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三水白虎汤对胶原诱导性关节炎TNF-α、MMP-1、MMP-3表达的影响
目的 探讨三水白虎汤对胶原诱导性关节炎模型关节滑膜组织中TNF-α、MMP-1、MMP-3 mR-NA表达的影响.方法 胶原诱导性关节炎模型鼠33只随机分为3组,分别给予生理盐水、三水白虎汤水煎剂、来氟米特灌胃治疗.灌胃30天后处死大鼠,用原位杂交的方法 探测关节局部组织中MMP-1、MMP-3 mRaqA的表达;用ELISA法检测血清TNF-α含量.结果 三水白虎汤组、来氟米特组血清TNF-α的含量显著低于对照组(P<0.05).SSBH组MMP-1、MMP-3mRNA的表达强度和面积均显著低于对照组(P<0.05).结论 三水白虎汤对胶原诱导性关节炎组织中TNF-α、MMP-1、MMP-3 mRNA的表达有一定的抑制作用.
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昆仙胶囊对胶原诱导关节炎大鼠滑膜组织IL-8及γ IP-10mRNA表达的影响
目的:研究昆仙胶囊对胶原诱导关节炎大鼠滑膜组织白细胞介素-8(IL-8)及干扰素-y诱导蛋白10(γIP-10)mRNA表达的影响.方法:将54只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤(MTX)组和昆仙胶囊低、中、高剂量组各9只.采用尾根部皮下注射胶原蛋白建立胶原诱导关节炎大鼠模型,检测各组关节滑膜细胞与软骨的病理变化,RT-PCR法检测各组滑膜组织IL-8及γIP-10 mRNA的表达水平.结果:MTX组和昆仙胶囊各剂量组大鼠关节滑膜损伤较模型组明显改善(P＜ 0.05,P＜ 0.01).与模型组比较,MTX组、昆仙胶囊各剂量组大鼠的IL-8 mRNA、γ IP-10 mRNA的表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；随着昆仙胶囊剂量的增加,关节滑膜组织IL-8 mRNA、γIP-10 mRNA的表达有下降的趋势；与MTX组、昆仙胶囊低、中剂量组大鼠比较,昆仙胶囊高剂量组大鼠的IL-8 mRNA、γ IP- 10 mRNA的表达明显降低(P＜0.05).结论:昆仙胶囊可能通过抑制大鼠滑膜组织IL-8及IP- 10 mRNA基因表达,减轻大鼠滑膜细胞增生及软骨破坏来实现其治疗滑膜炎的目的.
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乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白的鉴定及其对胶原诱导性关节炎小鼠的干预研究
目的:分析乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白(Zaocys typeⅡcollagen,ZCⅡ)与其他物种Ⅱ型胶原蛋白(C Ⅱ collagen)的同源性,探讨其对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)小鼠关节炎症的影响.方法:采用限制性胃蛋白酶消化法提取ZC Ⅱ;SDS-PAGE凝胶电泳及紫外分光光度计法对其鉴定,质谱分析其同源性.鸡C Ⅱ小鼠尾根部皮下注射诱导CIA模型;口服ZC Ⅱ高、中、低剂量干预,视觉评分法对关节炎评分,HE染色评价小鼠膝关节病理变化.结果:提取的ZC Ⅱ分子量约为110 ～ 140 kD,紫外吸收峰为230 nm左右;质谱分析所得肽质量指纹图谱与其他物种有4个以上肽段匹配,蛋白评分大于95％.在关节炎症方面,与正常对照组比较,CIA小鼠关节炎及组织病理学评分升高(P＜0.05);与CIA模型组比较,不同剂量ZCⅡ干预组关节炎及组织病理学评分显著降低(P＜0.05).结论:质谱分析结果提示ZCⅡ与其他物种CⅡ具有较高同源性;ZCⅡ能显著抑制CIA小鼠的关节肿胀,改善关节组织病理变化.
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类风湿关节炎大鼠模型的构建及昆明山海棠对大鼠佐剂性关节炎的干预研究
目的:制作和比较佐剂性关节炎大鼠模型及胶原性关节炎大鼠模型,选择外观及病理变化更明显的模型来观察昆明山海棠制剂对其的干预作用.方法:构建AA和CIA大鼠模型,采用肿胀度评分法观察造模前后大鼠关节变化情况,造模后28 d分离关节滑膜、切片HE染色,观察滑膜炎症,ELISA方法检测血清中细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)水平;观察昆明山海棠对大鼠关节肿胀度、血清细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)及关节滑膜组织炎症的影响.结果:从造模后16 d开始AA组和CIA组的关节肿胀度升高(P＜0.01);AA组在出现肿胀的时间及程度上与CIA组比较有显著差异(P＜0.01);造模后28 d,两个模型组血清中IL-1β、TNF-α水平升高,TGF-β水平下降(P＜0.01),同时,两个模型组间也存在显著差异(P＜0.05);造模后,AA组滑膜组织有大量炎性细胞浸润、纤维素样渗出及出现丰富的血管翳;经过昆明山海棠的干预,高、中剂量组关节肿胀得到明显改善(P＜0.01);昆明山海棠高、中剂量能抑制血清中IL-1β、TNF-α水平及提高TGF-β水平(P＜0.01).结论:AA大鼠模型与CIA模型比较出模时间更早,症状更明显;昆明山海棠能改善AA大鼠关节肿胀度,抑制血清中细胞因子的水平,对AA大鼠有明显的治疗作用.
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雷公藤多甙对胶原诱导性关节炎大鼠IL-10表达的影响
目的 研究雷公藤多甙对类风湿关节炎大鼠的作用,探讨类风湿关节炎的发病机制及雷公藤多甙的作用机制,为临床应用提供理论基础.方法 本实验应用鸡Ⅱ型胶原蛋白,建立胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型.应用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)检测观察正常对照组、CIA模型组和雷公藤多甙治疗组大鼠血液及关节液中白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的浓度.结果 ELISA检测结果显示,类风湿关节炎大鼠血清和关节液中IL-10含量明显减低,而雷公藤多甙可以升高IL-10的浓度,使之趋向正常.结论 雷公藤多甙可有效减轻佐剂型关节炎大鼠的关节病变,并能使CIA大鼠血清、关节浸液IL-10分子水平增高.
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不同剂量(+)-2-(1-羟基-4-环己酮)乙基咖啡酸酯对大鼠关节炎模型和全血炎症模型的药效学研究
目的:对(+)-2-(1-羟基-4-环己酮)乙基咖啡酸酯(HOEC)在大鼠关节炎模型上进行药效学评价,并利用大鼠全血花生四烯酸(AA)代谢模型,探究引起HOEC对关节炎的非剂量依赖性治疗作用的可能机理.方法:(1)采用大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,研究3个不同剂量的HOEC对CIA的治疗情况,并用免疫组化方法检测关节组织中胞质磷脂酶A2(cPLA2)、5-脂氧合酶(5-LOX)和环氧合酶2(COX-2)的表达水平;(2)ELISA检测HOEC和其体内代谢物咖啡酸对大鼠全血AA代谢模型中代谢产物的作用.结果:(1)HOEC对大鼠CIA有治疗作用,但高剂量(10 mg/kg)组的治疗效果不如低(1 mg/kg)和中剂量(3 kg/kg)组;(2)HOEC对大鼠关节组织中cPLA2、5-LOX和COX-2的表达水平均有抑制作用;(3)HOEC对大鼠全血AA代谢模型中LOX和COX通路的代谢产物均有抑制作用,而咖啡酸对这些代谢产物的抑制作用弱于HOEC.结论:HOEC对大鼠CIA模型的抗炎作用可能与抑制关节组织中cPLA2、5-LOX和COX-2的表达有关;HOEC对治疗大鼠CIA的非剂量依赖现象可能与其代谢产物咖啡酸对AA代谢产物生成的抑制作用弱于HOEC有关.
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姜酚对胶原诱导性关节炎的抗炎作用及其机制研究
目的 探讨姜酚对牛II型胶原诱导性关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)大鼠的抗炎作用及其机制.方法 将6周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、姜酚组和雷公藤多苷组,每组10只.制备CIA模型,观察姜酚对CIA大鼠关节病理、关节炎指数的变化及对大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1 (IL-1)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响.结果 姜酚能够抑制CIA大鼠踝关节肿胀,降低关节炎指数,并能降低血清TNF-α、IL-1及IL-1β水平,减轻关节滑膜细胞增生、滑膜层及滑膜下层淋巴细胞浸润,其疗效与雷公藤多苷组相当(P＞0.05).结论 姜酚对CIA大鼠关节炎具有治疗作用,其机制可能与下调TNF-α、IL-1和IL-1β有关.
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全反式视黄酸预防性给药可减轻类风湿关节炎模型大鼠的炎症
目的 探索全反式视黄酸(ATRA)对Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的类风湿关节炎模型(CIA)大鼠关节炎形成期关节组织结构、血清中相关炎性细胞因子表达水平,以及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响.方法 将6～8周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、ATRA各剂量组,给予溶剂对照组和ATRA各剂量组大鼠尾部皮内注射CⅡ和不完全弗氏佐剂诱导类风湿关节炎,空白对照组大鼠以相同方式给予等量生理盐水.自初次免疫第2天起,ATRA各剂量组大鼠腹腔注射不同剂量(0.05、0.5、5 mg/kg)的ATRA油剂,溶剂对照组腹腔注射等体积玉米油,空白对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周3次,连续3周.观察ATRA对大鼠关节炎指数(AI)评分、膝踝关节组织病理形态学、血清中相关炎性细胞因子的表达水平及软骨损伤相关蛋白表达水平的影响.结果 自初次免疫第15天起,ATRA各剂量组和溶剂对照组AI值均显著高于空白对照组(P＜0.05),溶剂对照组AI值趋于平稳,ATRA各剂量组AI值呈上升趋势,且低于溶剂对照组(P＜0.05);膝踝关节病理切片可见,ATRA各剂量组和溶剂对照组踝关节结构出现严重紊乱,但组间关节损伤的半定量评分差异无统计学意义(P＞0.05);此外,与溶剂对照组相比,ATRA各剂量组白介素-17A(IL-17A)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌减少(P＜0.05),白介素-10(IL-10)分泌增多(P＜0.05);膝关节中解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS-4)和基质金属蛋白酶(MMP-3)表达下调(P＜0.05),其余软骨损伤相关蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在胶原诱导关节炎形成期,ATRA可抑制TNF-α、IL-17A等促炎因子的分泌,促进IL-10的分泌,从而减轻CIA大鼠关节炎形成期的炎症反应.说明ATRA在关节炎形成期可延缓疾病的进展,其作用机制可能与纠正Th1/Th2及Th17/Treg失衡有关.
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蜂毒对胶原诱导性关节炎炎性痛大鼠背根神经节TrkA、TRPV1的影响
目的：探讨蜂毒对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis, CIA）大鼠TrkA、TRPV1疼痛信号分子的影响。方法分为正常对照组、模型组、蜂毒组（BV,3 mg/mL）。采用Wistar雄性成年大鼠，CollagenⅡ+IFA 0.2 mL造模。BV组于造模14 d后开始给药，直至21 d；记录每组足跖厚度、痛阈和肿胀关节评分，背根神经节采用IHC观察病理切片TRPV1的表达和western boltting观察TrkA的表达，评价蜂毒对CIA大鼠踝关节的干预。结果造模从10 d起开始肿胀，14 d内全部出现CIA体征，足跖厚度和肿胀关节评分整体上呈逐渐增加的趋势。在14 d时趋于平稳。BV组予蜂毒0.3 mg治疗7 d，BV组足跖厚度和肿胀关节评分低于模型组。痛阈（秒）：正常对照组15.47±0.35，模型组10.90±0.10，BV组13.14±0.18。免疫组化TRPV1阳性细胞百分数（%）：正常对照组11.40±1.48，模型组44.47±4.38，BV组21.60±2.20。western blotting观察TrkA表达（灰度值）：正常对照组1.59±0.04，模型组4.53±0.21，BV组2.46±0.17。结论蜂毒注射能降低炎性痛大鼠DRG信号分子TrkA、TRPV1的表达水平。这可能是消炎镇痛的信号通路之一，为蜂毒治疗类风湿性关节炎提供新的启发。
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乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白调控胶原诱导性关节炎小鼠肠系膜淋巴结Treg/Th17平衡
目的：探讨乌梢蛇Ⅱ型胶原蛋白（Zaocys typeⅡcollagen, ZCⅡ）对胶原诱导性关节炎（Collagen-induced arthritis, CIA）小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞（mesenteric lymph node lymphocytes, MLNLs）Treg/Th17细胞及其细胞因子的影响。方法鸡Ⅱ型胶原蛋白小鼠尾根部皮下注射，诱导CIA模型；胃蛋白酶消化法提取ZCⅡ，口服高、中、低剂量ZCⅡ干预。视觉评分法评价关节肿胀，HE染色评价膝关节组织病理学；分离小鼠MLNLs，流式细胞术（FCM）检测Treg和Th17细胞的比率；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测MLNLs培养上清中TGF-β和IL-17的活性。结果与正常组比较，CIA小鼠关节炎及组织病理学评分升高（P<0.05），MLNLs中Treg和Th17的比率及其分泌TGF-β和IL-17水平上升（P<0.05）。与CIA模型组比较，不同剂量ZCⅡ干预组关节炎及组织病理学评分降低（P<0.05），MLNLs中Treg细胞的比率上升，Th17细胞的比率下降（P<0.05），MLNLs分泌TGF-β水平上升，分泌IL-17水平下降（P<0.05）。结论口服ZCⅡ能够改善CIA小鼠关节炎及组织病理学评分；ZCⅡ可能通过调节MLNLs中Treg/Th17比率及其细胞因子的水平，重新诱导CIA小鼠的免疫平衡，缓解关节炎症。
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高频超声在大鼠胶原诱导性关节炎模型中的应用
目的：建立稳定的大鼠胶原诱导关节炎（CIA）模型，尝试应用高频超声在体观察CIA大鼠关节病变，评价超声在RA小动物实验研究中的应用价值。方法60只Wistar大鼠分为模型组（50只）和空白组（10只），模型组采用牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂在尾部皮内注射，14 d后同样方法加强免疫。空白组同期给予生理盐水注射。定期观察两组小鼠的关节和关节外表现。第45天对所有实验大鼠进行踝关节评分（AI）及高频超声检查；处死大鼠，对60只大鼠共120个踝关节进行病理检查，与AI及超声结果进行对比。结果对照组均未发病。模型组50只大鼠共100个踝关节经病理证实62个发生滑膜炎，病理切片显示典型的炎性细胞浸润，滑膜增生，软骨及软骨下骨破坏，部分伴血管翳形成。使用AI诊断其中42个，检出率为67.8%；高频超声诊断54个，检出率77.4%，二者具有显著性差异（P<0.05）。结论高频超声成功显示CIA大鼠踝关节类风湿病变。高频超声无创性反映关节病变可以作为类风湿性关节炎小动物模型研究的理想影像学方法，构建类风湿关节炎发病机制及治疗研究的评价体系。
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白藜芦醇对胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞增殖的影响
目的 研究白藜芦醇(Res)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响并探讨其可能的作用机制.方法 应用四甲基噻唑氮蓝(MTT)比色法和流式细胞术(FCM)检测FLS的增殖水平和细胞周期分布.结果 50～400μmol/L的Res作用24、48 h和25～400μmol/L的Res作用72 h,均能明显抑制FLS的增殖(P<0.05),且具有时间剂量依赖性.细胞周期分析显示与对照组比较,Res处理组的FLS的S期细胞所占百分比例明显增加(P<0.01);G2/M期细胞所占百分比例明显减少(P<0.01),并呈剂量依赖性.结论 Res对CIA大鼠成纤维样滑膜细胞具有生长抑制作用,其抗增殖效应呈现一定的剂量、时间依赖方式.该作用可能与Res能够使FLS的细胞周期阻滞于S期有关.
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胶原诱导性关节炎大鼠椎骨和牙槽骨的变化及泼尼松的影响
目的:探讨胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠椎骨和牙槽骨的变化及泼尼松的影响.方法:58只SD雌性大鼠,随机选取8只作为正常对照组,其余用于建立CIA模型.免疫4周后,筛选出成功建立CIA大鼠并随机分成CIA模型组、泼尼松低、中、高剂量组.正常对照组和CIA模型组灌胃溶剂对照溶液,泼尼松治疗组分别灌胃泼尼松0.9、2.7、8.1 mg/(kg·d).连续给药4个月后处死,取腰椎及上颌骨进行micro-CT扫描.结果:与正常对照组比较,CIA模型组腰椎的骨微结构明显受损和骨量明显减少,而牙槽骨的骨微结构有所破坏,但骨量变化差异无统计学意义.与CIA模型组比较,泼尼松3个剂量组腰椎和牙槽骨的骨微结构明显改善,骨量明显增加.结论:CIA大鼠椎骨丢失比牙槽骨明显.泼尼松治疗可延缓CIA大鼠椎骨和牙槽骨的骨丢失.
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蒽贝素对胶原诱导性关节炎大鼠 IL-6和IL-17A 的影响
目的：探讨蒽贝素治疗类风湿关节炎（RA）的可能作用机制。方法选取Lewis雌性大鼠建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型，将造模成功的大鼠随机分为 CIA 模型组、甲氨蝶呤组、蒽贝素20 mg／kg 组、蒽贝素40 mg／kg 组4组，另设正常对照组，每组各8只大鼠。其中甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤0．5 mg／kg、每周2次，蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组分别予每日1次相应剂量蒽贝素灌胃，正常对照组及 CIA 模型组灌服等体积溶媒。共给药21 d，期间每周评估大鼠足趾肿胀程度，实验结束时行腹主动脉取血，ELISA 法测血清 IL-6和 IL-17A 含量，比较各组间的差异。结果治疗第14日，CIA 大鼠双侧足趾均较正常对照组大鼠肿胀（P 均＜0．01）；随着治疗时间的延长，甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组大鼠的鼠爪肿胀较 CIA 模型组明显好转（P 均＜0．01），甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组间比较差异均无统计学意义（P 均＞0．05）。影像学观察，CIA 模型组出现骨质疏松、关节间隙模糊、狭窄，甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组存在轻度骨质疏松，足趾小关节间隙清楚，尚未变窄。治疗后，甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg组血清 IL-6和 IL-17A 水平均低于 CIA 模型组（P 均＜0．01），其中甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组血清 IL-6水平比较差异均无统计学意义（P 均＞0．05），蒽贝素组20 mg／kg 组和40 mg／kg组的血清 IL-17A 水平均低于甲氨蝶呤组（P 均＜0．05），但甲氨蝶呤组与蒽贝素20 mg／kg 组和40 mg／kg 组血清 IL-6和 IL-17A 水平与正常对照组比较差异仍有统计学意义（P 均＜0．05）。结论蒽贝素可能通过抑制 Th17细胞分化信号通路中相关靶点，降低血清 IL-6和 IL-17A，缓解关节炎症状。
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热痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清TNF-α及IL-6的影响
目的:观察热痹康汤对大鼠关节炎模型(CIA)血清TNF-α及IL-6的影响,初步揭示热痹康汤治疗类风湿关节炎的机理.方法:采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠模型,以甲氨蝶呤为对照,观察热痹康汤对各组大鼠血清TNF-α、IL-6水平的影响.结果:热痹康汤能降低CIA大鼠血清TNF-α的水平,疗效优于甲氨蝶呤；能降低IL-6的水平,与甲氨蝶呤疗效相当.结论:热痹康汤能降低CIA大鼠血清TNF-α,IL-6水平,是其治疗类风湿关节炎的机理之一.
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昆明山海棠对CIA HIF-1α的影响
目的:探讨昆明山海棠(THH)对胶原诱导性大鼠关节炎(CIA)大鼠模型中对于低氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响.方法:建立胶原诱导性关节炎(CIA)模型,动态观察关节炎指数(AI)与HE染色关节的病理改变,免疫组化法检测HIF-1α表达.结果:THH的高中低治疗组以及地塞米松治疗组与CIA模型组和正常对照组中的HIF-1α表达有统计学意义(P＜0.05).结论:THH治疗CIA具有明显疗效,提示其作用机制与调节滑膜组织内的HIF-1α的表达有关.
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清肝祛浊剂对类风湿关节炎模型大鼠治疗作用的实验研究
目的 观察不同剂量清肝祛浊中药对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用,探讨其抗炎作用机理.方法 取80只Wistar大鼠,除空白组10只外,剩余大鼠造模.选择符合实验要求的大鼠50只,随机分为单纯模型组、甲氨蝶呤组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组5组,观察不同时间各组大鼠的右后足体积的肿胀率、平均关节炎指数.第28日检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α、MMP-2和MMP-9.结果 与模型组比较,各用药组的IL-1β、TNF-α、MMP-2和MMP-9显著降低.结论 清肝祛浊中药高、中、低浓度对胶原诱导性关节炎大鼠有良好的治疗作用.
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黑骨藤追风活络胶囊对胶原诱导性关节炎大鼠IL-1β、IFN-γ、IL-15的影响
目的 观察黑骨藤追风活络胶囊对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎症的缓解作用及对血清白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-15(IL-15)表达水平的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤多苷片组和黑骨藤追风活络胶囊组,每组10只,对除正常组外,其余3组建立CIA模型,于初次免疫后10 d开始,给各组大鼠进行相应药物灌胃处理以延缓炎症进展,并每隔7 d评定一次各组大鼠的关节炎指数(AI),给药21 d后处死大鼠检测各组大鼠血清中IL-1β、IFN-γ和IL-15的表达水平.结果 正常组大鼠关节正常,而模型组关节红肿较为明显,AI指数评分较高(P<0.001),雷公藤多苷片组和黑骨藤追风活络胶囊组大鼠AI均较模型组有所缓解(P<0.01).模型组大鼠血清IL-1β、IFN-γ、IL-15水平均较正常组升高(P<0.01),雷公藤多苷片组及黑骨藤追风活络胶囊组大鼠IL-1β、IFN-γ、IL-15水平均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01).结论 黑骨藤追风活络胶囊可在一定程度上抑制CIA大鼠促炎因子分泌,缓解关节炎症,可作为临床上治疗类风湿关节炎的辅助用药.
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异种双份脐血干细胞移植对胶原诱导性关节炎小鼠IL-4及TNF-α mRNA表达的影响
目的 观察异种、异基因双份人脐血间充质干细胞(MSCs)移植对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠白细胞介素(IL)-4及肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达的影响.方法 先进行脐血CD34+细胞分选,然后采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原诱导C57BL/6(H-2b)小鼠,建立CIA小鼠模型,并随机分为正常对照组、模型组、单份MSCs移植治疗组、双份MSCs移植治疗组、甲氨蝶呤阳性治疗对照组,每组10只小鼠.采用尾静脉注射,除模型组、正常对照组用生理盐水,两个MSCs移植治疗组给予的脐血所含的CD34+细胞数均为2×105.移植后第42天处死动物、取脾组织,采用反转录PCR(RT-PCR)法检测IL-4、TNF-α mRNA的表达,收集数据并做统计分析.结果 双份MSCs移植治疗组IL-4、TNF-α mRNA的表达,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 双份MSCs移植治疗CIA小鼠能显著抑制TNF-α mRNA的表达,上调IL-4 mRNA表达,具有免疫调节作用,可能有助于类风湿关节炎的治疗.
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RANKL和M-CSF在CIA大鼠关节滑膜的表达及药物的干预作用
目的 初步探讨RANKL和M-CSF在CIA大鼠关节滑膜的表达及T-614、MTX的干预作用.方法 通过鸡Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合的胶原乳剂免疫大鼠,建立CIA大鼠模型,将CIA大鼠随机分为模型对照组、T-614组、MTX组和T-614+ MTX组.药物干预组大鼠分别用T-614、MTX及T-614联合MTX干预3周.关节炎指数(arthritisindex,AI)评分评价关节炎程度,HE染色观察踝关节组织形态学变化,X线片观察骨侵蚀情况,高频超声观察踝关节并测量滑膜厚度,Western blot法检测滑膜RANKL和M-CSF表达.结果 与正常对照组相比,模型对照组AI评分、病理评分、X线评分、超声下滑膜厚度、关节滑膜RANKL,M-CSF表达均增加(P＜0.05)；与模型对照组相比,T-614组、MTX组、T-614联合MTX组上述观察指标均降低(P＜0.05)；与T-614组、MTX组相比,T-614联合MTX组上述观察指标均降低(P ＜0.05)；T-614组和MTX组之间上述观察指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RANKL和M-CSF参与了CIA大鼠关节滑膜病变的发生、发展,T-614、MTX可能通过减少细胞因子RANKL,M-CSF的生成来延缓关节滑膜病变的进展,T-614与MTX具有一定的协同效应.
