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HPLC法和荧光法测定大鼠血浆皮质酮的比较

王喆;冯芳

摘要: 目的:建立并优化HPLC法和荧光法测定大鼠血浆中皮质酮,并比较两种方法特点.方法:①HPLC 法:前处理采用乙酸乙酯萃取,色谱柱采用Lichrospher C18柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-水(60∶40)为流动相,流速:0.8ml/min,检测波长:240nm.②荧光法:血浆经二氯甲烷萃取后,再以乙醇反萃取,与浓硫酸作用呈色,测定荧光强度.激发发射波长:472nm/519nm.结果:①HPLC 法:皮质酮线性范围为0.01~2.0μg/mL,精密度RSD(%)小于6.5,准确度Bias(%)小于8.7.②荧光法:皮质酮线性范围为0.1~3.2μg/mL,精密度RSD(%)小于13.3,准确度Bias(%)小于14.5.③HPLC 法均可测定大鼠血浆皮质酮昼夜节律变化和抑郁症造模前后变化,荧光法只能测定后者.结论:两种方法准确、专属、灵敏,可用于大鼠血浆皮质酮含量的测定.与荧光法相比,HPLC 法灵敏度更高.在实际样本分析中,应根据具体情况选择采用哪种方法.

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