首页 > 文献资料
-
补糖对男大学生运动后血清TLR4水平和白细胞TLR4 mRNA表达的影响
目的:探讨补糖对一次较大强度运动后血清Toll样受体4(TLR4)水平和白细胞表面TLR4mRNA表达的影响.方法:随机选取8名健康男性青年进行两次跑台运动,实验时间为两周,两次测试间隔1周.运动前和运动中随机补充下列饮料的一种:含糖饮料(补糖组)或对照饮料(对照组),含糖饮料的补充量为0.8 g/kg体重.摄取一种饮料后,在跑台上以75％VO2max的强度跑步60分钟.分别在安静、运动后即刻、运动后1小时、运动后2小时和运动后24小时测定血清IL-6、TLR4和NF-κB水平及白细胞TLR4 mRNA相对表达量.结果:(1)运动后,对照组白细胞计数显著升高,运动后2小时非常显著高于安静水平,运动后24小时回落到安静值;(2)运动后即刻,对照组血清IL-6水平有升高趋势,补糖组变化不明显;(3)运动后即刻,对照组血清TLR4水平显著下降,补糖组下降不明显,补糖组显著高于对照组;运动后2小时,对照组和补糖组白细胞TLR4 mRNA相对表达量显著低于安静值,在运动后1小时补糖组显著高于对照组.(4)运动后即刻,对照组血清NF-κB水平比安静值升高了93％,补糖组升高幅度为43％,低于对照组.结论:一次较大强度运动能引起血清TLR-4水平和白细胞TLR-4mRNA表达的下降,补糖能缓解运动造成的血清TLR-4水平降低和白细胞TLR-4 mRNA表达降低.
-
PPARγ表达上调抑制肝星状细胞增殖的实验研究
目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达上调对肝星状细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养HSC-T6细胞至对数生长期,以不同浓度的PPAR γ激动剂15d-PGJ2作用24h后应用RT-PCR的方法观察分析各组肝星状细胞PPARγmRNA的表达,MTF检测HSC增殖情况,流式细胞仪分析HSC-T6细胞凋亡情况.结果 15d-PGJ2处理的HSC-T6细胞中PPARγmRNA表达比例上调；凋亡细胞数明显增多.不同浓度的15d-PGJ2均可抑制HSC-T6细胞的增殖,以2μmol/L组为显著.结论 PPARγ表达上调能够抑制HSC-T6增殖并诱导其凋亡.
关键词： 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 肝星状细胞 凋亡 核因子κB -
银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-кB活化的影响
目的研究银杏内酯B对脂多糖刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB活化的影响.方法用L929细胞结晶紫染色法检测TNFα的含量,用电泳迁移率改变检测法检测NF-κB的结合活性.结果1和10 μmol·L-1银杏内酯R能够显著抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα的生成,其IC50为0.26μmol·L-1:1 mg·L-1LPS和1 nmol·L-1PAF均可活化大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB;银杏内酯B能够抑制LPS或PAF刺激的NF-κR活化.结论银杏内酯B能够抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNFα生成及大鼠胸腔多形核白细胞NF-κB的活化.PAF参与LPS激活NF-κB的过程.
关键词： 核因子κB TNFα 电泳迁移率改变检测法 脂多糖 银杏内酯B -
Exendin-4体外通过抑制NF-κB-iNOS-NO信号减轻氧化应激诱导的小鼠MIN6胰岛β细胞凋亡
探讨胰高血糖素样肽-1受体激动剂Exendin-4(Ex-4)在氧化损伤诱导胰岛β细胞凋亡中的保护作用.培养的MIN6胰岛β细胞,通过AO-EB染色观察细胞凋亡形态,Annexin-V-PI染色流式技术测定凋亡率,Griess法检测细胞内一氧化氮水平,Western blotting检测胞浆iNOS蛋白、胞浆及胞核核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达水平.Ex-4可抑制叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的β细胞凋亡,Ex-4(100nmol·L-1)预处理较单独t-BHP处理,其凋亡率减少约67%(P<0.001).Ex-4同时减少NO水平的增高,并抑制t-BHP诱导的β细胞NF-κBp65活化及iNOS蛋白表达水平.Ex-4可能通过抑制细胞内NF-κB活化、胞浆iNOS表达来抑制NO水平,终减轻氧化损伤诱导的β细胞凋亡.
-
丁基苯酞抗大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧损伤及其机制
本研究探讨丁基苯酞抗大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧损伤及其机制.原代培养大鼠大脑皮质神经元,建立氧糖剥夺/复氧模型(OGD/R),采用MTT法、酶学检查、免疫组化、RT-PCR等观察丁基苯酞(各浓度组)的保护作用及其机制.在氧糖剥夺4 h/复氧8 h时丁基苯酞各浓度组可增加神经元的细胞活力和减少神经元LDH(乳酸脱氢酶)的释放,可显著降低神经元表达iNOS mRNA(诱生型一氧化氮合酶)和NF-κB(核因子κB)p65蛋白(增加).不同剂量丁基苯酞(100、10、1和0.1 μmol·L-1)在增加细胞活力、减少LDH释放及降低神经元表达iNOSmRNA等方面,高浓度的作用强于低浓度,且丁基苯酞100 μmol·L-1组与吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)100 μmol·L-1组差异显著.在OGD 4 h/R 8 h时丁基苯酞可能抑制iNOSmRNA的表达及NF-κB的活化,从而有效保护氧糖剥夺/复氧中损伤的大脑皮质神经元.
-
胆碱和对乙酰氨基酚的协同镇痛作用及其机制
探讨胆碱(Cho)与对乙酰氨基酚(Ace)的协同镇痛作用及其机制.本研究采用腹腔注射0.6％醋酸溶液建立小鼠醋酸扭体疼痛模型.将KM小鼠随机分为对照组(n=10)、单用Cho组(n=50)、单用Ace组(n=50)和合用组(n=40),造模后计数20 min内扭体次数.采用OriginPro8.5软件分析求得各药物的EDs0.采用等辐射分析法分析Cho和Ace的相互作用.为进一步研究Cho和Ace协同作用的机制,将40只KM小鼠随机分为生理盐水对照组(control组)、Cho组、Ace组和Cho+ Ace组,每组10只.造模后,小鼠眼球取血,使用ELISA试剂盒分别测定小鼠血清中TNF-α、IL-6、PGE2、NF-κB的含量.经计算可得,单用Cho组和单用Ace组的ED50分别为19.47和20.56 mg·kg-1,合用组ED50为Cho 2.94 mg·kg-1+Ace 3.15 mg·kg-1.等辐射分析法证实Cho与Ace合用时具有协同镇痛作用.ELISA结果发现Cho组和Ace组血清中TNF-α、IL-6、PGE2和NF-κB含量较control组降低(P＜0.05),而与Cho组和Ace组相比,Cho+Ace组TNF-α、IL-6、PGE2和NF-κB含量进一步降低,且差异具有统计学意义(P＜0.05).本研究证实Cho与Ace具有协同镇痛作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关.
-
盐酸千金藤素逆转EAC/ADR细胞多药耐药性的作用及其机制
目的研究盐酸千金藤素对艾氏腹水癌耐药细胞株EAC/ADR多药耐药性的逆转作用及其与核因子κB(NF-κB)的关系,探讨其作用机制.方法 MTT法、小鼠移植瘤模型实验观察盐酸千金藤素体外和体内逆转细胞多药耐药性的作用;Dot-ELISA法检测细胞核NF-κB水平及药物作用后的变化.结果盐酸千金藤素体外能逆转EAC/ADR细胞的耐药性,逆转倍数为13倍;体内能延长荷瘤小鼠的生存时间,生命延长率为75.37%;并能降低EAC/ADR细胞中NF-κB的持续性活性及化疗药物对其的激活.结论盐酸千金藤素具有逆转多药耐药性的作用,其机制可能与抑制NF-κB的活性有关.
-
艾拉莫德对脂多糖激活大鼠肺泡巨噬细胞系TNFα产生及NF-κB活性的抑制作用
目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用.方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol·L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFαmRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性.结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFα mRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用.结论T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生.
关键词： 艾拉莫德 大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383 肿瘤坏死因子α 核因子κB -
PKC/NF-κB-PXR信号通路对P-糖蛋白基因表达的调控研究
P-糖蛋白(P-gp)是ABC (ATP binding cassette)转运体家族重要成员,也是药物在机体内转运的重要载体.本文考察PKC/NF-κB-PXR信号途径对LS 174T细胞中P-gp基因表达的调控作用.运用孕甾烷X受体(PXR)-MDR1双荧光报告基因实验探究PKC激动剂佛波酯(PMA)对LS174T细胞中MDR1荧光素酶活性的影响;分别采用real-time qPCR和Western blot检测PMA对LS174T细胞中P-gp mRNA表达、蛋白表达及NF-κB通路相关蛋白的影响.结果表明,PKC激动剂PMA能明显抑制PXR介导的P-gp荧光素酶活性、mRNA和蛋白表达,并能显著性增加胞内RelA/p65的核转位.此外,siRNA干扰实验结果显示,PKCa siRNA、RelA siRNA或PXR siRNA干扰均可显著削弱PMA对P-gp基因表达的下调作用.因此,PKC激动剂能显著抑制PXR介导的P-gp基因表达并伴随NF-κB激活,提示PKC/NF-κB-PXR信号通路对P-gp基因表达具有重要的调控作用.
-
冬凌草甲素通过下调控核因子κB通路增强U251对替莫唑胺的敏感性
目的 研究经冬凌草甲素处理后的脑胶质瘤U251对替莫唑胺的敏感性.方法 实验共分为5组:对照组(无血培养基)和4个浓度(极低浓度、低浓度、中浓度、高浓度:10,20,40,80 μmol·L-1冬凌草甲素)实验组.各组U251细胞分别孵育24,48,72 h,在各时间点以免疫印迹法检测U251细胞中核因子κB(NF-κB)在各组细胞中的表达;将中高2个浓度组U251细胞再培养72 h后,继续在极低、低、中、高这4个浓度组(含50,100,200,400 μmol·L-替莫唑胺)实验组中培养48 h,以流式细胞仪检测细胞凋亡比例.结果 中、高2个浓度实验组的冬凌草甲素孵育U251细胞48,72 h后,U251细胞中NF-κB的相对表达量分别为0.67±0.11,0.55 ±0.21;0.45±0.12,0.51 ±0.17,与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).中、高2个浓度组U251细胞在培养72 h后,继续在4个浓度替莫唑胺组中培养48 h后,各组细胞的凋亡比例分别为(50.13±5.44)％,(55.34±5.93)％,(55.58±4.92)％,(57.51±4.89)％;(55.67±3.96)％,(60.34±6.89)％,(59.77±4.71)％,(63.45±5.67)％,与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 冬凌草甲素可以抑制脑胶质瘤U251细胞NF-κB蛋白的表达,经冬凌草甲素处理后的脑胶质瘤U251对替莫唑胺的敏感性增强.
-
秦艽对风湿热痹类风湿关节炎大鼠的保护作用
目的 研究秦艽对风湿热痹类风湿关节炎(RA)大鼠踝关节核因子κB(NF-κB)的表达及作用机制.方法 按照随机数字表法将SD大鼠分为8组,每组10只:正常组、疾病模型组(Ⅱ型胶原)、病证模型组(Ⅱ型胶原+风湿热)、阳性药组、秦艽组、秦艽+威灵仙组、秦艽+桑寄生组、秦艽+防己组.第1天,在大鼠的背部2点和尾根部1点的皮内注射Ⅱ型胶原(CⅡ)乳剂各0.1 mL,致炎;第2天(除正常组和疾病模型组外),用人工气候箱进行风湿热病证模型造模,连续11d;第12天,在大鼠左后肢足跖皮内注射CⅡ乳剂0.1 mL进行2次免疫作为激发注射,再放入人工气候箱进行风湿热病证模型造模,连续7d.造模结束后,各给药组按15 mL·kg-1给予对应的药液灌胃,正常组、2种模型组给予等量0.9％ NaCl,每天1次,连续21 d.第39天,踝关节取材,用苏木精-伊红(HE)染色技术观察踝关节组织的破坏程度,用免疫组织化学法测定核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平,用免疫印迹法对NF-κB的表达进行半定量分析.结果 与NF-κB在正常组的表达量105.08±7.97相比,疾病模型组和病证模型组的NF-κB蛋白表达量分别为170.57±8.93,180.02±6.93,差异均有统计学意义(均P ＜0.05),且病症模型组高于疾病模型组.各给药组之间比较,秦艽防己组的NF-κB蛋白表达量为112.37 ±7.34,差异有统计学意义(P＜0.05).NF-κB蛋白相对表达量:与正常组的0.41 ±0.16比较,疾病模型组和病证模型组的分别为0.78 ±0.12,1.08 ±0.11,差异均有统计学意义(均P＜0.05);与病证模型组比较,秦艽防己组的NF-κB蛋白相对表达量为0.53±0.04,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 各秦艽寒热不同配伍可能通过下调NF-κB,对RA起到保护作用,其中平寒相配效果佳.
-
与 P－糖蛋白及 MDR1基因关联的药物转运研究现状
P－糖蛋白（P－gp）由MDR1基因编码，腺苷三磷酸依赖的药物外向转运蛋白，是介导药物吸收与转运动力学的关键转运体。不少药物通过核因子κB（ NF－κB）和孕烷X受体（ PXR）信号通路直接影响MDR1基因和P－gp的表达，导致P－gp的功能发生改变，从而影响药物的吸收转运。因此，本文对P－gp介导的药物转运相互作用、药物对P－gp和MDR1基因表达的影响，以及与P－gp／MDR1基因表达相关的NF－κB和PXR信号通路的研究概况进行收集与探讨，以期从基因和蛋白水平上，为研究药物吸收转运特征的变化提供一定依据。
-
Mind Bomb－2基因通过调控核因子κB信号通路促进 U251增殖的实验研究
目的：研究Mind Bomb－2（MIB2）的表达对脑胶质瘤细胞U251增殖的影响。方法用蛋白质印迹法检测正常星形胶质细胞和胶质瘤细胞U251和MIB2蛋白的表达情况。将U251细胞、转染FLAG （一种20个碱基编码的标记蛋白）质粒的U251细胞和转染MIB2－FLAG质粒的U251细胞对应分为空白组、对照组和实验组。以蛋白质印迹法检测上述3组中MIB2的相对含量；采用实时定量PCR技术检测MIB2 mRNA在3组U251细胞中的表达情况；以蛋白质印迹法检测转染后U251细胞中MIB2、I Kappa B （ IkB）和核因子κB （ NF－κB）的表达；利用四甲基偶氮唑盐（ MTT ）实验检测转染后 U251细胞的增殖情况。结果 U251细胞MIB2的相对含量是星形胶质细胞的（17.04±2.91）倍；经MIB2－FLAG质粒转染U251细胞后，与对照组相比，实验组MIB2 mRNA增加（20.02±2.11）倍，实验组MIB2和NF－κB的蛋白表达增加（6.33±0.32）倍和（5.21±0.21）倍，实验组 IkB 的表达量为对照组的（0.43±0.04）倍；实验组MIB2－FLAG 质粒转染 U251细胞生长增殖速度明显增加（ P ＜0.001）。结论 MIB2通过调节NF－κB信号通路促进U251增殖。
关键词： Mind Bomb-2基因 核因子κB 增殖 脑胶质瘤 -
一种新合成化合物对臭氧诱导气道高反应小鼠肺部损伤的保护作用
目的:考察新型CD38抑制剂[5-(3-苯基丙酰氨基)-N-(4-乙氧羰基苯基)-1H-3-吲哚甲酰胺](T化合物)对臭氧诱导气道高反应(AHR)小鼠的疗效.方法:以丙卡特罗50 μg· kg-1为阳性药,采用梯度剂量的T化合物(12.5,25,50 mg·kg-1)治疗臭氧诱导的AHR小鼠,研究其治疗机制.结果:臭氧诱导的AHR小鼠模型的支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数量及丙二醛(MDA)含量增高、超氧化物歧化酶(SOD)含量降低,出现气道炎症的病理特征与气道高反应症状.T化合物治疗有效,且效果随着T化合物剂量升高而增强;丙卡特罗治疗效果也很明显.臭氧造模明显增加肺组织胞浆内磷酸化NF-κB p65与核内NF-κB p65表达量,导致肺组织胞浆内IκB-α与核内HDAC2降解;T化合物与丙卡特罗治疗能不同程度减轻上述蛋白表达变化.结论:T化合物能够有效治疗臭氧诱导AHR小鼠模型,且效果随着T化合物剂量升高而增强;其治疗机制可能通过降低氧化应激、上调HDAC2以及抑制NF-κB信号通路的激活.
-
核因子κB信号通路在炎症性肺部疾病中的作用
核因子（NF）κB是一种广泛存在多种组织细胞的转录因子，其信号通路的异常激活能导致哮喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）等肺部炎症性疾病的产生，而抑制其活性可有效缓解以上疾病的发生和发展。本文对NF-κB的生物学特征及其信号通路在哮喘和COPD等炎症性疾病中的作用以及NF-κB抑制剂治疗哮喘和COPD等炎症性疾病中的进展进行综述，为进一步阐述哮喘和COPD等肺部炎症性疾病的发病机制、预防及控制提供参考。
-
辛伐他汀对脑出血大鼠继发性炎症损伤的防治作用及作用机制研究
目的:观察辛伐他汀对大鼠脑出血后继发性炎症损伤的预防和治疗作用,并探讨作用机制.方法:选取9～12周龄的健康雄性SD大鼠60只为研究对象,随机分为对照组、模型组与辛伐他汀组,各20只.模型组和辛伐他汀组大鼠建立脑出血模型,建模成功后辛伐他汀组给予辛伐他汀[3 mg/(kg·d),qd]灌胃,模型组和对照组用等体积的生理盐水灌胃.比较三组神经功能行为学评分(NDS)、未损伤的神经元数目及脑组织中核因子 κB(NF-κB)、Toll样受体4(TLR4)和白介素(IL)-1β 的阳性细胞数.结果:建模后所有时间点,辛伐他汀组与模型组NDS均低于对照组,辛伐他汀组NDS均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);建模后12 h、24 h、48 h、72 h与7 d辛伐他汀组未受损神经元数目均高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);建模后7 d,辛伐他汀组和模型组NF-κB、TLR4、IL-1β 阳性细胞数目均高于对照组,辛伐他汀组NF-κB、TLR4、IL-1β 阳性细胞数目均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:辛伐他汀能抑制脑出血大鼠病变周围脑组织中NF-κB、TLR4和IL-1β 的表达,可能通过下调TLR4介导的NF-κB通路,进而抑制IL-1β,减轻炎症反应,减少脑组织的继发性炎症损伤.
-
白细胞介素10对人肾系膜细胞的细胞间粘附分子1表达的抑制作用通过核因子κB介导
目的:研究白细胞介素10(rhIL-10)对白细胞介素1β(rhIL-1β)诱导的人肾小球系膜细胞(human mesangial cells, hMsC)的细胞间粘附分子1(CD54)表达的影响及其细胞内作用机制.方法:用细胞ELISA法检测CD54蛋白水平表达,以Northern杂交方法测定CD54的基因表达,采用电泳迁移率变动法观察核因子κB(nuclear factor κB, NFκB)的活性.结果:20 ng*L-1的rhIL-10能抑制rhIL-1β诱导的CD54的表达,此抑制作用在rhIL-1β加入后的36 h内持续存在,rhIL-10还能抑制rhIL-1β诱导的hMsC CD54基因表达和核因子κB活化.结论:细胞因子rhIL-10对rhIL-1β诱导的hMsC 的CD54表达的抑制作用至少部分与其对NFκB活化及CD54基因表达的抑制有关.
-
益气养阴与解毒活血中药对心肌梗死后大鼠早期心室重构心肌NF-κB和PPAR-γ mRNA表达的影响
目的 研究益气养阴活血与解毒活血中药对心肌梗死后大鼠早期心室重构的影响及作用机制.方法 结扎Wistar雄性大鼠冠状动脉左前降支,造成急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为假手术组(只穿刺,不结扎)、模型组、培哚普利组、益气养阴活血组、解毒活血组(每组10只),分别灌胃,另设正常组10只给予等量水.4周后麻醉处死大鼠,检测左室重量指数(LVMI),测定动物血清高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)等炎症因子含量,利用反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)方法检测大鼠缺血心肌核因子κB(NF-κB) mRNA和过氧化物酶增殖体激活受体-γ(PPAR-γ) mRNA的表达水平.结果 与模型组比较,培哚普利组、益气养阴活血组、解毒活血组大鼠的左心室重量和LVMI均不同程度降低(P<0.01,P<0.05).解毒活血组能明显降低血清IL-6(P<0.05);益气养阴活血组和解毒活血组均能使心肌组织的PPAR-γ和NF-κBp65 mRNA的表达明显降低(P<0.05),解毒活血中药对PPAR-γ mRNA降低作用大于益气养阴活血中药(P<0.05).结论 益气养阴活血与解毒活血中药组分通过不同途径减轻大鼠AMI后组织炎症基因的表达,从而抑制大鼠AMI后的心室重构.
-
丹参单体对TNF-α诱导大鼠动脉平滑肌细胞NF-Κb和ICAM-1的影响
目的 观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)核因子κB(NF-κB)和细胞间黏附分子(ICAM-1)表达的影响,探讨丹参单体抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法 体外培养大鼠主动脉VSMC;RT-PCR法和免疫细胞化学法检测VSMCICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达;细胞ELISA和免疫细胞化学法检测NF-κB的表达.结果 TNF-α上调VSMC ICAM-1 mRNA和ICAM-1蛋白的表达,提高NF-κB水平(P＜0.01).两种丹参单体都抑制上述因子的表达,以丹酚酸B效果更佳.结论 丹参单体抗AS的机制之一是抑制炎症相关因子的表达,丹酚酸B抗炎效果优于丹参酮ⅡA.
-
模拟微重力下小鼠巨噬细胞感染空间诱变大肠埃希菌对炎性因子分泌和核因子κB表达的影响
目的 研究模拟微重力状态下小鼠巨噬细胞感染空间诱变大肠埃希菌(T1-13)后炎症反应及NF-κB表达的变化.方法 巨噬细胞随机分为4组:对照组(Con)、对照染菌组(Con+T1-13)、模拟微重力组(SM)、模拟微重力染菌组(SM+T1-13).细胞回转器模拟微重力效应,RT-qPCR检测细胞内炎性因子及NF-κB p65 mRNA表达;液相悬浮芯片多因子检测平台技术及硝酸还原酶法检测细胞培养液中炎性因子和总一氧化氮浓度变化;Western blot检测细胞中NF-κB信号通路相关蛋白表达.结果 染菌后,对照染菌和模拟微重力染菌组细胞分泌的炎性因子浓度、细胞内炎性因子及NF-κB p65 mRNA表达均显著升高;与对照组相比,模拟微重力组细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6分别升高168%、77.6%和187%;与对照染菌组相比,模拟微重力染菌组分泌炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6分别升高1.06%、6.78%、27.1%.巨噬细胞感染空间诱变大肠埃希菌后NF-κB p65 mRNA表达量显著升高,但是蛋白表达量显著下降,细胞内NF-κB激酶抑制剂β(IKKβ)、核因子κB激酶抑制剂α(IKKα)、磷酸化NF-κB p65蛋白表达量也显著下降.结论 模拟微重力可诱导巨噬细胞炎性因子分泌升高,空间诱变大肠埃希菌刺激后这种升高反应受到抑制,可能与NF-κB蛋白表达下调有关.
