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微小RNA-1调控自发性高血压大鼠肥厚左心室心肌组织Kir2.1蛋白的表达
目的 观察微小RNA-1(miRNA-1)调控自发性高血压大鼠(SHR)肥厚左心室心肌组织中内向整流钾通道2.1(Kir2.1)蛋白表达的变化及其意义.方法 17周龄雄性SHR 16只随机分为干预组(n=6)、阴性对照组(n=5)和空白对照组(n=5),通过脂质体瞬时转染技术,干预组由尾静脉注射miRNA-1抑制剂(Anti-miR-1),两对照组分别注入miRNA-1抑制剂阴性对照和无血清培养基混合物,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学法及Westem b1ot等技术,检测大鼠左心室心肌组织miRNA-1及Kir2.1蛋白表达水平的改变.结果 与对照组比较,miRNA-1基因沉默后,干预组左心室心肌miRNA-1表达水平降低了(40±8)%(P＜0.05),Kir2.1蛋白表达水平增高(0.50±0.10比0.22±0.09,0.22±0.17,均P＜0.05).结论 抑制miRNA-1表达能使SHR肥厚左心室心肌组织Kir2.1蛋白水平升高.
关键词： 高血压 微小RNA-1 自发性高血压大鼠 左心室肥厚 内向整流钾通道2.1 -
羟基红花黄色素A通过抑制微小RNA-1表达对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用
目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对H2 O2诱导的心肌细胞氧化损伤的保护作用,进一步观察该作用与微小RNA-1(miR-1)之间的关系.方法 以细胞存活率为指标筛选HSYA的适浓度.将细胞分为空白组、模型组、羟基红花黄色素A干预组,荧光显微镜检测活性氧(ROS)水平、流式细胞仪检测凋亡率、实时荧光PCR法检测miR-1表达水平,研究HSYA对H2 O2氧化损伤的心肌细胞的保护作用.在此基础上,研究miR-1模拟物转染心肌细胞情况下H2 O2诱导损伤后miR-1与ROS水平,及HSYA对细胞损伤的保护作用.结果 与空白组比较,模型组ROS水平升高,凋亡率增加,miR-1表达上调,差异有统计学意义.与模型组比较,羟基红花黄色素A干预组ROS水平降低,凋亡率降低,miR-1表达下调,差异有统计学意义.H9c2细胞被转染miR-1模拟物后,miR-1水平升高,ROS生成增多,与H2 O2诱导的miR-1水平升高和ROS生成增多呈叠加效应,而HSYA对其叠加升高的miR-1及ROS水平有下调作用.结论 HSYA能够降低H2 O2诱导的H9 c2细胞ROS生成和细胞凋亡率,对心肌细胞氧化损伤起保护作用,其机制可能与下调miR-1表达水平有关.
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心肌组织特异性微小RNA-1在ST段抬高型急性心肌梗死患者尿中含量的变化研究
目的 观察心肌组织特异性表达的微小RNA-1(microRNA-1,miR-1)在ST段抬高型急性心肌梗死(STEAMI)患者尿中的变化,探讨尿miR-1在STEAMI诊断中的潜在作用.方法 20例STEAMI患者在发病12h内取尿,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1含量,同时检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平；以20例健康自愿者作为对照.结果 STEAMI患者血cTnⅠ(μg/L)、CK-MB(μg/L)和尿miR-1的含量[阈值循环(Ct)值,Ct值越低,表示含量越高]均明显高于健康对照组(血cTnⅠ:19.27±7.53比0.02±0.01,血CK-MB:93.82±12.30比0.86±0.63,尿miR-1:45.50±4.21比52.63±4.41,P＜0.05或P＜0.01).当STEAMI患者血CK-MB ＜300 μg/L及cTnⅠ＜50 μg/L时,尿miR-1含量与CK-MB、cTnⅠ值呈直线相关(尿miR-1的Ct值与血CK-MB:r=-0.81,P＜0.01；尿miR-1的Ct值与血cTnⅠ:r=-0.63,P＜0.05).结论 尿miR-1可作为STEAMI早期诊断的新型敏感生物学标志物.
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循环微小RNA-1对胸痛患者发生 急性心肌梗死的早期诊断价值
目的：评估循环微小RNA-1（miR-1）早期诊断急性心肌梗死（AMI）的诊断价值。方法采用前瞻性队列研究方法，入选2012年11月至2015年6月无锡市第二人民医院就诊的所有胸痛患者，根据AMI诊断标准将患者分为AMI组与非AMI组；以同期健康体检者作为健康对照组。取患者发病3h内静脉血，通过实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血浆miR-1含量；采用电化学放光法检测心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平。Spearman秩相关法分析AMI患者血浆miR-1水平与cTnI、CK-MB的相关性；受试者工作特征曲线（ROC）分析血浆miR-1、cTnI、CK-MB对AMI的早期诊断效能。结果 AMI组127例；非AMI组107例，其中心绞痛82例，肺栓塞2例，主动脉夹层3例，急性心包炎2例，心肌炎3例，急性心力衰竭13例，消化性溃疡2例；健康对照组90例。AMI组与非AMI组性别、高脂血症方面无差异。AMI组血浆miR-1、cTnI、CK-MB较非AMI组和健康对照组升高〔miR-1（2-ΔΔCt）：4.32±2.60比1.44±0.75和0.98±0.18；cTnI（μg/L）：3.23（0.63，10.70）比0.02（0.00，0.17）和0.00（0.00，0.00）；CK-MB（U/L）：32.40（14.20，95.40）比14.40（11.20，17.10）和8.90（8.28，9.50），均P＜0.01〕。AMI患者血浆miR-1与cTnI、CK-MB均呈显著正相关（r1＝0.395、r2＝0.490，均P＜0.000）。ROC曲线分析显示，miR-1诊断AMI的ROC曲线下面积（AUC）为0.905〔95%可信区间（95%CI）＝0.860～0.950，P＝0.000〕，敏感度为86.6%，特异度为95.4%；cTnI的AUC为0.908（95%CI＝0.870～0.946，P＝0.000），敏感度为81.9%，特异度为95.9%；CK-MB的AUC为0.795（95%CI＝0.736～0.854，P＝0.000），敏感度为63.0%，特异度为92.9%。结论血浆miR-1可早期诊断AMI，其诊断效能优于CK-MB，且与cTnI相当，可以提供cTnI以外的诊断信息，二者联合应用可能有助于提高AMI早期诊断的准确性。
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miR-1与糖尿病心肌肥大的相关性
目的 探讨糖尿病心肌病心肌肥大与miR-1表达量之间的关系.方法 给C57BL/6小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ),建立糖尿病心肌病心肌肥大模型,8周后取心脏组织并称其重量,提取RNA并逆转录,用qRT PCR检测miR-1的表达,检测糖尿病模型小鼠心脏组织中的相关靶基因BNP和ANP并确定糖尿病心肌病心肌肥大模型建立成功.培养大鼠心肌细胞H9C2细胞,对细胞进行高糖和低糖处理,24h后收集细胞,提取RNA并逆转录,用qRT PCR检测miR-1的表达.收集正常人血清,1型和2型糖尿病病人血清以及1型糖尿病心肌肥大病人血清,检测血清中miR-1的表达.Western blot检测高糖和低糖处理24h的H9C2细胞中p-Akt和AKT的表达.向H9C2细胞中加入Akt抑制剂LY294002,qRT PCR检测miR-1的表达量.结果 qRT PCR检测发现糖尿病心肌肥大小鼠心脏组织中的miR-1的表达降低,高糖处理的H9C2细胞中miR-1的表达降低,1型糖尿病心肌肥大病人血清中的miR-1的表达降低.Western blot检测发现高糖处理的H9C2细胞中p-Akt和AKT的表达升高,当加入Akt抑制剂LY294002时,qRT PCR检测发现miR-1的表达量升高.结论 糖尿病心肌肥大时,miR-1起到了关键作用,并且糖尿病心肌肥大的心脏组织中PI3K-Akt信号通路明显抑制了miR-1的表达.
关键词： 糖尿病心肌肥大 PI3K-Akt信号通路 微小RNA-1 -
miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究
目的 探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用.方法 脂质体转染寡核苷酸片段NC-mimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标.结果 miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P＜0.01).miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P＜0.05).miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P＜0.01).miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P＜0.01).与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(=19.28,P＜0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P＜0.01;t =23.14,P＜0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P＜0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(=6.78,P＜0.01;t =7.94,P＜0.01).结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力.
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胃癌外体(exosome)内miRNA-1的检测分析
目的 检测胃癌细胞系来源外体(exosome)及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义.方法 采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析.结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803(6.51±0.41)和SGC-7901(14.81±1.30)中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1 (1.05±0.25),差异有统计学意义(t分别为11.26、10.38,P均＜0.01);而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平(49.98±11.77和28.68±4.66)显著高于GES-1来源exosome(1.00±0.02)差异有统计学意义(t分别为4.162、5.942,P均＜0.01);25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110(0.070,4.307)]平均表达水平高于癌旁组织[1.149(1.110,2.075)],差异有统计学意义(Z=-1.897,P＜0.05).miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130(0.151,12.720)]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704(0.077,7.243)]明显增高(Z=-2.407,P＜0.05),且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.723 0,95％可信区间(CI)为0.627 0 ～0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66％,特异性为68％.结论 胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物.
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miR-1通过调控神经嵴细胞增殖和凋亡影响颌骨发育
目的：研究微小RNA?1（ miR?1）在斑马鱼胚胎发育过程中对神经嵴的影响。方法：通过显微注射miR?1反义核苷酸（ MO）抑制miR?1的功能，在胚胎发育96 h时，观察下颌骨的发育，软骨染色观察颅面部软骨的发育状况。 TUNEL和磷酸化组蛋白H3（ pH3）免疫荧光观察神经嵴细胞的凋亡和增殖。结果：在miR?1被敲低后，下颌发育不足，软骨染色显示下颌骨和舌骨形态结构异常。神经嵴细胞的凋亡异常增多，增殖能力降低。结论：miR?1参与调节了颅面部神经嵴细胞的发育，miR?1对于神经嵴细胞的活性具有调控作用，导致颅面部发育过程中神经嵴来源的下颌骨发育缺陷。
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紫杉醇对人肺癌细胞株耐药性的作用
目的 探讨紫杉醇对人肺癌细胞株耐药性的影响及可能机制.方法 紫杉醇作用于肺癌细胞株H1975、H820、A549和PC-9 48 h后,采用细胞计数试剂盒8与流式细胞术分别检测细胞增殖的抑制率与凋亡率,Western blot法检测紫杉醇对肺癌细胞中MET、p-AKT、生存素蛋白表达的影响,RT-PCR检测紫杉醇作用前后miR-1表达的变化.结果 紫杉醇对4株肺癌细胞生长有明显的抑制作用,并能促进细胞凋亡.紫杉醇能抑制H1975、PC-9和H820细胞中MET、p-AKT、生存素蛋白表达,而上调miR-1基因的表达.结论 紫杉醇上调H1975、PC-9和H820细胞miR-1的表达,从而可能导致MET、p-AKT、生存素表达水平的降低.
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拮抗内源性孤啡肽可通过下调 microRNA-1途径抑制大鼠再灌注性心律失常
目的 研究内源性孤啡肽(N/OFQ)对大鼠再灌注性心律失常(RA)的影响,以及microRNA-1(miR-1)在其中的作用.方法 将SD大鼠随机分为3组,即假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)及孤啡肽受体拮抗剂(UFP-101)预处理组(U+I/R组),每组8只.通过结扎左冠状动脉前降支制备大鼠缺血/再灌注模型,记录各组大鼠再灌注期间心律失常的发生情况并对其进行评分;采用qRT-PCR法检测miR-1、GJA1及KCNJ2基因表达水平;采用Western blot法检测Cx43、kir2.1蛋白表达情况.结果 拮抗内源性N/OFQ可明显降低大鼠RA及致心律失常评分(P<0.01).qRT-PCR及Western blot结果提示,与Sham组相比,I/R组miR-1表达增多(P<0.01),而Cx43及其mRNA表达下降(P<0.05),kir2.1表达下降(P<0.01);与I/R组比较,U+I/R组miR-1表达下降(P<0.05),Cx43及kir2.1表达增多(P<0.05).结论 内源性N/OFQ可上调miR-1,使Cx43及kir2.1蛋白表达受到抑制,从而导致缺血/再灌注性心律失常.
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miR-1／133对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞离子通道表达的影响
目的：探讨 miR-1／133是否参与病毒性心肌炎心肌细胞钾离子、钙离子通道基因表达的调节。方法建立Balb／c 小鼠急性病毒性心肌炎模型。将小鼠分为对照组、心肌炎组、心肌炎＋miR-1／133mimics 组、心肌炎＋miR-1／133 NC 组，每组10只。采用苏木精－伊红染色法观察心肌形态学改变；采用 qRT-PCR 法检测心肌中 miR-1、miR-133及 Kcnd2、Irx5、Kcnj2和α1c 的相对表达量；采用 Western blotting 法检测心肌中蛋白 Kv4．2、Kir2．1、Cav1．2的相对表达量。结果苏木精－伊红染色显示对照组心肌细胞排列整齐，间质无炎性细胞浸润；心肌炎组与心肌炎＋miR-1／133 NC 组心肌细胞水肿、排列紊乱，炎性细胞浸润间质；心肌炎＋miR-1／133mimics 组心肌细胞排列较整齐，无细胞水肿，间质少量炎性细胞浸润。与对照组相比，心肌炎组与心肌炎＋miR-1／133 NC 组心肌miR-1、miR-133及 Kcnd2、Kcnj2表达下调，蛋白 Kv4．2、Kir2．1的表达下调（P ＜0．01）；Irx5、α1c 及蛋白 Cav1．2表达均上调（P ＜0．01）；心肌炎＋miR-1／133 mimics 组较心肌炎组与心肌炎＋miR-1／133 NC 组相比，miR-1、miR-133及 Kcnd2、Kcnj2表达上调，蛋白 Kv4．2、Kir2．1表达上调（P ＜0．05），Irx5、α1c 及蛋白 Cav1．2表达均下调（P ＜0．01）。结论miR-1／133参与病毒性心肌炎心肌细胞钾离子和钙离子通道基因表达的调节。
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血清miR-1、miR-21在冠心病患者PCI术后病变冠状动脉再狭窄预测中的应用
目的 探讨血清微小RNA-1(miR-1)、微小RNA-21(miR-21)在冠心病患者经皮冠状动脉介入手术(PCI)术后再狭窄预测中的应用价值.方法 103例行PCI的冠心病患者根据术后6个月内扩张部位发生再狭窄情况分为再狭窄组(42例)和未狭窄组(61例),另选30例同期健康体检者作为对照组,采用RT-PCR法检测3组血清miR-1、miR-21;血管内超声检查测量外弹力膜内横截面积(EEM)、小管腔面积(MLA)、斑块面积(PLA),计算狭窄程度(RS);Pearson积矩相关分析法分析血清miR-21、miR-21与血管内超声检查相关指标的关系;用ROC曲线下面积(AUC)评估血清miR-1、miR-21预测冠心病患者术后再狭窄的价值.结果 与对照组比较,其余两组miR-t表达降低,miR-21表达升高;与未狭窄组比较,再狭窄组miR-1表达降低,miR-21表达升高(P均＜0.05).与未狭窄组比较,再狭窄组EEM、MLA减少,PLA、RS增加(P均＜0.05).狭窄组患者血清miR-1与miR-21表达呈负相关,miR-1与EEM、MLA呈正相关,miR-1与PLA、RS呈负相关;血清miR-21表达与EEM、MLA呈负相关,与PLA、RS呈正相关;P均＜0.05.当miR-1的AUC为0.770,此时佳截断值为0.36,诊断再狭窄的灵敏度、特异度、准确性分别为0.82、0.87、0.83;当miR-21的AUC为0.750,此时佳截断值为0.79,诊断再狭窄的灵敏度、特异度、准确性分别为0.79、0.85、0.80;miR-1联合miR-21的AUC为0.928,诊断再狭窄的灵敏度、特异度、准确性分别为0.89、0.93、0.87.结论 血清miR-1、miR-21与冠心病患者PCI术后病变冠状动脉再狭窄密切相关,早期联合检测可预测冠心病PCI术后再狭窄.
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微小RNA-1对胃癌细胞中血管生成相关因子表达的影响
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-1在胃癌发生过程中的作用.方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人胃癌细胞株SGC7901和BGC823中miR-1的表达.利用瞬时转染将表达miR-1的质粒转入胃癌细胞中,检测miR-1对胃癌细胞增殖的影响,利用Western blot检测胃癌细胞中过表达的miR-1对血管生成相关因子血管内皮生长因子(VEGF)-A和EDN-1的表达影响,双报告基因用于分析miR-1与VEGF-A和EDN1 3’端非编码区(3'UTR)的相互作用位点.结果 与正常胃黏膜上皮细胞GES-1比较,胃癌细胞中miR-1表达显著下调(P=0.000),miR-1通过与VEGF-A和EDN-1 3'UTR的特异位点结合,抑制VEGF-A和EDN-1的蛋白表达水平,从而抑制胃癌细胞的增殖.结论 miR-1通过抑制人胃癌中的血管生成相关因子的表达从而起到抑制肿瘤的作用.
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下调微小RNA-1表达对人肝癌血管内皮细胞生物学行为的影响
目的 通过构建慢病毒介导的微小RNA(miRNA)-1-小干扰RAN (siRNA),观察下调miR-1表达对人肝癌血管内皮细胞(TEC)生物学行为的影响.方法 针对目标序列合成特异性siRNA干扰片段并克隆入慢病毒载体,将重组miRNA-1-siRNA-GV159转染TEC,实验分为3组:(1)下调组(miRNA-1-siRNA,MD组);(2)阴性对照组(NC组);(3)空白对照组(CON组).分别用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞的凋亡及细胞周期,划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 MTT结果显示MD组细胞在转染miRNA-1-siRNA-GV159后的第1、2、3、4、5天5个时间点均表现出吸光度值降低,与NC组及CON组比较差异有统计学意义(P＜0.05);流式细胞仪检测凋亡结果显示CON、NC、MD组凋亡率分别为(2.03±0.30)％、(2.18±0.15)％、(6.32±0.33)％,MD组细胞凋亡率比其他两组明显明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);而细胞周期检测结果显示3组之间差异无统计学意义(P＞0.05);划痕实验结果显示划痕12h后CON、NC、MD3组细胞的迁移距离分别为(270.6 ±44.5)、(299.5 ±28.7)、(198.4 ±49.6)μm,MD组和其他两组比较迁移能力明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 下调miRNA-1表达可抑制TEC的增殖能力,增加TEC的凋亡并降低其迁移能力.
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MicroRNA-1的心律失常调控作用
微小RNA (miRNA)是近年来新发现的一类小分子非编码RNA,其通过调节靶基因mRNA的稳定性或抑制翻译过程而发挥作用.miR-1在人类心脏中表达为丰富,与心律失常的发生关系密切,有大量文献报道可通过调节其表达而上调或下调多种心脏电活动相关离子通道或蛋白水平来调控心律失常.本文就miR-1调控心律失常的作用机制作一综述.
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病毒性心肌炎患儿血清miR-1和miR-146b的表达水平及临床意义
目的 探讨病毒性心肌炎(VM)患儿血清微小RNA-1(miR-1)和微小RNA-146b(miR-146b)的表达水平及临床意义.方法 选取本院86例VM患儿作为研究对象,分为轻度组(49例)与重度组(37例),同时选取正常儿童52人作为对照组,对比不同组血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)、心肌钙蛋白I(cTnI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、T淋巴细胞亚群变化.采用RT-PCR法测定血清中miR-1、miR-146b mRNA表达,Logistic多因素分析病毒性心肌炎发生危险因素;Pearson相关性分析miR-1、miR-146b与临床指标的相关性.结果 与对照组比较,VM患儿CK-MB、LDH1、cTnI、TNF-α、IL-1β、CD8、miR-146b mRNA升高,随着病情加重,其水平逐渐升高(P<0.05);CD3、CD4、CD4/CD8、LVEF、miR-1 mRNA水平降低,随着病情加重,其水平逐渐降低(P<0.05).Logistic多因素回归性分析显示,CK-MB、cTnI、CD4/CD8、LVEF、miR-1、miR-146b是病毒性心肌炎发生的独立危险因素.miR-1与CK-MB、cTnI呈显著性负相关,与LVEF呈显著性正相关(P<0.05);miR-146b与CK-MB、cTnI呈显著性正相关,与LVEF呈显著性负相关(P<0.05).结论 VM患儿血清miR-1表达降低、miR-146b表达升高,且与心肌损伤相关,通过测定其水平的变化有助于判定VM患儿病情及预后.
关键词： 病毒性心肌炎 微小RNA-1 微小RNA-146b -
益母草碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化和miR-1表达的影响
目的:探讨益母草碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌纤维化和微小RNA-1(miR-1)表达的影响.方法:取10只SD大鼠作正常对照组;取另80只SD大鼠作为实验鼠,连续2周腹腔注射ISO诱导心肌纤维化动物模型.造模成功后将实验鼠随机分为5组:模型组,益母草碱低(7.5 mg·kg-1·d-1)、中(15 mg·kg-1·d-1)和高(30 mg·kg-1·d-1)剂量组,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂(0.3 mg·kg-1·d-1)组.连续给予相应药物腹腔注射2周后,以透射电镜观察左心室肌组织超微结构;Masson染色观察心肌纤维化程度;免疫组织化学法观察I型胶原和III型胶原的表达;酶联免疫吸附法检测左心室肌组织内皮素1(ET-1)和血管紧张素II(Ang II)含量;real-time PCR法检测左心室肌miR-1和ET-1 mRNA的表达水平;Western blot法检测p38 MAPK、β-肌球蛋白重链(β-MHC)及α-肌球蛋白重链(α-MHC)蛋白表达水平.结果:与模型组比较,高剂量益母草碱能明显改善左心室肌超微结构,降低心肌胶原容积分数(CVF)及I型胶原和III型胶原蛋白表达(P<0.05),减少左心室肌ET-1和Ang II含量(P<0.05),上调miR-1和α-MHC的蛋白表达水平(P<0.05),下调ET-1 mRNA及p38 MAPK和β-MHC蛋白表达水平(P<0.05).结论:益母草碱可抑制ISO诱导的大鼠心肌纤维化,其机制可能与影响miR-1的表达,抑制ET-1/p38 MAPK信号通路有关.
关键词： 益母草碱 心肌纤维化 微小RNA-1 内皮素1 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
微小RNA-1表达水平与高血压左心室肥厚的关系
目的 探讨微小RNA(microRNA,miRNA)与高血压左心室肥厚的相关性.方法 选取50例高血压患者及50例高血压左心室肥厚患者,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血浆中miRNA-1表达水平,分析miRNA-1表达水平与左心室相关指标的相关性,应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价miRNA-1对高血压左心室肥厚的预测价值.结果 高血压左心室心肥厚组室间隔厚度、左心室壁厚度、左心室舒张末期内径、左心室质量指数及miRNA-1表达水平均显著高于高血压组,差异有统计学意义(P<0.05).miRNA-1表达水平与室间隔厚度(r=0.382,P=0.002)、左心室壁厚度(r=0.411,P=0.001)、左心室舒张末期内径(r=0.285,P=0.023)、左心室质量指数(r=0.492,P=0.000)呈正相关.miRNA-1预测高血压左心室肥厚的ROC曲线下面积为0.937(95%CI:0.875~0.962,P<0.05).结论 miRNA-1表达与高血压左心室肥厚发生、发展密切相关,miRNA-1可能是高血压左心室肥厚特异性诊断的潜在标志物.
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丙泊酚后处理对体外循环心脏直视手术患者血microRNA－1的影响
目的：探讨丙泊酚后处理对体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB ）瓣膜置换术患者血微小RNA-1（microRNA-1，miR-1）表达的影响。方法：将40例行换瓣术的患者，随机均分为两组。 A组在主动脉开放后给予血浆靶控浓度为1 mg／L的丙泊酚，B组常规CPB麻醉。检测T1（术前5 min）、T2（CPB后60 min）和T3（CPB后24 h）血miR-1、肌钙蛋白I（Cardiac troponin-I，cTnI）、肌酸激酶同工酶（Creatine kinase-MB，CK-MB）的含量。结果：T2、T3两时间点，两组miR-1、cTnI、CK-MB均明显高于同组T1，B组miR-1明显高于同时间点A组（P＜0．05）。结论：丙泊酚后处理可降低CPB后60 min、CPB后24hmiR-1的含量。
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体外反搏对AMI患者血浆微小RNA-1表达水平的影响
目的:观察AMI患者血浆微小RNA-1 (miRNA-1)表达情况和体外反搏治疗(ECP)对其水平的影响.方法:将AMI PCI术后患者60例随机分为治疗组和阴性对照组各30例,并纳入门诊健康体检者30名作为健康对照组.3组均于入院时抽血,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测血浆miRNA-1水平.治疗组和阴性对照组给予常规冠心病二级预防药物治疗,治疗组在PCI术后第3周加用ECP,1h/(次·日),每周5次,为期7周；并于ECP治疗后分别测定两组患者血浆miRNA-1表达水平,评估心绞痛症状改善情况,并观察超声心动图心功能各项指标.结果:与健康对照组比较,AMI患者血浆miRNA-1表达水平明显升高(P＜0.05)；ECP治疗7周可使AMI患者血浆miRNA-1含量明显减少(P＜0.05),心绞痛症状明显缓解,超声心动图中收缩和舒张功能指标包括LVEF、收缩末容积、舒张末容积明显优于阴性对照组(P＜0.05).结论:血浆miRNA-1可做为提示AMI患者发病和病情进展的一项新型标志物;ECP可使AMI患者血浆miRNA-1表达水平明显减少,并使AMI患者心功能获得有效改善.
