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表阿霉素骨水泥介入治疗兔VX2肿瘤的MRI研究
目的:用MRI方法研究表阿霉素骨水泥介入治疗兔VX2肿瘤的效果.材料和方法:20只VX2肿瘤荷瘤兔随机平均分两组.一组行表阿霉素骨水泥介入治疗,一组仅以单纯骨水泥注入作为对照.动物处理后作MRI及病理检查.结果:表阿霉素骨水泥治疗后早期,肿瘤T2信号减低,瘤周水肿基本消失,肿瘤生长明显减缓.病理检查显示表阿霉素骨水泥周围肿瘤组织明显坏死.结论:表阿霉素骨水泥介入治疗可产生较好的抗肿瘤效果.本研究为表阿霉素骨水泥介入治疗椎体转移瘤方法的临床应用提供了实验依据.
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兔VX2肝肿瘤模型制作及影像学随访方法
目的:介绍应用VX2细胞株制作兔移植性肝肿瘤模型,探讨兔VX2肝肿瘤模型在肝肿瘤实验研究中的应用价值.方法:VX2肿瘤细胞株接种于18只新西兰大白兔肝脏内.2周后将18只兔随机分为三组,分别用螺旋CT、B型超声、DSA检查肝脏,观察肿瘤生长情况.然后将其处死,进行病理学对照.结果:18只兔VX2肿瘤肝脏接种成功率100%,三种方法随访观察准确率为100%,没有出现假阳性和假阴性.结论:三种方法均可观察VX2肿瘤模型之肝脏病灶,均可应用于VX2肿瘤模型制作后的实验.
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兔肝VX2肿瘤射频消融术后残癌中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8表达变化的意义
目的 探讨兔肝脏VX2肿瘤射频消融(RFA)治疗术后残余瘤组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(caspase-8)表达变化的意义.方法 超声引导下将VX2肿瘤细胞接种于23只新西兰白兔肝脏内,行RFA治疗,人为造成肿瘤组织残余,应用免疫组化方法检测治疗后残癌组织中caspase-8的表达情况.结果 RFA术前caspase-8在兔肝VX2肿瘤组织中呈低表达,为(9.4±2.3)％,治疗后即刻组残存瘤组织中的阳性表达率为(12.6±2.9)％；治疗1周后caspase-8于残存瘤组织中的阳性表达率为(45.8±12.8)％；治疗2周后的阳性表达率为(76.7±15.5)％.治疗后4周组的阳性表达率为(96.6±18.3)％.结论 RFA可诱导兔肝VX2肿瘤残余瘤组织中的肿瘤细胞凋亡,从而起到进一步的治疗作用.
关键词： 导管消融术 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8 细胞凋亡 VX2肿瘤 -
容积超声造影对兔肝VX2肿瘤射频消融效果的评估
超声引导下射频消融是治疗肝脏恶性肿瘤的有效手段之一[1-4].但是射频消融治疗存在三维空间漏治的缺点,可能导致部分病灶残余而使肿瘤再次复发,故射频治疗后准确判断治疗效果对患者下一步治疗方案的选择有重要意义.本研究对22只新西兰白兔VX2肝肿瘤射频消融前后进行二维及容积超声造影检查,探讨容积超声造影对射频治疗即刻疗效评估的价值.
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三维超声在实验兔VX2乳腺癌研究中的应用
目的 探讨实验兔VX2乳腺癌肿瘤内血流动力学变化特征.方法 应用二维及三维超声分别对注射VX2乳腺癌肿瘤悬液的17只实验兔肿瘤内部及周边血流动力学参数收缩期峰值流速(PSV)、搏动指数(PI)和阻力指数(RI)进行比较,利用VOCAL-Ⅱ功能量化分析肿瘤内部及周边的血供,并测量血管形成指数(VI);观察17只实验兔乳腺肿瘤内血流变化情况,比较二维和三维超声观察肿瘤大小及血流变化的差异.结果 注射肿瘤悬液1周,17只实验兔乳腺部位均出现肿瘤图像,但二维及三维超声于肿瘤内部及周边均未测及血流信号;第2～3周于肿瘤内部及周边分别测及Ⅰ、Ⅱ 级为主的血流信号;第4~5周二维及三维超声测及肿瘤内Ⅱ～Ⅲ级为主的血流信号;但三维超声测及肿瘤内的Ⅲ级血流信号多于二维超声.乳腺肿瘤内测及血流参数PSV:0～23.96 cm/s,RI:0～0.54,PI:0～0.88,VI:0～60.38%;第3~5周与第2周PSV、VI血流参数测值比较差异无统计学意义,注射肿瘤悬液后3～5周,肿瘤内VI、PSV测值与第2周测值比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 注射肿瘤悬液后随着肿瘤体积逐渐增大,实验兔乳腺VX2肿瘤内测及的Ⅲ级血流明显增多,三维超声可对实验兔VX2乳腺肿瘤内的血流级别作出准确评估,为乳腺癌血流动力学研究提供实验依据.
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射频消融治疗对兔肝VX2肿瘤VEGF表达的影响
目的:探讨射频消融(RFA)对兔肝VX2肿瘤血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法:建立日本大耳白兔肝VX2肿瘤模型,随机分为3组:对照组直接处死取肝脏标本;RFA治疗(4 h和24 h)组于射频消融后4 h和24 h处死取出肝脏组织.并以正常兔肝脏组织为正常对照,通过免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测VEGF的蛋白和基因表达.结果:VX2肿瘤浸润性生长,射频后中央消融区呈现大片坏死,周围见炎性反应带,外围癌组织残留.免疫组化和RT-PCR示对照组肿瘤组织VEGF的蛋白和基因表达均高于正常组(VEGF/GAPDH基因灰度比:1.3048±0.1936vs 0.8993±0.1107,P<0.05),射频消融后4 h和24 h表达明显下降(VEGF/GAPDH基因灰度比:0.7388±0.1503,0.8935±0.1936,均P<0.05),但不同时间段并无明显差异.结论:RFA治疗能下调肿瘤VEGF基因和蛋白水平的表达,抑制血管生成,减少血供,进而降低了复发和转移几率.
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改良法兔VX2骨肿瘤模型的病理学与影像学观察
目的 通过改良的种植方法建立兔VX2骨肿瘤模型并进行影像学和病理学研究.方法 将新鲜的活VX2肿瘤组织制成肿瘤细胞悬液,经胫骨近端关节面穿刺将肿瘤悬液注入32只新西兰大白兔右侧胫骨中上段骨髓腔内,建立兔VX2骨肿瘤模型.于肿瘤种植后每隔5天用X线平片及MRI对动物模型进行连续动态观察,并在影像检查后分批立即处死4只动物进行病理学检查,总观察期为40天.结果 所有32只兔试验侧胫骨肿瘤种植成功.在肿瘤种植后的前15天内,肿瘤破坏骨髓正常结构;从第20天起,肿瘤破坏骨皮质;第25天出现骨膜新生骨.第30～40天,骨膜新生骨及骨膜相继被肿瘤破坏.影像学所见与病理学所见相一致.结论 经改良的种植方法建立了更接近人体骨肿瘤的兔VX2骨肿瘤模型,其影像学表现与病理学表现有较高的一致性,为骨肿瘤的研究提供了理想的动物模型.
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三氧化二砷及人参皂甙对兔肝VX2肿瘤抗血管生成作用的比较
目的:比较三氧化二砷( As2O3)及人参皂甙(Rg3)对兔肝VX2肿瘤血管生成的作用.方法:复制兔肝VX2肿瘤模型24只,随机分为As2O3组、Rg3组及空白对照组各8只,As2O3组连续1周耳缘静脉注射用药,Rg3组连续1周灌服参一胶囊,空白对照组仅给予药物载体溶质作为对照.测量肿瘤瘤质量,应用免疫组化检测瘤组织中的微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达.并采静脉血检测肝功能.结果:As2O3组和Rg3组肿瘤瘤质量显著低于对照组,P值分别为0.013和0.033；As2O3组及Rg3组的MVD表达明显低于对照组,P值分别为0.006和0.003；VEGF表达也明显低于对照组,P值分别为0.049和0.021.As2O3组及Rg3组MVD及VEGF比较差异无统计学意义,P＞0.05.结论:As2O3及Rg3均可抑制兔肝VX2肿瘤生长,对肿瘤血管生成具有抑制作用,两者对肿瘤血管的抑制作用无差异.
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IVIM-DWI成像鉴别兔软组织VX2肿瘤凝固性坏死价值的探讨
目的 确定软组织肿瘤内有无坏死区对其生物学特性及治疗效果的评估都有着重要的意义.肿瘤内的坏死可为液化性坏死或凝固性坏死,对后者的MRI研究少见.本研究探讨体素内不相干运动弥散加权成像(intravoxel incoherent motion diffusion-weighted imaging,IVIM-DWI)在鉴别兔软组织VX2肿瘤中存活组织与凝固性坏死组织的价值.方法 在15只新西兰兔左侧大腿肌肉内接种VX2肿瘤,3周后对其行动态对比剂增强磁共振成像(dynamic contrastenhanced MR imaging,DCE-MRI)和IVIM-DWI成像检查(7个b值,0～800 s/mm2).采用MITK Diffusion软件对IVIM-DWI数据进行处理,形成灌注分数(f值)和真性弥散系数(D值)的参数图.MRI检查完毕后处死实验用兔获取肿瘤标本,在轴位方向上切片,获取与MR轴位图像相对应的大体标本断层组织厚片,并以其为参照,并结合增强早期DCE-MRI在标本对应层面的感兴趣区(region of interest,ROI)测量存活肿瘤组织、凝固性坏死组织的f值和D值.分别采用Wilcoxon秩和检验和独立样本t检验比较存活肿瘤组织与凝固性坏死组织之间D值和f值的差异.结果 所有实验用兔的VX2肿瘤均种植成功.共选取51个ROI,其中存活肿瘤组织34个,凝固性坏死组织17个.存活肿瘤组织和凝固性坏死组织的f值分别为(7.995±2.867)％和(5.918±2.709)％,t=2.484,P=0.016.存活肿瘤组织与凝固性坏死组织的D值分别为(1.110±0.110)×10-3和(1.132±0.208)×10-3 mm2/s,Z=0.100,P=0.920.结论 由IVIM-DWI所生成的f值能很好地鉴别兔软组织VX2肿瘤中的存活肿瘤组织与凝固性坏死组织,而D值不能鉴别.
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细胞悬液法和组织块植入法制作兔VX2骨肿瘤模型研究
目的 目前兔骨肿瘤模型的制作主要通过细胞悬液法或组织块植入法,但是哪种方法在制作肿瘤模型方面更为理想鲜见报道.本实验通过对比细胞悬液法及组织块植入法制作兔VX2骨肿瘤模型,旨在选择较为合理的造模方法.方法 取传代VX2肿瘤荷瘤兔,将肿瘤制备成肿瘤组织块及细胞悬液,将瘤块植入20只新西兰兔左胫骨髓腔内,将肿瘤细胞悬液注入此20只家兔右胫骨内制备VX2骨肿瘤模型.于模型制备后第7、14和21天行双侧胫骨X射线检查,观察肿瘤生长速度和形态;模型制备后第21天处死动物,取肿瘤,观察其形态并取穿刺骨孔周围软组织行病理检查,明确有无肿瘤细胞转移.结果 2种方法建模成功率均为100％.建模后第7、14和21天X射线示瘤块植入组肿瘤生长迅速,形态较规整,而细胞悬液组肿瘤生长较慢.模型制备后21 d,瘤决组发现穿刺孔周围软组织有肿瘤细胞浸润3只,而细胞悬液组有9只,瘤块植入组外渗率为15％,与细胞悬液植入组外渗率45％比较,差异有统计学意义,x2=4.28,P＜0.05.结论 瘤块植入法较细胞悬液法制作骨肿瘤模型更为方便,肿瘤生长快,发生肿瘤细胞外渗概率小,是一种理想的骨肿瘤模型制备方式.
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兔VX2肺癌模型多层螺旋CT灌注扫描与肿瘤乏氧显像相关性研究
目的:探讨兔VX2肺癌模型多层螺旋CT灌注扫描图像与肿瘤乏氧标志表达和肿瘤乏氧区间的相对关系.方法:17只新西兰大白兔,肺部原位成瘤后行动态CT灌注扫描,应用Perfusion 3灌注软件行灌注图像重建,在肿瘤高灌注区、低灌注区各选取3个感兴趣区做比较,肿瘤组织标本行免疫组化,检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor1alpha,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)的表达.应用SAS 9.0统计软件包进行数据统计分析.结果:高灌注区与低灌注区比较,HIF-1α的表达差异有统计学意义,P＜0.01;血容量差异有统计学意义,P＜0.01.在高灌注区,HIF-1α和血容量有明显相关性,r=-0.75,P＜0.01;HIF-1α和血流量亦有明显相关性,r=-0.50,P＜0.05.在低灌注区,HIF-1α与血容量(r=-0.50,P＜0.05)、血流量(r=-0.49,P＜0.05)和表面通透性(r=-0.53,P＜0.05)均有相关性.结论:初步提示,CT灌注图像高、低灌注区和乏氧区有一定的相关性.
关键词： 兔 VX2肿瘤 肺癌 多层螺旋CT灌注扫描 乏氧 -
移植法制作犬VX2肿瘤模型的实验观察
利用介入技术进一步研究肿瘤的发病机制和治疗效果,迫切需要较大的动物肿瘤模型.笔者通过对犬应用三联免疫抑制的同时接种兔VX2瘤细胞株,以探讨建立犬VX2肿瘤模型的可行性.
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改良法兔VX2肝移植肿瘤模型的建立
目的 探讨透视导引下经皮穿刺瘤组织块接种法制作兔VX2肝移植瘤模型,并与开腹组织块接种法进行比较.方法 新西兰大白兔30只,随机分成2组,15只/组,分别采用透视导引下经皮穿刺接种瘤组织块及开腹瘤组织块接种法种植于肝脏.于接种后14天,行CT平扫与病理组织学结合评价肿瘤接种成功率及生长情况.结果两组肿瘤接种成功率均为100%.穿刺组和开腹组肿瘤大直径分别为(1.02±0.11)cm和(1.07±0.13)cm,无统计学差异.开腹种植组种植后感染率及肿瘤坏死率明显高于经皮穿刺组(P＜0.05).结论 透视导引下经皮穿刺瘤组织块接种法建立兔VX2肝癌模型具有方法简单、成功率高、动物损伤小、肿瘤坏死率低等特点,为肝癌临床治疗和相关基础研究提供成熟的大型实验动物模型.
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三维超声研究兔乳腺VX2移植瘤放疗的血流变化
目的 应用三维超声探讨兔乳腺VX2移植瘤放射治疗前后的血流变化,研究其与MVD、VEGF表达之间的关系.方法 20只兔建立40个乳腺VX2移植瘤模型,第2周对20个右侧兔乳腺VX2移植瘤进行放射治疗,应用三维超声监测肿瘤生长情况,于治疗前(第2周)、第3周及第4周利用VOCAL-Ⅱ功能量化肿瘤内部及周边的血供,并测量VI值、FI值及VFI值;4周后处死瘤兔,用免疫组化法检测左右侧肿瘤MVD及VEGF的表达,评价三维超声相关检测指标的价值.结果 治疗前兔两侧乳腺VX2移植瘤VI值、FI值及VFI值基本一致,第3周及第4周右侧(治疗侧)较左侧(未治疗侧)VI、FI及VFI值减小(P＜0.01),且第4周的三维血流参数与MVD及VEGF表达呈正相关.结论 三维超声血流参数与MVD及VEGF的表达呈正相关,有助于评价乳腺肿瘤放射治疗的疗效.
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组织块悬液法建立兔食管VX2移植瘤模型的研究
目的 利用组织块悬液法建立兔VX2食管移植瘤模型,观察其肿瘤的成功率,生长情况及转移情况,为研究食管癌提供一个更好的研究方法.方法 将VX2肿瘤制作成组织块悬液,直接注射至兔食管黏膜下层,每周进行B超检测,观察肿瘤的生长情况,并结合大体解剖及病理学检查,评价其生物学特性.结果 14只实验兔,成瘤率100％,其中1只死于并发症(术后感染),1只食管穿孔,余皆正常成瘤,其成瘤时间约为5～9天左右,14天后可出现吞咽困难,B超示食管内见一低回声结节(紧贴食管后壁),3周后实验兔明显消瘦,进食困难,中位生存时间约为20天.结论 该方法可成功制成兔VX2食管肿瘤模型,生长稳定,难度较易.
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兔VX2肝癌LP-THACE后早期癌细胞凋亡研究
目的 研究经肝动脉碘油抗癌药乳液化疗栓塞(LP-THACE)后早期的肝肿瘤细胞凋亡.方法 27只新西兰大白兔肝VX2肿瘤模型,分成LP-THACE组、THAI(肝动脉灌注化疗)组和对照组(肝动脉灌注生理盐水),在处理后24h、72h、120h处死取材.HE染色光镜检查观察具有典型形态学特征凋亡细胞,分析凋亡指数(AI);FITC-Annexin V/PI双染法流式细胞术(FCM)检测凋亡早期细胞与凋亡晚期细胞,分析凋亡细胞百分率.结果 LP-THACE组凋亡指数(%)在三个不同时间点,瘤外周带依次为5.05±1.02、4.52±0.51、2.81±0.28,瘤中心依次为18.08±0.31、20.25±0.61、14.97±1.33,明显大于THAI组与对照组(P＜0.05).LP-THACE组瘤外周带的凋亡早期细胞百分率在三个不同时间点依次为11.44±4.78、10.99±5.77、5.99±0.57,凋亡晚期细胞百分率为33.21±11.33、38.40±7.77、28.76±7.21;LP-THACE组瘤中心带的凋亡早期细胞百分率在三个不同时间点依次为23.74±3.38、14.43±3.25、11.28±3.42,凋亡晚期细胞百分率为28.50±2.12、52.94±18.97、49.22±22.04.结论 LP-THACE诱导兔肝VX2肿瘤在介入处理后的早期发生了明显的肿瘤细胞凋亡,介入治疗诱导肿瘤细胞凋亡的作用集中在早期;诱导凋亡性死亡是LP-THACE治疗肝癌的主要机制.肿瘤中心区域比肿瘤周边区域凋亡对凋亡诱导因子敏感.
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兔VX2肝癌模型制作改良及影像学评价
目的 对兔VX2 肝癌模型制作进行改良,以用于介入治疗学研究,同时探讨瘤灶的CT 表现及CT 在检测瘤灶中的作用.方法 将VX2瘤细胞接种于兔皮下使其成瘤并传代;新西兰兔24只,以改良嵌插法建立移植性肝癌模型,于建模后7、14、21 d分别行超声、CT及血管造影检查,用于检测兔肝VX2 瘤灶,评估瘤灶生长变化;随后处死动物,进行尸解,评估影像检查结果.结果 24只(100%) 动物以改良嵌插法建立移植性肝癌模型全部成功.瘤灶以种植后2周CT显示清楚和典型,直径1 cm～2 cm 左右,平扫呈低密度或等密度,动脉早期明显强化,门脉期呈低密度,与周围肝组织分界较清楚.肝动脉造影显示肿瘤富血供.而种植后超过3 周的肿瘤大部分发生坏死.结论 嵌插改良法是一种值得推广的建立移植性肝癌模型的方法;在对瘤灶进行影像学评价上应尽量选择CT检查,接种后1 周左右的瘤灶较小而难以观察;2 周左右呈肝动脉源性血供丰富的约1 cm～2 cm的实体瘤,造影征像为肿瘤血管与肿瘤染色;3 周以上瘤灶大多出现明显示坏死;因此对1～2cm大小的兔VX2 肝癌瘤体,适合行血管造影检查.
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高温与亚高温射频治疗兔肺内VX2肿瘤的实验研究
目的:探讨肿瘤热疗对肺内VX2肿瘤的治疗效果.方法:选用实验新西兰大白兔肺内种植成功VX2肿瘤50只,雌雄不限制作动物模型,应用热疗技术进行实验研究.结果:高温射频组动物的平均治疗时间为(152.4±59.3)s,治疗过程中发现阻抗缓慢上升,至治疗结束前(2.0±2.1)s时,阻抗陡然上升至999Ω,输出功率迅速下降而自动停机,治疗过程中温度开始上升较慢,测量起始阻抗平均为(81.4±19.7) Ω,平均下降幅度为(10.7±6.4) Ω.结论:肿瘤的热疗与化疗将会逐渐成熟、完善,在肿瘤治疗中将会越来越显示出它的重要作用.
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3.0T MR增强扫描诊断兔VX2腹腔移植瘤的价值评价
目的：通过对兔VX2腹膜腔移植瘤的MR影像学表现来评估MR平扫加增强扫描对腹腔内移植瘤的诊断价值。方法采用开腹直接注入瘤粒悬液法制作兔VX2腹膜腔移植瘤模型，接种后第10天对瘤兔腹部进行MR扫描获得影像学结果，以病理结果为金标准评价MR的诊断价值。结果在对＜10mm的腹腔种植瘤进行扫描，MR平扫敏感度为60.19%、准确度55.86%，MR平扫加增强扫描敏感度为78.64%、准确度73.64%，对于病灶检出能力MR增强扫描要优于MR平扫；在对10~20mm之间的腹腔种植瘤进行扫描，MR平扫的敏感度为82.35%、准确度77.78%，MR平扫加增强扫描敏感度91.18%、准确度88.57%，对于病灶检出能力MR增强扫描要明显优于MR平扫；在对＞20mm的腹腔种植瘤进行扫描时MR平扫与MR平扫加增强扫描结果一致，检测能力相同。结论对于＜20mm的病灶MR增强扫描检出能力在敏感度、准确度方面优于MR平扫，而对于＞20mm的病灶MR平扫与平扫加增强检出结果相同均与病理结果一致。
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肝动脉灌注碘油羟基磷灰石纳米粒对兔VX2肝肿瘤细胞凋亡、增生及血管形成的影响
目的 观察肝动脉灌注碘油羟基磷灰石纳米粒(nHAP)对兔VX2肝肿瘤生长、坏死率、凋亡指数、微血管密度(MVD)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,同时观察其对瘤兔生存期的影响.方法 80只新西兰白兔肝内肿瘤种植后2周,随机分为4组,每组20只,兔上腹正中开腹,胃十二指肠动脉插管固定,经肝动脉灌注给药,实验设生理盐水组(A组)、单纯碘油组(B组)、阿霉素碘油组(C组)及碘油nHAP组(D组).治疗后1周及2周,采用CT检测肿瘤大小,计算肿瘤的生长率.治疗后2周,病理观察肿瘤区的坏死率,DNA缺口末端标记(TUNEL)法检测肿瘤的凋亡指数,免疫组化方法测定肿瘤的MVD值.记录各组实验兔治疗后的存活期.结果 治疗后1、2周,碘油nHAP组肿瘤体积及生长率明显小于其他各组(均P＜0.05).治疗后2周,碘油nHAP组肿瘤坏死率和凋亡指数大于其他各组(均P＜0.05).单纯碘油组及阿霉素碘油组栓塞后,残余肿瘤区的MVD(条)升高,两者分别为34±7和35±8,高于阴性对照A组(23±6,P＜0.05);碘油nHAP组残余瘤区MVD(16±4)条低于其他组.栓塞组增殖指数低于阴性对照A组,碘油nHAP组增殖指数低于其他各组(均P＜0.05).4组瘤兔治疗后的生存天数(d)分别为38±6、46±8、50±8、55±9.碘油nHAP组治疗后的生存期长于其他组(均P＜0.05).结论 肝动脉灌注碘油nHAP可明显抑制肿瘤生长,延长瘤兔的生存期,其可能通过促进肿瘤细胞坏死、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤血管生成发挥抗肿瘤效应.
