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异绿原酸B对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用
目的 研究异绿原酸B(ICAB)对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 建立CCl4诱导小鼠急性肝损伤实验模型并评价ICAB的保护作用,测定小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和肝组织丙二醛(MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.采用HE染色对肝组织细胞形态进行观察;Western印迹法测定ICAB对肝损伤小鼠肝细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化物还原酶1(NQO1)表达的影响.结果 ICAB各给药组(5、10和20 mg/kg)均可不同程度抑制CCl4所致小鼠血清ALT、AST和MDA的升高(P<0.01),ICAB高剂量组(20 mg/kg)明显提高肝细胞中SOD(P<0.01)和GSH-Px活性水平(P<0.05),降低MDA含量.同时,ICAB能改善CCl4造成的肝组织病理学损伤.此外,ICAB可促进Nrf2的表达及Nrf2的核转位,进而促进Nrf2下游靶蛋白HO-1和NQO1的表达.结论 ICAB对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有明显的保肝降酶作用,其作用机制可能与参与调节Nrf2信号通路、缓解氧化应激相关.
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金银花提取物多指标成分含量及指纹图谱同时检测研究
目的 建立金银花提取物中7种活性成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A及异绿原酸C)含量及指纹图谱同时检测的方法.方法 以AkzoNobel Kromasil C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),乙赌-0.1％磷酸溶液梯度洗脱,测定波长326 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL· min-1.结果 7种成分的线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均低于3％,加样回收率为97.98％ ～99.29％.结论 该方法简便、灵敏、准确,可用于金银花提取物的质量控制.
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基于指纹图谱分析和多成分同时定量的双鱼颗粒质量评价研究
目的 建立双鱼颗粒(SG)指纹图谱,并进行多成分定量分析,为评价SG提供依据.方法 采用Kromasil C18 (250mm×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈-0.05％三氟乙酸水溶液梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长为230、327 nm.采用Q-TOF/MS对指纹图谱中共有峰进行指认.结果 得到分离度、重现性均较好的SG指纹图谱,标示出17个共有峰,10批样品相似度均大于0.95;采用LC/Q-TOF/MS方法指认了14个共有峰,其中7个共有峰经对照品比对,分别为芍药苷、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C和新绿原酸,并对这7个成分进行了定量分析,平均回收率在97.8％～101.8％,RSD均小于2％.结论 本方法能够快速、简便、准确地对SG指纹图谱及7个指标成分同时进行分析,可作为全面评价该制剂质量的有效方法.
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异绿原酸A、B和C的制备工艺研究
目的 建立从金银花Lonicera japonica中分离制备高质量分数异绿原酸A、B和C的方法.方法 采用D-101大孔树脂、中低压制备色谱分离制备金银花中异绿原酸A、B和C单体,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构.结果 分离制备的异绿原酸A、B和C质量分数分别为98.7％、99.2％和97.6％.结论 该方法经济、简单、快速,可用于制备高质量分数的异绿原酸A、B和C.
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银翘清热片HPLC指纹图谱研究
目的 建立银翘清热片(YQT)的HPLC指纹图谱,并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF/MS)对其化学成分进行定性分析.方法 采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱,体积流量为1 mL/min,柱温为25℃,检测波长为230 nm.ESI-Q-TOF/MS正、负2种离子模式扫描对其化学成分定性分析.结果 建立了YQT HPLC指纹图谱,标定28个共有峰,归属到6味药材,其中7个共有峰来源于连翘,9个共有峰来源于金银花,6个共有峰来源于葛根,3个共有峰来源于牛蒡子,1个共有峰(2号)来源于连翘和升麻,另外2个共有峰分别来源于知母和升麻.11批不同批次的YQT制剂相似度均大于0.95.并采用LC-Q-TOF/MS方法鉴定了42个化学成分,其中16个采用对照品比对鉴定,分别为葛根素、大豆苷、大豆苷元、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱苷、芦丁、连翘苷、连翘酯苷A、牛蒡苷、芒果苷、知母皂苷B Ⅱ.结论 完善了YQT的质量标准体系,可为同类型的其他复方制剂的物质基础研究和质量控制提供参考.
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UPLC法同时测定不同银黄制剂中10种成分
目的 建立同时测定银黄制剂中10种成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)的超高效液相色谱(UPLC)方法.方法 采用Acquiyt UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),以乙腈-0.4％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,在326 nm波长处进行检测,柱温40℃,进样量1.0 μL.结果 银黄制剂中10种成分在考察线性范围内线性关系良好(r≥0.999 6),加样回收率均在97.43％～99.94％,RSD均小于2.0％.11批银黄制剂样品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量分数分别在0.236～3.419、5.279～26.220、0.495～4.714、0.130～2.702、0.310～3.210、0.363～5.036、35.209～133.289、1.493～6.635、1.546～5.393、0.254～0.823 mg/g.结论 该方法简便,准确,快速,分离效果好,重复性好,可用于银黄制剂的质量控制,并为将来该制剂质量标准提升提供参考.
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邓老凉茶颗粒的HPLC指纹图谱及模式识别研究
目的 研究邓老凉茶颗粒的质量控制方法.方法 采用HPLC法建立了邓老凉茶颗粒甲醇提取液的HPLC指纹图谱,收集了不同批次的11批产品进行测定,并使用主成分分析法对指纹图谱进行了模式识别研究.结果 11批邓老凉茶颗粒指纹图谱相似度达到0.95以上；经主成分分析,16个共有峰可综合为3个主成分,其累积贡献率达91.89％,异绿原酸B的相对峰面积为邓老凉茶颗粒指纹图谱中影响大的指标.结论 该方法稳定可靠,可以有效地用于邓老凉茶颗粒的质量评价和质量控制.
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基于HPLC特征指纹图谱分析不同生长阶段款冬花有效成分积累特征
目的 分析不同生长阶段不同花色(黄花、紫花、深紫花)款冬花中有效成分的积累规律,为款冬花药材生产和质量控制提供理论指导.方法 基于HPLC法对不同生长阶段、不同花色款冬花药材进行测定,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)计算相似度,运用主成分分析(PCA)和偏小二乘法-判别分析(PLS-DA)对样品进行模式识别研究.结果 获得了不同生长阶段和不同花色的款冬花药材HPLC指纹图谱,标定了27个共有峰,指认了其中11个共有峰;30批样品与对照指纹图谱的相似度极高,在0.901～0.995;根据峰面积可以判断出款冬花药材在不同生长阶段其积累特征存在差异,不同花色间差异明显;通过PCA和PLS-DA可将不同花色款冬花样品完全区分开来,4号峰没食子酸、6号峰绿原酸、8号峰芦丁、9号峰金丝桃苷、11号峰异绿原酸B、17号峰槲皮素等12个成分是导致不同花色款冬花质量差异性的主要标志物.质量评价以深紫花质量好,紫花次之,黄花差.结论 HPLC指纹图谱能够反映款冬花有效成分在不同生长阶段的积累特征和不同花色间的差异,结合化学模式识别,可为款冬花药材的生产和质量评价提供参考.
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扭肚藤UPLC指纹图谱建立及2种成分测定
目的 建立扭肚藤Jasminum elongatum (Bergium) Wild.UPLC指纹图谱,并测定异绿原酸B和咖啡酸甲酯的含有量.方法 扭肚藤甲醇提取物的分析采用Agilent Ecplise XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);乙腈-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温25℃;检测波长260 nm.结果 10批样品指纹图谱中有18个共有峰,相似度均大于0.85.异绿原酸B和咖啡酸甲酯分别在7.67 ～ 38.35μg/mL(R2=0.999 4)和9.60～96.0 μg/mL(R2 =0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.61％、99.09％,RSD分别为0.84％、1.25％.结论 该方法稳定可靠,可用于扭肚藤的质量控制.
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土圞儿中3种成分含量的变异规律
目的 研究土圞儿Apios fortunei Maxim中绿原酸、异绿原酸B、芹菜素含有量的变异规律.方法 收集23份种源,考察其农艺性状(叶长、宽及其比例,块根纵、横径及其比例,茎粗,块根质量).HPLC法测定3种成分含有量,分析其与海拔、经纬度、农艺性状、种源的相关性,并进行聚类分析.结果 各种源间绿原酸、异绿原酸B、芹菜素含有量均有显著差异,湖南、四川产者相对较高,其变异规律较一致,与块根纵横径比呈正相关关系,与海拔呈负相关关系,与叶、茎农艺性状以及经纬度的相关性较低.23个种源可划分为4个类群.结论 以绿原酸、异绿原酸B、芹菜素含有量为目标筛选土圞儿时,应优先考虑低海拔、高块根纵横径比的湖南与四川种源.
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基于全时段双波长融合HPLC图谱的山绿茶药材多成分定量研究
目的:以全时段双波长融合HPLC图谱定量为主要技术手段,对山绿茶药材进行质量控制方法的研究.方法:采用Poroshell SB-C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7 m),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,线性梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温30℃,检测波长256 nm(芦丁、异槲皮苷)、328 nm(绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C),使用Matlab软件编程,对dif格式数据进行全时段双波长融合.结果:芦丁、异槲皮苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C进样量分别在0.449～5.837、0.483～6.279、0.415～5.392、0.922～11.986、1.013～13.169、1.418～18.434 μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.3％～101.8％(RSD＜3％,n=6);10批样品中芦丁、异槲皮苷、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C含量范围分别为17.69～94.43、12.72～49.43、13.41～66.48、52.90～148.70、49.82～241.10、62.49～183.63 mg· g-1.结论:该方法可以为山绿茶的多成分质量控制提供依据.
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HPLC同时测定青银注射液中8种活性成分的含量
目的:建立HPLC同时测定青银注射液中8种活性成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C及蒿酮)含量的方法.方法:色谱柱:AkzoNobel Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相:乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱；分段变波长测定；柱温:30℃；流速:1.0 mL·min-1.结果:8种成分的线性关系良好,精密度、稳定性、重复性的RSD均低于3％,平均加样回收率为97.8％～99.2％.结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于青银注射液的质量控制.
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产地加工“发汗”对续断中异绿原酸A、异绿原酸B及异绿原酸C含量的影响
目的:研究产地加工“发汗”对续断中异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C含量的影响.方法:建立同时测定异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C含量的HPLC方法,然后比较续断“发汗”前后3个成分含量的变化.采用高效液相色谱法,使用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.05％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min,2％A→6％A;5～18 min,6％A→10％A;18～40 min,10％A→20％A;40～70 min,20％A→25％A;70～80 min,25％A→35％A;80～90 min,35％A→60％A;90～110 min,60％A→70％A;110～120 min,70％A),流速1 mL·min-1,检测波长为212 nm,柱温30℃.结果:异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C的峰面积与质量浓度的线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率(n=6)分别为101.5％、101.7％和102.0％;不同产地的续断未发汗品中异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C成分含量分别为0.06％～0.13％、0.45％～0.92％和0.18％～0.73％,发汗品中分别为0.09％～0.76％、0.29％～0.88％和0.24％～0.80％.经产地加工“发汗”后,续断中异绿原酸A的含量略有降低,而异绿原酸B和异绿原酸C的含量有所升高.结论:产地加工“发汗”对续断中的异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C3个酚酸类成分有明显影响,为进一步探讨续断“发汗”机理和制定“发汗”加工工艺提供了依据.
