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骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞的生物学特性及其支持造血的体外研究
为了解骨髓增生异常综合征(MDS)患者间充质干细胞(MSC)的生物学特性,探讨其对体外造血的支持能力,采集MDS的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,进行细胞形态观察和免疫表型、成骨分化及增殖能力检测,并对骨髓细胞进行成纤维细胞集落(CFU-F)形成分析.对MDS患者的MSC进行贴壁培养,接种脐血单个核细胞(MNC),以观察细胞数和CFU-GM的变化,作为MDS患者MSC支持造血体外实验.结果表明:来自MDS患者的MSC呈典型的成纤维样细胞形态,表型鉴定CD34,CD45阴性,SH2(CD105),SH3(CD73),Thy-1(CD90)阳性,体外诱导可向成骨细胞分化,其增殖能力和CFU-F形成能力与源于正常供者的MSC相当.支持造血的体外实验显示,实验组培养上清中的细胞总数和CFU-GM计数在第2周后均显著低于对照组(P<0.05).结论:来源于MDS患者骨髓的间充质干细胞的生物学特性与正常供者的MSCs无差异,但其体外支持造血的功能较后者显著减弱.
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骨髓脂肪细胞生成及其在骨质减少性疾病中的意义
骨髓基质系统由基质细胞谱系构成,包括未分化的基质干细胞及定型分化的脂肪细胞、成骨细胞、造血支持细胞等多种细胞类型.在定型分化的细胞中,以脂肪细胞为丰富.骨髓脂肪细胞生成在机体的能量储存、骨代谢、脂肪代谢、造血支持中发挥重要的病理生理学作用.尤其因增龄、绝经、代谢性异常等导致的多种骨质减少性疾病中,骨体积的减少则伴随骨髓脂肪成分的增加,脂肪细胞生成是骨质减少性疾病中的重要并发症.笔者旨就骨髓脂肪细胞功能、分化机制及其在骨质减少性疾病发生机理及临床治疗中的意义作一综述.
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骨髓基质细胞的生物学特性及临床应用前景
骨髓基质细胞具有强大的自我复制能力和多向分化潜能,可诱导分化为骨、软骨、脂肪、肌腱、神经、肌肉等组织和造血支持基质.因此,其在细胞和基因治疗方面呈现出广阔的临床应用前景.
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系统性红斑狼疮患者骨髓间质干细胞生物学特性及对造血支持的研究
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间质干细胞(MSCs)生物学特性、染色体核型异常与否及其对造血支持的影响.方法采用密度梯度离心和贴壁分离法对11例SLE患者和6名正常人骨髓MSCs进行分离培养,流式细胞术鉴定MSCs表面标志物,观察MSCs形态学改变及生长状况并绘制生长曲线,秋水仙素终止法分析MSCs染色体核型,正常人和SLE患者的MSCs输注大剂量化疗处理的ICR小鼠,观察正常人和SLE患者MSCs对小鼠造血的影响.结果SLE患者MSCs前5代可共收获(6~9)×109个细胞,其生长较正常人缓慢(P<0.01),均表达CD29、CD44和CD105,均不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR,染色体核型正常,正常人和SLE患者MSCs输注大剂量化疗处理的ICR小鼠后,小鼠白细胞、血红蛋白和血小板恢复均较未输注MSCs小鼠快(P<0.05).结论SLE患者MSCs体外生长存在一定缺陷,染色体核型正常,有支持造血功能.
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间充质干细胞对B淋巴细胞的免疫调节与系统性红斑狼疮的关系
间充质干细胞(mesenchvmal stem cells,MsCs)是存在于骨髓中不同于造血干细胞的一类具有自我更新及多向分化潜能的干细胞,主要来源于成体骨髓、胰腺、皮肤、肾脏等多处器官组织,也可从相应胎儿组织中分离获得,在特定的培养条件下可分化为骨、软骨、脂肪和肌肉等不同组织类型的细胞,并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用.
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脐带血间充质干细胞在异基因造血干细胞移植并发急慢性移植物抗宿主病应用中的护理
异基因外周造血干细胞移植( allo-PBSCT )是目前治疗恶性血液病的佳方法,但其主要并发症移植物抗宿主病( GVHD)是造血干细胞移植后致死的一个重要原因。脐带血间充质干细胞( UC-MSC )具有免疫抑制作用,降低GVHD的发生率;具有造血支持和促进造血干细胞植入;MSC 不表达HLA-Ⅱ类分子[1],是一类免疫缺陷细胞,不会引起排斥反应或反应较弱[2],不需要组织配型,取材方便。已有研究表明人类间充质干细胞在体外培养15代以上仍可保持原代细胞的生物学特点[3],不会形成恶性克隆,因此,UC-MSC在造血干细胞移植后GVHD应用中具有广阔的应用前景。我科共有13例恶性血液病患者行异基因造血干细胞移植后并发急慢性GVHD,均进行UC-MSC治疗,现将护理总结如下。1一般资料
异基因外周造血干细胞移植( allo-PBSCT )是目前治疗恶性血液病的佳方法,但其主要并发症移植物抗宿主病( GVHD)是造血干细胞移植后致死的一个重要原因。脐带血间充质干细胞( UC-MSC )具有免疫抑制作用,降低GVHD的发生率;具有造血支持和促进造血干细胞植入;MSC 不表达HLA-Ⅱ类分子[1],是一类免疫缺陷细胞,不会引起排斥反应或反应较弱[2],不需要组织配型,取材方便。已有研究表明人类间充质干细胞在体外培养15代以上仍可保持原代细胞的生物学特点[3],不会形成恶性克隆,因此,UC-MSC在造血干细胞移植后GVHD应用中具有广阔的应用前景。我科共有13例恶性血液病患者行异基因造血干细胞移植后并发急慢性GVHD,均进行UC-MSC治疗,现将护理总结如下。 -
人脐带间充质干细胞对再生障碍性贫血小鼠造血的影响
目的:通过从脐带中分离和培养脐带间充质干细胞(MSCs),探讨其对再生障碍性贫血(再障)小鼠骨髓造血的影响.方法:原代贴壁法培养人脐带MSCs,将小鼠分为模型组、对照组、MSCs输注组进行实验.经静脉输注免疫介导方法建立再障模型小鼠,分别于3、7、14、21、28 d观察其外周血象指标变化和骨髓组织形态;ELISA检测造血负调控因子(IFN-γ)的水平,计数骨髓造血干细胞集落生成单位.结果:原代培养中脐带组织块直接贴壁后8~10 d,边缘爬出长梭形MSCs,随传代培养呈平行、漩涡状生长;再障小鼠经MSCs输注治疗后外周血象明显增高,IFN-γ水平下降(P<0.01);治疗组骨髓红细胞集落形成单位与粒-巨噬细胞集落形成单位均较模型组明显增高(P<0.01),成纤维细胞集落形成单位计数差异无统计学意义(P>0.05).结论:人脐带来源的MSCs对再障模型小鼠骨髓可发挥造血支持作用.
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再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞体外造血支持作用的研究
目的 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)具有造血支持作用,再生障碍性贫血(aplastie anemia,AA)的发病机制涉及到造血微环境的异常,将两方面联系起来,体外研究再障患儿骨髓MSC的造血支持作用与再障的造血微环境异常的关系.方法 采集24例再障患儿和19例对照儿童的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC;观察细胞形态及骨髓MSC成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)计数分析;应用MTT法检测骨髓MSC粘附造血细胞的能力;应用ELISA检测骨髓MSC分泌干细胞生长因子(SCF)的浓度;对骨髓MSC进行贴壁培养,接种骨髓单个核细胞,计数扩增细胞数和红系爆式集落生成单位(BFU-E),粒细胞巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM),混合细胞集落生成单位(CFU-GMME).结果 ①再障患儿骨髓MSC传代时间延长,CFU-F计数15.70 4±5.78显著低于对照组21.73 4±5.74,P<0.05;②再障患儿骨髓MSC培养上清中SCF的浓度30.69±16.82 pg/mL显著低于对照组50.74±14.83 pg/mL,P<0.01;③再障患儿骨髓MSC支持下的单个核细胞(MNC)细胞扩增总数和红系爆式集落生成单位(BFU-E),粒细胞巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM),混合细胞集落生成单位(CFU-GMME)计数显著低于对照组,P<0.01.结论 再障患儿骨髓MSC体外造血支持作用较对照儿童骨髓MSC显著降低,其发生机制可能与再障患儿骨髓MSC增殖能力减低及分泌SCF减少有关.
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1例幼儿外周血干细胞采集的体会
外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)已广泛用于治疗恶性血液疾病、骨髓增生异常综合征以及那些因接受了大剂量化疗而需造血支持的恶性肿瘤病人.