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缺氧诱导因子-1α和血管内皮细胞生长因子在胶原性关节炎动物模型中的表达与意义
建立Wistar大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)模型.探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在CIA中的表达,为类风湿关节炎的发病机制及治疗前景提供线索.采用50只Wistar大鼠,随机分为对照组与模型组,将牛Ⅱ型胶原与福氏不完全佐剂乳化混匀作为免疫混合物,尾根部皮内注射,建立CIA模型.于造模第21、28、35、42天取踝关节和滑膜组织行HE染色及免疫组化染色,动态观察各项关节炎活动指标和检测HIF-1α和VEGF在CIA关节炎中的表达,并分析两者在CIA中的相关性及HIF-1α与滑膜病理学评分之间的关系.组织形态学和影像学结果显示,CIA大鼠的滑膜组织、关节软骨及骨组织均呈典型的关节炎病变,免疫组化结果显示CIA大鼠关节滑膜层和滑膜下层均表达HlF-1α和VEGF,第21天阳性表达量高,随病程进展.表达逐渐下降;统计学分析表明HIF-1α和VEGF的表达水平呈正相关(r=0.75,P<0.01),HIF-1α的表达水平与滑膜病理学评分和血管生成评分呈正相关(r1=0.48,r2=0.5,P<0.05).以上结果提示HIF-1α可能通过调控一系列下游靶基因,如VEGF等,促进滑膜增生及血管生成,影响RA的发生与发展.
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间歇性低压低氧通过促进细胞凋亡抗大鼠胶原诱导性关节炎
本文旨在研究慢性间歇性低压低氧(chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH)对大鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)影响.雄性成年Sprague-Dawley大鼠50只,随机分为5组:CIHH预处理组(Pre-T)、预处理对照组(Pre-C)、CIHH后处理组(Post-T)、后处理对照组(Post-C)及空白对照组(Con).Pre-T和Post-T大鼠分别存CIA造模前和造模开始后第12天给予28 d模拟海拔3 000 m (pO2=108.8 mmHg,14%O2)、每天5 h的CIHH处理;Pre-C和Post-C不接受CIHH处理,CIA造模处理分别与Pre-T和Post-T相同:Con大鼠不给予任何处理.通过螺旋测微器测定大鼠双后足爪厚度,以关节炎指数(ar-thritis index,AI)评价关节炎程度:HE染色法观察踝关节组织形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)检测膝关节滑膜组织细胞凋亡率;流式细胞术检测脾脏CD3+T淋巴细胞凋亡率;免疫组化SP法检测滑膜细胞和脾脏淋巴细胞Bcl-2、Bax蛋白表达水平.结果显示:(1)Pre-T大鼠CIA发生率明显低于Pre-C组大鼠(P<0.05):Pre-T和Post-T组大鼠的AI值分别明显低于Pre-C和Post-C组大鼠(P<0.05).(2)Pre-C及Post-C大鼠踝关节滑膜细胞明显增生,形成血管翳,侵蚀软骨及骨,炎细胞浸润增加:Pre-T和IPost-T大鼠关节组织病理改变明显减轻.(3)Pre-T和lPost-T大鼠滑膜细胞及脾脏淋巴细胞的凋亡率分别较Pre-C及Post-C大鼠明显增加(p<0.05).(4)与Pre-C及Post-C大鼠相比较,Pre-T和Post-T动物滑膜组织细胞及脾脏淋巴细胞Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),而Bax蛋白表达则明显升高(P<0.05).以上结果表明,CIHH可通过抑制Bcl-2蛋白和增强Bax蛋白表达,促进关节滑膜细胞和淋巴细胞凋亡,从而发挥抗大鼠CIA作用.
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肿瘤坏死因子-α与骨桥蛋白在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及其信号转导途径
目的 分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨桥蛋白(OPN)在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及可能的信号转导途径.方法 采用牛源性Ⅱ型胶原配合不完全弗氏佐剂制造胶原诱导性关节炎(CIA)模型,取正常对照组和模型组膝关节滑膜,胶原酶消化法分别培养滑膜成纤维细胞(SFs),分成正常对照组、模型组、模型组+脂多糖(LPS)、模型组+LPS+ p38途径抑制剂(SB203580),观察SFs中OPN mRNA的变化,分析TNF-α与OPN表达的相互影响及可能的信号转导途径.结果 模型组细胞加入LPS刺激后OPN mRNA表达较模型组明显增多(P＜0.01),予SB203580后,OPNmRNA的表达显著减少,4组间比较差异显著(P＜0.01).结论 TNF-α可诱导OPN的表达,这一过程可能是通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号转导途径而实现的.
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β-内啡肽对胶原诱导关节炎大鼠的免疫调节作用
目的 研究β-内啡肽(β-END)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的免疫调节作用,为探索β-END治疗类风湿关节炎(RA)提供实验依据.方法 采用尾根部皮内多点注射天然Ⅱ型胶原(CⅡ)的方法免疫雌性Wistar大鼠(60只),建立CIA模型.随机取CIA成模大鼠(5只/组)于初次免疫后第14～35天,给予不同浓度的β-END腹腔内注射,定期进行临床、实验室、影像学及病理指标评估.结果 不同剂量β-END(0.1、1、5 nmol隔日1次共2周)治疗后CIA大鼠临床、实验室、影像学及病理指标明显缓解;正常鼠β-END给药5 nmol×2周后重要脏器功能、组织学未见明显异常.结论 生理浓度的β-END体内可缓解CIA鼠关节局部及全身免疫炎性反应,这使β-END成为有潜力的治疗RA的制剂.
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血管活性肠肽对胶原诱导关节炎大鼠治疗的作用初探
目的探讨血管活性肠肽(VIP)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的免疫调节作用,为应用VIP治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据.方法采用尾根部皮内多点注射法注射天然Ⅱ型胶原(CⅡ),免疫雌性Wistar大鼠(60只),建立CIA模型.随机取CIA成模大鼠(5只/组)于初次免疫后14～35 d,腹腔内注射不同浓度的VIP.定期进行临床、实验室、影像学及病理指标评估.结果不同剂量VIP (0.1、 1、 5 nmol隔日1次,共2周)治疗后CIA大鼠,其临床、实验室、影像学及病理指标明显缓解;正常鼠于VIP给药5 nmol 2周后重要脏器功能、组织学未见明显异常.结论生理浓度的VIP体内可缓解CIA鼠关节局部及全身免疫炎性反应,5 nmol 2周以内的体内治疗量基本安全,提示VIP可作为治疗RA有潜力的制剂.
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雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠VEGF基因表达的影响
目的 研究雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响,探讨其在治疗类风湿关节炎中的抗血管生成机制.方法 建立大鼠CIA模型,造模成功后灌胃给药,动物分为正常组、模型对照组、沙利度胺组(作为阳性对照)、雷公藤多苷组,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠不同组织(肺、心、肝、肾、滑膜)中VEGF的表达,观察雷公藤多苷对VEGF基因表达的影响.结果 雷公藤多苷组、沙利度胺组大鼠各组织中VEGF mRNA均低于模型对照组(P<0.05),与沙利度胺组比较无明显差异(P>0.05).结论 雷公藤多苷对CIA大鼠VEGF的表达有抑制作用.
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山苍子根煎剂对CIA大鼠血清TNF-α,IL-1β水平影响
目的 观察山苍子根对CIA大鼠关节炎指数、血清TNF-α,IL-1β水平的影响,探讨其对类风湿关节炎可能的疗效机制.方法 用鸡Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA大鼠模型,记录各组大鼠的关节炎指数(AI); ELISA检测血清TNF-α及IL-1 β水平.结果 造模大鼠68.2%出现关节炎症状(雄鼠52.7%,雌鼠83.6%);给药24d后.山苍子根中、高剂量组AI较模型对照组明显降低(P＜0.01);模型对照组、雷公藤多甙组、强的松组、山苍子根各组血清TNF-α及IL-1 β水平较正常对照明显增高(P均＜0.01);与模型对照组比较雷公藤多甙组、强的松组、山苍子根各组血清TNF-α及IL-1 β水平明显下降(P均＜0.01),且IL-1 β下降水平随山苍子根剂量的增加而增加.结论 山苍子根可缓解CIA大鼠关节肿胀,抑制CIA大鼠血清TNF-α及IL-1 β水平,且随山苍子根剂量的增加其下调血清IL-1 β水平的作用亦随之增加.山苍子根治疗RA的机制可能与其下调血清TNF-α和IL-1 β水平有关.
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白花蛇舌草对胶原诱导性关节炎大鼠的保护作用
目的 探讨白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.,HD)对胶原诱导性关节炎大鼠(collagen-induced arthritis,CIA)的保护作用.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(n=10)和给药组(n=50),给药组用于建立Wistar大鼠CIA模型,造模成功后再随机分为模型组,雷公藤组,白花蛇舌草低、中、高剂量组,每组各9只并给予相应药物处理.自造模后第14天开始,每周观察各给药组的关节炎指数,于第42天处死大鼠检测各组血清的IL-1β、TNF-α水平,对比各组大鼠滑膜组织膜联蛋白Ⅰ的表达情况.结果 HD低剂量组在第35天及42天时,关节炎指数均显著低于模型组(P＜0.05);HD高剂量组在第28、35及42天时,关节炎指数显著低于模型组(P＜0.05);HD各剂量组、IL-1β、TNF-α水平均显著低于模型组,差异具有统计学意义(均P＜0.05);HD各剂量组膜联蛋白Ⅰ的表达量显著高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HD可降低细胞炎症因子IL-1β、TNF-α的水平,缓解胶原诱导性关节炎大鼠的炎症反应及骨质侵蚀,提示HD对胶原诱导性关节炎大鼠关节具有保护作用.
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甲氨蝶呤对小鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用及其机制
目的:研究甲氨蝶呤关节周围注射后对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)的治疗作用及其机制.方法:从初次免疫后第22天开始至50天止,每周3次关节周围注射甲氨蝶呤,PBS作阴性对照,对CIA小鼠关节炎严重程度进行评分并比较各组关节炎发生率,石蜡切片观察组织病理学变化,流式细胞术检测腹股沟淋巴结细胞中Th17细胞与Treg细胞的比例变化情况.结果:甲氨蝶呤可以有效降低小鼠关节炎的发病率及平均关节炎指数(P＜0.001);石蜡切片显示甲氨蝶呤对炎症细胞浸润、血管翳的形成、软骨以及骨的破坏具有较好的抑制作用;流式细胞术检测显示甲氨蝶呤组Th17细胞比例降低,Treg细胞比例增加(P＜0.05).结论:甲氨蝶呤关节周围注射可以有效抑制类风湿关节炎的发展,其机制可能与下调Th17/Treg细胞的比率有关.
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99 Tc－M DP 抑制胶原诱导性关节炎大鼠DKK1表达的研究
目的：观察胶原诱导性关节炎（ CIA）大鼠DKK1的表达及99锝－亚甲基二磷酸盐（99 Tc－MDP，商品名：云克）对骨侵蚀的治疗作用，探讨云克治疗骨侵蚀的可能作用机制。方法：建立CIA大鼠模型，分为模型组、甲氨蝶呤（ MTX）组、云克小剂量组、云克大剂量组；通过Larsen评分和病理组织形态学评分评价骨质破坏；ELISA法检测关节液和血清DKK1、肿瘤坏死因子（ TNF）－α水平；免疫组化法检测踝关节区滑膜及软骨的DKK1、TNF－α表达；采用方差分析、t检验和相关分析进行统计学处理。结果：云克干预组和MTX组大鼠骨质破坏，血清和关节液DKK1、TNF－α水平，踝关节区滑膜及软骨DKK1、TNF－α表达均低于模型组（ P＜0．05）；云克干预组骨质破坏、血清和关节液DKK1水平、踝关节区滑膜及软骨DKK1表达低于MTX组（ P＜0．05），但云克组间差异无统计学意义（P＞0．05）；云克干预组和MTX组血清和关节液TNF－α水平、踝关节区滑膜及软骨TNF－α表达组间差异无统计学意义（ P＞0．05）；相关性分析显示模型组及药物干预组大鼠血清和关节液DKK1与TNF－α水平呈正相关（r＝0．439，P＜0．05）。结论：云克可以减轻CIA大鼠骨侵蚀，疗效优于MTX，可能是通过直接降低DKK1或通过抑制TNF－α间接下调DKK1，增强Wnt信号通路保护骨侵蚀。
关键词： 胶原诱导性关节炎 骨侵蚀 DKK1 肿瘤坏死因子-α 99锝-亚甲基二磷酸盐 -
胶原诱导性关节炎小鼠脾脏T细胞合成儿茶酚胺增加
目的:探究胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠淋巴组织中T helper 1(Th1)细胞合成、储存、降解儿茶酚胺的变化,以进一步探讨Th1细胞来源的儿茶酚胺在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)致病机制中所起的作用.方法:将DBA/1J小鼠随机分为正常对照组和CIA模型组.Ⅱ型胶原乳剂尾根部注射制备CIA小鼠模型.Western Blot法检测脾脏组织中Th1细胞转录因子T-bet、细胞因子干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的表达.免疫荧光双标法检测脾脏中T-bet分别与酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、囊泡单胺转运体-2(vesicular monoamine transporter-2,VMAT-2)、单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的共定位.结果:与正常小鼠相比,CIA小鼠脾脏组织中T-bet、IFN-γ和IL-2的蛋白表达增加.小鼠脾脏中T-bet与TH、VMAT-2、MAO分别存在免疫荧光共定位.CIA组TH、VMAT-2及MAO单阳性细胞数以及分别的双阳性细胞数均显著增加(P<0.01).结论:CIA小鼠Th1细胞合成、储存、降解儿茶酚胺的能力增强.Th1来源的儿茶酚胺参与了CIA的发生发展.
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胶原诱导性关节炎小鼠脾脏及踝关节中G蛋白耦联受体激酶2的表达
目的:了解胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)发病后免疫器官及免疫细胞内G蛋白耦联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)的表达及其变化,探讨其参与CIA发病的机制.方法:用鸡Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,CⅡ)免疫DBA/1J小鼠;免疫荧光双标法检测小鼠踝关节和脾脏中CD4、Foxp3、ROR-γt分别和GRK2的共定位;Western Blot法检测正常小鼠和CIA小鼠踝关节和脾脏中GRK2的表达变化.结果:CIA小鼠四肢踝关节明显红肿;正常小鼠与CIA小鼠脾脏组织中均有CD4、Foxp3、ROR-γt和GRK2的共定位;CIA小鼠踝关节中也有CD4、Foxp3、ROR-γt和GRK2的共定位;CIA小鼠脾脏和踝关节组织中的GRK2的表达均降低.结论:CIA小鼠脾脏及踝关节组织表达GRK2且GRK2的表达显著低于正常小鼠.
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DBA/1小鼠与C57BL/6小鼠胶原诱导性关节炎模型的比较研究
目的：对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)在不同品系小鼠(DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠)的发病情况进行比较研究，以期寻找出一种适合制备CIA模型的小鼠品系。方法：用鸡Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen， CⅡ)乳剂分别免疫DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠诱导CIA，进行关节外观的观察及关节炎临床评分。结果：免疫后第31天， DBA/1小鼠出现关节红肿，关节炎临床评分升高，在第39天达到高峰。随着时间的推移，小鼠关节红肿等急性炎症现象有所减退。用改进方法免疫的C57BL/6小鼠于第21天开始出现关节红肿、临床评分升高现象。结论：在制备CIA模型时建议首选DBA/1小鼠。
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RANKL/OPG系统与大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎发病的关系及99锝-亚甲基二膦酸盐的干预作用
探讨核因子KB受体活化因子配体/骨保护素(RANKL/OPG)系统与大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)发病的关系及99锝-亚甲基二膦酸盐(99Tc-MDP,商品名:云克)的干预作用.除正常对照组(n=8)外,其余大鼠建立CIA模型,随机分为模型组、甲氨蝶呤(MTX)组和云克组.采用关节炎指数(AI)评分评价关节炎程度;ELISA法检测关节液RANKL、OPG水平;观察膝关节病理变化;免疫组化法检测膝关节滑膜RANNKL、OPG表达.结果表明,与正常对照组相比,模型组及干预组AI评分、关节液RANKL和OPG浓度、膝关节滑膜RANKL和OPG表达均显著增加(P＜0.01),干预组上述指标均明显低于模型组(P＜0.01),云克组明显低于MTX组(P＜0.01).结果表明,RANKL/OPG系统参与了大鼠CIA关节破坏的发生发展;云克可能通过抑制CIA大鼠的RANKL、OPG表达、降低RANKL/OPG比值起延缓关节破坏的作用,其起效时间明显早于甲氨蝶呤.
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Th1 和 Th2 细胞来源的儿茶酚胺在胶原诱导性关节炎中的作用
目的 探讨T h1和T h2细胞来源的儿茶酚胺在胶原诱导性关节炎(CIA )疾病发生、发展过程中的作用.方法 18只DBA/1小鼠随机均分为对照组(A组)、35 d CIA模型组(B组)和55 d CIA模型组(C组).采用实时定量PCR检测T-bet、IFN-γ、IL-2、GATA-3、IL-10和IL-4 mRNA表达 ,免疫荧光染色观察淋巴结中酪氨酸羟化酶、囊泡单胺转运体2、单胺氧化酶分别与 T-bet和GATA-3的共定位情况.结果 与A组相比 ,B组和C组小鼠淋巴结中T-bet、IFN-γ和IL-2 mRNA表达增加 ,IL-10和 IL-4 mRNA 表达减少 ,Th1细胞合成儿茶酚胺的能力增强(P<0 .05).结论CIA小鼠淋巴结中Th1细胞来源的儿茶酚胺增加 ;其参与了CIA发生、发展过程 ,并发挥抗炎作用.
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来氟米特对胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜IL-17和RANKL表达的影响
目的 探讨来氟米特(LEF)对滑膜病变的治疗作用.方法 40只雌性SD大鼠用完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节模型后均分为模型对照(B)组和LEF处理组(A组,LEF1 m/d灌胃,连续3周);另取10只SD大鼠作为正常对照(C)组.进行关节炎指数(AI)评分,ELISA法检测关节浸液IL-17和细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)浓度,计算膝关节滑膜病理积分,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达.结果 A组于给药2周后的AI值低于B组(6.60±1.65 vs.9.90±2.38)(P＜0.01).与C组比较,A、B关节浸液IL-17和RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加(P＜0.05、P＜0.01),但A组上述指标均低于B组(P＜0.01).结论 LEF可能通过抑制IL-17和RANKL在CIA大鼠关节滑膜的表达延缓关节滑膜病变的进展.
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IL-17和RANKL在胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜的表达及99 Tc-TDP的干预作用
目的:探讨白细胞介素17(IL-17)和细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)在胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜病变发生发展中的作用及99锝-亚甲基二膦酸盐(99Tc-TDP)的干预作用.方法:通过完全弗氏佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原构建CIA大鼠模型.模型大鼠随机分为模型对照组和99Tc-TDP组,99Tc-TDP组予0.05 μg·(kg·d)-1 99Tc尾静脉注射,正常对照组与模型对照组予等量生理盐水尾静脉注射.关节炎指数(AI)评分评价关节炎程度,各组大鼠用ELISA法检测血清及关节液IL-17和RANKL浓度,显微镜观察滑膜病理变化,免疫组化法半定量检测滑膜IL-17和RANKL蛋白表达.结果:与正常对照组相比,模型对照组和99Tc-TDP组血清及关节液IL-17浓度、关节液RANKL浓度、滑膜病理积分、滑膜IL-17和RANKL蛋白表达均增加(P＜0.05),99Tc-TDP组上述指标较模型对照组均降低(P＜0.05),各组血清RANKL浓度无显著性差异(P＞0.05).结论:IL-17和RANKL参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生发展,99Tc-TDP可能通过抑制滑膜IL-17和RANKL的表达延缓关节滑膜病变的进展.
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槌果藤提取物对CIA小鼠模型Treg和Th17细胞及相关细胞因子的影响
目的 探讨槌果藤对胶原诱导关节炎(CIA)模型小鼠全血和脾脏的Treg和Th17细胞比例及IL-17和TGFβ1水平的影响.方法 25只DBA/1J小鼠,采用牛Ⅱ型胶原蛋白制备CIA小鼠模型后根据踝关节病变总积分分为正常组(n=5)、生理盐水组(n=5)、槌果藤低剂量组(0.5g/kg,n=5)、中剂量组(1.0g/kg,n=5)和高剂量组(1.5g/kg,n=5).免疫后第21天开始给予槌果藤提取物灌胃,共4周.采用细胞流式仪检测小鼠血和脾脏Treg和Th17细胞百分比,ELISA法检测血IL-17和TGFβ1水平.结果 (1)牛Ⅱ型胶原蛋白诱导的CIA小鼠3周后开始首只小鼠足趾出现红肿,第7周到达高峰,小鼠造模成功率达90％以上.(2)与正常组比较,生理盐水组小鼠血和脾脏Treg细胞百分比明显下降[血:(1.17±0.36)％比(7.09±3.86)％,P＜0.01);脾脏:(1.56±0.48)％比(8.03±1.75)％,P＜0.01)];Th17细胞百分比显著上升[血:(3.96±2.05)％比(0.57±1.60)％,P＜0.01);脾脏:(8.32±1.62)％比(0.94±0.30)％,P＜0.01)];与生理盐水组比较,槌果藤低、中、高剂量组血、脾脏Treg细胞百分比上升[血:(2.30±0.21)％、(3.78±1.68)％、(4.51±1.58)％比(1.17±0.36)％,P均＜0.01);脾脏:(2.75±0.74)％、(4.19±1.45)％、(5.28±1.76)％比(1.56±0.48)％,P均＜0.01)],Th17细胞下降[血:(1.78±0.50)％、(1.35±0.36)％、(0.91±0.31)％比(3.96±2.05)％,P均＜0.01;脾脏:(3.66±1.69)％、(2.67±0.74)％、(1.70±0.44)％比(8.32±1.62)％,P均＜0.01];(3)与正常组比较,生理盐水组小鼠血清IL-17水平明显上升[(31.81±7.33)pg/mL比(12.26±4.89)pg/mL,P＜0.01],TGFβ1水平明显下降[(191.62±112.47)pg/mL比(637.33±97.42)pg/mL,P＜0.01];与生理盐水组比较,槌果藤低、中、高剂量组血清IL-17水平显著降低[(17.16±2.34)pg/mL、(16.02±2.78)、(10.46±1.83) pg/mL比(31.8 1±7.33)pg/mL,P＜0.01],TGFβ1水平显著升高[(342.63±41.78)pg/mL、(484.76±43.64)pg/mL、(500.83±40.80)pg/mL比(191.62±112.47)pg/mL,P＜0.01].结论 槌果藤提取物对CIA模型小鼠血和脾脏Treg和Th17细胞比例及血IL-17和TGFβ1水平具有调节作用.
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桂枝芍药知母汤对CIA大鼠外周血TNF-α IL-17和IL-10的影响
目的 观察桂枝芍药知母汤对类风湿关节炎大鼠的作用,探讨类风湿关节炎的发病机制及桂枝芍药知母汤的作用机制,为临床应用提供理论基础.方法 应用牛Ⅱ型胶原蛋白,建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型.应用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)检测正常对照组、CIA模型组、醋酸泼尼松组和桂枝芍药知母汤组大鼠血液TNF-α、IL-17和IL-10的浓度.用桂枝芍药知母汤治疗CIA大鼠,观察治疗过程中大鼠关节肿胀程度及关节炎指数.结果 ELISA检测结果显示,CIA大鼠模型组血清TNF-α、IL-17含量明显升高,而IL-10的含量明显下降;桂枝芍药知母汤组TNF-α、IL-17浓度下降,使之趋向正常,而IL-10的浓度上升,同时大鼠关节肿胀程度减轻,关节炎指数下降.结论 桂枝芍药知母汤可通过下调CIA大鼠外周血TNF-α、IL-17水平,上调CIA大鼠外周血IL-10水平,调节其免疫状态,以达到治疗CIA的作用.
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IL-18基因导入对小鼠胶原诱导关节炎作用的研究
目的：观察IL-18基因导入对小鼠胶原诱导性关节炎（CIA）的治疗作用。方法在CIA小鼠发病早期，将IL-18表达质粒pCAGGS-IL-18（pIL-18）经肌肉注射导入CIA小鼠体内，对照组给予空白质粒pCAGGS，3周后同量加强治疗1次。用关节炎评分评估CIA小鼠的病情，用组织学染色评价膝关节的软骨和骨破坏，用RT-PCR和real-time PCR法测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的细胞因子及转录因子表达水平。结果与对照组相比，治疗组能有效抑制胶原诱导性关节炎小鼠的关节炎评分，阻止关节软骨破坏，虽然髌骨及邻近的滑膜组织IL-18的mRNA表达没有明显改变，但TNF-α及IL-17A的mRNA表达明显降低，IL-10的mRNA表达明显增加，同时，Th2型转录因子GATA-3的表达明显增高，Th2型转录因子T-bet及Th17型转录因子ROR-γt的表达无明显改变。结论与IL-18的细胞因子治疗不同，单独IL-18表达质粒的基因导入即可对CIA小鼠达到治疗作用。该作用通过提高GATA-3的表达，增加Th2型细胞因子IL-10，降低Th1型细胞因子TNF-α及Th17型细胞因子IL-17A的表达来实现。
