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羟基红花黄色素A通过抑制微小RNA-1表达对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用
目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对H2 O2诱导的心肌细胞氧化损伤的保护作用,进一步观察该作用与微小RNA-1(miR-1)之间的关系.方法 以细胞存活率为指标筛选HSYA的适浓度.将细胞分为空白组、模型组、羟基红花黄色素A干预组,荧光显微镜检测活性氧(ROS)水平、流式细胞仪检测凋亡率、实时荧光PCR法检测miR-1表达水平,研究HSYA对H2 O2氧化损伤的心肌细胞的保护作用.在此基础上,研究miR-1模拟物转染心肌细胞情况下H2 O2诱导损伤后miR-1与ROS水平,及HSYA对细胞损伤的保护作用.结果 与空白组比较,模型组ROS水平升高,凋亡率增加,miR-1表达上调,差异有统计学意义.与模型组比较,羟基红花黄色素A干预组ROS水平降低,凋亡率降低,miR-1表达下调,差异有统计学意义.H9c2细胞被转染miR-1模拟物后,miR-1水平升高,ROS生成增多,与H2 O2诱导的miR-1水平升高和ROS生成增多呈叠加效应,而HSYA对其叠加升高的miR-1及ROS水平有下调作用.结论 HSYA能够降低H2 O2诱导的H9 c2细胞ROS生成和细胞凋亡率,对心肌细胞氧化损伤起保护作用,其机制可能与下调miR-1表达水平有关.
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甘西鼠尾草对缺氧/复氧H9c2大鼠心肌细胞的保护作用
目的 探究甘西鼠尾草对培养H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制.方法 采用体外细胞培养方法培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤心肌细胞模型,用甘西鼠尾草进行细胞给药,干预细胞生长过程.将培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为6组,分别为缺氧/复氧模型组(hypoxia/reoxygenation,H/R组);正常对照组(control,C组);缺氧/复氧模型+维拉帕米(verapamil)阳性对照组(H/R+V组);缺氧/复氧模型+甘西鼠尾草低、中和高剂量(0.01、0.1和1.0 mg·L-1)干预组(H/R+L、M、H组).使用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率;收集所培养的细胞上清液测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;使用荧光酶标仪,测定能够反映细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平高低的荧光吸光度值.结果 甘西鼠尾草可明显提高心肌细胞存活率,有效减少细胞内LDH漏出量和胞浆内MDA的含量,并降低细胞内ROS水平.结论 甘西鼠尾草对缺氧/复氧损伤心肌细胞具有显著的保护作用,其作用机制可能与其增强细胞清除氧自由基能力、减少脂质过氧化物的产生有关.
关键词： 甘西鼠尾草 H9c2大鼠心肌细胞 缺氧/复氧 -
原子力声显微镜评价大鼠心肌骨架
目的 本研究用原子力声显微镜观察大鼠心肌细胞的细胞骨架,并对声像图进行分析.方法 使用原子力显微镜加声激励对在盖玻片上贴壁生长的H9C2大鼠心肌细胞细胞骨架成像.结果 使用原子力声显微镜可以完整显示H9C2大鼠心肌细胞的细胞膜、细胞核以及清晰显示网状结构的细胞骨架结构(微丝、微管、中间丝).结论 原子力声显微镜可以很好地显示大鼠心肌细胞表面及亚表面的细胞骨架结构,进而为研究病理状态的心肌细胞打下基础.
关键词： 原子力声显微镜 H9c2大鼠心肌细胞 细胞骨架
