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脊髓损伤早期及制动大鼠股骨干骺端的显微CT观察
背景:脊髓损伤后可引起损伤平面以下骨量大量丢失,导致骨质疏松.目的:观察比较脊髓损伤及失用性制动模型大鼠股骨远端骨密度及骨微观结构的改变.方法:将SD大鼠随机分为3组:对照组,切除T10椎板,不损伤硬膜及脊髓;脊髓损伤组,切除T10椎板后行Allen's法造成脊髓损伤;制动组,以大鼠双侧腿-尾缝合造成双下肢制动.10 d后取一侧尺、桡骨及股骨行骨密度检测,另一侧股骨行显微CT扫描.结果与结论:脊髓损伤组与制动组大鼠股骨远端骨密度、骨矿物质含量、骨体积分数表、骨小梁厚度、骨皮质面积及厚度、骨小梁数量均低于对照组(P < 0.05 ),骨小梁结构模型指数、骨表面积体积比、骨小梁分离度均高于对照组;脊髓损伤组上述指标较制动组变化程度更显著(P < 0.05).3组尺、桡骨密度差异无显著性意义.说明脊髓损伤及制动均可导致骨量丢失,在脊髓损伤早期损伤平面以下部位骨微观结构呈现骨质疏松明显改变,且程度比失用性因素严重.
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犬椎间盘经皮针刺退变模型的建立
背景:普通针头穿刺纤维环是目前较为公认的理想椎间退变模型制作方法,但存在对动物损伤大,操作不简捷等缺点.目的:尝试在C臂机透视下经皮穿刺比格犬腰椎椎间隙建立腰椎间盘退变动物模型.方法:选用8只健康成年犬,行腰椎MRI后在C臂机下经皮穿刺椎间隙,损伤L5/6椎间盘.术后3,6个月行腰椎MRI后,取标本行免疫组织化学观察椎间盘退变情况.结果与结论:经皮椎间盘穿刺后3,6个月,L5/6椎间盘均出现了明显退变,MRI显示T2值均出现明显降低,并且椎间盘大多出现不同程度椎间盘突出征象;L5/6穿刺节段髓核Ⅱ型胶原阳性细胞含量较L4/5髓核均明显减少(P < 0.05).说明经皮穿刺损伤椎间盘建立犬椎间盘退变模型是一种简单有效、重复性好的建模方法.
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青老年大鼠脑缺血模型的比较
背景:大鼠具有成本低,种系内纯合性好,脑血管解剖特性与人类相似等特点,是目前脑缺血研究常用的实验动物.目的:观察青老年大鼠大脑中动脉梗死后的行为学变化,分析年龄对脑缺血的影响.方法:将青、老年SD 大鼠随机分为青、老年假手术组,青、老年模型组(同侧颈总动脉永久结扎大脑中动脉线栓法制备大脑中动脉梗死模型)4 组.结果与结论:老年假手术组体质量低于青年假手术组(P < 0.05),但高于老年模型组(P < 0.05),老年模型组体质量低于青年模型组(P < 0.05).术后第1,3,5,7 天老年模型组改良神经功能损害程度评分高于青年模型组(P < 0.05);与青年模型组及青、老年假手术组比较,术后第3,8,12 周老年模型组逃避潜伏期明显延长,跨过平台所在位置的次数明显减少(P < 0.05).表明在同等缺血打击下,老龄鼠脑缺血模型缺血损伤重、修复能力低,其神经功能恢复、学习和记忆能力明显逊于青年大鼠,提示增龄因素是研究脑缺血后神经损伤的重要影响因素之一.
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捆绑带束缚压力对骨折模型动物骨痂形成及愈合的影响
背景:有些观点认为捆绑带的使用会影响骨折部位的血运甚至造成骨折延迟愈合与骨折不愈合.目的:观察3种不同束缚压力捆绑带对骨折动物模型骨痂形成及愈合的影响.方法:建立新西兰大白兔股骨干非负重骨折动物模型,髓内固定后随机分为3组,分别在骨折部位加用200,150,100 N束缚压力的捆绑带固定,术后2,4,6周观察骨痂形成及愈合.结果与结论:200 N压力组骨折固定牢固,但骨折断端外骨痂形成受限,无骨愈合,影响断端远期稳定性.100 N压力组早期骨折断端不稳定,虽不影响骨折愈合,但容易出现畸形愈合.150 N压力组压力适中,骨折固定与愈合均良好.提示在保持适当束缚压力的情况下,捆绑带可以有效维持骨折部位稳定,避免骨折移位或畸形愈合,保障骨折正常愈合,对骨折部位骨膜血运无异常影响,有助于促进骨折早期愈合.
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邻苯二甲酸二丁酯诱导孕鼠尿道下裂模型后仔鼠睾丸细胞过氧化物酶6的表达
背景:前期实验发现在邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露诱导的仔鼠睾丸发育中蛋白过氧化物酶6表达显著增高.目的:进一步验证邻苯二甲酸二丁酯胚胎期暴露对胎鼠睾丸蛋白过氧化物酶6表达的影响.方法:妊娠14~18 d按800 mg/(kg?d) 邻苯二甲酸二丁酯染毒孕鼠,妊娠21 d取出胚胎大鼠睾丸,提取蛋白,通过Western blotting及免疫组织化学方法检测睾丸细胞过氧化物酶6的表达,以正常雄性仔鼠睾丸为对照.结果与结论:Western blotting检测显示,实验组过氧化物酶6的相对表达量为0.205±0.020,对照组为0.110±0.020,实验组明显高于对照组(P < 0.05).免疫组织化学方法发现过氧化物酶6主要定位于胎鼠睾丸Leydig细胞中.说明过氧化物酶6可能通过发挥抗氧化作用及刺激Leydig细胞增殖功能抵抗邻苯二甲酸二丁酯的毒性作用,其功能有待进一步研究.
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中药复方柔肝化纤颗粒干预肝纤维化模型大鼠肝脏微循环障碍的变化
背景:中药复方柔肝化纤颗粒已证明能显著改善慢性肝炎、肝硬化患者的临床症状,但其能否多途径、多靶点、多环节改善肝脏微循环尚不明确.目的:构建肝纤维化大鼠模型,观察中药复方柔肝化纤颗粒全方及不同拆方组合对模型大鼠肝脏微循环障碍失衡的影响及差异.方法:采用CCl4复合因素造模方法复制肝纤维化大鼠模型,在第4周造模结束后将建模成功的大鼠随机为6组:模型组、大黄蟅虫丸组,柔肝化纤颗粒组1:柔肝化纤颗粒全方灌胃;柔肝化纤颗粒组2:予补肾养肝方灌胃;柔肝化纤颗粒组3:予益气健脾方灌胃;柔肝化纤颗粒组4:予化痰解毒方与活血化瘀、软坚散结方灌胃;同时设正常对照组进行对比,各组分别按0.1 mL/kg灌胃给予相应的药液,1次/d,共给药12周.结果与结论:①光学显微镜下观察,模型组肝间质出现广泛纤维组织增生,将正常肝小叶分割成大小不等的肝细胞团(即假小叶形成),说明肝纤维化模型大鼠造模成功;②与正常对照组比较,各组大鼠血清一氧化氮及内皮素1水平明显偏高,且肝硬化程度越高,一氧化氮及内皮素1水平增高越明显(P<0.01),而肝动脉始增时间、肝静脉始增时间的缩短越明显(P<0.05或P<0.01);③与模型组比较,各用药组血清一氧化氮及内皮素1水平均有不同程度的降低(P<0.01),各用药组肝动脉始增时间、肝静脉始增时间均有不同程度的延长(P<0.01);④与黄蟅虫丸组相比,柔肝化纤全方组的一氧化氮及内皮素1水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝静脉始增时间较黄蟅虫丸组延长(P<0.01);⑤结果说明,实验成功复制了肝纤维化模型大鼠,采用中药复方柔肝化纤颗粒全方干预治疗后,能够调节模型大鼠肝脏微血管的流速,促进肝脏微循环的血流灌注量,有助于延缓肝纤维化的进展,其机制可能主要通过降低血清一氧化氮及内皮素1水平有关.
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6-羟基多巴胺单侧两点注射法构建的帕金森病模型鼠
背景：帕金森病动物模型的建立对帕金森病的临床、基础实验研究中有重要作用，同时其稳定性也直接影响到研究的结果。
目的：评价6-羟基多巴胺单侧两点注射法构建的帕金森病模型大鼠行为及病理变化。
方法：SD大鼠62只随机分为实验组50只，正常组12只，采用脑内立体定向，将6-羟基多巴胺注入实验组大鼠右侧黑质致密部和中脑腹侧被盖区以建立帕金森病模型，观察大鼠行为变化、酪氨酸羟化酶及脑内多巴胺含量改变。
结果与结论：2周后实验组经阿朴吗啡诱导后，有22只向左侧旋转速度>7 r/min，2周与4周之间大鼠的旋转圈数差异无显著性意义(P>0.05)。模型组中酪氨酸羟化酶及脑内多巴胺含量明显减少。说明应用6-羟基多巴胺单侧两点注射可成功建立行为及病理相似的帕金森病大鼠模型。 -
坐骨神经牵拉伤模型MR扩散张量成像与病理的对照
背景：磁共振弥散张量成像可以显示周围神经损伤的弥散变化并进行定量研究，因而在显示神经损伤及再生方面具有良好的应用前景。目的：探讨兔坐骨神经急性牵拉伤弥散张量成像的可靠性，明确弥散张量参数在神经损伤诊断中的价值及病理学基础。方法：选取32只新西兰白兔建立右后肢坐骨神经退变与修复模型，左后肢为假手术侧。采用1.5 T MRI 机于术后1 d，3 d，1周，2周，3周，4周，6周，8周行双侧坐骨神经弥散张量成像，进行DTT重建，测量各向异性分数、表观扩散系数；然后进行病理检查。结果与结论：牵拉伤后1d弥散张量成像仅显示神经近段，损伤段及远段中断；牵拉伤后1周远段出现细、短纤维束；牵拉伤后2-6周远段纤维束增多、增粗；牵拉伤8周神经纤维大部分恢复正常。1d-8周牵拉段、牵拉远段各向异性分数值与假手术侧差异有显著性意义(P<0.05)；1 d-1周牵拉近段各向异性分数值与假手术侧差异有显著性意义(P<0.05)。1-8周不同牵拉段表观扩散系数值与假手术侧差异均无显著性意义。神经牵拉伤早期各向异性分数值下降的病理改变是髓鞘板层疏松，崩解，轴索崩解；各向异性分数值升高的病理基础是髓鞘、轴索再生。结果可见DTT纤维示踪成像可清晰、直观、早期显示兔坐骨神经牵拉伤的异常改变，各向异性分数值测量可作为监测坐骨神经牵拉伤后退变及再生的敏感方法。
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提高激素性股骨头坏死模型成活率的方法
背景：激素性股骨头坏死动物模型建立过程中动物的死亡成为影响实验结果的主要因素。
目的：观察以脂多糖和地塞米松建立股骨头坏死模型，提高模型成功率的方法。
方法：新西兰大白兔48只随机等分为模型组、庆大霉素组、庆大霉素+兰索拉唑组和对照组，前3组连续2 d经耳缘静脉注射脂多糖，再连续3 d，臀部肌肉注射地塞米松注射液建立股骨头坏死模型，庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组在建模成功后连续7d以庆大霉素灌胃，同时庆大霉素+兰索拉唑组肌肉注射兰索拉唑注射液。对照组兔仅注射生理盐水。
结果与结论：模型组、庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组均造模成功；其中庆大霉素+兰索拉唑组存活状况好，3组动物死亡率分别是33.3%，25%，8.3%，模型组、庆大霉素组、庆大霉素组+兰索拉组和对照组兔的死亡数量差异有显著性意义(P <0.05)。提示在兔激素性股骨头坏死模型建立中，庆大霉素+兰索拉唑的使用，可以提高实验动物的生存率。 -
改良线栓法制作SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型
背景：线栓法是制作局灶性脑缺血再灌注模型的常用方法，防治大出血和顺利插线是其造模成功的关键和研究热点。
目的：对Longa线栓法进行改良，以期有效防治术中大出血和提高造模成功率。
方法：制备模型时颈外动脉两断端除了手术线结扎外，线结外端用电刀夹闭；插线时借助弯镊的力量使鱼线沿血管前内侧壁(翼腭动脉分叉处颈内动脉血管的方向)前行。术后进行大鼠行为评分，计算脑梗死体积和光镜下观察组织病理学变化。
结果与结论：电刀夹闭后的血管从横切面上的“圆”形变成“一”字形，线结不易脱落，有效防治术中大出血。借助弯镊的力量，可使插线成功率明显提高。模型大鼠脑梗死体积均明显增加，脑组织病理损伤加重。结果可见改良线栓法制作 SD 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，可有效防止线结脱落，提高插线成功率，模型制备成功。 -
特应性皮炎模型小鼠的生长繁殖及血液生理生化指标
背景：Nc/Nga小鼠皮损、病理和免疫学特征等均与人类特应性皮炎相一致，作为特应性皮炎动物模型其研究价值日益显现。目前国内尚无Nc/Nga小鼠的生理生化指标等相关数据报道。目的：观察特应性皮炎动物模型Nc/Nga小鼠的生长繁殖性能以及血液生理、生化指标。方法：统计Nc/Nga小鼠1-3胎的繁殖指标数据，包括每胎产仔数、离乳率、怀孕率及胎间隔。分别称取60只1-56 d Nc/Nga仔鼠的体质量，雌雄各半，绘制其生长表格。Nc/Nga鼠眼眶采血，测定其血常规和生化值。结果与结论：Nc/Nga 小鼠平均交配分娩间隔为(25.8±3.1) d，平均产仔数为(7.5±2.5)只，平均离乳率为(97.2±1.2)%、平均怀孕率为(97.0±1.4)%，1-3胎间差异无显著性意义(P>0.05)。Nc/Nga小鼠的体质量随着日龄的增长而逐渐增加，断奶后一两周内增重为迅速，6周后体质量雌雄间差异无显著性意义(P>0.05)。同一日龄的雌雄间血常规和生化值比较，雌性小鼠红细胞、血红蛋白明显高于雄性小鼠；雄性小鼠血小板计数明显高于雌性小鼠(P <0.05)；雌性小鼠三酰甘油、白蛋白水平明显高于雄性小鼠(P <0.05)。提示性别和年龄都会影响Nc/Nga小鼠的血液生理和生化值指标。
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MV3和HaCaT细胞接种去表皮真皮组织上构建人工皮肤黑素瘤模型
背景：课题组曾成功的用 MV3黑素瘤细胞和人角质形成细胞体外重建黑素瘤三维模型。
目的：利用MV3黑素瘤细胞和HaCaT细胞结合去表皮的真皮体外重建黑素瘤模型。
方法：MV3黑素瘤细胞和HaCaT细胞按照不同比例混合接种于人去表皮的真皮组织上，采用液下培养和空气-液面培养相结合技术进行培养，体外构建组织工程皮肤模型。对所构建的皮肤黑素瘤模型进行常规切片免疫组化观察。
结果与结论：苏木精-伊红染色显示MV3黑素瘤细胞在去表皮真皮表面成层分布或形成瘤灶，HaCaT 细胞和瘤细胞混合生长，形成典型的表皮样结构。部分瘤细胞浸润到去表皮真皮浅层或内部，成瘤灶分布。CK10、CK-pan和S-100免疫组化染色显示阳性。随着MV3∶HaCaT细胞比例的增高，CK10，CK-pan由表层逐渐下移，由层状分布变为团块状分布，S-100蛋白染色则分层逐渐明显，部分区域成瘤状分布。结果可见利用 MV3黑素瘤细胞和 HaCaT 细胞结合去表皮真皮体外可以构建皮肤黑素瘤模型。 -
高眼压动物模型的造模时间
背景：急性高眼压动物模型为研究青光眼提供了简单有效的途径，模型成功与否直接影响研究结果，目前对造模成功的判据多为观察性指标。目的：为前房穿刺所致的急性高眼压动物模型提供准确、可行的造模成功判定方法，观察特定高眼压下急性高眼压动物模型的成模时间。方法：利用连通器原理，将加压装置与内充2 mm 水银球的玻璃管相连，通过读取水银球的流动，计算眼内液体流入量。采用前房灌注法，成功建立10只兔眼眼内压为4.9 kPa 的急性高眼压动物模型，监测眼内液体流入量随造模时间的变化至液体不再流动30 min 后结束实验。拟合眼内压液体流入量随造模时间的变化规律，计算急性高眼压动物模型造模成功的时间。结果与结论：兔眼眼球进水量(y)与加压时间(t)呈Logistic 变化规律，即，其中参数U，b0和b1分别为957.44±313.22，0.023±0.008和0.980±0.003。当注水时间达到(282.93±42.68) min 后，眼内压等于外界施加的高压，兔急性高眼压模型造模成功。
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跑台训练建立过度训练大鼠模型
背景：过度训练是运动负荷与机体机能不相适应，以至疲劳连续累积而引起的一系列功能紊乱或病理状态。目前建立过度训练大鼠模型的常用训练方法有跑台、游泳、爬杆等方式，但国际上比较认可跑台法。
目的：通过动态监测运动大鼠的生化指标，同时观察其行为学改变，确立建立过度训练大鼠模型的建模标准，实现过度训练大鼠模型建模客观化。
方法：16只SD大鼠随机均分为模型组与空白对照组。模型组按训练计划进行运动训练，大鼠适应性喂养后开始训练，每周训练6 d，休息1 d，采用递增强度跑台运动，从训练第1周起，逐渐递增速度、坡度和跑步时间；而空白对照组常规饲养，不进行训练。
结果与结论：运动5周后大鼠出现过度训练行为学改变。训练过程中，血清肌酸激酶持续增加，5周后高于基础水平(P<0.01)；血清尿素氮持续增加，3周后高于基础水平(P<0.05)；而大鼠血红蛋白、血清睾酮呈现先升高后下降的趋势，8周后显著低于基础水平(P<0.05)。大鼠行为学上出现过度训练状态，同时血红蛋白、血清睾酮显著低于基础水平，血清肌酸激酶、血清尿素氮显著高于基础水平，提示运动机体处于过度训练状态。实验确立了过度训练大鼠的建模标准。按照实验训练方案，跑台速度为30 m/min、每次训练时间为110 min、坡度为15°时，训练持续至第8周可以建立过度训练大鼠模型。 -
以关节不稳建立的大鼠骨关节炎模型
背景：骨性关节炎是一种复杂的多病因退变性关节疾病。早期进行骨性关节炎的防治尤其重要。但获取足量的适合研究的早期骨性关节炎的人类骨标本十分困难。
目的：观察关节不稳方法建立骨关节炎模型大鼠的关节软骨组织学变化。
方法：10周龄雄性SD大鼠随机分为2组：实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带，对照组仅切开关节囊。于术后1，2，4，6，8周取右膝关节标本，行病理组织学检查分析大鼠骨关节炎病程的变化情况。
结果与结论：①术后2，4，6，8周，实验组关节软骨退变程度呈现轻度糜烂、溃疡磨损、严重磨损、骨赘形成等病理变化。②术后1，2，4，6，8周，实验组关节软骨评分均明显高于对照组(P<0.05)。结果显示该实验采用内侧副韧带切断+内侧半月板切除方法成功建立了大鼠膝关节骨关节炎模型，且造模后4周内的病理、形态学改变类似于人类早期膝关节骨关节炎表现，是研究早期骨关节炎的理想模型。
