首页 > 文献资料
-
硝基酪氨酸在糖尿病大鼠胰岛中的表达及普罗布考的干预作用
目的 观察硝基酪氨酸(NT)在糖尿病大鼠胰岛中的表达,以及普罗布考的干预对其表达和对胰岛β细胞的影响. 方法 大鼠高脂高糖饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg复制2型糖尿病大鼠模型,普罗布考组(PB组)每天同时灌胃普罗布考500mg/kg,10周后测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),计算胰岛素敏感指数(ISI),用免疫组化的方法观察NT在胰岛中的表达. 结果 糖尿病组(DM组)及PB组大鼠的FPG、TG、TC及MDA水平较正常对照组(NC组)明显增加(P＜0.01),NT的平均光密度也明显高于NC组(P＜0.01),但PB组上述指标的测定显著低于DM组(P＜0.01);DM组和PB组大鼠的SOD水平、ISI明显低于NC组(P＜0.01),PB组这些指标的测定显著高于DM组(P＜0.01);NC组和PB组的FIns比较差异没有统计学意义,但都明显高于DM组(P＜0.01). 结论 NT在胰岛的表达增强,普罗布考作为抗氧化剂,对于STZ引起的或糖尿病引起的氧化应激,均在一定程度上减轻其损伤,保护了胰岛功能.
-
钙非依赖型磷脂酶A2对过氧化氢诱导胰岛微血管内皮细胞凋亡的影响
目的 用过氧化氢(H2O2)诱导大鼠胰岛微血管内皮细胞(IMECs)凋亡,观察钙非依赖型磷脂酶A2(IPLA2)对其凋亡的影响.方法 siRNA技术抑制IMECs iPLA2表达,DNA ladder法检测H2O2诱导后的DNA片段,Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率,DIOC6(3)染色检测细胞线粒体膜电位.结果 (1)siRNA-iPLA2可明显抑制IMECs内iPLA2 mRNA的表达.(2)H2O2诱导后细胞DNA片段化程度随诱导时间的增加而增多,抑制iPLA2表达后细胞的梯状条带明显增亮.(3)干扰组和未干扰组、干扰阴性对照组相比凋亡率明显升高(P均<0.01).(4)与未干扰组比较,干扰组细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.01).结论 抑制iPLA2表达可促进H2O2诱导的IMECs凋亡.
-
GLP-1对大鼠胰岛细胞增殖及凋亡的影响
目的 观察胰升糖素样肽1(GLP-1)对大鼠胰岛细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 (1)GLP-1与大鼠胰岛细胞瘤细胞株RINm5f共育,观察其增殖情况;(2)检测GLP-1对IL-1β诱导的RINm5f细胞凋亡的保护作用;(3)GLP-1与原代培养大鼠胰岛细胞共育1、3、5天后,检测BAX及Bcl-2基因的表达.结果 (1)随着GLP-1浓度增高及刺激时间延长,RINm5f细胞A值呈剂量及时间依赖性增加;(2)GLP-1组与对照组相比RINm5f细胞凋亡率显著下降(P＜0.05);(3)与GLP-1共育后,大鼠胰岛BAX基因的表达量无明显变化,对照组BAX基因的表达逐渐增加(P＜0.05);而Bcl-2基因的表达量随着与GLP-1共育时间的延长呈时间依赖性增加.结论 GLP-1对大鼠胰岛细胞增殖有明显促进作用;同时对胰岛细胞的凋亡有保护作用.
-
Ghrelin对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的影响
目的 观察Ghrelin对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的影响.方法 将分离纯化的大鼠胰岛置于含不同浓度葡萄糖和Ghrelin的孵育液中孵育1h,应用放射免疫分析法测定孵育液中胰岛素浓度.结果 葡萄糖浓度＞5.6 mmol/L时,浓度≥10 nmol/L的Ghrelin对胰岛素分泌有明显抑制作用(P<0.05).结论 高浓度Ghrelin可显著抑制高浓度葡萄糖诱导的胰岛素分泌.
-
成人胰岛分离纯化的初步研究
目的 初步研究成人胰岛的分离、纯化方法,为司种异体胰岛移植治疗1型糖尿病进行前期准备.方法 采用改良的Ricordi技术消化成人尸体胰腺,然后用连续性密度梯度离心法纯化胰岛.胰岛收获量以国际标准的胰岛当量(islet equivalent,IEQ)表示.结果 完成10例成人胰岛分离和纯化,其中5例完成了胰岛当量的统计,胰岛收获量为6367～108725IEQ/胰腺,平均为47678.8IEQ/胰腺,平均每克组织收获2055IEQ.结论 采用改进的人胰岛分离方法,可以获得较大产量的有活性的胰岛.
-
胰腺干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞的实验研究
目的 研究大鼠胰腺组织干细胞向胰岛内分泌细胞分化及其在实验性糖尿病治疗中的应用.方法 应用Nestin结合的免疫磁珠从大鼠胰腺导管细胞中分离和纯化干细胞,经体外扩增及诱导分化形成胰岛样结构,进行体外和体内的功能评价.结果 大鼠胰腺干细胞经体外扩增和诱导分化后,表达胰岛素mRNA,并形成胰岛样结构.免疫荧光染色显示:胰岛结构内含有大量胰岛素阳性细胞和少量胰高糖素阳性细胞.在葡萄糖刺激下干细胞分化出胰岛,有胰岛素释放,其释放量约为正常胰岛的39.4%.将干细胞分化来的胰岛移植到免疫缺陷的糖尿病小鼠后可以明显改善糖代谢的紊乱.结论 胰腺组织干细胞可以在体外诱导分化成为具有治疗糖尿病功能的胰岛细胞.
-
纳格列奈-口服葡萄糖耐量试验对检测正常人胰岛β细胞功能的评价
目的 优化纳格列奈-口服葡萄糖耐量试验(NG-OGTT)评估胰岛β细胞功能的方法.方法 对24例健康志愿者进行NG-OGTT,测定各设定时间点(-15、0、10、20、30、45、60及120 min)的胰岛素和血糖水平.胰岛素测定采用放射免疫法.观察NG-OGTT中胰岛素释放的峰值,胰岛素释放倍增值(MVI),各设定时间点的胰岛素释放曲线下面积(AUCIns)、胰岛素释放速率(IRV)、胰岛素净增值与血糖净增值的比值(△I/△G),筛选出NG-OGTT中能反映胰岛β细胞分泌与储备功能的时间点.结果 (1) 正常人在NG-OGTT中反映胰岛β细胞早期相分泌功能的胰岛素释放峰值(90.50 mU/L)与IRV(2.75 mU·L-1·min-1)的达峰时间均在糖负荷后30 min;(2)其△I/△G的达峰时间虽在糖负荷后45 min(56 mU/mmol),但45 min时该值的升高主要由血糖的快速降低引起;(3) 反映β细胞储备功能的MVI(18.8)的达峰时间亦在糖负荷后30 min;(4) 其AUCIns在60 min时与120 min具有显著性相关(r=0.901,P=0.000).结论 糖负荷后采用-15、0、30和60 min 4个采血点,能反映β细胞早期相分泌功能及储备功能,方法简便.
-
Ibrolipim对糖尿病小型猪胰岛β细胞的保护作用
目的 通过观察Ibrolipim对贵州小型猪(小型猪)的胰岛结构和功能的影响,探讨其调节糖代谢的作用机制.方法 小型猪15头,随机分为3组.分别喂普通猪饲料、高脂高糖饲料(HFSD)和HFSD加1%Ibrolipim.每月末测定血糖(PG)和胰岛素(Ins)浓度.第6个月末作OGTT和胰岛素敏感性试验.第8个月末处死动物,取胰腺标本,作胰岛素含量测定.用HE染色、免疫组化和透射电镜观察β细胞结构的变化.结果 HFSD组小型猪PG和Ins水平增高,以及加重胰岛素抵抗(IR)和β细胞损害.HFSD+1%Ibrolipim组FPG显著降低,PG清除率以及胰岛素分泌急性相都明显改善,β细胞的结构和功能受到保护.结论 Ibrolipim有降低PG,减轻IR和保护β细胞的作用.
关键词： 葡萄糖 Ibrolipim糖尿病 胰岛 猪 雏型 -
胰岛纤维化与2型糖尿病
病理研究表明,2型糖尿病(T2DM)病人和动物的胰岛普遍存在纤维化现象.胰岛淀粉样蛋白沉积已成为T2DM胰岛公认的病理特征之一.
-
成体干细胞来源胰岛素分泌细胞的研究概况
通过胰腺或胰岛移植补充体内的β细胞,是糖尿病患者获得稳定血糖水平的佳办法.但胰腺或胰岛移植面临供体缺乏和免疫排斥两大难题.干细胞可通过体外扩增和诱导分化获得充足的胰岛细胞,为移植提供丰富的细胞来源,并可通过基因修饰减轻或抑制排斥反应,因此干细胞成为糖尿病治疗的研究热点.
-
Ghrelin在离体大鼠胰岛中抑制胰岛素分泌和上调Kir6.2表达
目的 明确ghrelin在离体大鼠胰岛中对胰岛素分泌和内向整流钾通道(Kir6.2)表达的影响,并讨论两者的关系. 方法 离体大鼠胰岛以高浓度葡萄糖及不同浓度ghrelin和(或)其受体拮抗剂[D-lys3]-GHRP-6孵育1h,采用放免法测定上清液的胰岛素,采用RT-PCR检测Kir6.2、磺酰脲受体1(SUR-1)、解偶联蛋白2(UCP-2)、葡萄糖转运子2(GluT-2)、胰十二指肠同源盒 1(PDX-1)等基因的表达.结果 10-8～10-6 mol/L ghrelin呈剂量依赖性抑制离体大鼠胰岛高浓度葡萄糖刺激的胰岛素释放,且剂量依赖性增加Kir6.2 mRNA表达,但对SUR-1、UCP-2、GluT-2及PDX-1 mRNA表达则无显著影响.[D-lys3]-GHRP-6可消除ghrelin对Kir6.2 mRNA表达的上调作用. 结论 在离体大鼠胰岛中,ghrelin通过作用于其受体,促进ATP敏感性钾通道组成成分Kir6.2的表达,改变钾通道功能状态.这可能是ghrelin抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌的机制之一.
-
特发性1型糖尿病的诊断及鉴别的临床意义
对于特发性1型糖尿病的诊断,目前尚无统一标准,且有较大争议.依据WHO分型建议并结合我们的临床研究结果,现初步提出特发性1型糖尿病的诊断依据供参考:(1)以自发糖尿病酮症或酮症酸中毒急性起病;(2)无胰岛自身免疫的证据;(3)排除已知病因的糖尿病及妊娠糖尿病.
-
大挑战 新起点
2011年在中国糖尿病防治历史上是值得浓墨重彩大书的一年.5月在"2011北大糖尿病论坛"上,来自国内外的专家围绕胰岛素问世90周年,对90年来糖尿病治疗的演变和进程,进行了回顾和讨论.7月由中华医学会糖尿病学分会承办的第3届亚洲糖尿病学术会议暨2011中国医师协会内分泌代谢科医师分会合并在京举行,在这次会议上隆重举行了中华医学会糖尿病学分会成立20周年(1991-2011)庆典活动.我国糖尿病学界的老前辈,糖尿病学分会历届委员,以及我国港、澳、台和国际糖尿病学术界的同道参加了这一盛会,活动对糖尿病学分会20年来的中国糖尿病防治工作进行了回顾和展望.
-
磁共振成像技术在糖尿病中的应用
磁共振成像(MRI)是一项能够提供高分辨生理和解剖信息的技术,该技术不使用放射性物质,对人体危害较小,解决了糖尿病在诊断和治疗中所遇到的难题(如胰岛细胞体积小、分散,活体难检测等),因此国内外专家利用MR1活体成像技术对糖尿病的早期诊断、分期和治疗进行了系列研究.
-
第62届美国糖尿病协会学术年会报道
本届ADA学术年会于2002年6月22日～26日在美国旧金山举行,参会者达万人.大会共收集论文2100余篇,内容覆盖了糖尿病(DM)基础与临床,涉及代谢、胰岛生物学、信号传导、流行病学、遗传学与免疫学、DM并发症等众多方面.现将会议论文中的主要内容综合报道如下.
-
L-谷氨酰胺对克隆的胰岛β细胞株INS-1E细胞和小鼠胰岛的急性刺激作用
目的 探讨 L-谷氨酰胺对INS-1E细胞和小鼠胰岛分泌胰岛素的作用.方法 INS-1E细胞经传代培养2 d后,在Krebs-Ringer缓冲液中37℃培养箱预培养30 min,再用含有不同浓度葡萄糖和不同浓度L-谷氨酰胺的改良Krebs-Ringer 缓冲液培养60 min,然后留取上清液进行胰岛素测定.雌性NMRI小鼠,6～10周龄,苯巴比妥腹腔麻醉,应用胶原酶技术消化胰腺分离胰岛,置于RPMll640 培养皿中在37℃培养箱(5%CO2,95%空气)过夜培养.次日在 Krebs-Ringer缓冲液中37℃水浴培养箱预培养30 min,然后分别把单个胰岛小心放入100μl含有不同浓度葡萄糖和不同浓度L-谷氨酰胺的改良Krebs-Ringer缓冲液37℃水浴培养箱培养60min,然后留取50μl上清液进行胰岛素测定.结果 L-谷氨酰胺在0.1～5mmol/L范围不增加葡萄糖刺激的INS-IE细胞的胰岛素分泌,仅10～20mmol/L的L.谷氨酰胺促进葡萄糖诱导的胰岛素分泌.L-谷氨酰胺在0.1～10mmol/L范围不促进葡萄糖诱导的小鼠胰岛的胰岛素分泌,仅20mmol/L的L-谷氨酰胺促进葡萄糖诱导的胰岛素分泌.结论 大剂量L-谷氨酰胺能增加葡萄糖诱导的INS-1E细胞和小鼠胰岛分泌胰岛素.
-
GLP-1可拮抗Ghrelin对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的抑制
胰岛素是机体调节血糖水平的主要激素.Ghrelin主要由胃分泌,可增进食欲,促进能量正平衡,调节血糖水平,诸多研究证明,Ghrelin可明显抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌[1-3].胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)由肠道分泌,可以抑制胃肠动力,减慢胃排空速率,减少胰岛β细胞凋亡,促进胰岛β细胞的增殖和分化,刺激胰岛素分泌[4-6].本实验采用体外培养的方法,观察GLP-1及Ghrelin对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的影响.
-
老年人群空腹血糖水平与胰岛B细胞功能关系的研究
目的 探讨老年人群空腹血糖水平与胰岛B细胞功能的关系.方法 276例入选者根据空腹血糖(FBG)水平分为:健康对照组(A组):FBG＜(5.6 mmol/L B组:5.6～6.9 mmol/L;C组:FBG 7.0～7.9 retool/L;D组:FBG 8.0～9.9 mmol/L;E组:FBG 10.0～11.9 mmol/L;F组:FBG12.0～14.9;G组:FBG≥15.0 mmol/L.均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)或馒头餐一胰岛素释放试验,并测定空腹胰岛素原.结果 (1)胰岛素曲线下面积(INSAUC)和空腹胰岛素,与A组比较,B组和C组明显增高(P＜0.05),C组至G组逐渐减低;(2)Homa-B细胞功能指数(HBCI)和糖负荷后30 rain净增胰岛素/净增葡萄糖比值(AI30/AG30),B组至G组呈逐渐降低趋势(P＜0.05或P＜0.01);(3)空腹胰岛素原和胰岛素原/胰岛素比值,B组至G组呈逐渐增高趋势(P＜0.05或P0.01).结论空腹血糖是简单而实用反映老年人群胰岛B细胞功能的指标,空腹血糖越高,胰岛B细胞功能越差.
-
限制能量摄入对大鼠胰岛细胞衰老及胰岛素表达的影响
目的 探讨限制能量摄人对大鼠胰岛细胞衰老及胰岛素表达的影响.方法 18月龄SD大鼠经过限制能量摄入(给予正常饮食量的60%)6个月,建立限制能量摄入动物模型.取限制能量摄人组(实验组)及对照组胰腺,行β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色并检测胰岛内p16的表达,以了解胰岛细胞衰老状态;同时检测胰岛B细胞胰岛素的表达.结果 实验组与对照组比较,胰岛内p16表达减少,分别为(0.19130±0.02852)个和(0.24526±0.03191)/p,差异有统计学意义(P＜0.01);胰岛内β-Gal染色阳性率分别为84%和100%(P＜0.01)、着色面积1.672和2.118(P＜0.05)、着色程度1.725和2.412(P＜0.05);胰岛素表达增加(201.7±35.3和187.8±26.0),差异有统计学意义(P＜0.05)结论限制能量摄入可延缓胰岛B细胞衰老,改善胰岛的分泌功能.
-
血管紧张素Ⅱ受体阻断剂治疗对db/db糖尿病小鼠胰岛的作用
目的 探讨长期坎地沙坦治疗能否延缓糖尿病状态下胰岛功能的进行性衰竭和高血糖的恶化.方法 将8周龄的db/db小鼠随机分为4组,分别给予坎地沙坦酯1、10 mg/kg体重、马尼地平10 mg/kg体重和安慰剂灌胃治疗6周,同窝出生的8周龄db/m小鼠作为非糖尿病对照亦给予安慰剂治疗.投药6周后行糖耐量试验后取胰腺,进行胰岛素、氧化应激损伤标志8-OHdG的免疫组化检测以及电镜观察胰岛β细胞的超微结构紊乱情况.结果 长期坎地沙坦治疗轻微改善糖耐量,减轻了胰岛含量随糖尿病进展的丧失.坎地沙坦治疗显著减少氧化应激产物8-OHdG在胰岛中的水平,电镜观察发现坎地沙坦治疗显著增加β细胞内胰岛素颗粒的形成,明显减轻db/db糖尿病小鼠β细胞内质网和高尔基体的过度增殖以及线粒体肿胀,抗氧化作用和减轻线粒体肿胀效应均呈现剂量依赖性,而且所有保护效应均独立于血压的下降程度.结论 在糖尿病起病后,坎地沙坦治疗并不能逆转糖尿病,但是能轻微改善糖耐量,并通过减轻氧化应激损伤、胰岛β细胞超微结构紊乱,从而保护胰岛β细胞功能,延缓β细胞功能衰竭,这些保护作用均独立于降压之外.
关键词： 糖尿病 非胰岛素依赖型 胰岛 肾素-血管紧张素系统 血管紧张素受体阻断剂
