活血通脉胶囊含量测定方法的探讨

目的:采用<中国药典>2010年版一部水蛭项下的含量测定方法对活血通脉胶囊进行了含量测定,为其质量控制建立方法.方法:参照药典方法进行了相应的方法学考察,对制剂和药材的实验结果进行了统计分析.结果:活血通脉胶囊(0.25 g/粒)含量测定均值为0.4 U/粒,水蛭药材为1.6 U·g-1,两种含量均值之间的统计检验t值为0.312.结论:两种含量均值之间不存在显著的统计学差异.以药典现行方法对活血通脉胶囊进行含量测定是可行的,此方法简单、快速,测定结果准确可靠,可用于活血通脉胶囊的质量控制.

两种反胶束体系的水蛭素萃取效果比较

目的 比较溴化十六烷基三甲铵(CTAB)-正丁醇-正辛烷反胶束体系及丁二酸-2-乙基己基酯磺酸钠(AOT)-异辛烷反胶束体系的水蛭素萃取效果.方法 以抗凝血酶活性单位(ATU)的萃取率为指标,用凝血酶滴定改进法测定萃取物的活性,正交实验对盐浓度、pH,搅拌时间、表面活性剂浓度等因素进行考察,优化CTAB-正丁醇-正辛烷体系及AOT-异辛烷体系的水蛭素对照品溶液反胶束萃取工艺,并进行水蛭素粗提液的分离纯化实验.结果 水蛭素CTAB反胶束体系佳萃取工艺为:萃取pH10.0,反萃取pH 2.0,萃取液NaBr浓度30 mmol·L-1,CTAB浓度85 mmol·L-1,反萃取液NaBr浓度32 mmol·L,萃取及反革取均为30℃,萃取及反萃取均搅拌5 min;AOT反胶束体系佳萃取工艺为:萃取pH 2.0,反萃取pH 9.0,萃取液KCI浓度26.5mmol·L-1,AOT浓度30 mmol·L-1,反革取液KCl浓度27.5 mmol·L-1,萃取及反革取均为30℃,萃取搅拌5min,反革取搅拌9 min.ATU回收率前者为82.95%,后者为85.53%;水蛭素粗提液分离纯化实脸两者的ATU回收率分别为80.70%和82.15%、比活性分别为2389.54及2459.98 ATU·mg-1.结论 两种反胶束体系的水蛭素萃取效果都较好,而后者又稍优于前者.

双水相萃取-凝胶色谱联用法提取菲牛蛭中的水蛭素

目的 建立水蛭素的双水相萃取-凝胶色谱联用提取法.方法 以抗凝血酶活性单位(ATU)为指标,在优化双水相萃取工艺条件基础上,建立以广西菲牛蛭消化液为原料的聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取-凝胶色谱联用提取水蛭素新工艺.结果 在所考察的实验范围内,水蛭素对照品双水相萃取佳工艺条件是:PEG 2000、( NH4)2SO4、NaCl质量分数依次为22％、20％、0.04％,萃取液温度35℃、pH 6.0；萃取物经凝胶色谱除杂以后,得到纯度较高的产品.实验建立的提取工艺处理水蛭素对照品ATU回收率达到81.92％,粗提液分离纯化及小规模工艺放大实验ATU回收率分别为80.34％、80.36％.所获产品比活性达到3 210.27 ATU·mg-1、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳及光谱扫描结果与水蛭素对照品相同.结论 双水相萃取-凝胶色谱联用提取水蛭素效果较好.

谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素抑制血栓形成的实验研究

目的 观察新型水蛭素衍生物谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素在体内外的抗栓作用.方法 通过发色底物法体外检测谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素被凝血因子Xa裂解前后的抗凝血酶活性变化,同时通过大鼠颈动脉血栓模型和大鼠后腔静脉血栓模型,进一步验证谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素在体内的抗栓效果及其低出血的特点.结果 体外实验显示,谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素只有被凝血因子裂解后,才产生抗凝血酶活性.大鼠颈动脉血栓模型和大鼠后腔静脉血栓模型实验结果显示,动物给予谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素后,血栓形成时间明显延长,血栓质量显著减小；同时对凝血参数影响较弱,动物出血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间明显低于阳性对照药水蛭素和低分子肝素.结论 新型抗凝蛋白谷氨酸-脯氨酸-精氨酸-水蛭素对动、静脉血栓的形成有明显的抑制作用,且出血副作用小于水蛭素和低分子肝素,为其进一步临床实验提供了重要的参考依据.

水蛭素基础及临床研究发展状况

目的综述水蛭素基础及临床研究发展状况.方法依据近年来国内外文献,进行分析、归纳和总结.结果与结论水蛭素(hirudin)是迄今发现的活性强的特异性天然凝血酶抑制剂,通过与凝血酶特异性结合而产生强有力地抑制血液凝固的作用,在抗栓抗凝方面应用广泛,药物开发前景较为广阔.

中药挥发油对水蛭素经鼻给药的影响研究

目的 以水蛭素为模型药物,探讨中药挥发油对蛋白/多肽类药经鼻黏膜吸收的影响,并考察中药挥发油的鼻纤毛毒性.方法 用离体蟾蜍上颚黏膜模型,评价水蛭素及中药挥发油的鼻纤毛毒性;以同位素示踪法测定水蛭素,以离体猪鼻黏膜Valia-Chien水平扩散池法与在体大鼠鼻腔灌流实验,考察部分中药挥发油对水蛭素透鼻黏膜吸收的影响.结果 离体实验结果表明,3%冰片和3%薄荷油对水蛭素鼻黏膜吸收促进作用较显著;在体实验结果表明,3%冰片和3%薄荷油组水蛭素的血药浓度显著高于阴性对照组,3%冰片和3%薄荷油组水蛭素的肾脏分布显著高于阴性对照组及其他实验组.纤毛毒性实验结果显示,中药挥发油对离体蟾蜍上颚黏膜纤毛影响由小到大的顺序为:1%冰片<1%薄荷油<3%冰片<1%石菖蒲油<1%细辛油<5%冰片<3%石菖蒲油<5%细辛油<5%薄荷油<5%石菖蒲油<3%细辛油<3%薄荷油.结论 3%薄荷油和3%冰片对水蛭素透鼻黏膜吸收有较显著促进作用;中药挥发油对离体蟾蜍上颚黏膜纤毛均有不同程度的影响.但纤毛运动相对百分率大于60%,毒性较小.

凝血酶直接抑制剂--比伐卢定

FDA于2000年12月15日批准了Medicines公司的抗凝新药比伐卢定(bivalirudin, AngiomaxTM)NDA No.20-873在美国上市.药用其注射剂,抗凝成分是水蛭素衍生物(片断),系一合成20肽,相对分子质量2 180.结构式为Phe-Pro-Arg-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Asn-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu.

水蛭素对荷肝癌H22小鼠的抑瘤作用

目的:观察水蛭素对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.方法:小鼠右前腋窝下皮下种瘤造成实体瘤模型,将40只小鼠随机抽样分为4组,水蛭素高剂量和水蛭素低剂量组、氟尿嘧啶组及模型对照组,每组10只.治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,用药14 d后取瘤称重,计算抑瘤率,并计算肝/体比、肾/体比、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标.结果:水蛭素高、低剂量组对小鼠H22肝癌细胞均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为37.63％、23.71％,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01、P＜0.05),水蛭素高、低剂量组与氟尿嘧啶组比较,肝/体比、肾/体比、脾脏指数均有显著性差异,有统计学意义(P＜0.05),经治疗后水蛭素各组小鼠与模型对照组及治疗前比较体重变化不明显(P＞0.05).结论:水蛭素对小鼠H22肝癌细胞有明显的抑制作用,同时对小鼠重要器官可能具有一定的保护作用.

水蛭素对小鼠H22肝癌细胞Histone H1表达的影响

目的:观察水蛭素对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其作用机制.方法:接种H22肝癌细胞于小鼠右腋下,形成实体瘤模型.将40只小鼠随机抽样分为4组,盐水对照组(A组)、氟尿嘧啶(5-Fu)组(B组)、水蛭素高剂量组(C组)、水蛭素低剂量组(D组),每组10只.连续用药14 d,次日处死取瘤称重,计算抑瘤率,免疫组化技术检测Histone H1的表达.结果:B、C组对小鼠肝癌细胞的生长抑制率分别为52.4％、37.98％.Histone H1在B、C、D组中均呈阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:水蛭素对肝癌细胞有抑制作用,其作用机制可能与影响Histone H1参与调控基因表达有关.

活血通脉胶囊治疗糖尿病神经病变临床研究

目的观察活血通脉胶囊治疗糖尿病神经病变的疗效及不良反应.方法将34例糖尿病合并周围神经病变的患者随机分为2组.治疗组16例,予活血通脉胶囊4粒/次,每日3次;对照组18例,予维生素B120 mg/次、腺苷辅酶B12 500μg/次,每日3次.均口服4周.结果治疗组总有效率87.50%,对照组有效率44.40%,两组比较有显著性差异(P＜0.05).正中神经和腓总神经运动传导速度(MCV),正中神经和腓浅神经感觉传导速度(SCV)4项神经传导速度,治疗组治疗前后比较有显著性差异(P＜0.05).药物治疗过程中未见明显不良反应.结论活血通脉胶囊是治疗糖尿病周围神经病变有效且安全的药物.

水蛭素的基础研究现状及临床应用展望

水蛭素(hirudin)是从水蛭中提取的一种抗凝血蛋白质.水蛭属于高度特化的环节动物,始载于我国<神农本草经>,俗称蚂蟥.中国药典收入了蚂蟥、日本医蛭、柳叶蚂蟥3种.中医认为它有破血、逐瘀、通经、利水道之功效.1955年,Markwardt[1]从医用水蛭咽周腺体中成功地分离出水蛭素纯品.

脉血康治疗精液不液化

目的 探讨水蛭对精液不液化的治疗作用.方法 具有正常性生活而未生育患者36例,全组病例精液常规捡查结果均为精液不液化或精液液化不全,全组均口服单-水蛭焙制的肠溶性胶囊-脉血康0.75mg,1d3次,服用40～50d.结果 全组病例均禁欲5d后复查精液常规,有33例占91.6%(33/36)液化时间为20～40min,有2例占5.5%(2/36)液化时间为50～60min,总有效率97.2%(35/36),只有1例液化时间由精液不液化变为液化不全,占2.7%(1/36).结论 用以水蛭焙制的脉血康胶囊对精液不液化具有良好的疗效.

脉血康胶囊的应用研究

目的 评价脉血康胶囊治疗临床多种适应症的有效性和安全性.方法 分析该药的有效成分和作用机制,列举实例,参阅相关研究.结果与结论 脉血康胶囊独特的药理机制使其具有广泛的适应症,临床用于多种疾病的治疗,且疗效确切、安全稳定、不良反应小.

不稳定型心绞痛及非Q波梗死的治疗进展

粥样斑块破裂后的血栓形成是不稳定型心绞痛和急性心肌梗死等急性冠状动脉综合征发生的基础.业已表明,阿司匹林和肝素的联合应用可明显减轻症状、无症状心肌缺血和心肌梗死的发生,同时亦可减少上述疾病引起的死亡事件.然而,肝素和阿司匹林都有应用上的限制.由于急性心肌缺血后的高凝状态常持续数月,因此,长期的抗凝治疗可能更为有益.而肝素往往需要频繁监测凝血状况并调整用药剂量,使其仅限于医院监护室中短期应用.

水蛭素在深静脉血栓治疗中的作用

水蛭素是凝血酶特异性抑制剂,能与血浆中游离的凝血酶和纤维蛋白结合的凝血酶结合,以防止血栓形成.深静脉血栓是外科手术后严重和常见的并发症,并可导致肺栓塞和长期的血栓后综合征.本文综述了水蛭素在深静脉血栓治疗中的作用.

水蛭素在急性冠状动脉综合征防治中的作用

急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)是从不稳定型心绞痛(unstable angina pecforis,UAP)到Q波心肌梗死(Q-wave myocardial infarction)的一组病症.可分为ST段抬高的心肌梗死和无ST段抬高(主要表现为ST段下降和/或T波倒置)的不稳定型心绞痛和无Q波心肌梗死,后二种情况又可统称为不稳定型冠状动脉疾病.

天然水蛭素对肌腱成纤维细胞抑制作用的体外研究

目的:通过体外实验研究天然水蛭素对兔肌腱成纤维细胞的抑制作用及三种相关细胞因子表达水平的变化,揭示天然水蛭素预防肌腱粘连的作用及相关途径.方法:体外分离培养兔肌腱成纤维细胞,采取MTT法检测不同浓度天然水蛭素对兔肌腱成纤维细胞增殖活性的影响;运用ELISA法测定兔肌腱成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达含量.结果:与未加水蛭素组(0 U/mL)比较,天然水蛭素干预组(1.50、3.00、6.00 U/mL)能够显著抑制兔肌腱成纤维细胞生长;并正向调节bFGF与MMP-2含量表达,负向调节TGF-β1含量表达(P<0.05或<0.01).结论:天然水蛭素能够显著抑制体外培养的兔肌腱成纤维细胞的增殖,且具有一定的浓度依赖性;通过降低兔肌腱成纤维细胞TGF-β1的表达并相应提高bFGF与MMP-2的表达可能是其基于TGF-β1/Smads信号通路发挥抗纤维化作用的一种有效途径.

人血管内皮生长因子165与嵌合水蛭肽融合基因防治兔颈动脉损伤后再狭窄的实验研究

目的 观察人血管内皮生长因子165(hVEGF165)与嵌合水蛭肽融合基因(fused hirudin,FH)对兔颈动脉损伤后再狭窄的防治作用,为再狭窄的基因治疗提供新的思路.方法 通过基因重组构建hVEGF165与FH的融合基因(hVEGF165-FH).制备兔颈总动脉血管成形术损伤后再狭窄模型,损伤局部转染该融合基因作为治疗组.同时局部转染pcDNA3.0空质粒作为对照组,通过血管造影、病理分析等观察融合基因是否抑制兔颈总动脉血管成形术后再狭窄.结果 局部转染融合基因后1周和3周,造影显示治疗组血管狭窄程度与对照组比较显著减轻;病理分析显示.治疗组较对照组管腔狭窄程度显著减轻(1周:11.50% vs 33.25%;3周:19.75% vs 52.25%,P＜0.05);治疗组较对照组内膜增生程度(内膜/中膜,I/M)显著减轻(1周:0.12 vs 0.50;3周:0.35 vs 1.07,P＜0.05).同时融合基因对血管损伤处的血栓形成有抑制作用,但对系统凝血指标无影响,无全身出血并发症.结论 融合基因hVEGF165-FH可有效地预防兔颈动脉成形术后再狭窄.以内皮修复为基础,构建双靶点甚至多靶点的融合基因可能是未来再狭窄防治的一个有效策略.

缺氧诱发因子1-α和血管内皮生长因子在Wilms'瘤中的联合表达/人前列腺癌细胞缺乏低密度脂蛋白受体及其调节剂SREBR2的反馈调节/聚乙二醇-水蛭素治疗慢性肾衰病人的药效学和药物动力学

水蛭素抗痛风作用及其机制研究

目的 探讨水蛭素抗痛风作用及其机制.方法 利用次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,尿酸钠诱导大鼠急性痛风性炎症模型,观察水蛭素对急性高尿酸血症尿酸水平及其诱导炎症的影响;利用氧嗪酸钾诱导小鼠慢性高尿酸血症模型,观察水蛭素对慢性高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿素氮水平及血清、肝脏黄嘌呤氧化酶活性,肾脏的病理学改变、C-反应蛋白(CRP)水平及葡萄糖转运体9(GLUT9)表达的影响.结果 水蛭素可显著降低次黄嘌呤引起的高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,显著抑制由尿酸钠引起的大鼠足跖急性肿胀;可显著降低由氧嗪酸钾引起的慢性高尿酸小鼠血清高尿酸水平,降低血清尿素氮水平,显著抑制GLUT9的表达,减轻肾脏病理学损伤.结论 水蛭素具有显著的抗高尿酸血症及抗痛风作用,其机制可能与保护肾脏作用及调节GLUT9表达有关.