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二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸对高碘仔鼠甲状腺和脑发育的影响
目的观察二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸( EPA)对高碘仔鼠甲状腺及脑代谢生化指标的影响.方法将动物随机分为3组:适碘组,高碘组,高碘+DHA EPA组(简称DHA组),饲养3个月后各组亲代小鼠雌雄交配,测定各组30日龄仔鼠脑组织相关的生化指标.结果高碘组30日龄仔鼠脑重、脑蛋白质、DNA含量显著低于适碘组、DHA组;高碘组30日龄仔鼠与适碘组、DHA组相比脑海马组织ACHE活性上升、ACH含量下降.以上各项指标,DHA组与适碘组相比均无统计学差异.结论 DHA、EPA能抑制高碘引发的甲状腺肿大,可通过促进脑组织DNA、蛋白质及乙酰胆碱的合成而拮抗高碘所致的脑损伤.
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浙江省舟山地区海水鱼类中脂肪酸含量调查
目的 调查我国浙江省舟山地区常见的可食用海水鱼类(简称海鱼)中主要脂肪酸的含量.方法 于2011年9-10月,在舟山地区码头市场或菜市场采集可食用海鱼31种,每种6条,共186条,保留可食部并匀浆后,采用Folch法提取样品脂肪,以气相色谱法测定其脂肪酸构成及含量.分析不同鱼种间n-6和n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)含量的差异.结果 在31种海鱼中,扁舵鲣总脂肪含量高,为(13.2±1.2) g/100 g可食部分；马面鲀低,为(0.6±0.1)g/100 g可食部分.鲻鱼总n-6 PUFA含量高,为(875.7±506.4) mg/100 g可食部分；鲫鱼低,为(2.1±1.9) mg/l00 g可食部分.扁舵鲣总n-3 PUFA含量高,为(2623.8±426.1)mg/100 g可食部分；尖头斜齿鲨低,为(82.0±13.9) mg/100 g可食部分.卵形鲳鯵总SFA含量高,为(3014.9±379.0)mg/100 g可食部分；鰤鱼低,为(89.7±5.8)mg/100 g可食部分.刀鲚总MUFA含量高,为(3335.7±383.5) mg/100 g可食部分；马面纯低,为(32.1±16.9) mg/100 g可食部分.结论 舟山地区31种常见的可食用海鱼中主要脂肪酸构成具有种属差异.
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二十二碳六烯酸对大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活性钾电流的影响
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠冠状动脉平滑肌细胞(CASMCs)上大电导钙激活性钾电流(BKCa)的影响.方法 采用酶消化法获得大鼠CASMCs,并用单通道内膜向外(inside-out)模式及全细胞膜片钳技术记录,分别加入10、20、30、40、50、60、70和80μLmol/L DHA后,大鼠CASMCs的BKCa变化.结果 (1)单通道inside-out模式下,测试电位-60 mV及DHA浓度>10 μmol/L时,BKCa的开放概率(Po)增大,且呈浓度依赖性,Po从[(0.072±0.003)μmol/L DHA,n=6]增至[(0.601±0.030)80 μmol/L DHA,n=10,P<0.05],半效激活浓度为(36.110±0.080)μmol/L;当DHA浓度<10μmol/L时,Po增加不明显(P>0.05);(2)全细胞模式下,随着DHA浓度增加,BKCa电流密度逐渐增大,且呈浓度依赖性.测试电位+80 mV,BKCa电流密度从[(48.95±2.5)pA/pF 0 μmol/L,n=6]增至[(226.3±11.3)pA/pF 60μmol/L,n=8,P<0.05].结论 随着DHA浓度的增加,BKCa Po及电流密度逐渐增大,DHA对BKCa的影响可能是舒张血管的机制之一.
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老年亚临床动脉粥样硬化患者血清胆固醇酯脂肪酸水平分析
目的 探讨老年亚临床动脉粥样硬化(AS)患者血清胆固醇酯脂肪酸水平,以期为早期预防AS提供实验室数据支持. 方法 回顾性研究纳入2013年8-12月北京医院老年体检志愿者180例(年龄≥60岁),包括颈动脉内中膜中层厚度(cIMT)＞1(亚临床AS组)92例和健康对照者(对照组)88例,抽取空腹静脉血.用液相色谱串联质谱法测定志愿者血清中11种胆固醇酯脂肪酸,计算各脂肪酸脱氢酶及脂肪酸碳链延长酶活性.同时用常规方法分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI(ApoAI)、载脂蛋白B(ApoB)、超敏C反应蛋白(hsCRP)等生化指标,用独立样本t检验、非参数检验、Logistic回归等对以上数据进行分析. 结果 与对照组相比,老年亚临床AS患者的年龄、TC、LDL-C和ApoB的水平显著偏高,血清CE16∶1和△9-脂肪酸脱氢酶(△9-desaturase)显著升高,CE22∶6则显著降低;校正年龄、性别、体质指数、TC、TG、HDL-C、LDL-C等可能混杂因素影响后,与低四分位数(Q1∶CE22∶6≤0.44％)相比,CE22∶6高四分位数(Q4∶CE22∶6＞0.71％)患亚临床AS的比值比为0.29(95％CI:0.11～0.78,Wald x2值6.009,P＜0.05);CE16∶1和△9-desaturase在校正混杂因素后差异无统计学意义.Spearman偏相关分析结果显示CE22∶6与心血管疾病危险指标中的ApoA、TC和HDL-C显著负相关(r分别为-0.166、-0.149和-0.194;均P＜0.05),而与其他指标关系差异无统计学意义. 结论 CE22∶6可能对亚临床AS具有保护作用,平衡脂肪酸摄入对早期预防基于AS的心血管疾病具有重要意义.
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二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转化的分子机制.方法 采用组织贴块法培养大鼠PASMC.将PASMC分为常氧组、低氧组(1％O2、94％ N2、5％CO2,低氧刺激12 h)、低氧(1％O2、94％ N2、5％ CO2)+DHA(10 μmol/L)组(给予DHA处理后低氧孵育12 h),低氧(1％O2、94％ N2、5％ CO2)+DHA(10 μmol/L)+过表达NFATc1组(细胞转染过表达NFATc1载体24h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h)及低氧(1％ O2、94％ N2、5％CO2)+DHA(10 μmol/L)+敲低NFATc1组(细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h).使用三气培养箱制造低氧环境加以干预.分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1 mRNA和蛋白表达水平,分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22(SM22) mRNA表达水平,采用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)法检测PASMC增殖情况.结果 低氧刺激12 h,低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组(P均＜0.05),而低氧+DHA组则均明显低于低氧组(P＜0.05).转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA24h后,低氧刺激大鼠PASMC 12 h,低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组(P均＜0.05),低氧+DHA组则高于低氧组(P＜0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显低于低氧+DHA组(P＜0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显高于低氧+DHA+过表达NFATc1组(P＜0.05).低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组(P＜0.05),低氧+DHA组则明显低于低氧组(P＜0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显高于低氧+DHA组(P＜0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显低于低氧+DHA+过表达N FATc1组(P＜0.05).结论 DHA可通过抑制NFATc1调控低氧诱导的大鼠PASMC由收缩型向合成型转化及增殖.
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二十二碳六烯酸对大鼠冠状动脉平滑肌细胞离子通道的影响
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活性钾通道电流(IBKCa)和电压依赖性钾通道电流(IKv)的动力学影响,阐述DHA舒张血管的机制.方法 采用膜片钳技术在全细胞模式下,记录0、10、20、40、60和80 μmol/L的DHA对大鼠冠状动脉平滑肌细胞上IBKCa和IKv的影响.结果 (1)DHA可呈浓度依赖性地增加IBKCa和BKCa尾电流,对IBKCa稳态激活无影响.在指令电压+ 150 mV,不同浓度DHA(0、10、20、40、60和80μmol/L)作用下,IBKCa电流密度分别为(68.2±22.8)、(72.4±24.5)、( 120.4±37.9)、(237.5±53.2)、( 323.6±74.8)和(370.6±88.2) pA/pF(P＜0.05,n=30).DHA对IBKCa的半效作用浓度(EC50)为(36.22±2.17)μmol/L.(2)DHA对IKv和Kv尾电流呈浓度依赖性抑制,使IKv稳态激活曲线右移、稳态失活曲线左移.在指令电压+ 50 mV,不同浓度DHA(0、10、20、40、60和80 μmol/L)作用下,IKv电流密度分别为(43.9±2.3)、(43.8±2.3)、(42.9±2.0)、(32.3±1.9)、(11.7±1.5)和(9.6±1.2) pA/pF(P＜0.05,n=30).DHA对IKv的EC50为(44.19±0.63) μmol/L.结论 DHA对BKCa通道有激活作用,对Kv通道有抑制作用.DHA舒张血管的作用是对血管平滑肌细胞BKCa及Kv通道综合作用的结果.
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二十二碳六烯酸增加大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙离子激活钾离子流的机制
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)增加冠状动脉平滑肌细胞(SMC)大电导钙离子激活钾离子流(BK)的机制.方法酶消化法分离正常大鼠冠状动脉SMC.采用不同钾通道阻滞剂,对冠状动脉SMC的钾离子通道进行鉴定.采用全细胞膜片钳实验技术研究DHA及其代谢产物16,17-环氧二十二碳五烯酸(16,17-EDP)对冠状动脉平滑肌细胞BK通道的影响,并观察加入细胞色素P450环氧化酶抑制剂SKF525A孵育SMC后BK通道电流的变化.结果正常冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流约占总钾离子流的(64.2±2.7)%(n=20).DHA可激活BK通道,半效浓度为(0.23±0.03)μmoL/L,但当使用细胞色素P450环氧化酶抑制剂SKF525A预孵育SMC后,DHA对BK通道的激活作用消失,而DHA代谢产物16,17-EDP可产生与DHA相同的BK通道激活作用,半效浓度为(19.7±2.8)nmol/L.结论 DHA通过细胞色素P450环氧化酶代谢途径激活平滑肌细胞BK通道,从而扩张冠状动脉.
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二十二碳六烯酸通过磷脂酶C-三磷酸肌醇-钙离子途径激活正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)激活正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BK通道)的机制.方法 采用酶消化法急性分离正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞;全细胞膜片钳实验技术记录正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞BK通道电流;膜内向外型单通道膜片钳实验技术记录不同钙离子浓度条件下BK通道电流,并计算开放概率(NP0);钙离子成像技术测定不同浓度DHA作用后及分别采用磷脂酶(CPLC)受体抑制剂和三磷酸肌醇(IP3)受体抑制剂预孵育冠状动脉平滑肌细胞后细胞内钙离子浓度变化.结果 1 μmol/L DHA可激活BK通道;在刺激电位60 mV,电极外液钙离子浓度为0、0.01、0.1、1、3、10、50和100 μmol/L条件下,BK通道NP0分别为0.0027±0.0004、0.0060±0.001 4、0.0972±0.0106、0.137 9±0.032 9、0.468 7±0.163 7、2.097 1±0.3104和3.120 4±0.242 7(P ＜0.05,n=4).未加DHA时,细胞内钙离子浓度荧光信号比值(R值)为0.51±0.01;加入0.001和0.01 μmol/L DHA后,R值分别为0.53±0.02和0.55±0.01,与未加DHA相比差异无统计学意义(P ＞0.05,n≥5);当加入的DHA浓度为0.1、0.3、1、3、5和10 μmol/L时,其R值分别为0.64±0.01、0.65±0.01、0.70±0.01、0.69±0.01、0.68±0.01和0.67 ±0.02,EC50为(0.04±0.02) μmol/L,与未加DHA比较,差异有统计学意义(P＜0.05,n≥4).分别采用PLC受体抑制剂U73122和IP3受体抑制剂2-APB预孵育冠状动脉平滑肌细胞,测定加入0.1μmol/L DHA后R值分别为0.52±0.01和0.49±0.02,低于未加抑制剂的R值(0.64±0.01,P＜0.05,n≥4).结论 DHA可通过PLC-IP3-Ca2+途径增加正常大鼠冠状动脉平滑肌细胞内钙离子浓度激活BK通道,从而扩张血管,对心血管系统有一定的保护作用.
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二十二碳六烯酸联合5氟尿嘧啶对胃癌细胞生长及bcl-2、bcl 2l12和bax表达的影响
目的 评估二十二碳六烯酸(DHA)联合5氟尿嘧啶(5-Fu)对胃癌细胞SGC 7901生长以及bcl-2、bcl 2l12和bax基因表达的影响.方法 采用台盼蓝拒染方法检测两药物单用和联用对细胞活力的影响,用联合系数判断两药合用效果,倒置显微镜下观察细胞生长状况,PI染色流式细胞术检测亚二倍体峰比并拟合细胞周期曲线,Annexin-V/PI双标记方法检测早期细胞凋亡,RT-PCR方法检测bcl-2、bcl 2l12和bax基因的表达.结果 DHA可抑制胃癌SGC 7901细胞生长,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05),24 h、48 h的半数抑制浓度分别为67.81 μg/ml、45.76 μg/ml;DHA联合5-FU对细胞生长的抑制具有协同作用(CI<1,P<0.01),倒置显微镜下可见两药联合处理后细胞稀疏;亚二倍体峰比、Annexin-V早期凋亡率示DHA、5-FU均能诱导细胞凋亡且联合用药后细胞凋亡更明显(DHA、5-FU、联合组的亚二倍体峰比分别为5.2%、6.2%、13.9%;早期细胞凋亡率分别为4.00%、5.37%、13.11%);细胞周期曲线在联合组停滞于G0/G1和S期;RT-PCR显示DHA、5-FU可下调bcl-2和bcl 2l12表达,两药联合表达时下调更显著,bax表达则无明显改变.结论 DHA能抑制胃癌SGC 7901细胞增殖,联合5-FU后对细胞生长抑制和周期阻滞具有协同作用,可能通过下调bcl-2和bcl 2l12基因诱导胃癌SGC 7901细胞发生凋亡.
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母乳中二十二碳六烯酸及花生四烯酸含量的观察
目的观察不同地区母乳中脂肪酸成分的差别. 方法采用石英毛细管柱气相色谱法,对三个地区的109例健康产妇母乳中脂肪酸成分进行了测定,其中上海市区27例,上海郊区(崇明县)15例,浙江省舟山群岛67例. 结果上海市区产妇成熟母乳中亚油酸(LA)和α-亚麻酸(LNA)的含量分别为(29±6)%和(2.8±0.7)%,均显著高于郊区产妇母乳中LA[(20±3)%]和LNA[(2.7±0.8)%]的含量,也显著高于浙江舟山地区母乳中LA[(20±3)%]和LNA[(2.5±0.6)%]的含量.浙江舟山地区母乳中二十二碳六烯酸(DHA)的含量[(0.67±0.21)%]显著高于上海市区母乳中DHA的含量[(0.51±0.25)%,P<0.01],也显著高于上海郊区母乳中DHA的含量[(0.42±0.16)%,P<0.01].初乳中花生四烯酸(AA)和DHA的含量,显著高于成熟乳中的含量. 结论舟山群岛居民由于膳食中鱼和海产食物较多,故母乳中DHA的含量较高.初乳中含有较高的AA和DHA,十分有利于新生儿的生长发育.
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母鼠孕期和哺乳期补充二十二碳六烯酸或α-亚麻酸对子代体格和智能发育的影响
目的 了解母鼠孕期和哺乳期补充二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)或α-亚麻酸(α-linolenic acid,LNA)对子代体格和智能发育的影响.方法 SD母鼠24只,随机分为三组.对照组:母鼠在孕期和哺乳期给予普通饲料;LNA组:母鼠在普通饲料基础上同时给予LNA,100 mg/d;DHA组:母鼠在普通饲料基础上给予DHA,100 mg/d.出生仔鼠作为研究对象.各组仔鼠于出生时、生后11和21 d时,称重后处死,每组每次处死约14～21只,分离脑组织并称重,同时测定脑中DHA含量,剩余仔鼠(每组约为19～22只)在生后28 d时进行Morris水迷宫智能测试.结果 LNA组仔鼠在出生时、生后11和21 d时脑中DHA含量分别为(17.81±0.40)%、(19.49±0.61)%和(21.26±0.53)%,均高于对照组[分别为(13.36±1.60)%、(17.19±1.09)%和(19.19±1.12)%],但明显低于DHA组[分别为(22.16±1.53)%、(23.28±1.01)%和(24.41±1.07)%](P《0.01).Morris水迷宫智能测试结果显示,三组仔鼠训练第1天到第4天的测量结果差异无统计学意义;第5天时LNA组游泳路程为(594.91±680.21)cm,游泳时间为(27.71±28.90)s,得分值为642.21±522.13;DHA组游泳路程为(603.32±478.97)cm,游泳时间为(46.43±44.47)s,得分值为821.39±924.75,均小于对照组,分别为(1338.96±1310.16)cm、(60.39±46.28)s和1435.94±1366.64(P均《0.05). 结论 母鼠在孕期和哺乳期补充DHA或LNA也许有益于子代的智能发育.
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二十二碳六烯酸对高氧复苏新生大鼠氧化水平的影响
目的 探讨母鼠孕期和哺乳期补充二十二碳六烯酸(DHA)对高氧或空气复苏的窒息新生大鼠体内氧化和抗氧化水平的影响.方法 孕鼠从妊娠第1天起随机给予不同饮食,从而分为普食组和DHA组(除普通饮食外每日给予100 mg DHA).新生鼠出生24 h内进行缺氧实验2 h,然后随机进入高氧复苏组和空气复苏组.实验共分4组:普食+高氧复苏组、普食+空气复苏组、DHA+高氧复苏组和DHA+空气复苏组.用分光光度法分别检测窒息后即刻、高氧1 d、3 d和7 d时新生鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.结果 DHA+高氧复苏组新生鼠在高氧1 d、3 d和7 d时的s0D水平分别为(93.7±16.8)U/ml、(128.2±11.5)U/ml和(170.9±9.0)U/ml,显著高于DHA+空气复苏组[(73.7±21.5)U/ml、(112.2±19.9)U/ml和(124.2±24.6)U/ml],差异均有统计学意义(P均<0.05).DHA+高氧复苏组新生鼠的MDA含量在高氧3 d和7 d时分别为(6.0±0.5)nmol/ml和(3.5±0.9)nmol/ml,均显著低于普食+高氧复苏组[分别为(7.5±1.1)nmol/ml和(4.0±0.5)nmol/ml],差异均有统计学意义(P均<0.05).窒息后即刻、高氧1、3和7 d时各组间GSH-Px水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 DHA可能通过提高体内抗氧化酶水平和减少氧化代谢产物,从而对新生鼠窒息后复苏时的高氧性损伤产生一定的保护作用.
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不同喂养方法对婴幼儿生长速率影响的研究
目的探讨对无法进行母乳喂养儿,添加二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(AA)喂养与婴儿体格发育速率的关系.方法选择无法母乳喂养儿166名,男84 名,女82 名.随机分为配方组83名(男 39名,女44名)和在配方奶粉中添加DHA和AA的添加组83名(男45名,女38名).除配方组不含DHA和AA外,两组奶粉配方成分均完全相同.添加组添加的DHA来源于高山被胞霉提取物,含量为奶粉中每百克脂肪的0.2%,AA来源于双鞭甲藻,含量为奶粉中每百克脂肪的0.3%,二者比例为1∶1.5.另选择母乳喂养儿89名(男47名,女42名)为对照组.总观察对象为255名,男 131名,女 124名.观察体重、身高和头围等生长发育指标,大便次数及性状、口臭、舌苔和眼分泌物等生理耐受性指标.观察频率为出生当日、生后1、2、4、6、8、10、12周,计8次.结果 3组生长发育距离值表明,添加组的体重一直保持第1位,身长从第3位追至第2位(母乳组为第1位),头围从第2位追至第1位.生长发育增长值显示添加奶粉组对体重、身长和头围3个参数具有有力的推动力,值得注意的是对头围增长的促进极为强劲.在生理相对接受性方面,配方组和添加组的两组人工喂养儿与母乳喂养儿的大便性状基本一致,表现了良好的耐受性.口臭、舌苔和眼分泌物3个参数表明,添加组的综合耐受性更加接近母乳组.结论为了达到与母乳喂养儿同样的生长发育潜能的佳表达,对出生后无法进行母乳喂养的婴儿,在配方奶粉中添加DHA和AA的人工喂养.DHA和AA的添加提高了婴幼儿对配方奶粉的生理耐受性.
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饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸对肺癌细胞增殖与自噬的影响
目的 研究饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸对肺癌细胞增殖与自噬的影响.方法 用0、30、60、120、240μmol/L硬脂酸(饱和脂肪酸)和DHA(不饱和脂肪酸)分别处理肺癌细胞A549,绘制细胞生长曲线并计算克隆形成率以检测细胞增殖.采用硬脂酸和DHA分别处理A549细胞24h后,采用激光共聚焦显微镜从形态学方面观察细胞自噬情况.采用硬脂酸和DHA分别处理A549细胞12、24、36h后,用Western blotting检测细胞自噬相关蛋白的表达.结果 30~240μmol/L硬脂酸和DHA均有抑制A549细胞增殖的作用(P<0.05),硬脂酸、DHA处理A549细胞24h后均检测到细胞出现明显的自噬;Western blotting结果 显示,硬脂酸、DHA分别处理A549细胞12、24、36h后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.05),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(ser2481)磷酸化水平降低(P<0.05).结论 饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸均有抑制肺癌细胞增殖、诱导肺癌细胞自噬的作用,其机制可能与p-mTOR(ser2481)信号通路有关.
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不饱和脂肪酸与脑功能关系的研究进展
加入WTO标志着我国将进入公开、公平、公正全方位竞争的社会,在这样的社会中要立于不败之地,智商的高低将起决定性作用.因此,怎样使孩子聪明以成为众望所归.国外有关增强小儿智商的研究发现,小儿智商的高低受多方面因素的影响,如遗传因素、周边环境、教育状况、营养等,但大量的研究证明,缺乏组成大脑脂质的脂肪酸是引起大脑功能不良的重要因素.研究证实大脑脂肪酸主要是22碳六稀酸(docosahexaenoic acid,DHA)和AA(花生四烯酸).这些脂肪酸是从胎儿到脑功能发育完成不可缺少的物质基础.其中亚油酸和α-亚麻酸不仅不能缺少,而且二者必须保持平衡.
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二十二碳六烯酸改善棕榈酸诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗作用
目的 观察二十二碳六烯酸(DHA)对棕榈酸诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗的影响.方法 将C2C12细胞诱导分化成熟,加棕榈酸及DHA处理,通过实时聚合酶链反应(real-Time qPCR)及免疫印迹检测C2C12细胞葡萄糖转运体4(GLUT4)、胰岛素受体-β(IR-β)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达;谷胱甘肽检测试剂盒检测超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,荧光分光光度计检测活性氧(ROS);[3H]-2-脱氧-D-葡萄糖检测C2C12细胞葡萄糖摄取量.结果 棕榈酸组与对照组比较,磷酸化胰岛素受体底物-1(P-IRS-1)的表达上调[(2.9±0.3)比(1.1±0.1),P＜0.05];磷酸化胰岛素受体-β(p-IRβ)表达下调[(0.87 ±0.09)比(1.58±0.21),P＜0.05];GLUT4表达下调[(1.1±0.3)比(3.3±0.4),P＜0.05];炎症分子MCP-1、IL-6、iNOS表达明显上升:[MCP-1:(27.2±0.6)比(1.0±0.1),P＜0.001;IL-6:(94.9 ±6.5)比(0.8±0.0),P＜0.001;iNOS:(288.0±15.6)比(1.8±0.6),P＜0.001].C2C12细胞氧化应激标志物ROS升高2.1倍(P＜0.05),SOD、GSH-Px活性分别下降63％及49％(P＜0.05);DHA组与棕榈酸组比较,p-IRS-1的表达下调[(1.3±0.2)比(2.9±0.3),P＜0.05],p-IRβ表达上调[(1.3±0.2)比(0.9±0.1),P＜0.05],GLUT4表达明显升高[(2.8±0.4)比(1.1±0.3),P ＜0.05];炎症分子MCP-1、IL-6、iNOS表达均明显下调[MCP-1:(18.5±0.3)比(27.2 ±0.6),P＜0.001;IL-6:(1.7±0.4)比(94.9±6.5),P＜0.001;iNOS:(5.0±0.9)比(288.0 ±15.6),P＜0.001],氧化应激标志物ROS下降55％(P＜0.05),SOD、GSH-Px活性升高72％及64％ (P ＜0.05).结论 DHA通过激活C2C12细胞的胰岛素信号通路,减少细胞的炎症反应及氧化应激而改善胰岛素抵抗.
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二十二碳六烯酸和神经酸对1-溴丙烷染毒大鼠学习记忆的影响
目的 观察二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和神经酸(nervonic acid)对1-溴丙烷(1-bromopropane,1-BP)致大鼠学习认知功能损伤的保护作用及机制.方法 SPF级雄性Wistar大鼠40只,随机分为溶剂对照组、1-BP染毒组(800 mg/kg)、神经酸(150 mg/kg)+ 1-BP组(800 mg/kg)、DHA(500mg/kg)+1-BP组(800 mg/kg),每组10只.分别经灌胃给予相应受试物7d,第8天开始采用Morris水迷宫试验检测大鼠的学习和记忆能力,连续5d.水迷宫结束次日断头处死大鼠,迅速剥离大鼠大脑皮层,在冰浴中制备组织匀浆,分别测定还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)及γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(γ-glutamate cysteineligase,γ-GCL)活力.结果 Morris水迷宫定位航行试验中,1-BP染毒组大鼠的逃避潜伏期和游泳总路程明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);与1-BP染毒组比较,DHA+1-BP组大鼠的逃避潜伏期和游泳总路程明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).空间探索试验中,与1-BP组比较,DHA+1-BP组和神经酸+1-BP组的穿越平台次数明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,1-BP染毒组平台周边时间/总时间比值明显减少,与1-BP组比较,DHA+1-BP组动物的平台周边时间/总时间比值明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,1-BP染毒组动物大脑GSH含量降低了18.1％,DHA+1-BP组GSH含量明显高于1-BP组,差异均有统计学意义(P＜0.01).与1-BP染毒组比较,DHA+1-BP组和神经酸+1-BP组MDA含量明显降低,DHA+1-BP组GR酶活力明显增加,神经酸+1-BP组γ-GCL酶活力明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 1-BP染毒导致大鼠大脑氧化应激,损伤认知功能;DHA和神经酸在一定程度上可减轻1-BP对大鼠认知功能的损伤;增强GR和γ-GCL酶活力,升高大脑GSH含量,可能是其作用机制之一.
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毛细管气相色谱法测定人血清及乳汁中二十二碳六烯酸的浓度
目的:建立一种简便、准确的毛细管气相色谱法测定血清和乳汁中二十二碳六烯酸(DHA)含量的方法.方法:用甲醇-甲苯-乙酰氯在100℃条件下,将标本中各种形式的DHA进行甲酯化;采用氰丙基聚甲基硅氧烷弹性石英毛细管柱,程序升温法进行分离;用氢火焰离子化检测器进行检测,以C_(15.00)为内标,以内标标准曲线法定量.结果:测定日内和日间变异系数,血清样品为1.5％～4.7％和5.5％～8.5％.乳汁样品为3.6％和1.8％,回收率平均为91.6％.在10～250mg/L范围内线性关系良好(r=0.9994).结论:该法样品用量少,前处理方法简单、准确,血清和乳汁中其他成分对DHA的测定无干扰.适用于临床检测和科研的需要.
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二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF表达的影响
目的：评价二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞促血管生成素2（ Ang?2）和血管内皮生长因子（ VEGF）表达的影响。方法将原代培养大鼠脑微血管内皮细胞采用随机数字表法分为3组（ n＝18）：对照组（ C组）、氧糖剥夺组（ OGD）组和二十二碳六烯酸组（ DHA组）。OGD组和DHA组采用无糖、无血清DMEM培养液培养，DHA组加入二十二碳六烯酸40μmol，在1％O2?5％CO2?94％N2低氧培养箱中孵育；C组在常糖和常氧条件下培养。培养时间为24 h。采用AnnexinV＆PI法检测细胞凋亡情况，ELISA法测定培养液上清液Ang?2、VEGF、前列腺素E2（ PGE2）和前列腺素I2（ PGI2）的浓度；RT?PCR法检测细胞Ang?2和VEGF的mRNA表达；Western blot法检测环氧化酶?2（ COX?2）蛋白的表达。结果与C组比较，OGD组和DHA组细胞凋亡率升高，上清液Ang?2、VEGF、PGE2和PGI2的浓度升高，细胞Ang?2、VEGF的mRNA和COX?2蛋白表达上调（ P＜0．05）；与OGD组比较，DHA 组细胞凋亡率降低，上清液 Ang?2、VEGF、PGE2和 PGI2浓度降低，细胞 Ang?2、VEGF的mRNA和COX?2蛋白表达下调（ P＜0．05）。结论二十二碳六烯酸可抑制大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang?2和VEGF的表达，减少细胞凋亡，其机制与降低COX?2蛋白表达有关。
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外源性保护素DX对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响
目的 探讨外源性保护素DX (PDX)对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性C57BL/6小鼠30只,6～8周龄,体重20～ 25 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(Sham组)、脓毒症组(S组)和PDX组.采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型.于CLP后1h时,PDX组腹腔注射PDX 300 ng,Sham组和S组注射等容量生理盐水.于CLP后24 h时处死小鼠,收集肺泡灌洗液(BALF),测定蛋白浓度和IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-10浓度;取肺组织,观察病理学结果,进行肺损伤评分,测定髓过氧化物酶(MPO)活性、湿重/干重(W/D)比值和NF-κB p65磷酸化水平.结果 与Sham组比较,S组和PDX组肺损伤评分、MPO活性、W/D比值、NF-κB p65磷酸化水平以及BALF蛋白浓度和炎性因子浓度升高(P＜0.05);与S组比较,PDX组肺损伤评分、MPO活性、W/D比值、NF-κB p65磷酸化水平以及BALF蛋白浓度和IL-1β、TN F-α、IL-6浓度降低,IL-10浓度升高(P＜0 05).结论 外源性PDX可抑制肺组织NF-κB活性从而减轻脓毒症小鼠急性肺损伤.
