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不同频度电针治疗大鼠慢性神经源性痛的疗效比较
慢性疼痛,尤其是慢性神经源性疼痛持续时间长,恢复较慢,对人身心健康危害很大,且难以控制.因此慢性神经源性痛的研究成为疼痛领域的研究热点与重点.本所在正常大鼠镇痛模型和慢性炎症痛模型中观察到,多次电针或TENS的镇痛作用不仅与刺激参数有关,而且主要取决于两次电针之间的时间间隔.本实验将大鼠右侧L5/L6脊神经结扎造成慢性神经源性痛模型,用引起缩足的机械刺激阈值(50%)来评价机械性痛觉超敏.用大鼠5 min内在5±1℃冷板上的抬脚次数来反映冷诱发的持续性疼痛.
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眼镜蛇镇痛素najanalgesin对大鼠神经病理性疼痛脊髓GLT-1的影响
目的:观察眼镜蛇镇痛素najanalgesin对L5脊神经结扎并剪断(spinal nerve ligation and transection,SNL)大鼠脊髓胶质细胞谷氨酸转运体亚型1(GLT-1)表达的影响,探讨najanalgesin脊髓镇痛机制.方法:100只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(A),SNL模型组(B),SNL+najanalgesin组(C),SNL+生理盐水对照组(D),SNL+najanalgesin+脂质体组(E),SNL+najanalgesin+脂质体+GLT-1反义寡核苷酸(As-ODNs,F)6组.鞘内分别注射10μL生理盐水(A,D),40ng·kg-1najanalgesin(C,E,F),每日1次,在注射najanalgesin的同时于第3天一次性注射脂质体+GLT-1As-ODNs10μL(F)以及脂质体10μL(E),术后1,4,7 d(A,B,C,D)及第7天(E,F)取各组大鼠L4～L6脊髓节段,检测各组GLT-1 mRNA和蛋白表达改变.结果:采用SNL成功建立了神经病理性疼痛模型.与假手术组相比,B,D组大鼠GLT-1 mRNA和蛋白表达先增加再降低,C组大鼠GLT-1 mRNA和蛋白表达明显增加,但不随时间变化.与D组相比,C组大鼠第7天GLT-1 mRNA和蛋白表达明显增高.与椎管内注射najanalgesin组相比,椎管内注射GLT-1As-ODNs后,F组GLT-1表达明显下降,而脂质体对照组GLT-1的表达基本不变.结论:najanalgesin可以增加脊髓GLT-1 mRNA和蛋白表达,是其脊髓镇痛机制之一.
关键词： 眼镜蛇毒 神经病理性疼痛 胶质细胞谷氨酸转运体1 脊神经结扎 -
异位电活动的特点及其与慢性神经病理性痛的关系
外周神经损伤后,受累的背根神经节(DRG)神经元及损伤部位发放大量异位放电,这种放电被认为是慢性神经病理性痛发生发展的基础之一,但近期这一理论受到越来越多实验的挑战.本文以脊神经结扎(SNL)模型为例,从三个方面就异位放电的特点及其与慢性神经病理性痛的关系进行论述:首先介绍异位放电的特点;然后根据现有的实验资料分析异位放电发生的可能分子机制,着重讨论电压依赖性钠离子通道在异位放电中的作用;后,从正反两方面分析了损伤的外周神经产生的异位放电在慢性神经病理性痛发生发展过程中的作用.
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脊神经结扎神经病理痛模型大鼠脊髓星形胶质细胞激活与痛行为的关系
目的:研究L5脊神经结扎模型大鼠脊髓星形胶质细胞的激活与痛行为之间的关系.方法:44只雄性SD大鼠180～220 g,随机分成4组,分别为假手术组、脊神经结扎1天、3天和7天组.行为学上使用von Frey Hair测定大鼠在上述各时间点50%缩足阈的变化(n=8),星形胶质细胞的激活使用免疫组织化学方法观察其特异性标志物GFAP的染色情况(n=3).结果:(1)脊神经结扎后1天动物出现机械性痛超敏,3天和7天痛行为稳定并持续存在;假手术组未见显著变化.(2)结扎侧脊髓背角星形胶质细胞在术后1天发生激活,3天和7天可见星形胶质细胞强烈的激活反应,假手术组亦可见轻微的激活.(3)脊神经结扎后,星形胶质细胞发生了激活,其激活程度和痛行为的产生和维持紧密相关.结论:脊髓背角星形胶质细胞的激活可能在神经病理痛中发挥作用.
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普瑞巴林对SNL模型大鼠镇痛作用及对脊髓背根神经节p-JNK表达的影响
目的:探究普瑞巴林(pregabalin, PGB)对脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠的镇痛效果及对脊髓背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)磷酸化氨基末端蛋白激酶(phosphorylated c-JunN-terminal kinase,p-JNK)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分为5组,假手术C组、SNL组、PGB治疗P1组、P2组和P3组,于术后第11天开始,PGB 3组分别每天一次灌胃PGB 15、30、60 mg/Kg,C组和SNL组给予生理盐水,连续4 d(Dll-D14).于术后第14天,测定给药前、给药后30、60、90、120、180 min各时间点的机械痛阈和热缩足反射潜伏期的变化,测定后每组随机取10只大鼠L5 DRG,免疫荧光法测定p-JNK在DRG的表达情况.结果:与C组相比,术后第14天,SNL、P1、P2、P3组的机械痛阈值和缩足反射潜伏期明显降低(P＜0.01),给药后,与SNL组相比,P1、P2、P3组的机械痛阈值和缩足反射潜伏期值逐渐增加,镇痛效果在100 min左右达到大,并呈剂量依赖.SNL组p-JNK存在高表达现象,P2组和P3组p-JNK表达明显下调.结论:普瑞巴林可以抑制脊神经结扎引起的痛敏现象,镇痛作用在给药后90～120 min达到大,并呈剂量依赖,其机制可能是通过降低p-JNK在DRG的表达而产生镇痛作用.
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腰5脊神经结扎大鼠腰4背根神经节神经元超极化激活电流的变化
目的:研究腰5脊神经结扎(L5 spinal nerve ligation,SNL)神经病理痛大鼠腰4背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元超极化激活电流(Ih)及其通道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)发生的可塑性变化.方法:以单侧L5 SNL制备神经病理痛大鼠模型,运用全细胞膜片钳技术记录和分析背根神经节神经元Ih的表达和激活特性.结果:L5 SNL之后,腰4 DRG神经元Ih的电流密度降低,单位电导下降,而翻转电位及电压依赖特性未发生显著性改变.结论:腰4DRG神经元Ih的这些变化可能贡献于L5 SNL大鼠的神经病理痛.
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损伤大鼠L5脊神经及其前后根对痛行为的影响
目的:观察大鼠腰5脊神经和脊神经根不同部位损伤对诱导神经病理性疼痛的不同作用.方法:采用腰5脊神经结扎加切断(lumbar 5 spinal nerve ligation,L5 SNL)、腰5前根切除(lumbar 5ventral rhizotomy,L5 VR)和腰5背根切除(lumbar 5 dorsal rhizotomy,L5 DR)诱导大鼠痛觉过敏,结合痛行为学测试观察病理性疼痛的发展过程.结果:(1)L5 SNL可引起大鼠病理性疼痛.双侧后肢50%撤足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)和撤足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)于术后1d明显下降,痛觉过敏的症状,在同侧后肢持续了5周,在对侧后肢也保持3周.(2)L5 VR也可诱导大鼠产生病理性疼痛.双侧后肢50%PWT和PWL于术后1d明显降低,并维持到了术后第5周.(3)L5 DR没有引起大鼠产生痛觉过敏症状.与术前基础值和假手术组比较,L5 DR后50%PWT和PWL均无明显变化.结论:选择性损伤运动纤维和损伤脊神经均能诱导大鼠产生病理性疼痛,但脊神经背根损伤不引起痛觉过敏.
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脊神经结扎诱导神经病理痛大鼠脊髓背角BDNF的含量和表达上调
目的:研究脊神经结扎(SNL)大鼠脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达的变化,并探讨其在神经病理痛形成中的作用.方法:按照双盲随机的原则,将30只雄性SD大鼠随机分为SNL手术组和假手术对照组,每组各15只大鼠,进行酶联免疫吸附实验(ELISA)和免疫组化染色,检测神经病理痛大鼠脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达随时间的变化.结果:(1)ELISA定量分析显示,脊神经结扎可以显著上调脊髓背角BDNF的含量.SNL后,背角BDNF的含量在24 h内即可由手术前的(91.09±7.1)pg/mg总蛋白上升到(160.75±15.0)pg/mg总蛋白(P<0.01),这种上调的高峰可以持续到SNL后的48 h;然而在假手术大鼠,背角BDNF的含量则没有明显的变化.与假手术组相比,SNL大鼠背角BDNF上调的高峰期在24～48 h(P<0.01),此后其含量开始逐渐恢复,至SNL后28 d基本恢复至术前对照水平(P0.05);(2)免疫组化染色显示,在脊神经结扎的24h内,SNL大鼠结扎侧背角BDNF的蛋白表达也呈现明显的时间依赖性上调变化.SNL后12 h,背角浅层BDNF免疫反应的平均光密度值即可由手术前的0.18±0.01上调到0.25±0.03(P<0.05).与假手术组相比,在SNL后的12 h和24 h,SNL大鼠结扎侧背角浅层BDNF的免疫反应较假手术大鼠也明显上调,其平均光密度值分别由假手术大鼠的0.19±0.02和0.18±0.01上调到0.25±0.03(P<0.05)和0.23±0.01(P<0.05).结论:脊神经结扎可以呈时间依赖性的上调脊髓背角BDNF的含量和蛋白表达,这种上调的BDNF可能在外周神经损伤所引起的神经病理痛的早期发挥作用.
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大鼠SNL神经痛模型不同时相背根神经节TRPV1的活化形式
目的:研究大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)神经痛模型不同时相背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)TRPV1的活化形式.方法:大鼠随机分为正常(D 3)组、模型(D 3)组、正常(D 15)组与模型(D 15)组.采用SNL方法制作大鼠神经痛模型.检测造模后第三天(D 3)与第15天(D 15)大鼠术侧缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT),L4～6 DRG TRPV1表达与磷酸化水平.结果:SNL模型大鼠早期即出现痛觉敏化现象,直至实验结束.D3、D15术侧PWT显著下降(P＜0.001).D3 L4～6DRG TRPV1表达均下降(p＜0.05,P＜0.01,P＜ 0.01);L5 DRG TRPV1磷酸化水平上升(P＜ 0.001),L4、L6 DRG TRPV1磷酸化水平下降(P＜0.01,P＜ 0.05).D 15 L5 DRG TRPV1表达水平下降(P＜0.01),L4、L6 DRG TRPV1表达水平上升(P＜0.05);L4～6 DRG TRPV1磷酸化水平均下降(P＜0.01,P＜0.001).结论:SNL神经痛的发生、维持与DRG TRPV1的活化有关.SNL神经痛的早期,TRPV1的活化与损伤DRG TRPV1磷酸化水平升高有关;SNL神经痛的维持阶段,TRPV1的活化与邻近未损伤DRG TRPV1表达增强有关.
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牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物不同穴位注射对神经病理性疼痛大鼠的疗效比较
目的:比较不同穴位注射牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物(神经妥乐平)治疗大鼠神经病理性疼痛的疗效.方法:构建L5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型大鼠,将成功模型随机分为5组(n=10),分别为SNL组、神经妥乐平+L5“夹脊”穴组、神经妥乐平+L5“环跳”穴组、神经妥乐平+ L5“委中”穴组及神经妥乐平+L5“足三里”穴组,于穴位注射0d、1d、3d、5d、7d、10d、14d测定大鼠双足50％机械缩足反应阈值.结果:神经妥乐平注射四个不同的穴位均有较好的镇痛作用,四个穴位镇痛强度之间无显著差异.结论:在本实验条件下,“委中”、“环跳”、“足三里”、L5”夹脊”穴注射神经妥乐平治疗神经病理性疼痛均有较好的镇痛疗效.
关键词： 牛痘疫苗接种家兔炎症皮肤提取物 穴位 脊神经结扎 神经病理性疼痛 -
脊髓中内源性5-TH耗竭有助于减轻脊神经结扎动物对机械和凉刺激产生的痛觉敏化
近,有一个振奋人心的证据表明:有种很强的易化性驱动力调节着脊髓伤害性信息的传递,该驱动力起源于延髓头端腹侧区(RVM)并部分地由5-HT通路介导.
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大鼠SNL神经性疼痛模型的建立
目的 建立大鼠L5和L6脊神经结扎(Spinal nerve ligation,SNL)疼痛模型并进行评价.方法 根据大鼠痛阈值测定结果,选择90只符合要求的SD雄性大鼠进行手术操作,术后每隔1d测定大鼠后足的机械痛阈值,比较术前和术后大鼠对疼痛刺激的反应变化.结果 术后大鼠左足的痛阈值逐渐降低,至10d后趋于稳定,与术前有明显差异(P≤0.01);右足的痛阈值微有升高,保持在稳定的水平内.结论 本研究建立的大鼠SNL模型机械痛阈变化明显,稳定性好,可靠性高,可以作为大鼠一种神经病理性疼痛的模型.
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鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体对脊神经结扎模型所引起的热痛敏的镇痛作用
目的:研究鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体在大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型所引起的神经病理性痛中的镇痛作用.方法:建立大鼠SNL模型,分别在手术前和手术后鞘内给予米诺环素100 μg、在手术后鞘内给予IL-6的中和抗体0.03 μg、手术后鞘内联合给予两种药物,观察给药3天各组大鼠热刺激的缩足反应潜伏期(paw withdrawal latencies,PWL).结果:①SNL手术前后给予米诺环素都可以提高大鼠的PWL(P＜0.05),但SNL手术前给药对大鼠PWL的提升明显高于手术后给药(P＜0.05).②手术后给予IL-6的中和抗体可以有效提升SNL组的PWL(P＜0.05),但是还是比给予生理盐水的假手术组大鼠的PWL明显减少(P＜0.05).③手术后联合给予两种药物可以明显逆转SNL组的PWL(P＜0.05).④联合给药对大鼠PWL的提高明显高于SNL手术后给予米诺环素组和给予IL-6的中和抗体组(P＜0.05),但与手术前给予米诺环素组的PWL相比无明显差异(P＞0.05).结论:鞘内联合给予米诺环素和IL-6的中和抗体对SNL引起的神经病理性痛有明显的镇痛作用.
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脊髓IL-6在脊神经结扎模型所引起的热痛敏中的作用
目的:研究脊髓中IL-6在大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)所引起的神经病理性痛中的作用.方法:建立大鼠SNL 模型,以ELISA法检测脊髓IL-6含量.鞘内分别给予外源性IL-6,以及IL-6的中和抗体以拮抗内源性的IL-6,观察大鼠对热刺激的缩足反应潜伏期(paw withdrawal latencies,PWL).结果:①SNL手术后3天和7天,脊髓IL-6水平明显上调(P＜0.05).②手术7天后给予外源性IL-6不能明显引起假手术组的PWL变化,但是与给予生理盐水的假手术组和SNL组相比,给予IL-6的SNL组PWL明显下降(P＜0.05).③手术7天后给予IL-6的中和抗体不能引起假手术组的PWL改变,但是与给予生理盐水的SNL组相比,给予中和抗体的SNL组PWL明显上升(P＜0.05).结论:IL-6在脊神经结扎模型所引起的神经病理性痛中发挥促伤害性作用.
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低频电针改善SNL模型大鼠早期神经痛背根神经节辣椒素受体的机制
目的 探讨低频电针干预早期神经痛背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)辣椒素受体(Transient receptor potential vanilloid type 1,TRPVl)的机制.方法 将32只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组与电针组,每组8只.采用脊神经结扎的方法制作大鼠神经痛模型.取患侧足三里、昆仑穴进行2 Hz电针治疗,连续3d.检测大鼠术侧后足缩腿阈(Paw withdrawal threshold,PWT),L5DRG TRPV1表达与磷酸化水平.进一步开展PKC激动剂PMA与PKA激动剂db-cAMP拮抗2 Hz电针镇痛作用的验证性实验.结果 SNL模型大鼠早期即出现自发性疼痛,PWT显著下降(P＜0.001),L5DRG TRPV1表达水平降低(P＜0.01),磷酸化水平升高(P＜0.001).SNL假手术组大鼠PWT没有显著变化.2 Hz电针能提高SNL模型大鼠的PWT (P＜0.001),降低L5 DRG TRPV1磷酸化水平(P＜0.05).PMA与db-cAMP足部局部注射能拮抗2 Hz电针的抗神经痛作用(P＜0.001,P＜0.001).结论 早期神经痛与损伤DRG TRPV1磷酸化水平升高有关.低频电针能改善早期神经痛,可能与下调损伤DRG的TRPV1磷酸化水平有关.
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依达拉奉通过降低脊神经结扎大鼠背根神经节和脊髓pJNK抑制痛敏
目的:观察依达拉奉对脊神经结扎(SNL)大鼠痛敏的影响及其作用机制.方法:将SD雄性大鼠随机分为假手术(Sham)组、SNL模型组和依达拉奉(Eda)组,观察脊神经结扎大鼠术前及术后7 d机械痛反应阈值(PWMT)的变化;在术后相应时间点取各组大鼠手术侧L5和L4及对侧L5背根神经节(DRG)和脊髓,观察pJNK在DRG和脊髓中的表达分布及依达拉奉对pJNK表达的影响.结果:依达拉奉可以减轻脊神经结扎引起的痛敏现象;SNL组术后24 h手术侧L5DRG中pJNK阳性神经元的表达增加,术后3 d免疫双荧光显示脊髓中 pJNK在星型胶质细胞中存在高表达现象;依达拉奉可以降低相应时间点DRG和脊髓中pJNK表达的含量.结论:依达拉奉能抑制脊神经结扎引起的痛敏现象,其机制可能是通过降低脊髓和DRG中pJNK的含量而产生镇痛作用的.
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右美托咪定对脊神经结扎大鼠脊髓背角高迁移率族蛋白B1的影响
目的 观察右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对脊神经结扎大鼠机械痛阈和热痛阈的作用及对脊髓背角高迁移率族蛋白Bl (high mobility group box 1 protein,HMGBl)的影响. 方法 雄性SD大鼠30只,采用随机数字表法随机分为3组:假手术组(Sham组)、脊神经结扎组(SNL组)和DEX处理组,每组10只.各组大鼠经L4-5鞘内置管后,SNL组和DEX组大鼠行左侧L5脊神经结扎术.DEX组于术后鞘内注射DEX 2 μg/10μl,Sham组和SNL组注射等容生理盐水,每日1次,连续7d.观察各组大鼠行为学变化.7d后处死大鼠,Western blot法检测大鼠左侧L¨脊髓背角HMGBl表达. 结果 SNL组大鼠左后肢缩足反应阈值(paw withdrawal threshold,PWT)和缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)在术后第1天和第3天开始分别明显降低,且持续到术后第7天(P＜0.05).术后第7天PWT、PWL分别为(12.9±1.6)g和(8.3±0.9)s,与Sham组比较分别降低67％和41％(P＜0.05),而脊髓背角HMGBl表达增高84％(P＜0.05)；与SNL组比较,DEX组大鼠相应时间点PWT和PWL明显增高(P＜0.05).术后第7天PWT、PWL分别为(22.3±3.2)g和(10.4±1.1)s,较SNL组分别升高73％和25％(P＜0.05),而脊髓背角HMGBl表达降低29％(P＜0.05). 结论 脊髓背角HMGB1表达增高参与了SNL诱导的神经病理痛；鞘内注射DEX能明显缓解SNL诱导的神经病理痛,其镇痛作用可能与抑制大鼠脊髓背角HMGB1水平有关.
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脊髓背角内NDRG2在脊神经结扎神经病理性痛模型大鼠中的作用
目的 通过鞘内注射 N-myc 下游调节基因2(NDRG2)干扰腺病毒(AD-Ndrg2-RNAi),研究脊髓背角内 NDRG2在脊神经结扎(SNL)神经病理性痛模型大鼠中的作用.方法 雄性 SD大鼠42只,体重180~230 g,随机分为假手术组(sham 组,n=6)和 SNL组(n=36),sham组仅暴露脊神经不结扎,SNL组行 L5脊神经结扎术.分别测定术前1 d、术后1、3、7、10、14和21 d大鼠术侧足底机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).SNL 组大鼠各相应时点行为学测试后分别处死,取术侧脊髓腰膨大,检测NDRG2蛋白含量和mRNA表达量.另取48只雄性SD大鼠行鞘内置管后随机分为四组(n=12):sham+生理盐水组(CS 组)、sham+AD-Ndrg2-RNAi 组(CA组)、SNL+生理盐水组(SS组)和 SNL+AD-Ndrg2-RNAi组(SA组);CS、SS两组大鼠术后3 d鞘内单次注射生理盐水10 μl,CA、SA两组大鼠相同时点鞘内单次注射10 μl,滴度为2×109PFU/ml的AD-Ndrg2-RNAi.于 SNL术前1 d、术后1、3、7和10 d分别测定大鼠足底 MWT和TWL.术后10 d行为学测试后处死大鼠,取术侧脊髓腰膨大,检测 NDRG2和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白含量,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测 NDRG2 mRNA 的表达量.结果 与 sham 组比较, SNL组术后1、3、7、10、14、21 d MWT明显降低(P<0.01),术后3、7、10、14、21 d TWL明显缩短(P<0.01).与术前1 d比较,SNL组脊髓背角内 NDRG2的蛋白含量和 mRNA表达量在术后1 d明显降低,术后7、10、14、21 d 明显升高(P<0.05).与 CS 组比较,SS 组和 SA 组术后1、3、7、10 d MWT明显降低,TWL 明显缩短(P<0.05);与 SS 组比较,SA 组术后7、10 d MWT 明显升高, TWL明显延长(P<0.05).与CS组比较,术后10 d CA组脊髓背角内NDRG2的蛋白含量和 mR-NA表达量均明显降低(P<0.05),SS组均明显升高(P<0.05);与 SS组比较,SA 组脊髓背角内NDRG2的蛋白含量和 mRNA表达量均明显降低(P<0.05).与 CS组比较,术后10 d CA、SS、SA组脊髓背角内 GFAP蛋白含量均明显升高(P<0.05).结论 NDRG2蛋白含量升高参与了神经病理性痛的形成,鞘内注射 AD-Ndrg2-RNAi明显抑制大鼠脊神经结扎造成的慢性病理性疼痛,提示星形胶质细胞中的 NDRG2参与慢性病理性疼痛的发生和发展.
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鞘内注射PDE4B-siRNA对L5脊神经结扎大鼠痛觉高敏的影响
目的 观察鞘内注射针对磷酸二酯酶4B(PDE4B)基因的小于扰RNA(siRNA)对L5脊神经结扎(SNL)大鼠的热痛觉及机械痛觉高敏的影响.方法 雄性SD大鼠70只,随机均分为假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(V组)、错配siRNA组(siRNA-M组)和PDE4B-siRNA组(siRNA-B组),分别于神经结扎术后即刻以及术后1、3、5、7d鞘内注射生理盐水、生理盐水、Lipofectamine(R)RNAiMAX、错配siRNA 2 μg和PDE4B-siRNA 2 μg,容量均为10μl.PDEAB-siRNA、错配siRNA与载体均在注射前30 min混匀.于术前ld及术后2、4、6、8d分别测定五组大鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)；术后4、8d行为学测试结束后每组各处死6只大鼠,取腰段脊髓,采用实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)和western bolt分别测定PDE4B的mRNA和蛋白表达.结果 与术前1d比较,术后2、4、6、8 dNS组、V组、siRNA-M组和siRNA-B 组大鼠MWT明显缩短、TWL明显减小(P＜0.05).与NS组比较,术后2、4、6、8 d siRNA-B组大鼠MWT明显延长、TWL明显增加(P＜0.05).与Sham组比较,术后4、8dNS组、V组、siRNA-M 组、siRNA-B组大鼠脊髓组织的PDE4BmRNA、PDE4B蛋白表达升高(P＜0.05).与NS组比较,术后4、8dB组大鼠脊髓PDE4B mRNA、PDE4B蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 鞘内注射PDE4B-siRNA可显著抑制L5 SNL大鼠腰段脊髓PDE4B的mRNA和蛋白表达,有效缓解机械和热痛觉高敏.
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眼镜蛇镇痛素对大鼠神经病理性疼痛脊髓GLAST mRNA的影响
目的:观察椎管内注射眼镜蛇毒najanalgesin对大鼠L5脊神经结扎并剪断(spinal nerve ligation and transection,SNL)术后脊髓谷氨酸-天冬氨酸转运体GLAST (glutamate-asparate transporter,GLAST) mRNA表达的影响,探讨najanalgesin脊髓镇痛机制.方法:采用L5SNL模拟神经病理性疼痛,von Frey hair测定大鼠术侧后足50％机械刺激撤足反射阈值(50％paw withdrawal threshold,PWT)判断模型成功,real-time PCR检测SNL 7 d后脊髓L4-L6GLAST mRNA表达.结果:SNL诱导大鼠产生了机械痛敏,表现为50％机械刺激PWT降低,模型复制成功.SNL 7d后脊髓GLAST mRNA表达降低,椎管内给予najanalgesin剂量相关上调SNL大鼠脊髓GLAST mRNA的表达.结论:Naj analgesin可以增加脊髓GLAST mRNA的表达,可能是其脊髓镇痛机制之一.
关键词： 眼镜蛇毒 神经病理性疼痛 谷氨酸-天冬氨酸转运体 脊神经结扎
