首页 > 文献资料
-
UPLC指纹图谱结合模式识别分析不同产地生/制何首乌
采用超高效液相色谱(UPLC),建立不同产地生/制何首乌二苯乙烯苷(TSG)的含量测定方法和指纹图谱.大孔树脂柱处理各样品,UPLC分析,Waters ACQUITY UPLC@BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),乙腈-0.5%甲酸溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,波长254 nm,柱温(25±5) ℃.结果发现大孔树脂分离后药材二苯乙烯苷含量均在25.0%以上;成功建立不同产地生/制何首乌药材UPLC指纹图谱;标定了17个色谱峰,聚类分析不能完全将生/制首乌分开,而主成分分析可明显地将其分为两类;二苯乙烯苷是两类何首乌自变量投影重要性指标(VIP)差异大的组分.前处理方法可获得高含量的二苯乙烯苷,测定方法简单,灵敏,可靠,可用于生/制何首乌的快速鉴别,可作为何首乌药材整体质量控制的方法之一.
-
甘肃祁连山地区麻花秦艽UPLC指纹图谱与遗传多样性研究
目的 建立麻花秦艽UPLC指纹图谱,并分析其指征性成分差异与遗传多样性.方法 应用超高效液相色谱法测定采集样本干燥根的主要化学成分,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统分析不同居群指征性成分共有峰的相对峰面积,应用SPSS19.0对其进行聚类分析;应用ISSR分子标记对所采集样本干燥叶片进行基因组DNA提取和扩增,利用Popgen32软件分析遗传多样性及遗传分化状况.结果18个居群麻花秦艽药材共标定了12个共有峰,可分为3个类群,张掖市山丹县麻花秦艽龙胆苦苷及5种化学成分总含量高;6条ISSR引物共扩增出73个位点,PPB为98.63％,I平均值为0.366 3,H平均值为0.231 6,Gst为0.344 1,基因流Nm为0.953 0.结论 建立的麻花秦艽UPLC指纹图谱可作为其质量评价体系;麻花秦艽在种群水平上具有较高的遗传多样性,居群内遗传多样性水平明显高于居群间,遗传变异主要存在于居群内.
-
红花龙胆不同药用部位UV-Vis和UPLC指纹图谱研究及资源评价
目的 建立红花龙胆Gentiana rhodantha不同药用部位UV-Vis和UPLC指纹图谱,结合多变量分析研究红花龙胆根、茎、叶和花中化学成分的整体分布与质量分数变化.方法 Shim-pack XR-ODS Ⅲ液相色谱柱(150mm×2.0 mm,2.2μm).流动相为0.1％甲酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,柱温40℃;检测波长242 nm,进样量0.3 μL;体积流量为1.00 mL/min.电喷雾离子源(ESI)正/负离子模式,多反应监测(MRM)模式,喷雾电压3.5 kV,脱溶剂管温度250℃,鞘气和干燥气体积流量分别为3.0 L/min和15.0 L/min,碰撞气体积流量0.15 mL/min;UV-Vis指纹图谱测定,检测波长200～500 nm,狭缝1.0 nm,采样间隔0.5 nm;采用偏小二乘判别分析(PLS-DA),变量投影重要性准则(VIP)和系统聚类(CA)对不同产地药材进行分类研究.结果 UPLC和UV-Vis方法学考察显示,精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于2.00％;马钱苷酸、芒果苷和当药苷加样回收率在97.89％～102.71％,RSD在1.09％～2.88％;11点平滑十一阶导数预处理为佳光谱预处理方法,PLS-DA模型R2cal=0.931 5,RMSEE=0.302,R2val=0.901,RMSEP=0.341,根、茎、叶和花UV-Vis光谱呈现指纹特性;UPLC指纹图谱相似度分析显示植株化学成分分别在叶部和花部较接近,根部和茎部较相似.不同产地红花龙胆根部UPLC指纹图相似性系数变化范围大,药材质量不稳定.马钱苷酸、芒果苷在叶片和花中量较高[(1.46±0.42)、(51.59±15.45)mg/g];当药苷在根中量较高[(4.41±3.24) mg/g].叶片总体呈现较高的化学成分量,马钱苷酸、芒果苷和当药苷量对不同药用部位的区分均有较大贡献.聚类分析显示,不同产地红花龙胆植株化学成分呈现一定地理特征,高海拔地区的药材和低海拔地区的药材成分整体差别较大,聚为不同类群.结论 UPLC和UV-Vis指纹图谱相结合可反映红花龙胆根、茎、叶和花中化学成分的整体分布与质量分数变化,研究结果为野生红花龙胆资源的质量评价提供方法和理论依据.
关键词： 红花龙胆 UPLC指纹图谱 UV-Vis指纹图谱 多变量分析 资源评价 -
左金丸传统丸剂与免煎配方颗粒剂的UPLC指纹图谱研究
目的:通过指纹图谱比较左金丸传统丸剂与免煎配方颗粒剂主要药效成分的相对含量.方法:采用超高效液相色谱法建立左金丸传统丸剂与免煎配方颗粒剂的指纹图谱,对其主要药效成分的相对含量进行比较.结果:方法学研究表明,所用色谱条件符合定性要求;以"诺得胜"左金丸中盐酸小檗碱为参照物峰,左金丸免煎配方颗粒剂中黄连主要成分(盐酸黄连碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)的相对含量高于传统丸剂,吴茱萸主要成分(吴茱萸碱、吴茱萸次碱)的相对含量明显低于传统丸剂.结论:左金丸免煎配方颗粒剂与传统丸剂的指纹图谱存在差异;前者黄连主要成分的相对含量较高,吴茱萸主要成分的相对含量明显较低.
-
姜不同炮制品对苓甘五味姜辛汤UPLC指纹图谱影响研究
目的:建立苓甘五味姜辛汤的超高效液相(UPLC)指纹图谱,探明姜不同炮制品对苓甘五味姜辛汤指纹图谱的影响.方法:采用UPLC BEH色谱柱C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相为乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱;流速0.2 mL/min;柱温30 ℃;检测波长280 nm;分别用生、干、炮姜配伍成苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤各10批,对其指纹图谱进行相似度分析、直观比较和PCA分析.结果:建立了分离度、重现性均较好的苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤UPLC指纹图谱;同一炮制品组成的苓甘五味姜辛汤指纹图谱相似度较好,但苓甘五味(生/干/炮)姜辛汤指纹图谱直观比较及PCA结果差异明显.结论:所建立的指纹图谱方法简便、稳定、可行;姜的不同炮制品对苓甘五味姜辛汤的指纹图谱均有不同程度的影响.
-
不同产地山楂与野山楂果实UPLC指纹图谱的建立及模式识别
目的 建立不同产地山楂与野山楂果实的指纹图谱,并对其进行模式识别.方法 山楂与野山楂果实70％乙醇提取物的分析采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7 μm);乙腈-0.1％磷酸为流动相;体积流量0.3mL/min;检测波长350 nm;柱温35℃.以主成分分析(PCA)、正交偏小方差判别分析(OPLS-DA)、相似度分析3种方法对实验数据进行分析.结果 20批样品UPLC指纹图谱中有18个共有峰,相似度除S9样品较低外,其他样品均在0.85左右;并对其中5个共有峰进行了化学成分指认,通过化学计量学分析方法将山楂和野山楂果实分成两类;且黄酮与酚酸类是其主要的差异标记物.结论 该方法简便、快速、可靠,为山楂果实的的质量控制提供依据.
-
淡豆豉UPLC指纹图谱
目的 建立淡豆豉UPLC指纹图谱.方法 淡豆豉80％甲醇提取液的分析采用ACQUITY UPLC@BEHC18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7 μm);流动相0.1％冰乙酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长260 nm;柱温25℃;进样量10 μL.通过SPSS1 21.0软件进行聚类分析.结果 11批样品的指纹图谱中有10个共有峰,其中6个为大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素,相似度均高于0.900,可分为2类.结论 该方法简便快速,可用于淡豆豉的质量控制.
-
UPLC指纹图谱法考察丹蛭降糖胶囊的不同制备工艺
目的 运用超高效液相色谱(UPLC)法对两种制备工艺的丹蛭降糖胶囊特征指纹图谱进行初步研究比较,考察不同制备方法对药物指纹图谱的影响,为制备工艺的优化以及后续的药效学研究提供理论依据.方法 采用WatersAcquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相为乙腈-0.1％磷酸进行梯度洗脱;体积流量0.25mL/min;柱温30℃;检测波长230 nm.结果 以芍药苷和丹皮酚为参照峰,新工艺(醇水双提)丹蛭降糖胶囊的特征指纹图谱共确定了15个共有峰,老工艺(水提)丹蛭降糖胶囊确定了12个共有峰.结论 丹蛭降糖胶囊新制备工艺特征指纹图谱确认的共有峰多,表明提取的有效成分多.对比指纹图谱的峰面积,新工艺峰面积明显高于老工艺,说明新工艺提取效率更高.
-
扭肚藤UPLC指纹图谱建立及2种成分测定
目的 建立扭肚藤Jasminum elongatum (Bergium) Wild.UPLC指纹图谱,并测定异绿原酸B和咖啡酸甲酯的含有量.方法 扭肚藤甲醇提取物的分析采用Agilent Ecplise XDB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);乙腈-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温25℃;检测波长260 nm.结果 10批样品指纹图谱中有18个共有峰,相似度均大于0.85.异绿原酸B和咖啡酸甲酯分别在7.67 ～ 38.35μg/mL(R2=0.999 4)和9.60～96.0 μg/mL(R2 =0.999 7)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.61％、99.09％,RSD分别为0.84％、1.25％.结论 该方法稳定可靠,可用于扭肚藤的质量控制.
-
补肾强身片UPLC指纹图谱
目的 建立补肾强身片(淫羊藿、菟丝子、金樱子等)UPLC指纹图谱.方法 该药物50％乙醇提取液的分析采用Agilent SB-C18色谱柱(100 mm ×4.6 mm,2.7 μm);以乙腈-0.1％磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;检测波长215 nm;柱温40℃.再通过聚类分析、主成分分析、正交偏小二乘判别分析对指纹图谱进行评价.结果 12批样品的UPLC指纹图谱中有20个共有峰,并鉴定出9个(原儿茶酸、红景天苷、绿原酸、金丝桃苷、特女贞苷、朝藿定C、淫羊藿苷、山柰素、宝霍苷Ⅰ),相似度0.843～0.970.12批样品可分成3类,并找到4个差异标志物,包括特女贞苷和绿原酸.结论 该方法简便可靠,可用于补肾强身片的质量控制.
关键词： 补肾强身片 UPLC指纹图谱 聚类分析 主成分分析 正交偏最小二乘判别分析 -
甘草微型饮片切制工艺及UPLC指纹图谱
目的 优化甘草微型饮片切制工艺,建立其UPLC指纹图谱.方法 以流动性、出膏率以及甘草苷、甘草酸、甘草素、甘草次酸、异甘草素、查耳酮含有量为评价指标,软化时间、饮片厚度、饮片粒径、干燥温度为影响因素,正交试验优化切制工艺.甘草70％乙醇提取物的分析采用BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温25℃;检测波长237 nm.结果 佳工艺为粒径0.5～0.9 mm,厚度1 mm,软化时间1h,干燥温度50℃.10批样品UPLC指纹图谱中有25个共有峰,相似度均大于0.9.6种成分在各自范围内线性关系良好(R2＞0.999 0),平均加样回收率为99.4％ ～ 102.5％,RSD 0.29％ ～ 1.9％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于甘草微型饮片的质量控制.
-
基于UPLC指纹图谱的青黛提取工艺评价研究
目的 建立青黛UPLC指纹图谱,用于评价其提取工艺.方法 采用单因素实验设计,以UPLC指纹图谱的共有峰数目、特征指纹峰总峰面积、有效成分含量为评价指标,分别对影响青黛加热回流提取法、超声提取法、微波萃取法的提取溶剂、提取温度、提取时间及物料比等因素进行优化,筛选并评价提取工艺.结果 3种提取法的佳提取溶剂均为N,N二甲基甲酰胺,佳提取工艺分别为加热提取法(物料比0.25 g∶30 mL,提取温度20℃,提取时间60 min)、超声提取法(物料比0.25 g∶ 30mL,提取温度50℃,提取时间60 min)、微波萃取法(物料比0.25 g∶ 30mL,提取温度50℃,提取时间8 min).在佳提取工艺下,微波萃取法、超声提取法和加热回流法的提取物的特征峰数依次为34,30,11,总峰面积依次为3 495.6,2 904.9,420.9.同时,微波萃取法得到的靛玉红含量分别为超声提取法和加热回流法的1.63倍和22.57倍.超声提取法得到的靛蓝含量分别为微波萃取法和加热回流法的2.52倍和11.40倍.结论 以UPLC指纹图谱的共有峰数目、特征指纹峰总峰面积和靛玉红含量为评价指标,微波萃取法优于超声提取法和加热回流法;以UPLC指纹图谱的共有峰数目、特征指纹峰总峰面积和靛蓝含量为评价指标,超声提取法优于微波萃取法和加热回流法.
-
不同采收期芭蕉根的UPLC指纹图谱研究
目的 建立芭蕉根不同采收期的UPLC指纹图谱分析方法,为其原药材的采收期提供参考.方法 采用Agilent ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18(2.1×100mm,1.8μm)色谱柱,0.1％乙酸水-乙腈洗脱系统,梯度洗脱,检测波长为:290nm,流速为0.2ml/min,柱温35℃.测定12批芭蕉根药材的指纹图谱,并对不同月份的芭蕉根进行系统聚类分析和相似度比较.结果 12批不同采收期芭蕉根药材共有峰的个数和相似度有差异,利用系统聚类分析可将不同月份的药材分为两大类,其中1～9月归为一类,10～12月为一类.结论 从化学成分相似性的角度看,建议芭蕉根的采收期为1～9月份.
-
基于超高效液相色谱指纹图谱的正交试验优选“二神丸”药对醇提工艺考察
目的:采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱结合正交试验优选“二神丸”药对佳醇提工艺.方法:选择乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数4个因素,采用L9(34)进行正交试验,以UPLC指纹图谱特征峰总面积、补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚的含量以及干浸膏得率为综合评判指标.结果:优选出“二神丸”药对佳醇提工艺:乙醇浓度60％,乙醇8倍用量,每次提取1h,提取2次.结论:优化的提取工艺稳定、合理、可行,对于规范“二神丸”药对醇提工艺和质量控制具有一定的参考意义.
-
基于UPLC指纹图谱和判别分析鉴别黄芩产地研究
目的:利用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱技术结合判别分析方法建立黄芩产地快速鉴别方法.方法:色谱柱为Aquity BEH C18(50mm×2.1mm,1.7μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速为0.4mL/min,柱温为40℃,检测波长为280nm.采用UPLC法对河南、甘肃、山西、河北、山东5省份64批黄芩样品进行测定,利用中国药典委员会颁布的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件》(2004版A)对其进行相似度评价,并结合Fisher线性判别函数建立黄芩产地快速鉴别模型.结果:不同产地黄芩药材的指纹图谱相似度大于0.95;判别分析结果显示河南、山东、河北3省份的黄芩可被准确区分开来,山西、甘肃各有一批次黄芩出现误判,各模型判断正确率均大于94.7％.结论:利用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱技术结合判别分析方法鉴另别黄芩产地快速、准确,值得推广.
-
四物汤UPLC指纹图谱方法的建立与应用
目的:建立四物汤UPLC指纹图谱的分析方法,并应用于传统煎液与中药配方颗粒调配剂的对比.方法:采用LunaOmega C18(150×2.1mm,1.6μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.2mL/min,使用230hm和277nm两个波长进行采集;运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件对样品进行相似度评价.结果:在230nm条件下,四物汤中检测出10个白芍的特征共有峰;在277nm条件下,检测出当归、川芎和熟地黄23个共有峰;中药配方颗粒调配剂指纹图谱与传统煎液对照谱图对比,相似度良好,在0.957～0.991之间.结论:所建立的四物汤UPLC双波长指纹图谱,其方法精密度、重复性和稳定性良好;通过对多个四物汤传统煎液样本与中药配方颗粒调配剂的对比分析,结果显示两者的物质成分无显著差异.
-
夏桑菊颗粒UPLC指纹图谱研究
目的:建立不同批次夏桑菊颗粒的指纹图谱.方法:采用UPLC,建立12批夏桑菊颗粒的指纹图谱.ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.5％醋酸溶液,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.4 mL/min,检测波长320 nm,标定了16个色谱峰,分别采用相似度软件、聚类分析和主成分分析等方法,对12批样品进行系统的比较与归类.结果:建立了夏桑菊颗粒专属性的UPLC指纹图谱,将不同批次的样品分为6大类.结论:该方法重复性好,简便可靠,可用于夏桑菊颗粒的快速鉴别,可为夏桑菊颗粒的质量控制提供依据.
-
苦地丁药材超高效液相色谱指纹图谱研究
目的:建立苦地丁药材的超高效液相色谱指纹图谱.方法:采用UPLC-PDA技术,测定10批不同产地的苦地丁药材.Phenomenex Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.02％三乙胺溶液梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温30℃,检测波长289 nm.结果:建立了10批不同产地的苦地丁药材的超高效液相色谱指纹图谱及其对照图谱.确定了13个共有峰,指认了其中的3个峰,各指纹图谱相似度大于0.80;聚类分析将不同产地药材分为3类;主成分分析得到3个主成分,累计方差贡献率达到89.607％,并判别出苦地丁药材中的2个主要化学成分.结论:该方法实现了苦地丁药材指纹图谱的快速、高效测定,为全面控制其质量提供了依据.
-
水线草UPLC指纹图谱的建立及应用
目的:建立不同产地水线草的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并对其混淆品白花蛇舌草进行鉴别应用.方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),以甲醇-1％冰醋酸梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 mL/min,检测波长254 nm.指纹图谱采用相似度分析和主成分分析.结果:建立了水线草药材的专属性指纹图谱,确定了15个共有峰.各产地水线草药材指纹图谱相似度均超过0.85.结论:该指纹图谱重复性好,简便可靠,可用于水线草药材的专属性鉴别,有效区别水线草及其混淆品白花蛇舌草.
-
中药狼毒及其醋炙饮片的UPLC指纹图谱
目的:比较不同来源狼毒药材及醋炙前后的质量差异.方法:以岩大戟内酯B为参照物,采用UPLC法,使用Waters ODS色谱柱(100mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈-水梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm,建立了月腺大戟来源的狼毒药材、醋炙饮片及狼毒大戟来源的狼毒药材的UPLC指纹图谱,分析时间不超过20 min.结果:药材或饮片的批次间的相似度均大于0.90,质量稳定;同一来源狼毒醋炙后共有峰减少,且个别成分相对含量有不同程度的升高或降低;狼毒大戟与月腺大戟来源的狼毒药材之间相似度小于0.72,差异显著.结论:该研究为完善狼毒的质量控制与阐述其醋炙机理提供了依据.
