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降钙素对人成骨样细胞增殖与细胞膜流动性的影响
为了解降钙素(CT)对体外培养的人成骨样细胞OS-732增殖与细胞膜流动性的影响,并与1,25(OH)2D3的作用进行比较,在培养液中添加1IU/ml CT前后观察DNA合成速率、细胞增殖、细胞周期和细胞膜流动性的变化.结果表明CT有明显促进OS-732细胞增殖和DNA合成的作用,使G2+M期细胞所占的百分比增加,而S期细胞的百分比下降.1,25(OH)2D3可使细胞膜流动性增加,而1IU/ml CT使其下降.结论认为降钙素与1,25(OH)2D3不同,它促进人成骨样细胞增殖和降低细胞膜流动性.
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花椒油对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响及其机制研究
目的:本文选择HaCaT角质形成细胞测定花椒挥发油对其细胞膜流动性和膜电位的影响及其机制,研究花椒挥发油对皮肤活性表皮的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制.方法:采用CCK-8试验测定花椒挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同浓度花椒挥发油对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同浓度花椒挥发油对细胞膜电位的改变,同时考察了花椒挥发油对HaCaT细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量Ca2+-ATP酶试剂盒测定花椒挥发油对HaCaT细胞内Ca2+-ATP酶活性的影响.结果:相对于常用化学促透剂氮酮,花椒挥发油具有较低细胞毒性,花椒挥发油可增加HaCaT细胞膜流动性、降低细胞膜电位,同时可降低Ca2+-ATP酶活性、增加HaCaT细胞内Ca>浓度而影响细胞Ca2+平衡.结论:花椒挥发油可能通过改变细胞内Ca2+平衡而影响细胞膜流动性及膜电位,增加活性表皮流动性以降低皮肤表皮屏障作用,从而利于药物的透皮吸收.
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冰片对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响
目的：研究冰片对皮肤活性表皮作用方式，探究冰片作为经皮促透剂的促透作用机制。方法选择常用经典化学经皮促透剂氮酮作为阳性对照促透剂，采用CCK-8试剂盒测定并计算冰片对HaCaT细胞的半数抑制率(IC50)，利用荧光漂白恢复技术测定不同浓度冰片对HaCaT细胞膜流动性的影响，采用流式细胞仪测定冰片对HaCaT细胞膜电位及细胞膜内Ca2+浓度的影响。结果冰片和氮酮的药物IC50分别为2.826、0.172 mmol/L；冰片可增加HaCaT细胞膜流动性，且随着药物浓度的增大而增加，呈剂量依赖性关系；冰片可降低HaCaT细胞膜电位和HaCaT细胞内Ca2+浓度，表现出类似氮酮作用特点。结论冰片的经皮促透作用机制可能与其影响角质细胞内Ca2+浓度进而改变活性表皮角质形成细胞膜电位和膜流动性有关。
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萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响及其机制研究
该文选择HaCaT皮肤角质形成细胞测定萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制.选择具良好经皮促透效果的萜烯类化合物,即薄荷醇、柠檬烯、1,8-桉树脑、薄荷酮、4-萜品醇和长叶薄荷酮;采用MTr试验测定萜烯类经皮促透剂的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同萜烯类促透剂对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同萜烯类促透剂对细胞膜电位的改变,同时考察了萜烯类促透剂对HaCaT细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量Ca2+-ATP酶试剂盒测定萜烯促透剂对HaCaT细胞内Ca2+-ATP酶活性的影响.实验结果表明,相对于常用化学促透剂氮酮,6种萜烯类促透剂均显示较低细胞毒性;所选择的萜烯类促透剂可显著增加HaCaT细胞膜流动性、降低细胞膜电位,同时可降低HaCaT细胞Ca2+-ATP酶活性和细胞内Ca2+浓度而影响细胞Ca2平衡.因此,萜烯类促透剂可能通过改变细胞内Ca2平衡而影响细胞膜流动性及膜电位,增加皮肤活性表皮流动性而降低皮肤屏障作用,从而利于药物的透皮吸收.
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芍药苷、薄荷脑对葛根素在Calu-3细胞模型转运过程中膜流动性、钠-钾离子ATP酶和钙离子ATP酶的影响
研究芍药苷、薄荷脑对葛根素在细胞模型转运过程中对Calu-3细胞膜生理功能的影响.以Calu-3细胞作为模拟鼻黏膜组织的体外细胞模型,采用荧光漂白恢复技术及超微量酶活性检测方法,考察细胞膜流动性、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性,探索配伍药物促进葛根素转运的作用机制.结果表明,配伍低、中、高浓度薄荷脑或同时配伍低、中、高浓度芍药苷和薄荷脑时,与单独使用葛根素相比,Calu-3细胞膜荧光漂白恢复率显著升高,Na+-K+-ATP酶活性未发生明显改变,Ca2+-ATP酶活性显著增强,由此证实薄荷脑起到主要渗透促进作用,并且其作用机制可能与增加流动性、激活Ca2+-ATP酶活性密切相关.
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广藿香对肢体缺血-再灌注大鼠肠上皮细胞膜流动性的保护作用
目的 观察广藿香对肢体缺血-再灌注大鼠血清一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF-α)及肠上皮细胞膜流动性的影响,探讨广藿香保护肠屏障功能的作用及机制.为从中医药角度寻找创伤、手术后等胃肠道保护措施新方法提供实验依据.方法 成年Wistar大鼠80只,建立肢体缺血-再灌注模型.将实验动物随机分为正常对照组,模型组,广藿香水提液高(4 g·kg-1·d-1)、中(3 g·kg-1·d-1)、低(2 g·kg-1·d-1)剂量组以及广藿香挥发油高(4 g·kg-1·d-1)、中(3 g·kg-1·d-1)、低(2 g·kg-1·d-1)剂量组.各组在造模前连续5天灌服相应药物.检测血清No及TNF-α浓度变化;DPH荧光探针技术测定肢体缺血再灌注后肠上皮细胞膜流动性的变化.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清NO浓度和TNF-α水平显著升高(P<0.01),肠上皮细胞细胞膜荧光偏振度P值升高(P<0.05).与模型组比较,给药各组大鼠血清NO浓度及TNF-α水平显著降低(P<0.01或P<0.05);藿香水提液低剂量组及藿香挥发油中剂量组肠上皮细胞细胞膜荧光偏振度P值降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 广藿香可以通过降低血清NO浓度,抑制血清TNF-α水平,使肠上皮细胞保持良好的细胞膜流动性,达到保护肠屏障功能的作用.
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不同粒径纳米二氧化硅的体外细胞膜毒性作用
探讨不同粒径纳米二氧化硅对体外培养细胞膜的损伤作用及其机制.20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2对RAW264.7巨噬细胞染毒后,分别采用MTT法、显微镜及透射电镜、能谱分析、荧光漂白恢复技术(FRAP)、丙酮酸法、荧光探针2', 7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA),测定染毒细胞的活性、形态及超微结构,细胞内外Si元素分布、膜流动性,细胞外液中乳酸脱氢酶(LDH)含量和细胞内活性氧生成.试验结果显示:20 nm、60 nm SiO2及微米SiO2粒子的细胞半数抑制浓度(IC50)分别为2.07、6.82和14.71 mg/mL;染毒后细胞数量减少,呈气球样变,线粒体肿胀、破坏;细胞内吞噬泡和细胞间隙颗粒均含Si元素;31.25、125、500 μg/mL的20 nm、60 nm SiO2组及500 μg/mL微米SiO2组细胞膜荧光恢复率降低(P＜0.05);125、500 μg/mL两种粒径纳米SiO2组及500 μg/mL微米SiO2组细胞膜扩散系数降低(P＜0.05);两种粒径纳米SiO2组细胞外液中LDH活性升高(P＜0.05),500 μg/mL的20 nm SiO2较60 nm SiO2和微米SiO2致细胞荧光恢复率降低,LDH活性升高(P＜0.05);两种粒径纳米SiO2及微米SiO2可致染毒细胞内活性氧水平升高(P＜0.05).结果表明,20 nm、60 nm SiO2可通过诱导脂质过氧化引起细胞生长抑制、形态异常、超微结构改变和细胞膜损伤,相同剂量20 nm SiO2产生的毒性效应较60 nm SiO2明显,说明纳米SiO2的尺寸效应是一个值得关注的问题.
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晶状体细胞膜流动性与白内障发病机制的相关研究
从流动镶嵌模型到脂筏,细胞膜的结构模型研究不断进展.细胞膜的流动性是指构成细胞膜的脂质和蛋白质分子的运动性.对细胞膜流动性的观察方法包括自旋标记电子顺磁共振和荧光探针等.某些可溶性蛋白与细胞膜的相互作用,能改变其流动性.目前对于晶状体细胞膜流动性的研究十分有限,其脂质构成的特殊性,暗示了晶状体细胞膜流动性的特殊性.随年龄增长,晶状体核区细胞间弥散途径的建立,合胞体超结构的形成,可能需要其细胞膜流动性发生相应改变.以晶状体细胞膜流动性研究为切入点,有助于深入阐明白内障的发病机制.
关键词： 细胞膜流动性 6-酰基-2-二甲酰氨基萘 总极化值 α晶状体蛋白 晶状体 -
饮用加银水对尾吊大鼠脂质代谢的影响
目的研究饮用加银水对尾吊模拟失重大鼠红细胞膜流动性、血脂和血管内皮细胞的影响.方法 30只SD雄性大鼠随机分为地面对照组(GC组)、模拟失重对照组(SC组)和模拟失重饮用0.20 mg/L加银水组(SS组),实验期21 d.观察大鼠血脂指标、红细胞膜流动性以及脱落循环内皮细胞数量的变化.结果 SC组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、HDL-C/TC比值以及红细胞膜流动性低于GC组,LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)/HDL-C比值和脱落循环内皮细胞数量高于GC组.SS组和SC组比较,SS组大鼠血清TC、LDL-C和LDL-C/HDL-C比值增高,HDL-C/TC比值和红细胞膜流动性降低.结论长期饮用0.20 mg/L加银水可以加重尾吊模拟失重大鼠脂质代谢的紊乱.
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多不饱和脂肪酸对模拟失重大鼠脂质代谢的影响
目的研究添加以鱼油为来源的不同剂量的多不饱和脂肪酸(PUFA)对模拟失重大鼠血清红细胞膜微粘度、循环内皮细胞、以及血清总胆固醇、血清甘油三酯等脂质代谢的调节.方法选用3周龄断乳雄性SD大鼠49只,采用小体差法分为5组:Ⅰ组悬吊对照,饲喂含10%玉米油饲料;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组悬吊实验组,分别饲喂含0.5%,1.5 %和3.0 %鱼油的合成饲料;Ⅴ组地面正常对照组,饲喂含10 % 玉米油饲料.悬吊时间为30 d.结果血清红细胞膜微粘度Ⅱ、Ⅳ组与Ⅴ组无显著性差异,Ⅲ组红细胞膜流动性有了显著的增加.Ⅱ组较为明显的减轻了模拟失重对循环内皮细胞(CEC)的增加作用,血清总胆固醇(TC)的含量与鱼油的添加量呈负相关,而血清甘油三酯(TG)含量在各剂量组中无显著性差异.Ⅰ组相对Ⅴ组血清冠心病指数(LDL/HDL)有显著升高而各悬吊实验组中LDL/HDL分别比Ⅰ组降低13.9%、11.1%和31.4%.结论在模拟失重条件下,补充PUFA会减少失重对脂质代谢的不利作用,从而对动脉粥样硬化及冠心病(CHD)的发生起到一定的预防作用.
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桉树醇对HaCaT细胞内钙离子浓度及细胞膜流动性的影响
目的:研究萜烯类经皮促透剂桉树醇(1,8-Cineole)对HaCaT细胞膜流动性及细胞内Ca2+浓度的影响,探究其促透作用机制.方法:采用CCK-8试剂盒测定并计算桉树醇对HaCaT细胞的半数抑制率(IC50);利用荧光漂白恢复技术(FRAP)测定不同浓度桉树醇对HaCaT细胞膜流动性的影响;采用流式细胞仪测定桉树醇对HaCaT细胞内Ca2+浓度的改变.结果:桉树醇药物IC50为9.077 mmol·L-1;不同浓度桉树醇均可显著增加细胞膜流动性,且随着药物浓度的增大而增加,呈剂量依赖性关系.同时,桉树醇可降低HaCaT细胞内Ca2浓度.结论:桉树醇的经皮促透作用机制可能与影响角质细胞内Ca2+浓度进而改变细胞膜流动性有关.
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聚山梨酯80诱发类过敏反应机制研究
目的:研究聚山梨酯80诱发类过敏反应的可能作用机制.方法:采用小鼠耳廓蓝染模型考察聚山梨酯80对血管通透性的影响,验证聚山梨酯80诱发类过敏反应效应;采用RBL-2H3细胞脱颗粒模型探索聚山梨酯80诱发类过敏反应的可能作用机制.首先检测B-氨基己糖苷酶释放,考察聚山梨酯80对过敏介质释放的影响;进而采用细胞膜特异荧光染料FM4-64在高内涵系统考察聚山梨酯80对细胞脱颗粒囊泡回收的影响;后采用荧光偏振法考察聚山梨酯80对细胞膜流动性影响.结果:小鼠耳廓蓝染实验证明聚山梨酯80能够显著提高血管通透性,证实了聚山梨酯80诱发类过敏反应效应;在RBL-2H3细胞模型上,β-氨基己糖苷酶释放实验证实聚山梨酯80能够显著增加β-氨基己糖苷酶释放,表明聚山梨酯80能够直接诱发过敏介质释放;高内涵实验显示聚山梨酯80能够显著促进囊泡回收,提示聚山梨酯80能够促进细胞脱颗粒过程中的囊泡循环;荧光偏振法检测实验证实聚山梨酯80显著降低相对荧光偏振度,提示聚山梨酯80能够提高细胞膜流动性.结论:研究结果提示聚山梨酯80诱导类过敏反应发生机制可能通过提高细胞膜流动性加速了囊泡循环,促进了细胞脱颗粒,增加了过敏介质释放引起类过敏反应症状.
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补阳还五汤及其有效成分体外给药对脑细胞膜流动性的影响
目的比较研究补阳还五汤及其有效成分黄芪甲苷、阿魏酸、川芎嗪、芦丁、绿原酸、紫檀烷苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、毛蕊异黄酮苷、芍药苷、丹皮酚、槲皮素体外给药对缺血-再灌损伤大鼠脑细胞膜流动性的影响.方法大鼠颈总动脉结扎30min-再灌2 h作为脑中风动物实验模型.用自旋标记ESR法测脑细胞膜流动性.结果病理切片证实脑组织发生脑中风的典型病变.损伤大鼠脑细胞膜流动性较正常大鼠减低;补阳还五汤及其有效成分对正常细胞无影响但可使损伤大鼠脑细胞膜流动性增大,不同程度地恢复到接近于正常细胞膜流动性水平.结论细胞膜流动性是一个敏感而重要的生物学指标,反映细胞的活性状态.可用这一新的技术方法来研究补阳还五汤及其组方的配伍机理,为中药方剂的改进提供理论依据.
关键词： 补阳还五汤 有效成分 自旋标记电子自旋共振(ESR) 细胞膜流动性 -
薄荷油对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响及其机制研究
目的 考察薄荷油作为天然经皮促透剂对HaCaT皮肤角质形成细胞膜流动性及膜电位的影响,探讨薄荷挥发油经皮促透作用机制.方法 采用细胞增殖-毒性试验(CCK-8)测定薄荷挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同浓度薄荷挥发油对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同浓度薄荷挥发油对细胞膜电位的改变和对HaCaT细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量CA2+-ATP酶试剂盒测定薄荷油对HaCaT细胞内Ca2-ATP酶活性的影响.结果 与常用化学促透剂氮酮相比,薄荷挥发油具有较低细胞毒性.薄荷挥发油可增加HaCaT细胞膜流动性、降低细胞膜电位,降低Ca2+-ATP酶活性、增加HaCaT细胞内Ca2+浓度而影响细胞Ca2平衡.结论 薄荷挥发油可能通过影响皮肤表皮细胞Ca2平衡而改变细胞膜流动性及膜电位,降低皮肤屏障作用,从而促进药物的透皮吸收.
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烹调油烟对大鼠肺泡巨噬细胞的损伤作用
为探讨烹调油烟对大鼠肺泡巨噬细胞的影响.给大鼠吸入烹调油烟,采用支气管肺泡灌洗法获得大鼠肺泡巨噬细胞,进行检测.结果显示油烟组大鼠肺泡巨噬细胞数、膜流动性和吞噬功能均不同程度低于对照组.说明烹调油烟可以造成肺泡巨噬细胞损伤.肺泡巨噬细胞受损在烹调油烟与人类肺癌相关关系中可能起重要作用.
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芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响
[目的]考察芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响.[方法]芦笋多糖对S180小鼠腹腔注射给药7d,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量,采用试剂盒测定红细胞膜磷脂、胆固醇和唾液酸含量,荧光偏振法结合探针1,6一二苯-1、3、5己三烯测定红细胞膜流动性.[结果]芦笋多糖能增加S180小鼠红细胞膜表面带3蛋白、血型糖蛋白A的含量;升高S180小鼠红细胞膜磷脂含量,降低胆固醇含量;增加S180小鼠红细胞膜表面唾液酸含量;提高S180小鼠红细胞膜流动性.[结论]芦笋多糖可以改善S180小鼠红细胞膜组分的异常变化,从而保持细胞膜的流动性,恢复红细胞的结构和功能.
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三伏贴中芥子碱及细辛挥发油促进HaCaT细胞摄取延胡索乙素的作用及其机制研究
目的 研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制.方法 采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微镜可视化观察SPT及AEO促进HaCaT细胞摄取THP的作用,并用HPLC法测定HaCaT细胞中THP的量;以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为荧光探针,利用荧光偏振技术研究SPT、AEO及THP对HaCaT细胞的细胞膜流动性的影响.结果 SPT及AEO均能显著促进THP被HaCaT细胞摄取,且AEO的促进作用优于SPT.SPT、THP、AEO分别作用于DPH标记的HaCaT细胞后,AEO组HaCaT细胞的荧光偏振度和细胞膜微黏度均显著降低,细胞流动性增加,证明AEO是通过提高细胞膜流动性从而促进HaCaT细胞摄取THP,而THP、SPT均不能增加细胞膜流动性.结论 三伏贴中SPT及AEO均可促进HaCaT细胞摄取THP,AEO促进机制与其提高细胞膜流动性相关,而SPT的促进作用不是通过增加细胞膜流动性实现,其具体机制有待进一步探明.
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藿香正气软胶囊对肠屏障功能保护作用的实验研究
目的探讨藿香正气软胶囊(HXZQ)对肠屏障功能的保护作用.方法Wistar大鼠50只,建立肢体缺血-再灌注模型.HXZQ各组分别于造模前ig给药,测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平、血浆二胺氧化酶(DA())活性及小肠上皮细胞细胞膜流动性.结果肢体缺血-再灌注后,肠道屏障功能明显受到损伤和破坏.HXZQ能明显降低血清TNF-α水平(P＜0.01),显著降低血浆中DAO活性(P＜0.01),显著提高小肠上皮细胞细胞膜流动性.结论HXZQ对肢体缺血-再灌注损伤时肠道屏障功能具有明显的保护作用.
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海藻多糖对肿瘤细胞膜流动性的影响
目的研究海藻多糖的抗肿瘤作用机制.方法采用荧光探针DPH法,观察海藻多糖对S180和H22小鼠细胞膜流动性的影响.结果海藻多糖可升高S180荷瘤小鼠肿瘤细胞的膜流动性,降低H22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性.结论海藻多糖可恢复肿瘤细胞膜流动性至正常细胞膜流动性而达到抗肿瘤的作用.
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微乳对葛根素在MDCK-MDR1细胞的转运影响及机制研究
目的 探讨微乳制剂对葛根素在血脑屏障(BBB)细胞模型MDCK-MDR1的转运影响以及机制.方法 采用MTT法评价葛根素微乳与溶液的细胞毒性浓度范围,确定适宜给药质量浓度,考察葛根素溶液及微乳在MDCK-MDR1单层的双侧转运特性,通过免疫组化染色研究细胞紧密连接蛋白的表达,荧光光漂白恢复法测定细胞膜流动性的变化以及阴离子探针结合流式细胞技术研究细胞膜电位的改变,进而阐明微乳对葛根素转运影响的作用机制.结果 葛根素溶液质量浓度50～300 μg/mL,微乳稀释500倍以上对MDCK-MDR1无显著毒性.溶液中葛根素在MDCK-MDR1单层的吸收方向转运表观渗透系数(Papp)为1.04×10-6 cm/s,外排方向转运Papp值为1.05×10-6 cm/s,微乳中葛根素双侧转运Papp值均较溶液中葛根素显著增加(P＜0.05).微乳作用可以减少MDCK-MDR1紧密连接蛋白Claudin-1、Occludm、ZO-1、F-actin的表达,促进细胞膜流动,降低细胞膜电位.结论 微乳制剂可以促进葛根素在BBB细胞模型MDCK-MDR1的双侧转运,其作用机制与打开细胞间紧密连接,增加细胞膜流动性,使细胞去极化,降低膜电位进而增大葛根素细胞旁路渗透有关.
