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SLE患者外周血T细胞亚群ICOS与CD28共表达水平与疾病的关系
目的观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)病人外周血CD4+及CD8+ T细胞表面可诱导共刺激分子(inducible co-stimulator, ICOS)及CD28共表达水平,探讨ICOS和CD28共表达水平与SLE疾病的关系. 方法采用三色流式细胞术检测SLE病人(n=51)及正常人(n=30)外周血CD4+及CD8+ T细胞表面ICOS与CD28共表达水平,并结合SLE病人疾病活动程度、临床表现等进行分析. 结果与正常人相比,SLE活动期和稳定期病人外周血CD4+ T细胞中仅表达ICOS不表达CD28(即CD28-ICOS+)的细胞比例明显升高,但活动期病人和稳定期病人之间并无差异;活动期病人外周血CD8+ T细胞上同时表达CD28和ICOS的细胞(即CD28+ICOS+细胞)和CD28-ICOS+细胞比例都明显升高;同一SLE病人在疾病活动期CD4+和CD8+ T细胞中CD28+ICOS+的细胞比例和CD8+ T细胞中CD28-ICOS+细胞比例明显高于该病人经过治疗病情稳定时;初发未治疗SLE病人仅CD4+ T细胞中CD28+ICOS+细胞的比例比复发病人明显升高;血清抗dsDNA抗体(+)病人和血清免疫球蛋白含量(IgG、IgA和IgM中任何一种)异常升高的病人外周血CD4+ T细胞中CD28+ICOS+细胞和CD8+ T细胞中CD28-ICOS+细胞比例分别明显高于血清抗dsDNA抗体(-)和血清免疫球蛋白含量正常的病人. 结论 CD28和ICOS在SLE病人外周血CD4+和CD8+ T细胞上共表达水平与SLE疾病的活动程度、病程及临床表现等存在一定的关联.
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CHB患者CD4+ T细胞ICOS表达及其与干扰素治疗的相互关系
目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者经干扰素治疗前后外周血CD4+T细胞上可诱导共刺激分子( inducible costimulator,ICOS)表达水平的变化情况.方法 CHB患者56例,其中聚乙二醇(PEG)干扰素α2a治疗28例,拉米夫定治疗28例,以健康志愿者20例为正常对照组.采集两治疗组治疗前及治疗后24、48周的患者外周血,以流式细胞技术检测ICOS+ CD4+T细胞在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的频数变化;采用real-time PCR法检测患者HBV DNA载量变化.结果 CHB患者CD4+T细胞ICOS表达水平明显高于正常对照者(P＜0.001).干扰素治疗后患者ICOS表达水平下降,同拉米夫定组差异有统计学意义(P＜0.05).干扰素治疗后患者ICOS改变值同HBV DNA载量变化值呈正相关(r=0.972,P＜0.001),而拉米夫定组则未发现相关性(r=-0.101,P=0.608).结论 CHB患者存在着细胞免疫紊乱,其CD4+T细胞ICOS的表达升高.干扰素可下调CD4+T细胞ICOS的表达,纠正细胞免疫偏移,发挥抗HBV作用.
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ICOS共刺激途径中MAPK家族信号分子对活动期SLE患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用
目的 研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激途径中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族信号分子对活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用.方法 体外分离纯化活动期SLE患者和正常人外周总T细胞、CD4+和CD8+T细胞,予以抗CD3/抗ICOS刺激,通过Western blot检测信号分子的活化水平,ELISA检测培养上清细胞因子表达,3H-TdR法测定细胞的增殖水平.结果 活动期SLE病人CD4+或CD8+T细胞经ICOS共刺激后,胞外信号调节激酶(ERK)的活化水平明显低于正常人,CD4+或总T细胞分泌IL-2明显低于正常人,PD98059抑制ERK活化可致细胞增殖水平下降与IL-2分泌减少,SB-203580抑制p38MAPK活化可致IL-10分泌减少,细胞因子IL-2能明显促进T细胞的增殖水平.结论 活动期SLE患者ICOS共刺激T细胞增殖功能降低与其ERK信号活化障碍所致的IL-2分泌减少密切相关,MAPK家族信号分子在ICOS共刺激不同T细胞亚群增殖与细胞因子分泌中具有不同的作用.
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重组可诱导共刺激分子融合蛋白治疗过敏性支气管哮喘小鼠的实验研究
目的研究可诱导共刺激分子融合蛋白(ICOS-Ig)对过敏性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的治疗作用.方法 32只健康雌性BALB/c小鼠用分段随机分组法将小鼠随机分成4组.哮喘组(A组)、ICOS-Ig治疗组(B组)、同型抗体对照组(C组)、生理盐水气雾激发对照组(D组),每组8只,采用重组真核表达技术制备ICOS-Ig,建立鸡卵白蛋白(OVA)免疫小鼠哮喘模型,给予ICOS-Ig治疗后观察其气道阻力变化、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、各炎性细胞百分比及白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)和总免疫球蛋白E(IgE)含量的变化;采用流式细胞仪(FACS)检测T辅助细胞(Th)亚群变化;取肺组织行病理组织学分析观察肺内炎症情况.结果 (1)制备的ICOS-Ig可与哮喘小鼠脾脏B细胞上相应配体结合.(2)B组小鼠气道压力变化为[(33±12)%],与A组[(58±10)%]比较差异有统计学意义(P<0.01). B组BALF中细胞总数为[(5.9±3.1)×107/L],与A组[(22.6±5.3)×107/L]比较差异有统计学意义 (P<0.01);B组嗜酸粒细胞数为0.020±0.020,与A组(0.070±0.030)比较差异有统计学意义(P<0.01);B组IL-4水平为(77±31)ng/L,与A组[(179±44)ng/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组外周血中总IgE水平为(175±33)μg/L, 与A组[(282±22)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.01); B组Th2细胞比例为(4.5±1.0)%, 与A组[(11.1±2.5)% ]比较差异有统计学意义(P<0.01).(3)与A组比较,B组小鼠肺内炎性浸润明显减轻、上皮细胞完整、管腔内少见分泌物.结论 ICOS-Ig可体内阻断可诱导共刺激通路、减少Th2免疫反应偏移并抑制IgE的生成,对过敏性哮喘有治疗作用.
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可诱导共刺激分子基因表达抑制降低大鼠T淋巴细胞活化增殖能力的研究
目的 RNAi抑制大鼠T淋巴细胞可诱导共刺激分子(ICOS)基因表达,观察其对T淋巴细胞功能的影响.方法 选择4个干扰位点,插入pSilencer 4.1-CMV neo载体,转染大鼠淋巴细胞.RT-PCR检测ICOS基因的抑制程度,流式检测ICOS表达变化.MLR检测细胞的增殖能力,ELISA法检测细胞因子IFN-γ和IL-4分泌水平.结果 转染后,T淋巴细胞ICOS的mRNA和ICOS分子表达水平下降(P＜0.05),淋巴细胞增殖能力明显降低,同时IFN-γ和IL-4的水平也减低.结论 大鼠淋巴细胞ICOS基因的表达抑制,降低了T淋巴细胞活化增殖能力.
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可诱导共刺激分子与程序性死亡-1在重症肌无力患者外周血表达的研究
目的 检测重症肌无力(myasthenia gravis,MG)早期患者外周血中正性共刺激分子可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)与负性共刺激分子程序性死亡-1(programmed death 1,PD-1)的表达,并探讨其临床意义.方法 分别收集2014年2月到2016年12月间在苏州大学附属第一医院就诊且确诊为MG患者82例外周血标本,作为试验组,同时收集20例非MG患者的其他免疫病患者(non-myasthenia gravis,NMG)及健康体检者56名的外周血标本作为对照组.应用免疫荧光标记、流式细胞术检测3组成员外周血单个核细胞膜上PD-1、ICOS及相应配体程序性死亡-1配体(PD-L1)、可诱导共刺激分子配体(ICOSL)的表达;同时收集2组患者及健康对照组血清,应用酶联免疫吸附法检测3组成员血清中可溶性PD-1(sPD-1)、可溶性PD-L1(sPD-L1)和细胞因子IL-4等的含量并进行统计学分析.结果 (1)流式分析结果:MG组CD4+T细胞上ICOS+亚群[57.29％(57.32％)]较健康对照组[15.6％(14.23％),Z=-6.560,P＜0.05]及NMG组[23.4％(8.48％),Z=-3.645,P＜0.05]显著增高,CD14+单核细胞上和CD19+B细胞上ICOSL+亚群较健康对照组和NMG组表达增高.MG组CD4+T细胞上PD-1+亚群[16.82％(10.66％)]较健康对照组[9.34％(9.18％),Z=-4.345,P＜0.05]及NMG组[7.07％(3.40％),Z=-4.594,P＜0.05]表达增高,CD14+单核细胞和CD19+B细胞上PD-L1+亚群较健康对照组及NMG组明显升高.MG患者外周血CD4+T上PD-1与ICOS的共表达[9.64％(8.82％)]较健康对照组[1.81％(2.10％),Z=-7.389,P＜0.05]及NMG组[2.86％(1.49％),Z=-4.636,P＜0.05]上调.(2)EILSA检测结果:MG组血清中sPD-1[(1.87 ±0.64) ng/ml]明显高于健康对照组[(1.49±0.70) ng/ml,t=2.04,P＜0.05]及NMG组[(1.05±0.5) ng/ml,t=2.08,P＜0.05];MG组血清中sPD-L1与健康对照组及NMG组差异无统计学意义.(3)血清细胞因子检测结果:MG组血清中IL-4表达[(61.88±5.15) pg/ml]较健康对照组[(32.03±1.84) pg/ml,t=2.50,P＜0.05]及NMG组[(42.62±3.31) pg/ml,t=2.34,P＜0.05]上调,MG患者sPD-1与IL-4呈正相关(r=0.406,P=0.029).结论 CD4+T细胞上的PD-1+ICOS+亚群升高提示该亚群参与了MG免疫病理过程,sPD-1可能干扰了T细胞上膜型PD-1的负性信号传导,引起ICOS正性信号相对亢进,导致该群细胞过度活跃推动MG病情进展.
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Ad-siICOS阻断ICOS共刺激通路抑制大鼠角膜移植排斥反应的实验研究
目的 观察携带报告基因GFP且表达ICOS-siRNA的重组腺病毒(Ad-siICOS-EGFP)阻断可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)共刺激通路对角膜移植急性免疫排斥的抑制作用.设计实验性研究.研究对象Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠.方法 取Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠,建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C、D 4组,每组20只鼠:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;C组为Ad-EGFP注射组;D组为生理盐水注射组.术后每日在裂隙灯显微镜下观察角膜植片以及眼前段组织的变化.对角膜混浊、水肿、新生血管3项指标进行评分,观察排斥反应指数(RI)的变化并记录植片的存活时间.各移植组分别于术后5天随机取10只大鼠,麻醉处死后,取植片行免疫组织化学及RT-PCR检测.各组其余大鼠进行角膜植片存活时间统计.主要指标角膜植片平均存活时间;ICOS蛋白表达情况;ICOSmRNA表达情况.结果 各组角膜植片平均存活时间:A组(9.800±0.632)天;B组(14.700±1.418)天;C组(10.000±1.054)天;D组(10.100±0.876)天(F=52.383,P=0.000).ICOS蛋白表达情况:各组植片均可见ICOS蛋白阳性表达,各组植片组织ICOS蛋白免疫组化染色阳性细胞评分:A组(1.900±0.568);B组(1.100±0.316);C组(1.800±0.632);D组(1.900±0.568)(F=5.214,P=O.004).ICOSmRNA表达情况:各组大鼠植片组织ICOS的PCR产物凝胶电泳条带辉度值比值:A组(1.004±0.164);B组(0.621±0.096);C组(0.929±0.134);D组(0.918±0.120)(F=16.717,P=O.000).结论 Ad-siICOS-EGFP可有效抑制大鼠植片组织ICOSmRNA及ICOS蛋白的表达,从而阻断ICOS共刺激通路;移植术后即刻受体鼠球结膜下注射Ad-siICOS-EGFP,可抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥反应,延长角膜植片存活时间.
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日本血吸虫感染可诱导共刺激分子配体基因敲除小鼠CD154和CD40动态变化及对Th1/Th2偏移的影响
目的:探讨可诱导共刺激分子( inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体( ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响. 方法:建立ICOSL基因敲除( ICOSL knockout, ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠感染日本血吸虫疾病模型,于感染前和感染后4、7、12、16、20周,应用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测小鼠脾细胞与肝虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40的水平;应用酶联免疫吸附测定法( enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脾细胞经可溶性虫卵抗原( soluble egg anti-gen,SEA)诱导72 h后培养的上清液中γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平及小鼠血清中SEA特异性抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平;应用HE染色观察小鼠肝虫卵肉芽肿病变动态变化. 结果:感染后4、7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠脾细胞CD154、CD40 水平与野生型小鼠相比,显著降低 [ CD154 为(18. 62 ± 4. 76)% vs. (27. 91 ± 3. 94)%、(22. 44 ± 4. 67)% vs. (40. 86 ± 5. 21)%、(25. 50 ± 6. 81)% vs. (43. 81 ± 8. 41)%、(20. 22 ± 5. 28)% vs. (40. 95 ± 7. 34)%、(17. 87 ± 4. 59)% vs. (33. 16 ± 6. 31)%,皆P<0. 01;CD40为(19. 43 ± 3. 26)% vs. (24. 37 ± 3. 59)%、(23. 00 ± 4. 47)% vs. (31. 80 ± 5. 86)%、(24. 46 ± 5. 01)% vs. (35. 85 ± 5. 32)%、(23. 42 ± 4. 69)% vs. (33. 30 ± 6. 14)%、(22. 85 ± 3. 78)% vs. (30. 88 ± 5. 94)%,皆P<0. 05 ]. 感染后7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠肝虫卵肉芽肿炎性浸润细胞 CD154、CD40 水平与野生型小鼠相比,亦显著降低[CD154为(0. 319 ± 0. 066) vs. (0. 488 ± 0. 086)、(0. 389 ± 0. 067) vs. (0. 596 ± 0. 082)、(0. 378 ± 0. 064) vs. (0.543 ±0.072)、(0.348 ± 0. 069) vs. (0. 523 ± 0. 076),皆 P <0. 01;CD40 为(0. 398 ± 0. 066) vs. (0. 546 ± 0. 079)、(0. 461 ± 0. 085) vs. (0. 618 ± 0. 076)、(0. 453 ± 0. 087) vs. (0. 587 ± 0. 074)、(0. 449 ± 0. 065) vs. (0. 565 ± 0.082),皆P<0.05 ]. 感染后,ICOSL-KO小鼠IFN-γ表达显著高于野生型小鼠(P<0.05),而IL-4表达水平则显著低于野生型小鼠(P<0. 05),其Th2分化指数亦显著低于野生型小鼠(P<0. 01). ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平与IgG1/IgG2a的比值亦显著低于野生型小鼠(P<0. 01),且ICOSL-KO小鼠的肝虫卵肉芽肿体积显著小于野生型小鼠(P<0. 01). 结论:ICOS-ICOSL信号通路在血吸虫病免疫病理中起重要调控作用,其对Th1/Th2偏移的影响可能是通过调控CD154-CD40信号通路来实现的.
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可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系
目的检测可诱导共刺激分子(inducible co-stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础.方法采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者(n＝51)以及健康体检者(n＝30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA-DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系.结果与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0.05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0.05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者(P<0.05);血清抗dsDNA抗体(+)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种)异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体(-)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0.05).结论 SLE患者外周血某些T细胞亚群存在ICOS的异常高表达,并且与疾病的活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量存在一定程度相关,故ICOS可能参与了SLE的免疫病理过程.
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长效干扰素对CHB患者CD4+T细胞ICOS表达及血清IFN-γ、IL-4水平的影响
目的 探讨长效干扰素对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+T细胞上ICOS表达及血清IFN-γ、IL-4水平的影响.方法 慢性乙型肝炎患者52例,其中聚乙二醇干扰素α2a治疗28例,常规治疗24例,另征集健康志愿者20例为正常对照组.采集治疗前及治疗后24、48周的患者外周血,以FCM检测ICOS+ CD4+T细胞在PBMC中的频数变化；以ELISA检测治疗前后患者血清中IFN-γ、IL-4的水平变化；以Realtime-PCR检测患者HBV-DNA载量变化.结果 慢性乙肝患者CD4+T细胞ICOS表达水平明显高于正常对照者(P＜0.001),干扰素治疗者48周时ICOS表达水平低于常规治疗者,差异有统计学意义(P＜0.01).经干扰素治疗后,患者Th1细胞因子IFN-γ水平升高,与常规治疗者相比有差异有统计学意义(P ＜0.001)；而Th2细胞因子IL-4水平逐渐降低,与常规治疗者相比差异有统计学意义(P＜0.001).干扰素治疗者ICOS、HBV-DNA载量变化值同IFN-γ水平的变化值呈负相关(P＜0.001),而与IL-4水平的变化值则为正相关(P ＜0.001).结论 慢性乙肝患者存在着细胞免疫紊乱,干扰素治疗可以在一定程度纠正患者体内的Th2偏移,降低CD4+T细胞上ICOS的表达,促进IFN-γ表达,发挥抗病毒作用.
关键词： 聚乙二醇干扰素α 2a 慢性乙型肝炎 可诱导共刺激分子 流式细胞术 -
ICOS/ICOSL逆向信号诱导成熟过程中树突状细胞特异性分泌TGF-β1
目的:分析可诱导共刺激分子(ICOS)能否向成熟过程中树突状细胞(DCs)传递逆向信号及其对DCs功能的影响.方法:取小鼠骨髓细胞,体外诱导培养、纯化第5天不成熟DCs,以ICOSIg或对照IgG加LPS或CpG处理后,流式细胞仪检测DCs表型分子、吞噬功能及胞内细胞因子改变;以ELISA检测培养上清细胞因子变化;以[3H]-TdR掺入法探讨DCs抗原递呈功能.结果:与IgG对照组相比,ICOSIg联合LPS或CpG处理组DCs 分泌TGF-β1的表达明显升高;ICOSIg作用于成熟过程中DCs,其吞噬功能与对照IgG相比近似或略有增强,但其抗原递呈功能受到部分抑制,可引起T细胞中IL-2、IL-10明显升高.结论:ICOS作用于成熟过程中的DCs后,促进DCs特异性分泌TGF-β1、部分抑制了DCs的抗原递呈功能,其机制可能是诱导了产IL-10 CD4+T细胞的生成;这种反向信号在不同机制诱导DCs成熟的过程中均可能存在.
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ICOS在健康人外周血调节性T细胞上的生物学特征初探
目的：：研究ICOS在健康人外周血Treg离体培养中的作用,了解mTOR对离体培养Treg ICOS表达的调控。方法：MACS分选Treg后经anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激后第3、7天流式检测Treg表面ICOS表达情况；anti-CD3+anti-CD28抗体或anti-CD3+ICOSL-Fc刺激3 d,流式检测Treg ICOS表达情况；雷帕霉素处理离体培养Treg,流式分析其对Treg ICOS表达作用。 CFSE标记人PBMC细胞,并与离体培养Treg混合培养,流式检测Treg的接触抑制活性。结果：anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激Treg 3 d,ICOS+ Treg中活、死细胞的比例分别为(92.00±2.69)%和(2.20±0.56)%,在ICOS-Treg中比例为(90.30±3.53)%和(1.77±0.78)%,两者无显著差异；培养第7天,ICOS+ Treg 细胞比例从第3天(40.20±1.83)%降至(11.60±1.10)%；anti-CD3+ICOSL-FC刺激Treg 3 d后,ICOS MFI为(403.30±74.42),anti-CD3+anti-CD28刺激组为(2410.0±746.4), anti-CD3+ICOSL-FC刺激后Treg ICOS表达相比anti-CD3+anti-CD28组显著下降；雷帕霉素处理离体培养Treg细胞3 d后, ICOS表达下调。此外,雷帕霉素处理的离体培养Treg均能有效抑制PBMC中Tcon的分裂增殖。结论：ICOS表达高低对人外周血Treg存活率影响无显著差异,mTOR信号并非调控人Treg离体培养ICOS表达的唯一因素,CD28协同信号对调控离体培养人Treg 。表达比ICOSL信号更为重要,雷帕霉素处理的离体培养人Treg 仍具有细胞接触抑制活性。
关键词： 人调节性T细胞 雷帕霉素 可诱导共刺激分子 可诱导共刺激分子配体 -
ICOS信号介导的免疫反应在SHR大鼠肾纤维化中作用的实验研究
目的:初步探讨可诱导共刺激分子( Inducible costimulation molecule ,ICOS)介导的免疫反应在原发性高血压肾损害中的作用. 方法:采用无创尾动脉血压测量仪动态监测自发性高血压大鼠( Spontaneously hypertensive rats ,SHR)及其野生对照组京都维斯塔尔大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY)的血压情况. 应用ELISA法动态检测上述大鼠的24小时尿蛋白情况.采用免疫组化技术及RT-PCR法动态检测上述大鼠肾脏中ICOS蛋白及其mRNA的表达水平. 应用免疫组化技术及ELISA法动态检测大鼠肾脏及血浆中IL-17 A和TGF-β1的表达水平. 采用HE及MASSON染色检测各期大鼠肾脏病理改变情况. 结果:SHR大鼠从第6周开始血压及24小时尿蛋白值显著高于同期WKY大鼠. SHR大鼠肾脏中ICOS蛋白及其mRNA表达水平从第6周开始亦显著高于同期WKY大鼠,且其表达水平的动态变化均与SHR大鼠肾脏纤维化评分动态变化呈显著正相关关系(rA=0.813,PA<0.05;rB=0.753,PB<0.05). SHR大鼠血浆和肾脏中IL-17A、TGF-β1的表达在10周、23周亦显著高于同期WKY大鼠. HE和MASSON染色结果显示,与WKY大鼠相比,SHR大鼠肾脏纤维化程度明显升高,在23周后两者差异具有显著性( P<0.05 ). 结论:在高血压导致的肾损害中,ICOS介导的免疫反应可能起重要的作用.
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ICOS转基因小鼠肝纤维化病程中ICOS对Tfh极化的作用
目的 探讨肝纤维化病程中可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)信号对滤泡辅助性T淋巴细胞(follicular helper T cells,Tfh)极化的影响.方法 ICOS-Tg小鼠、野生型(wild type,WT)FVB/NJ小鼠各30只,流式细胞仪分析测定脾细胞CD4+T淋巴细胞共刺激分子CXC趋化因子受体5(C-X-C chemokine receptor type 5,CXCR5),转录因子B细胞淋巴瘤因子6(B cell lymphoma/leuke-mia 6,BCL-6)、Tfh细胞亚群上ICOS、白细胞介素(interleukin,IL)-21的表达趋势及特征.免疫组织化学法检测肝组织中CXCR5以及BCL-6的表达.酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞培养悬液中IL-21的水平.结果 四氯化碳致ICOS-Tg小鼠肝纤维化后脾CD4+T淋巴细胞CXCR5、BCL-6、以及Tfh细胞亚群上ICOS、IL-21的表达随着病程的发展逐渐升高.与WT小鼠相比,均呈上调表达,差异有统计学意义(4～16 W:P值均<0.05).免疫组织化学法结果提示肝组织CXCR5、BCL-6的表达水平随着病程的发展逐渐升高.与WT相比,均呈上调表达(P值均<0.05).WT小鼠的CXCR5+CD4+细胞群IL-21的表达于4 W时上升,12 W达峰值(4 W:11.39±1.80,7 W:16.50±3.00,12 W:22.90±4.50,16 W:18.90±3.20),ICOS-Tg小鼠同WT小鼠相比,IL-21的表达趋势相同但呈上调趋势(4 W:13.66±2.12,7 W:21.80±4.12,12 W:33.41±5.12,16 W:27.70±4.09).结论 Tfh细胞及其作用因子IL-21很可能参与了肝纤维化的免疫应答,与肝纤维化的发生发展有关.ICOS可能是调控Tfh极化的关键信号分子.
关键词： 肝纤维化 可诱导共刺激分子 滤泡辅助性T淋巴细胞极化 -
异基因免疫治疗中控制GVHD发生的研究进展
目前,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)已成为治疗某些恶性血液病的有效手段之一,然而伴随其而来的移植物抗宿主病(GVHD)是导致移植后患者死亡的重要并发症之一.因此,如何诱导移植后免疫耐受来控制GVHD,尤其是控制急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生及已成为研究的重要内容.GVHD的发生机制非常复杂,但终为供者骨髓内的成熟T淋巴细胞识别受者体内的细胞表面的MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ及所递呈的多肽而导致供者的T细胞的激活、增殖并浸润到GVHD的靶器官如皮肤、小肠及肝脏并导致靶器官的损伤[1].临床移植学和移植免疫学主要攻克的内容之一就是如何控制GVHD的发生发展.其预防和治疗是决定着同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是否成功的关键所在,移植个体是否长期存活的主要因素之一.本文章就导致GVHD现象的原因及新进展做一总结.
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肿瘤坏死因子受体相关因子3调节调节性T细胞的效应器功能和体液免疫应答
调节性T细胞（Treg细胞）控制免疫应答的不同方面，但其如何调控效应器功能尚不完全明确。该研究鉴定了肿瘤坏死因子受体相关因子3（TRAF3）是 Treg细胞的功能效应器。在 Treg细胞中特异性敲除TRAF3后，CD4＋ T细胞稳态受损，表现为Th1型效应／记忆T细胞增加。此外，Treg细胞中TRAF3敲除还增加抗原刺激引起的滤泡辅助性T细胞（TFH细胞）激活，伴随着生发中心形成增加及高亲和性IgG抗体产生。虽然TRAF3敲除并没有减少Treg细胞的总比例，但减少滤泡调节性T细胞（TFR细胞）的抗原刺激产生。Treg细胞中TRAF3信号通路是保持较高水平可诱导共刺激分子（ICOS）所必需的，也是TFR细胞生成和抑制抗体反应所必需的。该研究表明，TRAF3作为Treg细胞的功能效应器，具有调节抗体反应的功能，提示其在Treg细胞介导ICOS表达中起重要作用。
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FK506对肝移植受者外周血T细胞亚群及共刺激分子表达调节的研究
目的通过观察他克莫司(FK506)对肝移植患者T细胞亚群及T细胞表面CD28、CD152和可诱导共刺激分子(ICOS)表达的影响,探讨FK506对细胞信号传导通路的作用.方法流式细胞技术测定健康对照组、终末期肝脏疾病患者组及使用FK506治疗的肝移植患者组T细胞亚群及各亚群细胞表面CD28、CD152和ICOS的表达.结果CD3+T细胞总数在3组间差异无显著性;与疾病对照组比较,治疗组CD4+T细胞数明显下降,CD8+T细胞数明显增加;CD4+T细胞和CD8+T细胞上CD28和ICOS的表达均显著降低,而CD152分子则均显著升高.结论FK506对治疗组患者T细胞亚群平衡紊乱的迅速纠正有重要作用.通过抑制正性共刺激分子并同时促进负性共刺激分子表达,FK506可在T细胞免疫信号传导通路的上游阻断T细胞活化信号的传导,发挥了免疫调节功能.
关键词： FK506 T细胞亚群 CD28 CD152/CTLA-4 可诱导共刺激分子 -
负性共刺激分子介导免疫下调与免疫逃逸的关系
T细胞充分活化需要识别双信号系统,即主要组织相容性复合体-抗原肽提供的第一信号和共刺激分子提供的第二信号.共刺激分子在调节T细胞的免疫应答中起关键作用,其中负性共刺激分子介导的免疫下调在病毒、细菌、肿瘤细胞等的免疫逃逸中发挥重要作用,也可能与寄生虫慢性感染的免疫逃逸有关.该文就负性共刺激分子介导免疫下调与免疫逃逸关系的研究进展作一综述.
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可诱导共刺激分子在川崎病患儿外周血T淋巴细胞的表达
目的 探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在川崎病(KD)及KD伴有冠状动脉损害,IVIG非敏感型KD发病机制中的作用.方法 应用荧光定量PCR检测48例KD组和30例KD IVIG治疗组ICOSmRNA表达的变化.同时以25例同龄健康儿童和20例急性支气管肺炎患儿作为对照.结果 KD组与对照相比,ICOSmRNA表达显著升高(17.97 ± 7.22对8.01 ± 5.15,P ＜ 0.01).其中冠状动脉损害组较无冠状动脉损害组ICOS表达异常升高(29.09 ± 10.55对11.68 ± 5.11,P ＜ 0.01).KD IVIG组与KD组比较,ICOSmRNA表达降低(13.03 ± 5.15对17.97 ± 7.22,P ＜ 0.05).其中IVIG不敏感组与IVIG敏感组比较,ICOS表达显著升高(21.57 ± 6.22对9.85 ± 5.89,P ＜ 0.05).结论 B7/CD28家族分子中正性调节因子ICOS过度表达可能是导致KD免疫失衡的原因之一,正性调节因子过度表达可能与KD冠状动脉损害有关.IVIG治疗在纠正KD淋巴细胞过度活化中发挥作用,同时可能有下调正性调控因子表达的作用.
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氨基酸胶囊对舰艇官兵Th1/Th2细胞因子和可诱导共刺激分子CD28表达的影响
目的 探讨氨基酸胶囊对舰艇官兵Th1/Th2细胞因子和可诱导共刺激分子CD28的影响.方法 采用数字表法将100名舰艇官兵随机分为氨基酸胶囊组和安慰剂组(对照组),分别给予氨基酸胶囊和安慰剂胶囊,在气温28～35℃,湿度72％～81％环境和正常参加军事作业情况下,连续服用14 d,分别在第1、15天用ELISA法检测官兵血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)表达水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞CD28表达指标CD4+、CD8+、CD28+、CD4+ CD28+、CD8+ CD28+.结果 实验第15天,胶囊组官兵IFN-γ和IFN-γ/IL4的值分别为(193.51±19.63) ng/L和(102.86±20.5)明显高于对照组(176.04±18.26) ng/L和(72.55±27.18),差异有统计学意义(P＜0.05),而IL-4、共刺激分子CD4+、CD28+、CD4+ CD28+、CD8+ CD28+均明显低于对照组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 氨基酸胶囊能通过调节可诱导共刺激分子的表达水平,纠正体内的Th2偏移和Th1/Th2失衡,从而提高舰艇官兵机体免疫力.
