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濒危野生新疆阿魏低空遥感资源调查＊
目的：作为新疆特有的濒危药用植物，新疆阿魏的资源分布区域和数量对其保护和资源的可持续利用具有重要意义。方法：本文采用低空遥感和地面样方调查，对新疆阿魏地理空间分布和数量进行调查研究。结果：低空遥感调查结果首次清晰确定新疆阿魏的地理分布区域，将已知的“阿魏滩”扩大到附近5个山头，覆盖范围约0.88 km2，建议扩大围栏保护面积。同时，低空遥感影像分析出的分布区域内黄叶新疆阿魏（直径在0.3 m以上）数目大约为3191株。而地面样方调查得到直径在0.3 m以上的黄叶阿魏数目为2752株，两者之间误差为14%。并确定了新疆阿魏低空遥感监测的时相和监测范围。结论：低空遥感技术具有快速获取新疆阿魏分布现状的优势，可有效评价新疆阿魏资源动态变化。
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濒危药用植物新疆阿魏cDNA文库构建与微卫星标记
目的:测试和分析新疆阿魏转录组,挖掘基因表达谱多态性标记(EST-SSRs),为新疆阿魏属植物遗传多样性、生物学特性、功能基因鉴定和濒危机制的研究奠定基础.方法:提取新疆阿魏茎叶总RNA,反转录合成cDNA,应用454 GS FLX Titanium进行测序,并对其序列进行拼接,获得一致性序列(UniqueSequences);使用Simple Sequence Repeat Identification Tool (Perl Script)对一致性序列进行分析,检索SSRs模体,采用Primer 5及SSR Hunter软件设计引物并进行PCR扩增.结果:高通量测序获得新疆阿魏ESTs序列550 200条,经拼接得到60 248条Unique Sequences,从中发现1916个EST-SSRs,平均每100kb出现3.18个SSR,其中二核苷酸多,GA重复常见,随机挑选5条序列扩增及测序结果表明,80％的SSR位点与Sanger测序结果一致.结论:通过转录组测序首次获得新疆阿魏EST-SSRs,为新疆阿魏生物学特性及濒危机制研究奠定了基础.
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新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠腺癌Caco-2细胞迁移、侵袭的影响及相关机制
目的:研究新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠腺癌Caco-2细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其相关机制.方法:以Caco-2细胞为研究对象,用6.25,12.5 mg·L-1新疆阿魏乙酸乙酯提取物和顺铂分别作用于处于对数生长期的人结肠腺癌Caco-2细胞,并设空白组,用划痕愈合法观察0～48 h各组Caco-2细胞迁移情况,用transwell小室法计数72 h各组Caco-2细胞穿过基质膜个数,并计算出每个时间段Caco-2细胞迁移率和侵袭抑制率.采用荧光实时定量PCR法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组Caco-2细胞中磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine,Akt),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalina target of rapamgcin,mTOR)基因和蛋白的表达水平.结果:与空白组比较,新疆阿魏乙酸乙酯提取物和顺铂组在24,48 h细胞愈合程度变慢(P＜0.05);72 h时穿过基质膜的细胞个数显著减少(P＜0.01),各用药组PTEN基因表达水平明显升高,Akt,mTOR基因表达水平明显较低(P＜0.05).结论:新疆阿魏乙酸乙酯提取物可以显著抑制人结肠腺癌Caco-2细胞的迁移和侵袭,可能与提高PTEN基因表达水平有关.
关键词： 新疆阿魏 Caco-2细胞 迁移 侵袭 磷酸酶 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 -
新疆阿魏树脂不同分离部位对结肠癌细胞HCT116的抑制作用
目的:分析新疆阿魏树脂不同分离部位对结肠癌细胞HCT116抑制作用的活性,并确定其有效活性部位.方法:通过磺酰罗丹明B比色法(SRB)与流式细胞术以细胞密度1×105个mL,药物质量浓度250,125,62.5,31.25,15.6 mg·L 1(流式细胞术药物浓度为62.5 mg·L-1),检测新疆阿魏树脂不同分离部位(石油醚部位、乙酸乙酯部位,甲醇部位)对结肠癌细胞HCT116药物作用24 h后的增殖抑制与凋亡作用,以IC50和总凋亡率作为指标衡量其各分离部位抑制肿瘤的活性效能.结果:石油醚部位:对结肠癌细胞HCT116增殖抑制IC50 68.7 mg·L-1,总凋亡率为(43.4±1.1)％;乙酸乙酯部位:IC5043.7 mg·L-1,总凋亡率为(56.2±0.9)％;甲醇部位:IC5059.6 mg·L-1,总凋亡率为(46.7±3.1)％.结论:新疆阿魏树脂乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位对结肠癌细胞HCT116细胞毒性作用较强并能促进其大量凋亡,初步确定为新疆阿魏树脂抗肿瘤活性部位.
关键词： 新疆阿魏 结肠癌HCTT116细胞 磺酰罗丹明B比色法 细胞凋亡 抗肿瘤活性 -
新疆阿魏抗肿瘤活性部位筛选
目的 筛选新疆阿魏抗肿瘤的活性部位.方法 采用溶剂法将新疆阿魏分离成不同极性部位,磺酰罗开明B法检测各部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析各部位诱导肿瘤细胞凋亡的作用.结果 新疆阿魏石油醚部位无抗肿瘤活性,新疆阿魏乙酸乙酯部、正丁醇部对人结肠癌细胞HCTll6、人结肠腺癌细胞Caco-2、人肝癌细胞HepG2、小鼠肾癌细胞MFC均有不同程度的增殖抑制和促凋亡作用,甲醇部位活性较弱.结论 乙酸乙酯、正丁醇部位有较强的抗肿瘤活性,可确定为新疆阿魏抗肿瘤活性部位.
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新疆阿魏乙酸乙酯部位质量控制方法研究
目的：建立新疆阿魏乙酸乙酯部位质量控制方法。方法采用高效液相色谱法测定新疆阿魏乙酸乙酯部位的阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C含量。色谱柱为Waters XTerra RPC18（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL/min，检测波长324 nm，柱温30℃，进样量10μL。结果阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C分别在0.05～1.0、0.132～2.64、0.118～2.36 mg/mL范围内线性关系良好，平均回收率分别为99.34%、98.96%、99.24%。新疆阿魏乙酸乙酯部位的阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C含量分别为33.4、76.5、72.3 mg/g。结论该方法操作简单，结果准确，具有较好的重复性和稳定性，可为新疆阿魏乙酸乙酯部位的质量控制提供参考。
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新疆阿魏化学成分研究
目的:研究新疆阿魏的化学成分.方法:95%乙醇提取,有机溶剂萃取,硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定.结果:得到7个化合物,鉴定为fekrynol(1),fekolone(2),farnesiferol B(3),isosamarcandin(4),episamarcandin(5),farnesiferol C(6),伞形酮(7).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.
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新疆阿魏化学成分及药理活性研究进展
新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K.M.Shen)是分布在新疆北部的濒危民族植物药,主要含有倍半萜香豆素、含硫化合物、多糖和芳香族类等多种有效化学成分.目前多采用色谱技术建立指纹图谱实现质量控制.原植物药和特征化合物都具有抑菌、杀虫、抗过敏、抗肿瘤等广泛药理作用.本文主要从资源现状、化学成分、指纹图谱和药理活性等方面对国内外新疆阿魏的研究状况进行综述,为其系统化研究、有效质量控制和高效开发利用提供参考.
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新疆阿魏资源的保护及其开发
新疆阿魏是国内仅分布在新疆的一种重要珍稀药用植物资源,由于缺乏管理和采收不当,已经到了濒临绝灭的地步,应采取有效措施加强管理,建立保护区.
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新疆阿魏种子化学成分的研究
目的 研究新疆阿魏Ferula sinkiangensis种子的化学成分.方法 利用不同的色谱分离纯化手段,根据化合物的理化常数和光谱数据进行结构鉴定.结果 从新疆阿魏种子90％乙醇提取液中分离得到32个化合物,分别鉴定为丁二酸(1)、两型曲霉醌A(2)、β-谷甾醇(3)、豆甾醇-3-O-葡萄糖苷(4)、1-(3-乙基苯基)-1,2-乙二醇(5)、松脂素(6)、(7,8-cis-8,8’-trans)-2’,4’-二羟基-3,5-二甲氧基-落叶松脂素(7)、开环异落叶松脂醇(8)、正二十六醇(9)、异槲皮素苷(10)、槲皮素(11)、阿魏酸(12)、豆甾醇(13)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(14)、(R)-2’-hydroxy-N-[(2S,3S,4R)-1,3,4-trihydroxyhexacosan-2-yl]nonadanamide (15)、macrathoinF (16)、1,5-二-O-咖啡酰奎尼酸(17)、牛蒡苷(18)、parvifoliolsG(19)、5-羟甲基糠醛(20)、胡萝卜苷(21)、香草酸(22)、蔗糖(23)、芦丁(24)、neoarctin A(25)、绿原酸甲酯(26)、5-O-咖啡酰基奎宁酸(27)、尿嘧啶核苷(28)、次黄嘌呤核苷(29)、7-羟基香豆素(30)、绿原酸(31)、咖啡酸(32).结论 化合物2、5～11、14～20、22、24～29、31、32为首次从该属植物中分离得到.
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新疆阿魏树脂的化学成分研究
目的 研究新疆阿魏树脂的化学成分.方法 利用硅胶、ODS柱色谱、HPLC色谱及反复重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果 分离得到6个化合物,分别鉴定为7-羟基香豆素(1)、香草醛(2)、松柏醛(3)、3-(3,4-二甲氧基苯基)-2-丙烯醛(4)、阿魏酸(5)和β-谷甾醇(6).结论 化合物3、4均为首次从该属植物中分离得到,化合物2为首次从新疆阿魏中分离得到.
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新疆阿魏干预神经源性疼痛模型大鼠痛阈及脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的表达
背景：新疆阿魏主要由挥发油、树脂和树胶组成，具有抗炎、抗过敏及解痉镇痛作用。但其镇痛作用机制尚不明确，目的：观察新疆阿魏对神经病理性疼痛大鼠热痛及机械痛及脊髓 Fos 蛋白和星形胶质细胞表达的影响。方法：成年SD大鼠80只制备慢性坐骨神经松结扎大鼠模型后随机分为5组：分别灌胃低、中、高剂量阿魏0.075，0.15，0.30 g/kg，赛来昔布和生理盐水。各组分别在术前1 d及术后1，2，3，5，7，14 d进行热痛及机械痛测定，并取S4-5脊髓组织，并采用免疫组织化学染色的方法观察脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞表达变化。结果与结论：给药后1，5 d，低、中、高剂量阿魏组均高于生理盐水组(P <0.01)，中剂量阿魏组热痛阈值下降幅度小(P <0.05)，高剂量阿魏组机械痛阈值减小幅度小(P <0.01)。术后各时间点低、中、高剂量阿魏组及赛来昔布组在的Fos蛋白阳性细胞数均小于生理盐水组(P <0.05)，中、高剂量阿魏组各时间点Fos蛋白阳性细胞数均高于赛来昔布组(P <0.05)。高剂量阿魏组及赛来昔布组在术后各个时间点的脊髓组织星形胶质细胞阳性细胞数均明显少于生理盐水组(P <0.05)；中、高剂量阿魏组与赛来昔布组各时间点的星形胶质细胞阳性细胞数比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果证实，新疆阿魏可以有效缓解大鼠神经病理性疼痛，其机制可能与脊髓Fos蛋白和星形胶质细胞的激活有关。
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土壤因子对新疆阿魏挥发油成分的初步研究
目的:研究中药新疆阿魏挥发油成分与其土壤因子的关系.方法:在4个不同样地采集阿魏树脂和土壤样品,通过资料查阅和实地调查,考察产地的生态环境.用气相色谱和GC-MS联用方法分析了药材中的化学成分.结果:4个样地挥发油含量均大于10%,符合国家药典规定.挥发油中成分和相对含量也近乎一致.结论:新疆伊宁县白石墩是新疆阿魏的道地产区.其生长地土壤中有机质(17.4~22.6g/kg)、氮(30.3~46.7mg/kg)、磷(5.5~8.5mg/kg)、钾(182.773mg/kg)养分含量较少,pH值(7.91-8.16)偏碱性,总盐含量(1.0~2.6g/kg)相对较高.
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新疆阿魏及其不同炮制品挥发油成分GC-MS分析
目的 研究新疆阿魏炮制后挥发油成分的变化,探讨炮制对挥发油成分的影响.方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,通过GC-MS气质联用分析挥发油成分.结果 从新疆阿魏原药材挥发油中鉴别出35种成分,从民间习用炮制品、清炒炮制品、醋炙炮制品、水煮炮制品分别鉴别出34种、34种、32种、35种成分,新疆阿魏经炮制后挥发油的得率显著降低,挥发油中1,2-二硫戊烷量明显增加,2-乙硫基丁烷量明显减少.结论 炮制对新疆阿魏挥发油成分的组成和各成分的量都有较大的影响.
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新疆阿魏挥发油提取工艺的比较研究
阿魏为伞形科植物新疆阿魏Ferula sinkiangensis K.M.Shen或阜康阿魏Ferula fukanensis K.H.Shen的树脂.阿魏苦、辛、温.归脾、胃经.具有消积、散痞、杀虫的功效[1].维吾尔医生还用于治疗白癜风和胃病.李晓瑾等口[2]将新疆阿魏的化学成分初步分离为挥发油,糖类、树胶,阿魏酸等,其中挥发油12.29%、糖类35%、树胶45.5%;
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新疆阿魏水溶性抗溃疡有效成分的提取纯化工艺的研究
目的:优选出新疆阿魏水溶性抗溃疡有效成分的提取工艺及纯化工艺.方法:以新疆阿魏水溶性提取物的出膏率和阿魏酸含量的综合评分为评价指标,采用均匀设计优选出新疆阿魏水溶性抗消化性溃疡有效成分的提取工艺和纯化工艺,并采用药效学试验对两种纯化方法进行比较、优选.结果:新疆阿魏水溶性抗溃疡有效成分的优化提取条件为:加水量为药材量8倍,提取2次,每次提取2.5 h.高速离心纯化工艺条件为:药液浓度比1:3,离心时间35 min,离心转速4 000 r/min.ZTCl+1-Ⅱ天然澄清剂纯化工艺条件为:药液浓度比为1:22,ZTC用量为22%,澄清时间为1 h.结论:验证试验表明优化提取工艺稳定、合理、可行.药效试验结果表明提取液经过离心纯化后药效未出现显著降低,符合纯化要求,故确定采用高速离心法对药液进行纯化.
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新疆阿魏中阿魏酸在Caco-2细胞模型的吸和收转运研究
阿魏为伞形科植物,是新疆特色资源植物.本课题组前期研究表明,新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠癌细胞HCT116具有增殖抑制作用[1].Caco-2细胞模型是研究药物吸收、转运和代谢常用的经典体外模型[2],故本研究运用Caco-2细胞模型研究新疆阿魏乙酸乙酯提取物的吸收转运特性,为临床应用提供实验依据.
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含新疆阿魏水提物及挥发油微囊的胃内漂浮片处方优选
以阿魏酸的体外释放为指标,采用正交设计与单因素试验相结合的方法优选胃内漂浮片处方组成.优化处方中HPMC K4M用量为70％、起泡剂[碳酸氢钠-枸橼酸(1∶0.76)混合物]用量为20％.所得漂浮片在0.1 mol/L盐酸中的平均起漂时间为(8.3±2.2)s,持续漂浮时间为(22.3±2.8)h.零级、Higuchi和Peppas方程都可较好地拟合本品中阿魏酸的释放行为,且其中阿魏酸的释放主要受骨架溶蚀机制控制.
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新疆阿魏不同物候期阿魏酸含量动态变化研究
目的 建立新疆阿魏中阿魏酸的含量测定方法,并对不同物候期新疆阿魏药材进行含量测定.方法 采用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量,色谱柱为Symmetry Shield RP18(3.9 mm×150mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸(20∶80),检测波长:323 nm,流速:1mL·min-1,柱温:30℃.结果 阿魏酸线性范围为1.92～11.5 μg·mL-1(r=0.9998),平均回收率为99.6％,RSD=1.50％(n=9).不同物候期新疆阿魏中阿魏酸的含量在0.063～0.236 mg·g-1,尤以两年生新疆阿魏中阿魏酸的含量较高.结论 本方法专属性强,重现性好,结果准确可靠,可作为阿魏的质量控制方法.
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4个不同居群新疆阿魏中挥发性成分分析
目的 通过对4个不同居群新疆阿魏树脂挥发性化学成分的比较研究,为新疆阿魏遗传多样性的研究提供科学依据.方法 通过水蒸汽蒸馏法提取新疆阿魏树脂挥发油,采用GC-MS技术分析、鉴定其挥发性成分,以GC-MS分析的主要化学成分及其相对含量为检测指标,对野生生长在同一生境下的4个不同居群新疆阿魏树脂成分进行了比较分析.结果 从新疆阿魏各居群挥发油中分出了27个色谱峰,鉴定了22个化合物,4个不同居群新疆阿魏挥发油GC-MS分析均含有相同的主要活性成分,其相对含量差异均没有统计学意义,其中3,4-二甲基噻吩、α-萜品烯、水芹烯、3-蒈烯、2,3,4-三甲基噻吩、3,6-二甲基-1,4-二噻烷-2,5-二酮、3-硫代丙酸甲酯、1,1-二甲硫基乙烷、1,1-二甲氧基丙烷、α-石竹烯和绿叶烯为首次在新疆阿魏药材中检测到.结论 综合分析新疆阿魏药材挥发性成分化学信息,新疆阿魏4个居群GC-MS分析主要化学成分一致,其相对含量差异均没有统计学意义,为新疆阿魏种质资源、道地性与品质评价的重要依据.
