,5-二羟基-3’,4’,7-三甲氧基黄酮(7),chrysosplenol C(8),3,3’,5-三羟基-4’,7-二甲氧基二氢黄酮(9),艾纳香素(10),3,3’,5,7-四羟基-4’-甲氧基二氢黄酮(11),3’,5,5’,7-四羟基二氢黄酮(12).结论:化合物1,3～5,8为首次从该属植物中分离得到;化合物6,7为首次从该植物中分离得到.

不同产地黔艾纳香中左旋龙脑含量测定

目的:测定不同产地黔艾纳香中左旋龙脑的含量.方法:采用超声提取、毛细管气相色谱法测定,用HP-5石英毛细柱(30m×0.32mm×0.25μm)、FID检测器,氮气为载气,程序升温,进样口温度280℃,起始温度为90℃,以5℃/min的升温速率升至100℃,维持3min;再以5℃/min的升温速率升至150℃,维持2min.结果:左旋龙脑浓度在0.0200-0.0600mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R=0.9997),平均回收率为96.97％(n=6).结论:该方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为龙脑的定量分析提供了科学有效的方法;罗甸艾纳香和黎平艾纳香中龙脑含量分别为3.858、3.012mg/g,具有显著差异.

5种特色苗药品种的研究进展与文献分析

苗药与藏、蒙、维、傣、彝并称为六大民族药,其中常用药物289种,经筛选与再评价研究,已开发上百种苗药药材及成方制剂,但收集苗药的相关专著比较零散,无系统整理.文章首次梳理了苗药研究的主要专著,并重点对头花蓼、吉祥草、大果木姜子、艾纳香和黑骨藤5种特色苗药品种的资源分布和成方制剂进行归纳总结.通过分析近10年相关中英文文献、专利及基金资助情况,讨论苗药发展现状与存在问题,为其资源的可持续利用和深入研发提供依据.

艾纳香叶废渣乙酸乙酯部位对佐剂类风湿关节炎大鼠药理作用研究

目的:研究艾纳香叶废渣乙酸乙酯部位(BBE)对大鼠实验性佐剂类风湿关节炎的作用及其机制.方法:用弗氏完全佐剂建立佐剂型类风湿关节炎大鼠模型,用废渣乙酸乙酯部位不同剂量进行28 d的灌胃治疗处理,以体重变化、足肿胀度、关节炎指数、免疫器官增生以及病理切片等来评价治疗效果,并同时用比色法测定血清中的SOD,MDA,GSH,NO,OH·,ALP,AST,ALT,NAG,SA水平以及采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血浆中IL-1,IL-6,TNF-α水平.结果:其乙酸乙酯部位能显著减轻AA大鼠关节肿胀和关节炎指数,能有效抑制关节滑膜增生,下调血清中MDA,NO,OH·,ALP,AST,ALT,NAG,SA,IL-1,IL-6,TNF-α水平,上调SOD,GSH水平.结论:艾纳香叶废渣乙酸乙酯部位对类风湿关节炎有一定的治疗作用.

艾纳香黄酮类物质生物合成途径分析

为深入了解艾纳香中黄酮类物质的生物合成途径,提高艾纳香黄酮类活性物质的生物合成量,该课题基于艾纳香的转录组数据,将艾纳香的转录组测序结果同KEGG数据库中其他多种高等植物黄酮类物质生物合成途径的研究结论进行比对,预测出了艾纳香中黄酮类物质可能的代谢途径.研究结果表明,艾纳香在KEGG数据库中比对上2条黄酮类代谢通路,分别是:类黄酮生物合成途径,KEGG编号为ko00941,艾纳香转录组信息中有32条基因与该途径相关;黄酮和黄酮醇的生物合成,KEGG编号为ko00944,艾纳香转录组信息中有12条基因与该途径相关.艾纳香中黄酮类物质的生物合成主要与ko00941途径相关.艾纳香中黄酮类物质的生物合成途径与其他物种的高等植物相似,催化黄酮类物质生物合成的关键酶很可能也是CHS与查耳酮异构酶.艾纳香素是艾纳香中重要的药理活性物质,HCT与艾纳香素的生物合成密切相关.

艾纳香萜类物质生物合成途径分析

为了全面了解艾纳香中萜类物质的代谢途径,以及具体的基因和催化酶类,以期为从分子水平调控艾纳香中萜类活性成分提供理论依据.基于艾纳香的转录组数据,将艾纳香的转录组测序结果同KEGG数据库中其他多种高等植物萜类合成途径的研究结论进行比对,预测出艾纳香中萜类代谢的具体途径.结果表明艾纳香在KEGG数据库中比对上4条萜类代谢通路:萜类骨架代谢途径、单萜代谢途径、二萜代谢途径、倍半萜与三萜代谢途径,对应基因的数目分别为103,10,29,59条.通过对催化酶与活性产物进行总结分析,结果显示,单萜活性产物为8种、二萜3种、三萜和倍半萜3种.在萜类代谢途径过程中的关键酶主要为脱氧木酮糖-5-磷酸合酶、HMG-CoA还原酶、烯丙基转移酶系.艾纳香中与单萜类物质合成的酶类相对较少,而产物种类较多,这可能与单萜合酶催化产物的不专一性有关.通过对艾纳香中萜类调控途径的整体分析,并对其中关键酶基因的调控,有望整体提高艾纳香中萜类活性物质的产量.

艾纳香挥发油栓的制备工艺及体外溶出度研究

目的:研究艾纳香挥发油栓的制备工艺,考察其体外溶出效果.方法:建立艾纳香挥发油栓的含量测定及方法学考察方法,采用正交试验优化艾纳香挥发油的提取工艺,通过融变时限、外观及溶出度等指标优化对栓剂基质的考察,多指标考察栓剂佳的成型温度、基质及辅料用量的选择,确定佳的处方工艺.考察不同溶出方法及转速对制剂溶出度的影响,建立溶出度测定方法.结果:制备的艾纳香挥发油栓工艺稳定,正交试验佳工艺为药材加6倍量的水、加2.5％氯化钠,提取8h,栓剂佳成型温度60 ～ 65℃,在45 min及3h的累积溶出度分别达到70％,90％以上.结论:艾纳香挥发油栓处方合理,制备工艺简单可靠,稳定性良好.

基于温度因子的贵州省艾纳香种植气候区划研究

根据贵州省艾纳香栽培种植的气象指标,根据贵州省各县主要气象站点54年(1960-2014年)的气象统计资料,建立艾纳香可种植区域气候因子与海拔高度的回归模型.综合考虑气候及坡度、海拔高度等要素,利用GIS的空间分析功能,确定艾纳香的可种植区域.运用RS的图像分类技术,完成贵州省土地利用现状图,将贵州省不适宜艾纳香种植的地块屏蔽,终将艾纳香种植气候区划划分为适宜区、适宜区和次适宜区3个等级.研究结果表明艾纳香可种植区域主要分布在、黔南和黔西南.适宜种植气候区的面积共计76.98 km2,适宜种植气候区的面积共计156.04 km2,次适宜种植气候区的面积共计235.43 km2.

不同产地艾纳香药材的GC指纹图谱研究

目的 建立艾纳香的GC指纹图谱分析方法,为其质量评价提供依据.方法 采用毛细管气相色谱法,以适宜的程序升温条件,对来自14个不同产区的艾纳香药材进行了指纹图谱测定;并以共有峰的相对峰面积值为参数,对各个产地的艾纳香药材进行指纹图谱相似度评价和聚类分析.结果 14个不同产地的艾纳香药材的GC指纹图谱有23个共有峰;相似度评价和聚类分析结果表明,不同产地艾纳香的成分种类上差异不大,但成分比例和量上差异较大.结论 该分析方法对艾纳香中各成分的分离效率高,且精密度、稳定性和重复性均符合指纹图谱研究的技术要求(RSD＜5％),可作为艾纳香药材质量评价的重要依据.

苗药艾纳香不同居群及不同部位的质量研究

目的 研究苗药艾纳香不同居群及不同部位的质量.方法 挥发油采用药典方法蒸馏提取;总黄酮采用50％乙醇回流法提取,紫外可见分光光度法测定.结果 艾纳香新鲜、阴干及烘干叶片挥发油含量分别为2.0167、1.5917、1.2751 ml/kg,且三者间差异有统计学意义.叶片挥发油含量显著高于嫩枝,分别为1.1417 ml/kg和0.6313 ml/kg.不同居群挥发油含量为0.9333～2.5667ml/kg,平均为1.6490ml/kg,居群间差异有统计学意义;不同居群总黄酮含量为13.43％～17.48％,平均为14.87％,居群间差异无统计学意义.结论 提取艾纳香挥发油时,应采用新鲜叶片,且好即采即用;作为药材使用的艾纳香叶片应采用阴干法干燥;艾纳香嫩枝可用于提取挥发油,以充分发挥艾纳香资源价值;不同居群艾纳香叶片挥发油含量差异显著,总黄酮含量差异不显著,在选择艾纳香优良种源时,应以挥发油含量作为主要指标.

艾纳香化学成分研究

艾纳香为菊科植物艾纳香Blumea balsamifera DC.的干燥茎叶,又称之为大风艾,辛、苦、温,具温中活血、调经、祛风除湿之功能,用于治疗外感风寒、泻痢、腹痛、肠鸣、肿胀、月经不调、筋骨疼痛等病症[1].

茉莉酸甲酯对艾纳香活性成分、抗氧化酶活力以及内源激素含量的影响

目的 研究艾纳香植株不同叶位叶片中4种内源激素含量和3种抗氧化酶活性以及L-龙脑的含量与诱导剂的浓度、采样时间之间的规律.方法 以0.01、0.10、1.00、10.00 mmol/L的茉莉酸甲酯(MeJA)作为外源诱导剂,艾纳香不同叶位的叶片(嫩叶、成熟叶、老叶)为实验对象,以生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)4种内源激素含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)3种抗氧化酶的活力以及活性成分L-龙脑的含量作为检测指标.结果 1.00 mmol/L的MeJA对L-龙脑的积累效果较好;不同浓度的MeJA诱导下,抗氧化酶的变化比较复杂.对于POD来说,除了10.00 mmol/L MeJA浓度处理下的艾纳香3个叶位的叶片中其含量低于对照外,其他浓度处理下,POD在72 h均显著高于对照(P＜0.05).对于CAT来说,10.00 mmol/L MeJA诱导下,艾纳香3个叶位叶片其含量在24 h时达到高,之后随着时间的推移,CAT活力极速下降.在其他浓度处理下,嫩叶和老叶中的CAT酶活力在72 h,显著低于对照,而在成熟叶中除了0.10 mmol/L MeJA处理,均在72 h时高于对照.对于SOD来说,除了1.00 mmol/L MeJA处理的3个叶位的叶片在48 h之后,SOD含量均高于对照,且与对照组有显著差异(P＜0.05)外,其余浓度处理下的SOD均低于对照.低浓度的MeJA(≤0.10 mmol/L)可以促进艾纳香叶片中的IAA、GA3和ZT的积累,而高浓度的MeJA(≥10.00 mmol/L)促进ABA的积累.结论 艾纳香植株在外源MeJA(1.00 mmol/L)诱导下可以促进活性成分积累,为其栽培生产提供理论依据.

艾纳香及其提取物的GC-MS指纹图谱和相关性研究

目的 建立艾纳香及其提取物艾粉、艾纳香油的GC-MS指纹图谱,并进行相关性分析.方法 采用GC-MS建立艾纳香、艾粉、艾纳香油指纹图谱分析方法;通过CHROMAP 1.5指纹图谱系统解决方案软件分别建立共有模式,标定共有峰,进行相似度评价,并用NIST 11标准质谱库对共有指纹峰进行检索分析.结果 建立了艾纳香、艾粉、艾纳香油的GC-MS指纹图谱;标定艾纳香共有峰40个、艾粉共有峰17个、艾纳香油共有峰31个,并鉴定了艾纳香40个共有指纹峰、艾粉13个共有指纹峰、艾纳香油25个共有指纹峰的化学成分;艾纳香药材相似度为0.632～0.989,提取物艾粉和艾纳香油相似度均大于0.900;艾纳香药材与其提取物指纹图谱有较好相关性.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于艾纳香、艾粉、艾纳香油的鉴别和质量控制.

艾纳香二氢黄酮对脂质过氧化损伤大鼠原代培养肝细胞的保护作用

冰片提高生物利用度的研究进展

冰片,又名龙脑、梅花脑、瑞龙脑等,是龙脑香科植物龙脑香Dryobalanops aromarica Gaertn.f.树脂的加工品,也有以菊科植物艾纳香Blumea balsamifera DC.叶提取的结晶,或樟脑、松节油等用化学方法合成的制成品替之[1].早在唐代梅花冰片已以龙脑香之名载于唐代<新修本草>,历代医家认为其开窍、引药上行、佐使有功,并以之作为"佐使药"广泛应用.现代医学研究发现冰片对提高药物生物利用度有显著效果.近年来,冰片提高生物利用度的作用受到国内外的重视,本文对冰片提高生物利用度的研究进展作一概述.

艾纳香总黄酮提取工艺优化及其含量测定方法研究

目的:建立测定艾纳香中总黄酮含量的方法;考察艾纳香总黄酮提取工艺;比较艾纳香中不同部位总黄酮含量.方法:分别将样品、二氢槲皮素、槲皮素、芦丁、柚皮苷通过不同方法显色后在200～800 nm波长范围内扫描,对比扫描图选择适宜的对照品及显色方法;运用单因素及正交实验考察艾纳香总黄酮提取工艺;将艾纳香侧枝分为上部叶、中部叶、下部叶、上部茎、中部茎、下部茎6个部分,比较不同部位总黄酮含量.结果:以二氢槲皮素为对照品,经亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色后,在494 nm处检测,在0.0054～0.0324 mg/mL(r=0.9999)范围内线性关系良好;艾纳香总黄酮佳提取工艺为:提取溶剂50％乙醇,提取温度60℃,料液比1∶300,超声功率400 W,提取时间60 min,提取1次;艾纳香的叶比茎总黄酮含量高,高为73.7 mg/g,且上部叶＞中部叶＞下部叶＞中部茎＞上部茎＞下部茎.结论:该研究中总黄酮含量测定方法准确、提取方法简便,可用于艾纳香总黄酮的提取及含量测定;测定艾纳香不同部位总黄酮含量,为艾纳香资源开发与综合利用提供了科学依据.

不同提取方法对艾纳香挥发油化学组成的影响及其体外抗氧化活性

目的 研究不同提取方法制取艾纳香挥发油的化学组成的差异,以及挥发油与提取挥发油后的水提液的生物活性.方法 采用水蒸气蒸馏装置和挥发油测定器两种提取方法,以干燥的艾纳香叶为原料分别提取挥发油,将所得的挥发油进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术化学组成分析;采用DPPH法比较艾纳香挥发油与提取挥发油后的水提液的体外抗氧化活性.结果 挥发油测定器制得艾纳香挥发油不论从挥发油得率还是L-龙脑的量均优于水蒸气蒸馏装置.从艾纳香挥发油GC-MS离子流图谱中鉴定出50种成分,占挥发油总量的90％以上,其中主成分均为L-龙脑,含有量分别达76.39％和61.57％;艾纳香挥发油质量浓度在100 mg/mL时,自由基清除率为17.42％,其水提液IC50=1.003 mg/mL.结论 制取艾纳香挥发油,采用挥发油测定器法优于水蒸气蒸馏法.艾纳香挥发油具有较弱的抗氧化活性,而其水提液具有较好的抗氧化活性.

气相色谱法测定艾纳香中左旋龙脑的研究

目的 建立气相色谱法测定艾纳香药材中左旋龙脑.方法 以水杨酸甲酯为内标物,采用PEG20M( 10％)填充柱(2m×3mm ×2μm),FID检测器；气化温度180℃;柱温150℃；检测器温度200℃；进样量为1μL.结果 左旋龙脑在0.312 ～ 10.000 mg/mL范围内与峰面积比值的线性关系良好,平均回收率为100.9％,RSD为2.2％.结论 本方法简便、准确、可用于艾纳香药材的质量评价.

艾纳香挥发油和左旋龙脑在不同叶型及不同部位的分布

目的 寻找艾纳香叶型和叶的茎生长部位中挥发油和左旋龙脑分布规律.方法 挥发油采用药典方法蒸馏提取;左旋龙脑采用乙酸乙酯超声提取,气相色谱法测定.结果 按叶型区分,艾纳香的挥发油的含有量由高到低依次为马耳艾、小叶艾和大叶艾,左旋龙脑依次为马耳艾、大叶艾和小叶艾,但统计学上无显著性差异.按部位区分,挥发油和左旋龙脑的量由高到低依次均为茎中上部叶和下部叶,统计学上有显著性差异.结论 应首选马耳艾叶型和它的中上部位叶作为筛选优良种源.