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AKT1、p65和MMP9在乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨AKT1、p65、MMP9在乳腺癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化方法检测AKT1、p65和MMP9在74例经手术切除的乳腺癌组织中的表达.分析癌组织AKT1、p65和MMP9的表达与患者临床病理参数的关系.结果 在74例乳腺癌组织中AKT1的高表达率为73％(54/74),p65的高表达率为51％(38/74),MMP9的高表达率为29％(22/74).三者的表达均彼此相关且三者的表达均与TNM分期和组织学分级明显相关,差异有统计学意义(P<0.05),而与患者年龄、淋巴结转移等均无关;差异无统计学意义(P>0.05).结论 AKT1、p65、MMP9在乳腺癌浸润进展过程中发挥重要作用,以AKT1、p65、MMP9为靶蛋白抑制乳腺癌的恶性进展可能具有相对重要的临床病理意义.
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肌肽减轻H2O2诱导的N2a细胞损伤
目的 探究肌肽对H2O2诱导的N2a细胞损伤的保护作用及其机制.方法 将N2a细胞分为对照组、损伤组(给予H2O2)和肌肽保护组(预先加入肌肽).用相差显微镜观察了细胞形态,用免疫荧光染色和免疫印迹实验检测细胞AKT1和FAS-L的蛋白表达.结果 肌肽显著增加了N2a细胞增殖能力(P＜0.05);与对照组比较,H2O2损伤组细胞形态发生明显改变,细胞皱缩,胞膜变厚并出现发泡现象;而肌肽保护组细胞形态较损伤组明显改善;免疫荧光染色和免疫印迹实验显示,损伤组AKT1的表达显著低于对照组,FAS-L的表达显著高于对照组.而肌肽保护组AKT1的表达显著高于对照组,FAS-L的表达显著低于对照组(P＜0.05).结论 肌肽能够减轻N2a细胞对H2O2诱导的细胞损伤.
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乳腺癌中Akt1和girdin的表达及临床病理意义
目的 探讨Akt1和girdin在乳腺癌组织中表达的意义.方法 回顾性分析88例乳腺癌临床病理资料,将其与10例癌旁组织制成组织芯片,应用免疫组化EnVision两步法检测Akt1和girdin在乳腺癌中的表达.结果 88例乳腺癌中Akt1阳性率为77.3％(68/88),10例癌旁组织中Akt1的阳性率为30％,二者差异显著(P＜0.05).乳腺癌中Akt1阳性与淋巴结转移、TNM分期密切相关(p＜0.05).88例乳腺癌中girdin阳性率为80.7％(71/88),10例癌旁组织中girdin阳性率为40％,二者差异显著(P＜0.05).乳腺癌中girdin表达与淋巴结转移密切相关(P＜0.05).此外,88例乳腺癌中Akt1和girdin阳性呈正相关(r=0.308,P＜0.05).结论 乳腺癌中Akt1和girdin的表达与临床病理特征有一定联系,特别是两者阳性与淋巴结转移有关,因此可以作为影响乳腺癌预后的重要生物学标记物.
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microRNA-185下调AKT1信号通路对淋巴母细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响及相关的分子机制的研究
目的 探讨miR-185对淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)细胞增殖和致肿瘤性的影响及相关的分子机制.方法 qPCR检测人T-LBL组织和正常的胸腺组织中miR-185表达水平.miR-185模拟物及NC-miRNA转染Jurkat细胞,MTT法测定细胞增殖情况,qPCR和MTT法分别检测miR-185表达水平和细胞增殖情况,细胞流失术检测细胞凋亡.生物信息学软件TargetScan预测miR-185的靶作用位点,并通过qPCR、Western blot和荧光素酶活性实验证实miR-185的靶作用位点.慢病毒介导的miR-185过表达Jurkat细胞分别通过皮下注射的方式注射入裸鼠左右侧,皮下注射后4 d、8 d、12 d、16 d、20 d、24 d、28 d、32 d分别测量肿瘤体积,以探讨miR-185对体内肿瘤生长的影响.结果 与人正常胸腺组织相比,T-LBL组织中miR-185表达显著下调(P<0.05);MTT检测细胞增殖结果表明,与NC-miRNA转染组相比,miR-185转染组Jurkat细胞增殖速率显著下降(P<0.05),且转染miR-185后,Jurkat细胞凋亡比例显著升高(P<0.05);TargetScan生物学软件预测表明AKT1为miR-185潜在的靶基因,实验结果进一步证实AKT1的3'非翻译序列(3'UTR)是miR-185的直接靶点;裸鼠移植瘤试验结果表明,miR-185能抑制体内肿瘤生长.结论 miR-185通过靶向作用于AKT1基因抑制Jurkat细胞增殖,其可能为T-LBL的临床治疗提供新的靶标.
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PP242对Ph+急性淋巴细胞白血病细胞增殖的抑制作用及对AKT1-Ser473磷酸化的影响
目的 观察ATP竞争性哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)抑制剂PP242对体外培养的Ph染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖和AKT1473位丝氨酸磷酸化的影响.方法 对Ph+ ALL细胞株SUP-B15进行培养及传代,Cell Counting Kit-8比色法检测PP242(100 nM,250 nM,500 nM,750 nM,1 000 nM)处理细胞株SUP-B15后12 h、24 h、48 h细胞生长情况；应用免疫印迹法及实时定量RT-PCR检测使用PP242(100 nM,250nM,500 nM)培养细胞48 h后AKT1及磷酸化水平情况.结果 100 nM、250 nM、500 nM、750 nM、1 000 nM PP242对Ph+ ALL细胞株SUP-B15作用12 h、24h及48 h后,其抑制率:12 h组:10.17％,13.25％,20.13％,22.54％,27.61％；24h组:11.33％,20.54％,36.18％,41.66％,47.27％;48 h组:23.13％,39.24％,55.72％,61.88％,66.93％,与对照组相比差异均有统计学意义(P ＜0.05)；100 nM、250 nM、500 nM PP242处理SUP-B15细胞48 h后,免疫印迹法检测结果显示AKT1蛋白的表达水平无明显变化,而473位丝氨酸(Ser473)磷酸化水平逐渐降低；实时定量RT-PCR检测结果显示,AKT1的mRNA表达无明显变化,绝对定量mRNA结果分别为:0.673±0.124,0.751±0.133,0.689±0.154,与正常对照组(0.679±0.167)相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ATP竞争性mTORC2抑制剂PP242对体外培养的Ph+ ALL细胞株SUP-B15细胞的增殖存在抑制作用,其作用强度呈浓度和时间依赖性；SUP-B15细胞中存在AKT1的表达；PP242在抑制Ph+ ALL细胞株SUP-B15细胞的增殖过程中可下调AKT1 Ser473磷酸化水平.
关键词： Ph+急性淋巴细胞白血病 mTORC2 PP242 AKT1 -
Akt1在高血压心肌纤维化中的作用及其机制
目的 观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响.方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能；处死并取其心脏进行组织切片,行Masson染色观察胶原沉积；流式细胞学方法检测心脏中巨噬细胞浸润；免疫组织化学染色检测炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达；实时定量PCR检测Akt1及α-SMA mRNA水平；Western blot检测α-SMA蛋白表达以及Akt1蛋白表达和激活.体外分离原代骨髓巨噬细胞进行Akt1 siRNA及Control siRNA干扰后与乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)共培养,观察促纤维化因子mRNA和蛋白的表达.结果 与对照组比较,高血压组在AngⅡ灌注7d时血压升高[(147.1±1.0)比(104.6±2.1)mm Hg,P＜0.01],射血分数和短轴缩短率均升高(P＜0.05)；胶原沉积明显增加[(2.06±0.18)％比(0.35±0.04)％,P＜0.01]；心脏组织中巨噬细胞浸润增加[(1.75±0.15)％比(0.44±o.07)％,P＜0.01],促炎因子(iNOS、IL-1β、TNF-α)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)表达升高(均P＜0.01).高血压组Akt1及α-SMA mRNA表达上调(P＜0.01),Akt1磷酸化水平上调(P＜0.01),同时α-SMA蛋白表达明显上调(P＜0.05).体外实验,与单独CFs组相比,CFs与转染Control siRNA巨噬细胞共培养组促纤维化因子(α-SMA、TGF-β、Ⅰ型胶原)mRNA表达升高(P＜0.05或P＜0.01),α-SMA蛋白表达明显上调(P＜0.01),而CFs与转染Akt1 siRNA巨噬细胞共培养组上述促纤维化因子mRNA表达降低(P＜0.05或P＜0.01),α-SMA蛋白表达下降(P＜0.05).结论 在高血压心脏纤维化疾病早期,心脏组织Akt1活性增加,可能通过促进炎症反应,介导巨噬细胞作用下的成纤维细胞转分化,进而促进高血压导致的心肌纤维化.
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大鼠腓肠肌内蛋白激酶B各亚型表达的年龄差异
目的 研究大鼠腓肠肌内蛋白激酶B(Akt/PKB)各亚型伴随年龄变化的表达差异. 方法 用反转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(western blotting)检测老年组(30月龄)和青年组(6月龄)大鼠腓肠肌内Akt各亚型mRNA和蛋白表达,并统计分析比较. 结果 (1)30月龄组大鼠腓肠肌内Akt1与Akt2的mRNA水平均高于6月龄组(t=7.124,P=0.000;t=2.598,P=0.021),Akt3差异无显著性(t=0.460,P=0.653).(2)两组间Akt1蛋白表达水平无显著变化(t=0.469,P=0 646),30月龄组Akt1的Thr308磷酸化水平低于6月龄组的表达,有显著差异(t=-9.861,P=0.000);30月龄组Akt2的蛋白水平高于6月龄组的表达,有显著差异(t=7.522,P=0.000);Akt3蛋白表达在两组间无差异(t=0.058,P=0.955). 结论 大鼠腓肠肌中Akt三种亚型伴随年龄改变表达存在差异,推测Akt各亚型在此过程中可能发挥不同功效.
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不同AKT1与AKT2表达状态的胶质瘤的生存分析
目的 探讨AKT1与AKT2在脑胶质瘤中的表达及与患者生存期的相关性.方法 免疫荧光法检测手术切除的50例胶质瘤组织标本中AKT1及AKT2的表达水平,确定两者表达的相关性并与生存期进行相关性分析.结果 Log - rank单因素检验,年龄≥50岁、KPS评分＜ 80分和WHO Ⅲ～Ⅳ级患者的生存期显著缩短.胶质瘤组织中AKT1及AKT2在WHOⅢ～Ⅳ级的表达率显著高于WHO Ⅰ～Ⅱ级,两者表达存在正相关,且与患者的生存期呈负相关.结论 AKT1与AKT2的表达状态对预测患者的生存期具有一定的临床价值.
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miR-885-3p靶向AKT1对结直肠癌细胞HT-29放射敏感性的影响
目的 探究miR-885-3p对结直肠癌细胞HT-29放射敏感性的影响以及作用机制.方法 荧光定量PCR检测经不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射后HT-29细胞中miR-885-3p的表达量;建立过表达miR-885-3p细胞株,功能试验探讨其对HT-29细胞放射敏感性的影响;生物信息学预测miR-885-3p下游调控的靶基因,双荧光素酶报告基因法进一步验证;上调和下调miR-885-3p表达量探讨miR-885-3p与靶基因丝苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)表达量的调控关系;慢病毒转染敲减AKT1表达量,观察其对HT-29细胞放射敏感性的影响;共转染miR-885-3p模拟物,探讨过表达AKT1对miR-885-3p诱导的HT-29细胞放射敏感性的影响.结果 miR-885-3p在放射诱导的HT-29细胞中表达上调(F=46.64,P<0.05);过表达miR-885-3p和敲减AKT1可通过抑制HT-29细胞存活、促进其凋亡,从而增强HT-29细胞放射敏感性(t=12.33、12.95,P<0.05),放射增敏比(SER)分别为1.602和1.946;抑制miR-885-3p可通过促进HT-29细胞存活、 抑制其凋亡从而促进HT-29细胞放射抵抗(t=11.94,P<0.05),SER为0.839;AKT1是miR-885-3p下游靶基因;过表达AKT1反转miR-885-3p增强HT-29放射敏感性的作用,SER为0.680.结论 miR-885-3p通过直接靶向AKT1增加结直肠癌HT-29细胞放射敏感性,为提高临床结直肠癌放疗敏感性提供一个靶点.
关键词： 结直肠癌 miR-885-3p 放疗敏感性 AKT1 -
术前新辅助化疗及肠内营养对胃癌患者 Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响
目的：探讨术前新辅助化疗（NAD）及肠内营养（EA）对胃癌患者胃癌组织内 Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白影响。方法选取胃癌患者75例，随机分为对照组25例、NAD 组25例和 NAD+EA 组25例，分别检测干预治疗前后胃癌组织中 Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白的表达情况。结果 NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Akt1蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05)，NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Akt1蛋白含量均较对照组显著降低(P<0.05)。NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Bcl-2蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05)，Bax 蛋白含量均较治疗前均显著升高(P<0.05)，NAD 组治疗后 Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.05)，NAD+EA 组治疗后 Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.01)，NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Bax 蛋白含量均较对照组显著升高(P<0.05)。结论术前 NAD 结合 EA 能降低胃癌组织内 Akt1、Bcl-2蛋白，提高 Bax 蛋白水平，可能通过改变蛋白含量抑制肿瘤进程。
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靶向Akt1小干扰RNA对人喉癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:研究Akt1基因沉默对人喉癌细胞系(Hep-2)增殖和凋亡的影响.方法:设计并合成针对Akt1的特异性小干扰RNA(siRNA)序列,利用转染试剂转入体外培养人Hep-2细胞,48 h后收集细胞,RT-PCR和Western blot验证siRNA的沉默效应,MTT法检测细胞增殖活性、台盼蓝细胞染色法计数细胞存活率、AnnexinV/PI检测细胞凋亡和坏死.结果:设计的Akt1siRNA能够有效抑制体外培养Hep-2细胞内Akt1表达实现其基因沉默效应；Akt1siRNA干扰组Akt1mRNA转录和蛋白表达水平均低于空白和阴性对照组；Akt1siRNA干扰组细胞增殖活性下降,细胞存活率下降,Akt1siRNA干扰后细胞凋亡率和坏死率增加.结论:RNA干扰Akt1基因沉默具有抑制喉癌细胞增殖,促进细胞凋亡的作用,Akt1可作为喉癌基因治疗的后选新靶点.
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慢病毒靶向携带Akt1 shRNA对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响
目的 探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA(Akt1-shRNA)对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响.方法 构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞(SGC-LV-shAkt1)为实验组细胞,SGC7901细胞和转染慢病毒空载体SGC7901细胞(SGC-LV-shCON)为对照组细胞.Real-Time PCR检测Akt1 mRNA表达水平,Westem blot检测胃癌细胞Akt1、phospho-Akt (ser473)和bcl-2蛋白表达水平,然后流式双染法、生长速率等方法检测Aktl shRNA对SGC-7901细胞凋亡及增殖能力的影响.结果 成功构建Akt1基因RNAi的慢病毒载体LV-shAkt1,病毒滴度为5× 108 TU/mL.SGC-7901细胞转染后,实验组(SGC-LV-shAkt 1)Akt1 mRNA和Akt1、p-Akt、bcl-2蛋白表达水平较对照组(SGC-7901、SGC-LV-shCON)降低(P＜0.01);(38.7±3.5)％的实验组细胞凋亡(P＜0.05).SGC-LV-shAkt1细胞生长曲线平缓,生长速度较另两种细胞(SGC-7901、SGC-LV-shCON)明显降低.结论 靶向Akt1的RNAi能有效抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,下调抗凋亡蛋白bcl-2有关.
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BTG1及AKT1表达与乳腺癌侵袭的相关性研究
目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)与AKT1的表达与乳腺癌侵袭之间的相关性。方法采用免疫组化法及免疫印迹法(Western blot)检测正常乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织及乳腺癌组织中的BTG1、AKT1表达。结果⑴乳腺癌组织的分期越高，BTG1基因表达越弱，纤维瘤组织与正常乳腺组织的BTG1基因表达明显增强。纤维瘤组、正常组与乳腺癌组相比差异均非常明显(P<0.01)。纤维瘤组与正常组相比差异不明显(P>0.05)。AKT1随乳腺癌组织分期的升高表达逐渐增强，纤维瘤组与正常组的AKT1表达明显减弱，纤维瘤组、正常组与乳腺癌组相比差异均非常明显(P<0.01)。纤维瘤组与正常组相比差异不明显(P>0.05)。⑵BTG1在正常组中高表达，在乳腺癌组低表达。BTG1在纤维瘤组、正常组与乳腺癌组相比差异显著。AKT1在乳腺癌组高表达，在纤维瘤组、正常组与乳腺癌组之间有统计学差异。结论 BTG1和AKT1的表达与乳腺癌的发展、侵袭关系密切，可为判定预后提供一定的依据。
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AKT1基因多态性与阿尔茨海默病的相关性研究
目的：本研究旨在探讨胰岛素信号转导通路相关基因AKT1多态性与阿尔茨海默病的关系，以期深入了解AKT1基因多态对阿尔茨海默病易感性的影响。方法以阿尔茨海默病患者为病例组研究对象，同时选取年龄及性别匹配的健康体检者为对照组研究对象。提取基因组DNA，应用PCR方法对AKT1基因6个位点进行基因测序。结果在AKT1基因位点rs2498786上，阿尔茨海默病组与对照组之间存在统计学差异（P＜0.05）。结论AKT基因位点rs2498786的突变型等位基因C可能增加阿尔茨海默病的发病风险。AKT基因可能是阿尔茨海默病的易感基因，AKT基因位点rs2498786突变可能增加阿尔茨海默病的发病率，其他所研究的 AKT 基因位点虽与阿尔茨海默病无明显相关性，但是不排除是其微效基因，值得我们进一步研究。
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大鼠Akt1基因真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达
目的 构建Akt1基因真核表达载体pDC316-Akt1,观察其在293细胞(人胚肾母细胞)中的表达.方法 采用RT-PCR方法自大鼠肝组织总RNA中克隆Akt1 DNA片段,测序鉴定正确后,插入真核表达载体pDC316的EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ的酶切位点,构建Akt1真核表达载体Akt-pDC316,脂质体介导法转染293细胞,36h后Western blot检测转染293细胞中Akt1的含量.结果 经测序鉴定,构建的Akt1氨基酸序列与野生型Akt1序列完全相符.将Akt-pDC316转入293细胞,可见55000位置有Akt1的表达.经Western blot检测,具有良好的表达浓度.结论 构建Akt1基因真核表达载体在293细胞中可以充分表达.
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过表达Akt1对小鼠骨髓间充质干细胞生物学功能的影响
目的：探讨Akt1过表达对小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）生物学功能的影响。方法雄性健康C57小鼠，鼠龄7～8周，体质量18～25 g。取该小鼠胫骨和股骨，利用BMSCs的贴壁生长能力进行分离，并对获取的细胞进行流式鉴定。构建Akt1-IRES-GFP逆转录病毒载体，感染BMSCs，并筛选、扩增Akt1过表达的BMSCs。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot测定转染Akt1表达情况。用不同浓度（0、10、50、100 ng/mL）的γ干扰素（IFN-γ）处理Akt1-BMSCs及BMSCs，采用四唑氮化合物（MTS）法绘制生长曲线，通过Ca2+依赖性磷脂结合蛋白/碘化丙啶（Annexin V/PI）复染，观察不同浓度IFN-γ对Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs细胞凋亡的影响。结果成功培养出小鼠BMSCs，高表达CD29、CD44、Sca-1，而不表达CD45、CD34，CD11b、CD31、FLK-1、MHC-Ⅱ。成功筛选并扩增出Akt1-BMSCs；RT-PCR显示，Akt1-BMSCs的Akt1基因表达量明显高于BMSCs（P<0.01）；Western blot显示，Akt1-BMSCs的总Akt1蛋白及磷酸化Akt蛋白均高于BMSCs。流式细胞仪检测Akt1-BMSCs及GFP-BMSCs的绿色荧光蛋白（GFP）的表达量均高于95%。细胞增殖及凋亡实验显示，在正常培养及高浓度IFN-γ（100 ng/mL）的刺激下，Akt1-BMSCs显示出了增殖及抗凋亡优势。结论 Akt1-BMSCs比相同代数的BMSCs在正常培养及高浓度IFN-γ（100 ng/mL）的刺激下增殖及抗凋亡能力增强，可用于进行下一步的研究。
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利用组织芯片技术研究Akt1 MMP2和PTEN在胃腺癌中的表达及其相关性
目的:研究MMP2和PTEN在正常胃粘膜、癌旁组织和胃腺癌中的表达及相关性.方法:利用组织芯片技术通过免疫组织化学SP法检测胃腺癌、癌旁组织及正常胃粘膜中Akt1、MMP2和PTEN的表达.结果:在正常胃粘膜、癌旁组织和胃癌组织中,Akt1、MMP2和PTEN表达的阳性率差异均有显著性(P＜0.05);在高、中、低分化不同病理级别的胃腺癌中MMP2和PTEN的表达率差异有显著性(P＜0.05),Akt1表达率差异无显著性(P＞0.05),但高分化和低分化比较差异显著性(P＜0.05).Spearmen 等级相关分析得出,PTEN的表达与Akt1、MMP2的表达呈负相关(P＜0.05),Akt1 的表达与MMP2的表达呈正相关(P＜0.05).结论:Akt1、MMP2在癌组织中表达的阳性率高于正常胃粘膜,且随病理级别的升高阳性率也升高,PTEN 在癌组织中的表达则与之相反,它们对于胃癌的发生发展可能有重要作用.
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三阴乳腺癌中Notch1 AKT1和eIF4E的表达及临床意义
目的：检测三阴乳腺癌组织（TNBC）中Notch1、AKT1和eIF4E表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测56例TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织 Notch1、AKT1和eIF4E的表达情况。结果 TNBC组织中Notch1、AKT1和eIF4E阳性表达定位于细胞质和（或）细胞核，其表达率分别为62％（35/56）、57％（32/56）和61％（34/56），明显高于癌旁正常组织（ P ＜0．01）；56例 TNBC组织中，Notch1、AKT1和eIF4E蛋白在组织学分级Ⅲ级阳性表达率高于Ⅰ＋Ⅱ级（ P＜0．05），Notch1、AKT1和eIF4E的病理分期Ⅲ～Ⅳ期的表达率高于Ⅰ～Ⅱ期（ P＜0．05），Notch1、AKT1和eIF4E阳性表达与淋巴结转移有关（ P＜0．05）；相关性分析显示，三者之间呈正相关（ P＜0．05）。Cox回归多因素分析显示Notch1和eIF4E的阳性表达是独立预后因素。结论 Notch1、AKT1和eIF4E在TNBC中呈明显高表达，与TNBC的发生、发展和转移密切相关。
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miR-183及Akt1蛋白在子宫内膜癌中的表达及其意义
目的 探讨miR-183及Akt1蛋白在子宫内膜癌(EC)组织中的表达,以及抑制或过表达miR-183对Ishikawa细胞内Akt1蛋白表达的影响.方法 实时定量PCR方法检测子宫内膜癌组织miR-183及Akt1mRNA的表达水平,Western blot方法检测子宫内膜癌组织Akt1蛋白表达;将miR-183 inhibitors或miR-183 mimics应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染将转染至Ishikawa细胞,实时定量PCR方法及Western blot方法分别检测转染后Akt1 mRNA及蛋白的表达变化,MTT方法检测转染后细胞增殖能力的变化.结果 miR-183在子宫内膜癌组织中的表达量较癌旁组织明显降低,Akt1蛋白及mRNA在癌组织中较癌旁组织表达明显增高(P＜0.01);与对照组相比,转染miR-183 mimics的Ishikawa细胞内Akt1蛋白与mRNA水平显著降低,细胞增殖能力显著下降(P＜0.01);与对照组相比,转染miR-183 inhibitors的Ishikawa细胞内Akt1蛋白与mRNA水平显著升高,细胞增殖能力亦显著升高(P＜0.01).结论 miR-183在子宫内膜癌组织中低表达,并能够抑制Ishikawa细胞增殖,抑制Akt1的表达可能是其作用机制之一.
关键词： 子宫内膜癌 miR-183 AKT1 Ishikawa细胞 转染 -
miR-183及Akt1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义
目的 探讨miR-183及Akt1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,以及抑制或过表达miR-183对Akt1蛋白表达的影响.方法 实时定量PCR方法检测NSCLC组织miR-183mRNA及Akt1mRNA的表达水平,Western blot方法检测NSCLC组织Akt1蛋白表达;将miR-183 inhibitors及miR-183 mimics转染至A549细胞,实时定量PCR方法及Western blot方法分别检测转染后Akt1 mRNA及蛋白的表达变化.结果 miR-183mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达量较癌旁组织明显降低(P＜0.01),Akt1 mRNA及蛋白在癌组织中较癌旁组织表达明显增高(P＜0.05);转染miR-183 inhibitors的细胞内Akt1蛋白与mRNA水平与对照组相比显著升高(P＜0.05),转染miR-183 mimics的细胞内Akt1蛋白与mRNA水平对照组相比显著降低(P＜0.05).结论 miR-183在NSCLC组织中低表达,并能够调节Akt1的表达.
