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吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对大鼠急性坏死性胰腺炎肝损伤的保护作用
目的:探讨核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的预防治疗作用.方法:大鼠80只随机分为正常对照组(Z)、胰腺炎组(Y)和干预组.干预组又分为建模前1 hPDTC干预组(A)、建模后1 h PDTC干预组(B)和建模后6 h干预组(C).干预组按不同时间ipPDTC.建模后6,12,24 h分批处死,临床全自动生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)和淀粉酶(AMY),用凝胶迁移率改变分析法(EMSA)测定胰腺和肝脏中NF-κB的活性.同时观察胰腺和肝脏的病理改变.结果:正常大鼠组织中几乎测不到NF-κB的活性,与Z组比较,Y组胰腺和肝脏组织中6,12,24 h NF-κB活性分别明显增加(P＜0.001).建模前1 h,1 h后使用PDTC,胰腺和肝脏组织中NF-κB活性均受到抑制(18.14±3.30,23.79±3.62 vs 24.82±4.57;10.68±2.51,13.83±2.70vs 16.38±2.50;P＜0.05),Y组血清ALT,AMY均高于对照组.病理学检查可以见到Y组和A.B,C组的胰腺和肝脏均有炎性改变,但A组较Y组明显为轻.结论:NF-κB的异常活化与SAP以及肝损伤有明显关系;PDTC对SAP时肝损伤的发生有一定的预防作用.
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亚砷酸联合硼替佐米对肝癌细胞系BEL-7402的作用
目的:探索亚砷酸(As2O3)对BEL-7402的作用,研究其与硼替佐米联合的化疗效果.方法:As2O3不同浓度及作用时间处理细胞,或与硼替佐米联合作用,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测增殖,流式AnnexinV-PI双染法检测凋亡,Western blot及EMSA法检测NF-κB活性.结果:细胞形态及生长抑制率随亚砷酸作用时间及浓度变化而变化,呈时间和浓度依赖性,细胞凋亡率随时间增加而提高(3-48 h:5.23％±0.55％,5.24％±0.28％,4.92％±0.91％,4.73％±0.83％,17.54％±1.49％),双药联合作用时,NF-κB活性受到抑制,细胞凋亡率也提升(24 h:8.41％±0.78％).结论:AszO3对BEL-7402有明显抑制作用；联合硼替佐米作用,可以增强肿瘤细胞对药物的敏感性,提高肿瘤治疗的效果.
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姜黄素对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效
目的:观察姜黄素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效,并探讨其作用机制.方法:选♀BALB/c小鼠60只,随机分为4组,每组15只.A组:正常对照组:B组:DSS结肠炎组,小鼠每日自由摄取5%DSS溶液:C组:姜黄素治疗组,小鼠自由摄取5%DSS溶液,每日腹腔注射姜黄素悬液30 mg/kg;D组:地塞米松治疗组,饮用5%DSS溶液,每日腹腔注射一次地塞米松针剂0.4 mg/kg.各组小鼠每日记录疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察小鼠结肠黏膜组织学改变.ELISA法测定结肠组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6含量.免疫组织化学染色观察核因子-κB(NF-κB)在结肠组织炎性细胞内的表达情况.Western blot检测结肠组织胞质NF-κB抑制蛋白IκB的表达情况.结果:DAI与组织学损伤评分显示C、D组分别与B组比较差异有统计学意义(DAI:1.64±0.92,2.80±0.92vs 7.67±1.56;组织学损伤评分:1.36±0.50,2.00±0.67 vs 2.83±0.83.均P＜0.01),C、D组比较差异有统计学意义(P＜0.01).TNF-α(ng/L)、IL-6(ng/L)的浓度在B组明显升高,且高于C、D组(TNF-α:102.75±3.52 vs 75.91±1.59,78.25±2.15:IL-6:80.94±3.26vs 59.65±1.39,65.57±4.04,均P＜0.01);NF-κB在C、D组中的表达较B组显著下降(2.73±0.79,4.22±1.09 vs 7.92±1.24,均P＜0.01),C、D组之间仍有统计学意义(P＜0.05).IκBα在C、D、B组中的表达水平逐渐降低,C、D组和B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:姜黄素可以有效治疗DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎,其疗效优于地塞米松.其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路及调节细胞因子TNF-α、IL-6等的释放而发挥作用.
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幽门螺杆菌阳性消化性溃疡患者胃黏膜核因子κ B、β-防御素-2表达及其与胃窦炎症的关系
目的:检测幽门螺杆菌(Hpylori)阳性消化性溃疡(peptic ulcer,PU)患者胃窦黏膜组织学改变和炎症相关基因核因子κB(Nuclear-κB,NF-κB)、人β-防御素-2(human β-denfensin-2,HBD-2)蛋白表达,探讨胃窦黏膜炎症及NF-κB、HBD-2在Hpylori相关性PU中的作用及其意义.方法:57例PU患者,其中H pylori感染者40例,非Hpylori感染者17例,另设正常对照组8例;观察各组患者胃窦组织学改变,免疫组化法检测胃窦黏膜NF-κBp65、HBD-2的表达.观察NF-κBp65、HBD-2的细胞定位情况,用OneWay ANOVA方法比较Hpylori感染者与非Hpylori感染者及正常组胃黏膜NF-κBp65、HBD-2表达量,并对PU不同分期患者胃黏膜NF-κBp65,HBD-2的表达量进行比较;非参数统计方法分析Hpylori感染与PU患者胃窦炎症程度的关系、NF-κBp65、HBD-2表达与胃窦炎症程度的关系及HHpylori阳性PU NFκBp65与HBD-2表达的相关性.结果:PU患者胃窦的炎症程度与Hpylori的感染程度呈正相关(活动性r=0.374,P＜0.01;慢性r=0.333,P＜0.05).在Hpylori阳性PU患者NF-κBp65主要表达于胃黏膜上皮细胞和固有层间质细胞胞核,HBD-2主要表达于胃黏膜表层上皮细胞胞质,二者的表达均较Hpylori阴性组显著增强(6.4±3.28 vs 3.78±2.16,P＜0.01;12.96±5.03 vs 4.69±2.05,P＜0.01),且均与胃窦黏膜炎症程度具有显著相关性(活动性r=0.744,0.524,P＜0.01,慢性r=0.650,0.606,P＜0.01);Hpylori阳性PU胃黏膜NFκBp65表达与HBD-2表达呈正相关关系(r=0.438,P＜0.01).愈合期和疤痕期PU患者NFκBp65(4.28±2.11,3.65±2.27)、HBD-2(8.15±4.28,6.24±3.71)的表达较活动期者(7.14±3.24,13.56±5.43)显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:H pylori感染导致胃黏膜NF-κBp65,HBD-2表达增加,胃黏膜炎症程度增强.NF-κB可能通过诱导HBD-2的表达,参与胃窦黏膜炎症反应,从而影响了Hpylori相关性PU的病理生理过程.
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肾上腺髓质素对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜通透性的影响
目的:探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)改善溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型肠黏膜通透性的作用机制.方法:清洁级♂SD大鼠24只(180-200 g),随机分成3组:AM组、模型组和正常组,每组8只.模型组及AM组均给予TNBS灌肠,以建立UC大鼠模型.正常组给予生理盐水灌肠.造模后注意观察大鼠毛发、活动及大便情况的变化,记录每组大鼠体质量.48h后AM组给予1 mL AM灌肠,而模型组、正常组则给予1 mL生理盐水灌肠,连续灌肠7d后,腹腔注射10％水合氯醛麻醉大鼠,留取大鼠血液,离心后分离上层血清于无菌EP管中冻存,留取大鼠结肠组织,部分立即用4％多聚甲醛固定,余下组织冻存于-80℃.HE染色评估大鼠结肠病理变化,Western blot测定肠道黏膜RhoA、Rho激酶1(Rho associated kinase 1,ROCK1)、肌球蛋白轻链激酶(myosin lightchain kinase,MLCK)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65及紧密连接(tight junction,TJ)蛋白Occludin的表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α),干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)表达的水平.结果:TNBS造模后的大鼠出现腹泻及黏液脓血便,体质量明显减轻,肠管扩张,肠壁变薄,部分结肠黏膜可见散在溃疡,与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-α、IFN-γ的表达明显升高(P＜0.05),结肠组织中RhoA、ROCK1、MLCK及NF-κB p65蛋白的表达显著增高(P＜0.05),而TJ蛋白Occludin的表达较正常组明显降低(P＜0.05),与模型组比较,给予AM治疗后的大鼠TNF-α、IFN-γ表达降低(P＜0.05),结肠组织中RhoA、ROCK1、MLCK及NF-κB p65蛋白的表达显著下降(P＜0.05),而TJ蛋白Occludin的表达明显升高(P＜0.05)有统计学意义.结论:AM可能通过调节RhoA介导的NF-κBp65/MLCK信号通路,改善UC肠道黏膜屏障功能.
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川芎嗪对肝创伤后早期大鼠残肝组织保护作用的评价
目的:研究川芎嗪干预对68％(2/3)肝切除大鼠术后残肝组织的保护作用,以及其对肝脏核因子κB(NF-κB)激活的影响.方法:60只SD大鼠随机分成3组(每组20只),均行68％(2/3)肝切除术.术后30 min分别给予以下处理:A组腹腔注射生理盐水,B组注射吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐(PDTC),C组注射川芎嗪.术后2h、6h、10 h和24 h观察各组大鼠术后一般情况和血清转氨酶变化.组织切片观察残肝组织病理状况,Western-blot方法检测NF-κB的激活.结果:C组大鼠残肝组织切片细胞水肿较A组轻；丙氨酸氨基转氨酶(ALT)在6 h(488.9 U/L±59.2 U/L)、 10 h(670.0 U/L±73.4 U/L),较A组(651.6 U/L±65.3 U/L,930.0 U/L±62.9 U/L)低,P＜0.05;天门冬氨酸氨基转移酶(AST)在6 h(1113.1 U/L±138.7 U/L)、 10 h(1388.2 U/L±209.6 U/L),较A组(1315.0 U/L±111.0 U/L,1728.4 U/L±87.3 U/L)低,P＜0.05; NF-κB的激活在术后2 h(0.78±0.04)和10 h(0.75±0.07)均低于A组(均为1),高于B组(0.68±0.09,0.66±0.04),P＜0.05,6 h(0.71±0.07)低于A组(1),P＜0.05,与B组(0.64±0.09)接近,P＞0.05.结论:川芎嗪通过抑制NF-κB的激活,对创伤后肝组织产生保护作用,其保护作用接近于PDTC.
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幽门螺杆菌感染对食管上皮细胞的影响
目的:在体外幽门螺杆菌感染(Helicobacter ylori,H.pylori模型中,研究H.pylori感染对食管上皮细胞的影响.方法:体外培养人食管腺癌细胞OE33,经酸化脱氧胆酸[(deoxycholic acid,DCA),200 μmol/L,pH 6.0)]、H.pylori 26695及阴性对照处理.CCK-8检测细胞增殖活性,AnnexinV-FITC/7-AAD双染流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测尾型同源框转录因子2(caudalrelated homeobox transcription factor 2,CDX2)和黏蛋白-2(mucin-2,MUC2)mRNA表达,电泳凝胶迁移实验和Western blot检测核因子κB(nuclear factor kappa,NF-κB)的DNA结合活性及蛋白表达.结果:与对照组相比,酸化DCA和H.pylori处理后OE33细胞增殖活性均明显下降(46.504％,56.147％ vs 100％,DCA组,H.pylori组vs对照组),凋亡增加明显(15.68％,76.41％ vs 4.25％,DCA组,H.pylori组vs对照组,P＜0.01)；酸化DCA和H.pylori均可增加CDX2和MUC2mRNA表达.并且,二者均增加磷酸化IκBα及磷酸化P65表达,增加NF-κB的DNA结合活性.结论:体外H.pylori感染抑制食管上皮细胞的增殖活性并诱导其凋亡,增加食管上皮细胞CDX2和MUC2表达及NF-κB的活性.
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TLR9在脂多糖诱导的急性胰腺炎体外细胞模型中的作用
目的:探讨Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)在急性胰腺炎发病机制中的作用.方法:不同浓度脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(0、1、10、100 mg/L)刺激AR42J细胞后,RT-PCR法与Western blot法分别检测TLR9、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)P65 mRNA和蛋白质表达的变化,并分析TLR9、P65的相关性;ELISA法检测培养上清液白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)含量.结果:与空白对照组相比,LPS刺激后TLR9、P65 mRNA与蛋白质表达升高,呈浓度依赖性,各组间有显著性差异(mRNA∶F=21.594,F=24.449;蛋白质:F=23.193,F=24.891,均P＜0.01),相关性分析:r=0.942,r=0.900,均P=0.000,TLR9、P65呈正相关.上清液IL-1β、IL-6含量随LPS浓度增加而上升,组间差异有统计学意义(F=45.459,F=62.493,均P＜0.01).结论:LPS刺激AR42J细胞诱导的炎症效应中,TLR9表达上调,可能通过激活NF-κB,从而促进炎症因子合成与分泌,参与急生胰腺炎发病机制.
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NF-κB、Bcl-2在大鼠非酒精性肝病肝细胞凋亡中的作用
目的:通过核因子KB(nuclear factor κB,NF-κB)、Bcl-2在大鼠非酒精性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达,研究线粒体损伤途径在肝细胞凋亡中的作用及NAFLD的发病机制.方法:将36只SD大鼠随机分为正常组18只,模型组18只,分别于6、10、14 wk处死各组大鼠,6只在光镜下观察肝组织病理学形态；血浆肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)采用放免法测定;TUNNEL法测肝细胞凋亡百分数;免疫组织化学检测Bcl-2、NF-κB蛋白在肝细胞中的表达情况,结果:肝组织病理结果提示正常组肝组织结构正常,模型组第6、10、14周大鼠肝小叶脂肪变性,门管区及周围及腺泡第10、14周大鼠可见炎性细胞浸润,第14周大鼠出现胶原纤维生成.细胞凋亡百分数结果提示正常组在各时间段有散在凋亡阳性表现,模型组凋亡细胞表达明显高于正常组,且随时间的延长表达逐渐增多.免疫组织化学结果显示造模组随时间的延长Bcl-2表达逐步增加,且脂肪变明显的区域阳性染色细胞较相对正常肝细胞染色深.NF-κB定位于细胞质和/或细胞核,模型组第6、10、14周大鼠肝细胞内可见NF-KB明显活化,而且随造模时间延长,其表达随之增多.各组大鼠血浆TNF-α测定模型组各组大鼠血浆TNF-α表达随着造模时间的延长逐渐增高,且均高于同时间段正常组表达.结论:细胞凋亡是NAFLD病情进展的重要阶段,NF-κB、Bcl-2在NAFLD肝细胞凋亡中起到重要作用.
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艾灸对Helicobacter pylori胃炎大鼠单核细胞NF-κB、IκBα含量的影响
目的:探讨艾灸对幽门螺杆菌(Helicobacter pylod,H.pylori)胃炎大鼠胃黏膜HE染色镜检胃黏膜炎症积分值和单核细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、IκBα含量的影响,初步揭示艾灸干预H.pylori胃黏膜炎性损伤,保护胃黏膜的机制.方法:50只健康大鼠随机分为5组,即A空白组、B模型组、C艾灸组、D艾灸非穴点组和E电针组,每组10只.采用H.pylori灌胃造模,蛋白免疫印记法检测大鼠外周血单核细胞NF-κB、IκBα的含量.结果:与A组比较,B组大鼠胃黏膜HE染色镜检胃黏膜炎症积分值和单核细胞NF-κB含量显著升高(0±2.0 vs 2.5±2.5,0.54±0.11/β-actin vs 0.36±0.13/β-actin,P＜0.01),IκBα含量显著降低(0.21±0.03/β-actin vs 0.65±0.18/β-actin,P＜0.01)；与B组比较,C组大鼠胃黏膜HE染色镜检胃黏膜炎症积分值和单核细胞NF-κB含量显著减低(2.5±2.5vs0±2.00,0.36±0.13/β-actin vs 0.50±0.04/β-actin,P＜0.01),IκBα含量显著升高(0.65±0.18/β-actin vs 0.24±0.06/β-actin,P＜0.01)；与D组相比,C组大鼠胃黏膜HE染色镜检胃黏膜炎症积分值和单核细胞NF-κB含量明显升高(3.00±2.5 vs0±2.00,0.36±0.12/β-actin vs 0.50±0.04/β-actin,P＜0.01),IκBα含量显著降低(0.64±0.19/β-actin vs 0.24±0.06/β-actin,P＜0.01)；与E组相比,C组大鼠胃黏膜HE染色镜检胃黏膜炎症积分值和单核细胞NF-κB含量明显升高(3±2.75 vs 0±2.00,0.35±0.10/β-actin vs 0.50±0.04/β-actin,P＜0.01),IκBα含量显著降低(0.52±0.17/β-actin vs 0.24±0.06/β-actin,P.＜0.01).结论:艾灸穴位可减轻H.pylonri胃炎胃黏膜炎性损伤,此作用可能与艾灸诱导单核细胞IκBα大量表达,抑制NF-κB表达,减少炎性细胞因子的释放,减轻胃黏膜炎症损伤有关.
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结直肠腺癌组织中Cyr61和NF-κB p65的表达及其临床病理意义
目的 探讨结直肠腺癌组织中富含半胱氨酸61(Cysteine rich 61, Cyr61)和核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB) p65的表达情况, 及其与临床病理参数和患者预后的相关性.方法 收集2011-05/2016-09期间在湖北黄冈市中心医院治疗的结直肠腺癌患者92例, 免疫组织化学法和 western blot检测结直肠癌组织和癌旁组织中Cyr61和NF-κB p65的表达情况, 并分析肿瘤组织中Cyr61和NF-κB p65表达与临床病理特征和预后的相关性.结果 免疫组织化学染色和western blot结果均显示结直肠癌组织中Cyr61和NF-κB p65的蛋白表达显著高于癌旁组织(t = 24.866, P＜0.001;t = 45.508, P＜0.001).结直肠癌组织中Cyr61和NF-κB p65的表达显著相关(χ2 = 14.087, P＜0.001). 而且结直肠癌组织Cyr61表达与肿瘤直径、浸润深度、血管侵犯和TNM分期等临床病理参数显著相关(P＜0.05). 结直肠癌组织NF-κB p65表达与肿瘤直径、淋巴结转移和 TNM分期等临床病理参数显著相关(P＜0.05). 而且Cyr61和NF-κB p65高表达患者的5年总体生存率41.30％、45.65％显著低于Cyr61和NF-κB p65低表达患者的5年总体生存率76.09％、71.74％(HR =0.341, 95％CI: 0.179-0.649, P = 0.001;HR = 0.465, 95％CI: 0.245-0.881, P = 0.019).结论 Cyr61和NF-κB p65蛋白在结直肠癌组织中高表达,且Cyr61和NF-κB p65蛋白高表达与结直肠癌患者的临床病理参数和预后显著相关, 可能为结直肠癌患者的诊断和治疗提供新的指标.
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胃肠道常见的B细胞淋巴瘤中CARMA1与NF-κB表达的关系
目的:了解胃肠道常见的B细胞淋巴瘤中含caspase募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(caspase recruitment domain-containing membrane-associated guanylate kinase protein 1,CARMA1)表达与核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)表达的关系及其对淋巴瘤的影响.方法:筛选54例胃肠B细胞淋巴瘤,其中弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)34例、黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone B cell lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue,MALT淋巴瘤)20例及21例胃肠淋巴组织反应性增生病例.Real-time PCR检测CARMA1 mRNA,免疫组织化学染色检测肿瘤细胞的CARMA1、NF-κB/p65和NF-κB/p50蛋白表达.结果:CARMA1、NF-κB/p65和NF-κB/p50蛋白表达率在淋巴瘤组较淋巴组织反应性增生组病例明显增高(淋巴瘤:淋巴组织反应性增生CARMA1为75.9％∶47.6％,NF-κB/p65为48.2％∶14.3％,NF-κB/p50为38.9％∶9.5％,P=0.042,0.007,0.013).与MALT淋巴瘤比较,DLBCL病例中CARMA1 mRNA和蛋白高表达(DLBCL∶MALT淋巴瘤CARMA1 mRNA2-△△Ct为3.073∶1,CARMA1蛋白为88.2％∶55.0％),P值为0.019和0.020.CARMA1蛋白表达与NF-κB/p65和NF-κB/p50蛋白核表达有正相关关系(NF-κB/p65阴性组∶阳性组为67.9％∶84.6％,NF-κB/p50阴性组∶阳性组为78.8％∶71.4％),P值分别为0.030和0.031.CARMA1 mRNA在晚分期(Ⅲ和Ⅳ期)病例中表达水平高于早分期(Ⅰ和Ⅱ期)病例(晚分期∶早分期CARMA1 mRNA 2-△△Ct=4.416∶1),P=0.011,在消化管壁内浸润病例中CARMA1蛋白表达低于浸润至管壁外的病例(管壁内∶管壁外66.7％∶91.7％),P=0.003.肿瘤细胞高增殖活性病例中CARMA1 mRNA和蛋白表达都显著升高(高增殖活性∶低增殖活性CARMA1 mRNA 2-△△Ct=2.885∶1 CARMA1蛋白为88.6％∶52.6％),P值分别为0.035,0.006.NF-κB/p65、NF-κB/p50蛋白在晚分期病例、肿瘤细胞高增殖活性病例中表达水平明显高于相应的比较组病例(晚分期∶早分期NF-κB/p65为68.2％∶34.4％,NF-κB/p50为54.5％∶28.1％,高增殖活性∶低增殖活性NF-κB/p65为60.0％∶26.3％,NF-κB/p50为51.4％∶15.8％),P值分别为0.015和0.05,0.018和0.001.生存分析:淋巴瘤类型、临床分期、CARMA1蛋白及NF-κB/p65蛋白表达都是淋巴瘤独立的预后影响因子,4种因素的相对风险度接近.CARMA1蛋白强阳性表达的所有淋巴瘤和DLBCL病例的生存状况较阴性和一般阳性表达(＜50％)的相应病例差(P值为0.020,0.045).结论:胃肠MALT淋巴瘤和DLBCL中NF-κB持续活化可能与CARMA1蛋白高表达相关,推测CARMA1高表达通过活化NF-κB参与相关淋巴瘤的发生发展过程.
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吡咯烷二硫氨基甲酸酯对大鼠急性坏死性胰腺炎的影响
73)%.ANP组各项指标均显著高于假手术组(P＜0.05);单纯PDTC注射对各项指标没有影响,但PDTC干预ANP后,各项指标与ANP组均有显著差异(P＜0.05).结论 PDTC可以减轻胰腺组织的病理损害,其机制可能是抑制胰腺细胞NF-κB的激活,促进胰腺细胞凋亡,减少胰酶释放.
关键词： 胰腺炎 急性坏死性 核因子κB 脱噬作用 吡咯烷二硫氨基甲酸酯 -
CARK 对心肌细胞肥大的影响及其作用机制探讨
目的:探讨心肌细胞特异表达的基因CARK在心肌细胞中的作用.方法:构建CARK真核表达载体,用脂质体介导的方法将CARK基因与NFκB-Luciferase 报告载体或2.6kb Nppa promoter-luciferase报告载体共转染入原代培养的心肌细胞中,检测荧光素酶活性的变化.结果:与转染空载体组比较,转染CARK基因组的NFκB-荧光素酶的活性下降了13%,(p＞0.05),2.6kb Nppa promoter-荧光素酶的活性下降了19%(p＞0.05),但无显著性差异;当给予心肌细胞一定的刺激时,其荧光素酶的活性分别显著性的下降了45%和44.7%(p＜0.05).结论:当心肌细胞受到Ang Ⅱ的刺激时,CARK能明显抑制ANF的表达,并抑制NFκB的激活,推测它可能直接或间接地通过此途径抑制心肌细胞的肥厚反应.
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NF-κB信号通路与动脉粥样硬化研究进展
核因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)是一种具有基因转录多项调控作用的转录因子.1986年Sen等首次在成熟B细胞、浆细胞中发现的,能与免疫球蛋白κ轻链增强子B点特异结合的核蛋白,并能促进κ基因表达的核蛋白因子,称之为NF-κB[1].进一步研究显示,NF-κB能与调控免疫应答、炎症反应、细胞分化和生长、细胞粘附和细胞凋亡所必需的许多细胞因子、粘附因子等基因的启动子或增强子部位的κB位点发生特异性结合,启动和调节这些基因的转录,在机体的免疫应答、炎症反应和细胞的生长发育等方面发挥重要作用.
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胰岛素强化治疗对新诊断2型糖尿病患者外周血单核细胞中核因子κB表达的影响
目的 观察胰岛素强化治疗前后初发2型糖尿病(T2DM)患者外周血单核细胞中核因子κB (NF-κB)表达水平的变化,探讨胰岛素的抗炎作用机判. 方法 健康成人20例为正常对照(NC)组,新诊断T2DM 20例为DM组,DM组胰岛素强化治疗2周.治疗前后采用ELISA、FCM法检测NF-κB表达水平,同时测定治疗前后WBC、N%和FIns,计算HOMA-IR. 结果 与NC组比,DM组NF-κB表达水平显著增高(P＜0-01);DM组与治疗前比,治疗后NF-κB水平显著降低(P＜0-05),WBC、N%和HOMA-IR也明显降低(P均＜0-01). 结论 2型糖尿病患者体内存在低度炎症,胰岛素强化治疗可降低单核细胞NF-κB表达,减轻炎症反应.
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血糖控制对新诊断2型糖尿病患者血单核细胞核因子κB活性及血清炎症指标的影响
目的 探讨血糖控制对新诊断T2DM患者外周血单核细胞(PBMNC)中核因子κB(NF-κB)活性及血清炎症指标的影响.方法 96例新诊断T2DM患者,观察治疗前及血糖良好控制后PBMNC中磷酸化NF-κBp65(Ser536)、血清炎症指标及FFA等变化. 结果 在血糖控制达标2周时,PBMNC磷酸化NF-κBp65(Ser536)、FFA及血清3项炎症指标水平比治疗前显著降低.ΔhsC-RP与Δ2hPG、Δ糖化血清蛋白(FA)呈正相关;与ΔHDL-C呈负相关;ΔIL-6与ΔTC、ΔLDL-C呈正相关(P<0.05或P<0.01). 结论 新诊断T2DM患者在严格控制血糖后,血清hsC-RP、IL-6和TNF-α水平以及PBMNC中NF-κB磷酸化p65(Ser536)水平均明显降低.血糖改善带来炎症状态的改善.
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糖基化终末产物对真皮成纤维细胞细胞核因子κB活化的影响普罗布考的保护作用
目的 研究糖基化终末产物(AGEs)对真皮成纤维细胞(Fb)细胞核因子κB(NF-κB)活化的影响及普罗布考的保护作用. 方法 体外分离培养Fb,分为对照(Con)组、AGE-BSA组及普罗布考干预(Probucol)组.水溶性四唑盐(WST)法检测细胞增殖,免疫荧光染色检测NF-κB的活化、实时定量PCR检测MCP-1mRNA表达. 结果 与Con组相比,AGE-BSA组细胞增殖能力减退,NF-κB表达增加,细胞MCP-1mRNA表达升高(P＜0.05或P＜0.01);与AGE-BSA组相比,Probucol组细胞增殖能力增强,NF-κB表达下降,细胞MCP-1mRNA表达下调(P＜0.05或P＜0.01). 结论 普罗布考对AGE-BSA诱导的Fb的保护作用可能是通过促进Fb增殖,抑制NF-κB活化及减低MCP-1表达来实现的.
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阿托伐他汀钙对糖尿病大鼠肾脏肿瘤坏死因子α、过氧化物酶体激增剂激活受体γ及核因子κB表达影响的研究
目的 观察糖尿病大鼠应用阿托伐他汀钙治疗后肾脏组织TNF-α、PPAR-γ、核因子κB(NF-κB)表达情况及其对肾脏的影响. 方法 55只3月龄SD雄性大鼠随机选取10只作为正常对照(NC)组,余45只制备糖尿病大鼠模型.共40只符合造模标准,随机分为糖尿病未治疗(D)组、胰岛素治疗(Ⅰ)组、阿托伐他汀钙治疗(A)组及胰岛素联合阿托伐他汀钙治疗(Ⅰ+A)组,每组各10只.实验第4天,Ⅰ、Ⅰ+A组接受中效胰岛素治疗,A、Ⅰ+A组予阿托伐他汀钙灌胃.14周时检测TNF-α、PPAR-γ及NF-κB表达情况. 结果 糖尿病大鼠造模成功率为88.8％.糖尿病大鼠肾小球及集合管TNF-α、PPAR-γ及NF-KB表达均较NC组增高.治疗14周后,各治疗组TNF-α及PPAR-γ表达未见明显变化,而NF-κB在A、Ⅰ+A组肾小球及集合管中表达降低,肾脏组织病变减轻. 结论 阿托伐他汀钙可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏组织中NF-κB表达发挥抗炎、保护肾脏的作用.
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沙格列汀和格列本脲对2型糖尿病大鼠主动脉内皮细胞核因子κB及血管细胞间黏附因子1表达的影响
目的 观察沙格列汀对T2DM大鼠主动脉内皮细胞核因子κB(NF-κB)、血管细胞间黏附因子1(VCAM-1)表达的影响. 方法 将成模大鼠分为糖尿病对照(DM)组、格列本脲治疗(DMG)组和沙格列汀治疗(DMS)组.DMG、DMS组分别予格列本脲、沙格列汀治疗8周.12周末检测各组FPG、FIns、血脂、NF-κB和VCAM-1表达,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),观察大鼠主动脉形态学变化.结果 12周末,与DMG组比较,DMS组FIns[(11.38±1.56) vs(6.13±0.54) μIU/ml]、TG[(1.17±0.15)vs (0.72±0.25)mmol/L]、LDL-C[(0.57±0.05)vs(6.13±0.54) mmol/L]、HOMA-IR[(12.78±1.53)vs(6.78±0.57)]、NF-κB平均灰度值[(143.33±13.38)vs(121.67±11.43)]和VCAM-1平均灰度值[(153.33±12.74)vs(133.00±11.53)]表达降低(P＜0.05). 结论 沙格列汀在改善糖、脂代谢的同时,可下调糖尿病大鼠主动脉内皮升高的NF-κB、VCAM-1蛋白表达量,可能参与改善大血管并发症.
关键词： 沙格列汀 糖尿病 大鼠 核因子κB 血管细胞间黏附因子1
