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基因芯片筛查外周血中胃癌转移相关基因的研究
目的:探讨基因芯片筛查外周血中胃癌转移相关基因的效果.方法:收集2016年5月-2018年3月,于我院普外科住院确诊为胃癌但是未经手术治疗的30例患者,同时选取15名健康人员,每位患者分别于术前当日、术中、术后第1天3个时间段的清晨采集空腹静脉血,术中选取癌组织、癌旁组织(距肿瘤边缘约为5cm)、正常组织(距肿瘤边缘约为10cm)标本.全部病例均经术后病理结果证实.采用phalanx人全基因组表达谱芯片对胃癌患者空腹静脉血样、胃癌组织、癌旁组织正常组织进行检测,观察容易检测、特异性高的基因.结果:在参与检测的942个基因中,共筛选出69个显著差异表达的阳性基因,其中28个基因表达下调,41个基因表达上调.结论:运用基因芯片能够有效筛查外周血中胃癌转移相关基因,具有显著效果与较高的临床推广价值.
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转基因的骨骼肌细胞及其在Ⅰ型糖尿病治疗中的应用
骨骼肌成肌细胞已经成为转基因治疗的一种重要的靶细胞,关于这方面的研究越来越多.在治疗Ⅰ型糖尿病方面,面临的问题包括:体外培养骨骼肌细胞的增殖、分化、融合,高效率的基因转染载体、转移基因长期可控性表达等.本文主要对前两部分问题作一简单综述.
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心肌基因治疗
经过十几年的临床前期和工期临床研究,基因治疗已真正成为冠心病和充血性心力衰竭的治疗手段,并可能会改变心脏病专家处理这两种疾病方式.本文将介绍基因治疗在缺血性心脏病和心衰中的应用,包括现有的基因治疗载体、基因传输工具、转移基因(transgene)和有关基因治疗安全及功效的认识.
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基因治疗中反转录病毒的细胞导向性基因转移
成功的基因治疗要求将治疗基因高效、细胞特异性地传递到靶组织并稳定表达.因此需要发展细胞导向性转移基因的基因治疗载体.反转录病毒(Retrovirus,RV)是目前常用、也是成功率高的基因治疗载体,但普遍缺乏细胞导向性.RV载体靶向转移基因可以通过两种水平来实现:1.基因传递水平,利用天然或修饰RV包膜糖蛋白与细胞特异性表面蛋白的相互作用使基因定向传递到靶组织;2.基因传递水平,利用组织特异性启动子控制基因在特定组织表达.本文主要讨论RV载体在基因传递水平靶向转移基因方面的研究进展.
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宫颈癌转移的基因调控研究进展
宫颈癌转移是在多种基因的调控下完成的.既有癌基因和转移相关基因的过度表达,又有抑癌基因和转移抑制基因的缺失和失活.由于宫颈癌转移常常是患者手术治疗失败和导致患者死亡的主要原因,如何抑制肿瘤转移成为宫颈癌治疗的关键.
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转移抑制基因KAI1在妇科恶性肿瘤中的研究进展
癌细胞侵袭转移是影响癌症患者疗效和导致预后差的主要原因,其机制复杂.它包括肿瘤细胞脱离原发灶,侵袭黏附于细胞外基质,同时分泌蛋白水解酶,降解基质,进入血管和淋巴管,通过黏附于内皮细胞在适宜部位驻留,诱导血管生成,逃避机体免疫系统的攻击,在远隔部位形成转移灶.整个过程受其自身的转移基因和转移抑制基因的调控[1].
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加强胃癌的基础研究,提高防治水平
恶性肿瘤根本的特征是细胞失控性生长,后者源于细胞的去分化状态,容易进入或不易脱出细胞增殖周期、"病理"性复制、不易衰老或死亡.肿瘤细胞的基本生命活动受控于多种高度保守的基因及其产物(如癌基因、抑癌基因、细胞死亡基因、DNA修复基因、转移基因等),它们构成细胞之间、跨细胞膜、细胞内的信号传导,调控着基因转录、翻译、蛋白质修饰(如蛋白质折叠、磷酸化/去磷酸化、蛋白质裂解、泛肽化等)和细胞周期.
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重组病毒载体研究进展
重组病毒载体是当今病毒基因工程研究的热点之一.载体是供插入目的基因并将其导入宿主细胞内表达或复制的运载工具.近年来,重组病毒载体为由病毒介导的基因表达提供了更为安全可靠的载体渠道,研制能高效转移基因、表达高度组织特异性、精确控制表达的病毒载体迫在眉睫.利用病毒载体可治疗一些特殊疾病,同时探索病毒载体所面临的安全性和毒性问题[1].目前研究多的主要有腺病毒载体、伪狂犬病毒载体、慢病毒载体、鸡痘病毒载体、人5型腺病毒载体等.理想的病毒载体在基因治疗、疫苗研制、疫病防控等领域的贡献不可估量.本文对上述5种病毒载体的研究进展作一综述,旨在为开发出更安全、更有效的重组病毒载体提供参考.
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胃癌患者不同组织CD44v5+细胞表达率的比较
目的探讨胃癌患者不同组织CD44v5的表达规律. 方法采用流式细胞术对于39例胃癌患者的癌灶、癌旁组织、淋巴结转移灶和外周血细胞的CD44v5表达率进行了检测和对比分析. 结果胃癌患者不同组织的CD44v5+细胞检出率均显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01).胃癌患者各种组织CD44v5+细胞表达率大小顺序为癌灶>癌旁组织>淋巴结转移灶>外周血细胞,前三者和外周血细胞之间有显著性差异(P<0.05或P<0.01),而前三者之间却无显著性差异(P>0.05).在胃癌患者的各种组织中,伴肿瘤转移患者的CD44v5+细胞检出率均显著高于未转移者(P<0.05或P<0.01). 结论胃癌患者身体各种组织的CD44v5+细胞表达率显著升高,且CD44v5+细胞表达率与肿瘤转移密切相关.
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中晚期肿瘤治疗观念的转变与治疗近况(续)
(接第7期第788页)4.3 肿瘤的基因治疗(tumor gene therapy, TGT,又称转移基因导向治疗)所有癌症的发生均是基因改变和环境综合作用的结果.人类3 000多种疾病都具有遗传性,只有从基因修复入手才能根治许多疾病,这种通过基因修复治病的方法即基因疗法(GT).
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CXCR4在不同骨转移潜能小细胞肺癌细胞系中的差异表达及意义
目的:应用intrakine技术构建CXCR4(chemokine receptor 4 趋化因子受体4)敲减表型的肺癌细胞,体外观察其增殖、凋亡、侵袭、转移能力的变化.方法:经克隆PCR、测序鉴定质粒后,给高表达CXCR4、高骨转移细胞系SBC-5中转染pCMV-S-K,经流式及细胞免疫化学检测成功构建了CXCR4稳定敲减表型的肺癌细胞SBC-5/S-K,检测CXCR4敲减后细胞增殖、凋亡、侵袭及转移能力的变化.结果:与对照SBC-5/neo相比,SBC-5/S-K在增殖、克隆形成、凋亡及细胞进程方面没有变化,而侵袭、转移能力明显减弱.结论:体外实验证实CXCR4是肺癌转移基因,为后续体内功能研究打下基础.
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改良差示PCR技术分离入成骨肉瘤转移基因片段
目的:建立优化的差示PCR体系,通过对转移潜能不同的人成骨肉瘤细胞系进行差示比较,获得人成骨肉瘤转移相关基因片段.方法:以低转移性人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607及由此筛选出的高转移亚系SOSP-M为研究对象,利用优化的差示PCR技术获得两细胞系mRNA的表达差异,选取差异明显、片段较长的条带回收并克隆后,经点杂交和Northern杂交排除假阳性,并进行测序和同源性分析.结果:获得满意的差示PCR反应参数,并以高敏感度荧光染料SYBRTMGREEN Ⅰ替代同位素放射自显影,改良了显示系统.以此为基础,得到了两条高转移亚系所特有的差异DNA片段,命名为MG1和MG2,测序后分析显示它们具有较长的开放读框,与Genebank和EMBL数据库已知基因比较无明显同源性.结论:优化了差示PCR反应体系;分离筛选出2个人成骨肉瘤转移基因片段,已向Genebank申请登录.本实验为骨肉瘤转移的机制研究奠定了实验基础.
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肿瘤抑制基因nm23在泌尿生殖系肿瘤中的研究进展
肿瘤转移是肿瘤恶性的标志,是肿瘤患者死亡的主要原因.肿瘤的转移受自身的转移基因和转移抑制基因的调控[1].目前已发现的肿瘤转移抑制基因有:组织相容抗原、WDNMI、nm23、p53、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)等,其中研究多和被认为有前途的是nm23.Nm23基因是Steeg等[2]于1988年通过差异杂交的方法从具有较高转移潜能的小鼠黑色素瘤细胞株K-1735中发现的.随后,许多学者对人体乳腺癌、肝癌、直肠癌、泌尿生殖系肿瘤等多种肿瘤中的nm23进行了广泛深入的研究,并且有研究结果显示nm23的表达与多数肿瘤的转移呈负相关[3,4].本文就nm23基因在泌尿生殖系肿瘤中的研究进展综述如下.