TRPV1 UTR-3基因多态性与北京汉族儿童哮喘的易感性研究

目的 研究TRPV1 UTR-3基因多态性对北京汉族儿童哮喘易感性的影响.方法 采用ISSAC统一问卷进行病例对照研究,从美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库选取TRPVl基因UTR-3区域rs58868916、rs9899485、rs4790521、rs4790522、rs402369及ENSSNP11193515作为目的SNP.通过PCR方法检测177名哮喘儿童、44名遗传性过敏症儿童及151名非哮喘对照儿童豫TRPV1基因多态性;通过Hardy-Weinberg平衡检验、卡方检验、连锁不平衡(LD)分析、Logistic回归分析和模型拟合,分析TRPV1基因SNP等位基因频率(MAF)、基因型及单倍型差异.结果 Hardy-Weinberg平衡检验的P>0.05,满足基因型均衡要求;哮喘儿童与对照rs4790521T/C等位基因频率有显著差异(P<0.05);rs4790522A/C杂合子携带者哮喘患病风险显著低于纯合子A/A及C/C携带者(OR=0.588,95%CI=0.376～0.920,P<0.05),rs4790521隐性纯合子C/C携带者哮喘患病风险显著高于纯合子T/T及杂合子T/C携带者(OR=2.94,95%CI=1.32～6.53,P<0.01);LD分析显示rs4790521与rs4790522存在连锁不平衡(D'=0.959,r~2=0.120),此2位点SNP构建出3个频率大于0.10的单倍型;通过Logistic逐步回归调整年龄、性别、家族遗传史及家庭成员吸烟等混杂因素后,rs4790521SNP的MAF、隐性纯合子C/C、及单倍型Hap2-C/C与儿童哮喘密切相关,是影响儿童哮喘易感性的重要危险因素,P值均小于0.05.结论 TRPV1基因UTR-3多态性与中国北京汉族儿童哮喘易感性相关.

龙血竭总黄酮的镇痛作用及其机制研究

龙血竭是一种传统的镇痛抗炎药物,为进一步明确龙血竭镇痛作用的主要部位,本文研究了来自剑叶龙血树的龙血竭总黄酮(Total Flavonoids of Dragon's blood,TFD)的镇痛作用及其机制.通过在体实验评价TFD的镇痛效果及其急性毒性,利用全细胞膜片钳技术研究其对大鼠背根神经节神经元上TRPV1和电压门控性钠离子通道的作用.实验结果显示2～20 mg/kg剂量的龙血竭总黄酮对福尔马林模型第Ⅱ相疼痛有显著抑制效果;0.02-2 mg每只小鼠剂量的TFD可以显著降低辣椒素引起的舔脚时间.上下法急性毒性实验表明TFD对小鼠的LD50大于5 g/kg.TFD对1 u mol/L辣椒素所激发的TRPV1电流的大抑制率为(50.6±2.2)％,半数抑制浓度为(10.6±0.8)ug/mL.TFD浓度依赖性地抑制电压门控性TTX-s和TTX-r型钠离子通道电流,其对TTX-s和TTX-r型钠通道的半数抑制浓度分别是(19.8±3.0)ug/mL和(36.3±4.6)μg/mL.TFD可升高TTX-s和TTX-r型钠通道的半激活电压,并降低它们的半失活电压.TFD具有较好的镇痛作用并且无明显急性毒性,它的镇痛效应的机制之一是通过在痛觉传输通路上同时对电压门控性钠通道和TRPV1受体进行调制而起作用.

TRPV1及相关细胞因子对儿童支气管哮喘调控机制及中药调控作用研究

目的:探讨TRPV1基因及相关细胞因子对儿童支气管哮喘的调控机制及中药对TRPV1及相关细胞因子的调控.方法:通过KEGG数据库结合文献搜索绘制儿童支气管哮喘初步调控网络图,并对模型中的关键节点进行中药相关文献及数据库检索.结果:KEGG数据库结合前期研究及文献搜索绘制出儿童支气管哮喘的初步调控网络图.目前,已有研究表明大黄素、黄芩甙、延胡索、龙血竭等中药对调控网络中的TRPV1基因具有不同程度的下调作用;益肾平喘活血合剂能够抑制细胞因子IL-2的水平、促进细胞因子IL-4的水平,并呈剂量依赖性;而黄芪能够调节Th1 /Th2比值,喘敷灵穴位贴能升高IFN-γ的水平,并且二者均能降低血清中IL-4水平.结论:本研究绘制的儿童支气管哮喘的初步调控网络图对儿童支气管哮喘的调控机制及中药治疗提供了一定的基础.

不同病理痛早期电针镇痛频率优选及其脊髓背角TRPV1活化机制研究

目的:筛选炎性痛和神经病理痛早期电针镇痛的优势频率并探讨其脊髓背角TRPV1活化的干预机制.方法:SD大鼠60只,随机分为空白组、炎性痛模型组、2Hz电针Ⅰ组、100Hz电针Ⅰ组、2/100Hz电针Ⅰ组;假模型组、神经病理痛模型组、2Hz电针Ⅱ组、100Hz电针Ⅱ组和2/100Hz电针Ⅱ组,每组6只.炎性痛模型选用弗氏完全佐剂(CFA)模型,神经病理痛模型选用坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型.取双侧足三里、昆仑进行电针干预.采用Von Frey丝检测各组大鼠造模后1d及电针治疗1、3d时患侧50％足底机械缩足反应阈值(PWTs);采用免疫印迹法测大鼠患侧SCDH TRPV1、p-TRPV1的表达.结果:100Hz电针升高CFA大鼠早期患侧PWTs的作用显著(P＜0.05);2Hz电针升高SNI大鼠早期患侧PWTs的效果显著(P＜0.01).CFA和SNI模型组大鼠早期SCDH TRPV1、p-TRPV1蛋白表达显著升高(P＜0.05);100Hz和2Hz电针分别降低了CFA和SNI大鼠早期SCDH TRPV1、 p-TRPV1的蛋白表达(P＜0.05).结论:100Hz、2Hz电针分别为干预炎性痛和神经病理痛早期的优势频率电针;优势频率电针的镇痛效应可能通过调控炎性痛和神经病理痛大鼠早期SCDH TRPV1受体活化实现.

不同灸温对高脂血症小鼠胆固醇及“神阙”穴皮肤的影响

目的:通过观察不同温度艾灸对急性高脂血症模型小鼠胆固醇及“神阙”穴皮肤的影响,探讨艾灸效应与瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)的相关性.方法:32只C57BL/6J野生型(WT)小鼠选取8只作为空白组,余24只采用注蛋黄乳法制备急性高脂血症模型,造模成功后随机分为模型组、38℃艾灸组、46℃艾灸组,每组8只.38℃艾灸组施灸温度控制在(38±1)℃,46℃艾灸组施灸温度控制在(46±1)℃,两组均取“神阙”和双“足三里”,每穴每次艾灸10 min,每日1次,共治疗2次.空白组和模型组以同样方法抓取固定,不予艾灸治疗.治疗结束后,采用氧化酶法检测血清胆固醇含量;HE染色观察各组小鼠“神阙”穴皮肤组织形态;免疫组化法检测皮肤组织内TRPV1的表达.结果:①与空白组比较,模型组血清胆固醇含量升高(P＜0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较模型组降低(P＜0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较38℃艾灸组降低(P＜0.01).②38℃艾灸组皮肤组织形态结构有轻微的改变;46℃艾灸组皮肤组织形态结构改变明显,出现了特异性的变化.③46℃艾灸组“神阙”穴皮肤组织内TRPV1表达与空白组、模型组比较差异均有统计学意义(均P＜0.01),与38℃艾灸组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论:温度是影响小鼠胆固醇和穴位皮肤的重要因素,艾灸效应与TRPV1有相关性.

热敏通道与辛味中药的解表原理

表证是外感病邪引发的一类初期综合表现,以恶寒、发热、苔薄、脉浮为主,常常伴随疼痛、咳嗽或腹泻.恶寒、寒战是对外邪初期的抵抗,其本质是诱导产热,从而诱发骨骼肌的颤抖高效产热,为发热做动员.发热不利于病邪(病原微生物)的生存,而有利于人体正气的增强,但高热会危及生命,人体有相应机制应对.辛味中药中的TR PV1激动剂在早期使用,可以成功抑制寒战,阻止产热;在发热期使用可以迅速使得腠理开泄,汗出热退且不易反弹.此外,这些激动剂也有优良的止痛、止咳作用,对外感证有全面的疗效.辛味中药在解表时优先考虑其辛散作用,至于其温凉之分的分子意义有待进一步阐明.热敏通道激动剂的消炎作用并非杀菌或病毒,而是阻止其病理产物不良信号的传递.由于感染的复杂多样性,应将解表法与其他治法有机结合起来使用.

不同寒热药性中药对酵母致热大鼠体温调节及温度敏感瞬时感受器电位离子通道(TRPs)蛋白的影响

目的:观察比较4种典型寒、热药性中药对酵母致大鼠发热模型体温的干预影响以及温度敏感瞬时感受器电位离子通道(TRPs)蛋白的调节作用.方法:背部皮下注射酵母混悬液建立大鼠发热模型,108只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、大黄组、黄连组、吴茱萸组和高良姜组,分别于造模后第4,8,12 h取下丘脑和背根神经节,通过免疫组化和Western blot方法检测下丘脑和背根神经节中温度敏感瞬时感受器电位离子通道蛋白TRPV1和TRPM8的水平.结果:与正常组相比,注射酵母后模型组大鼠体温明显上升,8h达到高峰期(P＜0.01);下丘脑和背根神经节中TRPV1水平显著升高,TRPM8水平则明显降低.与模型组比较,大黄和黄连可显著降低酵母引起的大鼠体温升高,下调下丘脑和背根神经节中TRPV1水平,上调TRPM8水平(P＜0.05或P＜0.01);吴茱萸和高良姜对发热大鼠的体温和TRPs均无明显影响.结论:寒性中药大黄和黄连能降低酵母致热大鼠的体温,其作用可能与其对下丘脑和背根神经节中TRPV1和TRPM8的有效调节有关;热性中药吴茱萸和高良姜无相关作用.

TRPV1与中药止痛作用研究进展

瞬时感受器电位香草酸受体l(trannsient receptor potentialvanilloid 1,TRPV1)是一种非选择性阳离子通道,主要表达在感觉神经元上,属于瞬时感受器电位(transient receptor potential,TRP)家族成员之一.该受体可被机械性刺激,化学性刺激或内源性配基等激活,介导疼痛的传递,导致机体功能损伤.中医认为疼痛的发生机制为“不通则痛”,寒性收引和瘀血阻滞均能导致血脉不通而疼痛,清热解毒中药多数具有抗炎效果,温里药和活血化瘀药具有通畅血脉的作用.因此,无论从抗炎角度或通脉角度,清热解毒药、温里药和活血化瘀药均具有止痛作用.该文以TRPV1为靶点,对上述3类中药的止痛作用研究进行了综述.

TRPV1通道在动脉粥样硬化中的作用

瞬时感受器电位香草酸受体1型(TRPV1)又名辣椒素受体,属于瞬时感受器电位通道超家族成员,是一种非选择性阳离子通道,在哺乳动物中分布广泛,在神经组织如大脑、小脑、下丘脑、海马和非神经组织如心、肝、肾、脾等组织和器官皆有存在.TRPV1通道初只是被发现介导痛觉传递,近年来越来越多的研究发现TRPV1通道在心血管疾病领域也扮演着重要角色.本文主要综述TRPV1通道在动脉粥样硬化性疾病方面的作用,深入认识TRPV1与动脉粥样硬化的关系,为防治动脉粥样硬化性疾病提供新的方向和思路.

PIP2对外周伤害性信息整合器T RPV1活性的调控作用

瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid subfamily，member 1， TRPV1）是瞬时电压感受器阳离子通道（transient receptor potential cation channel，TRP）家族成员之一，可被伤害性热刺激或一些化学分子所激活，在热痛觉敏化形成过程中发挥重要作用，其功能活性在转录后水平受到多种方式的调控。近年来，磷脂酰肌醇4，5二磷酸（phosphatidylinositol 4，5-bisphosphate，PIP2）调节离子通道活性的研究不断深入，因此PIP2对TRPV1的调控作用受到愈来愈多的关注，但研究结果尚存一些争议。本文着重就近年来，对于PIP2对TRPV1的活性调控以及二者之间的结合等方面的研究进展加以整理和总结。

大鼠SNL神经痛模型不同时相背根神经节TRPV1的活化形式

目的:研究大鼠脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)神经痛模型不同时相背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)TRPV1的活化形式.方法:大鼠随机分为正常(D 3)组、模型(D 3)组、正常(D 15)组与模型(D 15)组.采用SNL方法制作大鼠神经痛模型.检测造模后第三天(D 3)与第15天(D 15)大鼠术侧缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT),L4～6 DRG TRPV1表达与磷酸化水平.结果:SNL模型大鼠早期即出现痛觉敏化现象,直至实验结束.D3、D15术侧PWT显著下降(P＜0.001).D3 L4～6DRG TRPV1表达均下降(p＜0.05,P＜0.01,P＜ 0.01);L5 DRG TRPV1磷酸化水平上升(P＜ 0.001),L4、L6 DRG TRPV1磷酸化水平下降(P＜0.01,P＜ 0.05).D 15 L5 DRG TRPV1表达水平下降(P＜0.01),L4、L6 DRG TRPV1表达水平上升(P＜0.05);L4～6 DRG TRPV1磷酸化水平均下降(P＜0.01,P＜0.001).结论:SNL神经痛的发生、维持与DRG TRPV1的活化有关.SNL神经痛的早期,TRPV1的活化与损伤DRG TRPV1磷酸化水平升高有关;SNL神经痛的维持阶段,TRPV1的活化与邻近未损伤DRG TRPV1表达增强有关.

脉冲射频背根神经节对CCI模型大鼠脊髓中 Iba1和TRPV1表达的影响

目的:对慢性坐骨神经缩窄损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠实施背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)脉冲射频(pulsed radiofrequency,PRF),探讨对其疼痛行为学和脊髓中离子钙结合适配器分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)、瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid type 1,TRPV1)表达的影响.方法:雄性SD大鼠100只随机分为4组:假手术组(Sham)、CCI组、CCI+PRF组、CCI+free-PRF组,每组25只.除Sham外,其余三组结扎右侧坐骨神经主干制作CCI模型.CCI后第7 d,CCI+PRF组于术侧L4-5 DRG行6 min的标准PRF治疗.CCI+free-PRF组仅在相同位置放置射频电极,无脉冲治疗.观察大鼠CCI前,CCI后1、3、5、7 d,PRF后1、7、14 d痛阈改变.术前、CCI后第7 d、PRF后14 d采用RT-PCR、免疫荧光法检测脊髓Iba1(小胶质细胞特异性抗体)和TRPV1表达.结果:CCI后,与Sham组比,CCI组、CCI+PRF组、CCI+free-PRF组大鼠痛阈均显著降低(P<0.05),脊髓Iba1、TRPV1表达均增强(P<0.05).脉冲射频后,CCI+PRF组痛阈较CCI组和CCI+free-PRF组显著升高(P<0.05),脊髓Iba1、TRPV1表达则明显减少(P<0.05).结论:脉冲射频可有效减轻CCI大鼠的神经病理性疼痛,可能与抑制大鼠脊髓中小胶质细胞活化、TRPV1表达有关.

外周神经元PKCε-TRPV1通路在痛转化中的作用及中间信号分子

痛转化指疼痛由急性向慢性转化的过程.干预痛转化的发生,有助于缓解慢性痛的发生与发展.蛋白激酶Cε(protein kinase C epsilon,PKCε)是重要的细胞内信号传导分子,参与多种生理病理状态过程.瞬时受体亚型1(transient receptor potential Vanilloid 1,TRPV1)是其主要下游信号分子之一,也被证实参与各类慢性疼痛的形成与维持.新研究表明,外周神经元PKCε-TRPV1信号通路是痛转化产生的关键环节.本文将进一步明确PKCε-TRPV1信号通路及可能的中间信号分子在痛转化中的作用,为慢性疼痛的治疗提供新的思路.

痛觉感受相关的TRP离子通道蛋白研究进展

疼痛是机体对外界伤害性刺激产生的一种不愉快感觉,与临床上包括癌症、糖尿病、关节炎等在内的多种疾病的病理过程相关.瞬变感受器离子通道蛋白是一类非选择性阳离子通道蛋白超家族,目前已有七个亚族、30多个成员在哺乳动物中被相继发现.近年研究表明TRPV亚家族中TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4以及TRPM亚家族中 TRPM8和TRPA亚家族中TRPA1与痛觉的产生关系密切.本文主要对上述离子通道与各种伤害性刺激引起的痛觉增敏的病理机制进行简要综述.

TRPV1和TRPA1激活引起肌肉伤害性感受和机械性痛觉过敏

TRPV1与功能性胃肠病内脏高敏感关系研究进展

功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders,FGIDs)是一组以腹痛、腹胀、恶心、呕吐、腹泻、便秘及排便困难等症状为临床表现,同时排除器质性病变的一类胃肠疾病综合征.FGIDs在普通人群的发生率达到34.6%[1],其症状的产生与多种生理、病生理改变有关,如胃肠动力异常、内脏感觉过敏、脑-肠轴调节障碍、炎症、社会心理因素和应激等.内脏高敏感与FGIDs的关系越来越受到人们的重视,其中辣椒素受体在内脏高敏感产生中的作用成为研究的热点.

TRPV1及TGF-β2的检测对儿童UACS诊断意义的探讨

目的：探讨对瞬时受体电位香草酸受体1（TRPV1）及转化生长因子β2（TGF-β2）的检测在儿童UACS中的诊断价值。方法选择32例于我院行腺样体手术的腺样体肥大患儿，其中上气道咳嗽综合征（UACS）组16例，对照组16例。所有患儿均于术前采血进行ELISA检测，术中取腺样体标本进行免疫组化试验。结果 UACS组与对照组相比，用ELISA法和免疫组化法进行检测，TRPV1及TGF-β2的检测值为（14.84±4.38）pg/ml 和（159.02±2.17） pg/ml，较对照组[（4.90±5.64）pg/ml和（101.49±1.70）pg/ml]明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。 ELISA与免疫组化检测结果之间无统计学意义的相关性。免疫组化的敏感性较高，阴性预测值较高，ELISA的特异性较高。结论 TR-PV1及TGF-β2的ELISA及免疫组化检测对UACS有辅助诊断价值。此两项诊断试验具有一定程度的互补性。

TRPV1受体在高血压肾病中的研究进展

瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）是一种在机体广泛分布的配体-依赖非选择性阳离子通道，表达于血管的感觉神经，可被多种内源性或外源性介质激活或致敏。近年来研究表明，TRPV1受体在改善高血压肾病的发展中起重要作用。

TRPV1在胃肠道中的病理生理学意义

TRPV1主要表达在初级传入感觉神经元上,是一种非选择性的阳离子通道.TRPV1可探测和整合炎症和热刺激信号,并转化为动作电位,并传至中枢形成痛觉.在胃肠道及相应背根神经节,TRPV1也有广泛分布.目前,已有诸多证据表明TRPV1可参与胃肠道运动,感觉和吸收等多种重要功能.这些生理学作用在功能性胃肠病的内脏高敏感和胃肠道运动失调的发病中有着重要意义.TRPV1可能为功能性胃肠病提供新的治疗靶点.

痔疮组织内辣椒素通道受体的表达及意义

目的;研究痔疮组织内疼痛受体TRPVI(辣椒素通道受体)在痔疮血管的表达,并探讨其在痔疮发病中的可能机制.方法:收集我院肛肠手术中切取的痔疮组织50例,取痔疮组织周围正常组织5例做对照,应用免疫组织化学方法检测痔疮组织血管内及周围正常组织中TRPV1的表达.结果:免疫组织化学结果表明痔疮组织血管内TRPV1高表达.结论:TRPV1可能在痔疮组织血管的形成过程中起了重要的作用.