首页 > 文献资料
-
胃癌微转移诊断研究进展
胃癌微转移是胃癌复发的关键因素.应用RT-PCR等分子生物学方法可有效诊断患者骨髓、淋巴结、腹腔灌洗液和外周血中微转移情况并能评价预后和治疗.
关键词： 胃肿瘤 微转移 逆转录聚合酶链式反应 诊断 综述文献 -
KLK11在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨激肽释放酶相关肽酶11(KLK11)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 选取2010年2月至2013年3月间宜宾市第二人民医院收治的行根治性胃癌切除术的48例胃癌患者的肿瘤标本和癌旁正常组织标本(距癌组织5cm以上).采用Western blot检测两种组织中KLK11蛋白的相对表达量,qRT-PCR检测组织中KLK11 mRNA水平,分析KLK11表达与患者临床资料及预后的关系.结果 胃癌组织中KLK11 mRNA的相对表达量为(0.65 ±0.23),高于癌旁正常组织的(0.39 ±0.16),差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织中KLK11蛋白的相对表达量为(0.73±1.74),高于癌旁正常组织的(0.51±0.21),差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织中KLK11的阳性率为70.8％(34例),高于癌旁组织中的37.5％(18例),差异有统计学意义(P＜0.05).KLK11的高表达与胃癌患者TNM分期、神经侵犯和淋巴结转移相关,差异均有统计学意义(P＜0.05);与患者年龄、性别、肿瘤直径和组织分化程度无关.结论 KLKK11的高表达与胃癌患者的TNM分期、神经侵犯、淋巴结转移及预后相关.
-
外周血PIPmRNA与乳腺癌预后因素的相关性研究
目的 探讨泌乳素诱导蛋白(PIP) mRNA对估计乳腺癌预后的临床价值.方法 用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法,检测121例乳腺癌患者外周血中PIP mRNA表达情况,另抽取30例乳腺良性疾病患者外周血标本作为对照组.结果 121例乳腺癌患者外周血中PIP mRNA有38例表达,阳性率为31.4％,对照组中PIP mRNA表达为阴性.两组比较差异有显著性(P＜0.05).PIPmRNA阳性表达与患者的淋巴结转移状况、原发肿瘤大小、分期、病理分级显著相关(P＜0.05)；而与患者的年龄、病理类型、ER、PR等无显著相关(P＞0.05).结论 外周血PIP mRNA阳性表达与乳腺癌不良预后有关.
关键词： 泌乳素诱导蛋白 逆转录聚合酶链式反应 乳腺肿瘤 -
大肠癌患者淋巴结细胞角蛋白-20mRNA基因表达的临床意义
目的探讨大肠癌患者淋巴结转移的临床意义.方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测了49例大肠癌患者淋巴结中细胞角蛋白-20(CK-20)mRNA的表达情况.结果 49例大肠癌标本中共检测淋巴结342枚,常规病理检查和CK-20 mRNA检测淋巴结转移的检出率分别为12.6%和23.1%,二者差异有显著性(P＜0.01).结论检测大肠癌患者淋巴结 CK-20 mRNA的表达,可以提高大肠癌淋巴结转移的检出率,对大肠癌的准确分期、治疗方案的选择及预后的判断具有指导意义.
关键词： 结直肠肿瘤 淋巴转移 细胞角蛋白 逆转录聚合酶链式反应 -
神经突触核蛋白-γ在人脑胶质瘤中的表达
目的 探讨神经突触核蛋白-γ(SNCG)在人脑胶质瘤组织中的表达情况.方法 针对43例人脑胶质瘤组织标本,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定SNCG mRNA的转录水平,同时采用免疫组化SP法检测SNCG的蛋白表达.结果 高级别胶质瘤(HGG,Ⅲ～Ⅳ级)和低级别胶质瘤(LGG,Ⅰ～Ⅱ级)中的SNCG阳性率分别为89.3％(25/28)和73.3％ (11/15),胶质瘤病理分级越高SNCG的阳性率越高(x2=15.724,P=0.000).SNCG mRNA在HGG和LGG中的转录水平较正常脑组织分别升高(4.46±0.39)倍和(2.56±0.34)倍(P＜0.05),而且HGG中的表达较LGG显著升高(P＜0.05).结论 SNCG的转录和蛋白表达水平在神经胶质瘤中显著增高,检测SNCG表达水平有利于胶质瘤的恶性程度判断.
关键词： 神经突触核蛋白-γ 神经胶质瘤 免疫组织化学 逆转录聚合酶链式反应 -
寻常型银屑病患者检测分泌型磷脂酶A2-ⅡA的意义
目的 探讨分泌型磷脂酶A2-ⅡA(sPLA2-ⅡA)的表达与银屑病皮损发病的关系.方法 依据PASI评分将银屑病患者40例分为3组,轻度组12例,中度组14例,重度组14例.非银屑病对照组患者35例.免疫组化法检测银屑病患者皮损组织和对照组健康人群组织切片中sPLA2-ⅡA表达情况.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测银屑病患者皮损组织和对照组皮肤组织sPLA2-ⅡA的mRNA表达水平.结果 对照组sPLA2-ⅡA表达阳性率5.7％(2/35),银屑病患者皮损组织中阳性率90％(36/40),2组差别有统计学意义(x2=53.05,P＜0.01).银屑病皮损组织比对照组皮肤组织中sPLA2-ⅡA的mRNA表达升高,2组相比差别有统计学意义(q=15.98,P＜0.01).银屑痛患者轻度组、中度组和重度组sPLA2-ⅡA表达阳性率差异有统计学意义(X2=14.62～24.93,P＜0.01),且sPLA2-ⅡA表达与PASI评分成显著的正相关(rs=0.87,P＜0.01).3组间sPLA2-ⅡA的mRNA表达差异也有统计学意义(F=33.47,P＜0.01),即银屑病患者皮损严重度加大即PASI评分越高,sPLA2-ⅡA的mRNA表达越显著.3组之间两两比较差别有统计学意义(q=6.37～11.74,P＜0.01).结论 sPLA2-ⅡA可能是银屑病发病的靶标.
关键词： 分泌型磷脂酶A2-ⅡA 银屑痛 逆转录聚合酶链式反应 -
染色体分离基因在纯化鼻咽癌组织中的表达
目的 研究染色体分离基因(homosapiens chromosome segregation gene,CSE1L)在纯化鼻咽癌及非癌组织中的表达.方法 首先从全基因组表达谱中筛选到鼻咽癌候选癌基因CSE1L.结合RNA保护、显微切割及线性扩增技术,获得纯化鼻咽组织中反义RNA(antisense RNA,aRNA),采用半定量逆转录聚合酶链式反应(semi-quantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction,sqRT-PCR)研究从全基因组表达谱中筛选的候选癌基因-CSE1L在两种不同纯化鼻咽组织aRNA中的表达.结果 在纯化鼻咽癌组织和鼻咽部非癌组织全基因组表达谱中,CSE1L基因表达值分别为1.056±0.296和0.465±0.835,相差2.27倍,两组比较有显著性差异(df=16,t=4.317,P=0.001＜0.01).sqRT-PCR检测纯化鼻咽癌组织及非癌组织aRNA中CSE1L基因的表达,分别为1.740±1.105和0.618±0.183,两组比较有显著性差异(df=30,t=3.159,P=0.004＜0.01).结论 利用全基因组芯片构建基因表达谱可筛选到鼻咽癌发病相关的候选靶基因,sqRT-PCR可验证芯片杂交结果,CSE1L基因是鼻咽癌发生、发展过程中重要的候选癌基因.
关键词： 鼻咽肿瘤 显微切割 芯片分析技术 染色体分离 逆转录聚合酶链式反应 -
线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及意义
目的 探讨Omi/HtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及其在口腔鳞癌发生发展中的作用及意义.方法 采用RT-PCR与免疫组织化学方法,检测20例低分化口腔鳞状细胞癌、20例高分化口腔鳞状细胞癌、20例口腔乳头状瘤、20例癌旁组织切除标本中Omi/HtrA2 mRNA与蛋白的表达情况,并与口腔正常组织标本中Omi/HtrA2mRNA与蛋白的表达情况作比较.结果 Omi/HtrA2蛋白在正常组织和癌旁组织中未检测到表达,在口腔鳞癌组(高、低分化)与口腔乳头状瘤组织中均有表达.Omi/HtrA2蛋白表达在高分化鳞癌组织中的表达水平高于低分化鳞癌组织、口腔乳头状瘤组织和癌旁组织(P＜0.05).Omi/HtrA2基因在高分化口腔鳞癌组织中的表达水平高于低分化口腔鳞癌组织、口腔乳头状瘤组织以及癌旁和正常组织(P＜0.05).结论 Omi/HtrA2在口腔鳞状细胞癌组织中有表达,表明Omi/HtrA2可能参与口腔鳞癌的发生发展过程.
-
猪牙胚釉原蛋白成熟肽基因原核表达克隆的构建
目的 克隆猪釉原蛋白(pAm)成熟肽编码区基因片段,并构建含有该基因的重组原核表达质粒,为制备基因工程化的重组pAm奠定基础.方法 从新生小猪牙胚组织中抽提总RNA,逆转录合成牙胚cDNA,通过PCR扩增pAm成熟肽编码序列(约540 bp),所得目的 基因插入表达载体质粒PGEX4T1,转化大肠杆菌DH5α.重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和核苷酸序列分析鉴定.结果 重组质粒PGEX4T1-pAm经双酶切和测序鉴定证实载体质粒PGEX4T1中插入的基因片段与pAm成熟肽基因序列完全相同.结论 从发育期猪牙胚组织中克隆到釉原蛋白成熟肽编码序列可成功构建含有pAm成熟肽基因的重组表达质粒.
关键词： 釉原蛋白 逆转录聚合酶链式反应 重组质粒 -
大鼠下肢缺血再灌注对心、肺组织功能损伤研究
目的:研究大鼠下肢缺血再灌注后对心、肺组织和功能的损伤作用.方法:SD大鼠20只随机分成2组,组Ⅰ(n=10)为实验组,行肾动脉水平远端腹主动脉阻断120 min后再灌注120 min,组Ⅱ(n=10)为假手术对照组,不行腹主动脉阻断.观察2组术后心肺组织病理变化以及心肌ATP酶,心肌凋亡率,平均动脉压(MAP)变化,肺丙二醛(MDA),伊文氏兰(Evan's blue)含量,肺糖皮质激素受体(GR)的mRNA水平变化.结果:组Ⅰ大鼠心肺组织可见炎性细胞浸润,心肌变性,肺渗出增加.与组Ⅱ比较,平均动脉压下降[(61±14)mmHg)]与(86±12)mmHg相比,p＜0.05],心肌ATP酶活力下降[Na+K+ATPase(8.05±0.35)U/mg与(9.04±0.81)U/mg相比较,p＜0.05;Ca2+ATPase(4.99±0.23)U/mg与(5.69±0.75)U/mg相比较,p＜0.05;Mg2+ATPase(4.40±0.26)U/mg与(5.30±0.62)U/mg相比较,p＜0.05],心肌凋亡率增加[(5.85±2.40)%与(0.87±0.26)%相比较,p＜0.05],肺MDA及Evan氏兰含量增高[(2.54±0.39)nmol/mg与(1.73±0.65)nmol/mg相比较,p＜0.05;(3.07±1.18)gμ/mg与(0.13±0.07)μg/mg相比较,p＜0.05],GR mRNA水平下调[(0.50±0.09)与(0.89±0.13)相比较,p＜0.05].结论:下肢缺血再灌注后可造成心肌损伤,凋亡细胞增加,肺组织损伤及通透性增加,GR mRNA水平下调.
-
大鼠低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因的表达
目的检测低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因的表达.方法用RT-PCR的方法检测大鼠梗阻性低顺应性膀胱组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因表达的改变.结果与正常对照组相比,低顺应性膀胱组逼尿肌层中Ⅲ型胶原蛋白基因的表达明显上调,Ⅰ型胶原蛋白基因的表达上调.结论膀胱组织肌层内Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白基因表达上调与梗阻后低顺应性膀胱的形成存在一定的关系.
关键词： 膀胱 梗阻 胶原 逆转录聚合酶链式反应 -
东莨菪碱致记忆障碍大鼠中枢电压依赖性钾通道亚型的表达
目的研究东莨菪碱致记忆障碍大鼠模型中枢电压依赖性钾通道亚型mRNA表达的差异.方法 Morris水迷宫实验检验大鼠空间学习记忆能力,用RT-PCR方法检测大脑皮层和海马中5种电压依赖性钾通道Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1,Kv4.2及Kv4.3 mRNA的表达.结果注射东莨菪碱大鼠的学习记忆能力明显下降,大脑皮层中Kv4.2的表达比对照组降低28.8%;海马中Kv1.4的表达升高111.7%,Kv2.1的表达升高64.3%,而Kv4.2的表达降低33.9%.其它电压依赖性钾通道表达的变化不大.结论东莨菪碱致大鼠学习记忆障碍的同时可诱发中枢电压依赖性钾通道亚型的表达改变.
关键词： 东莨菪碱 电压依赖性钾通道 逆转录聚合酶链式反应 记忆障碍 -
β-淀粉样肽25-35致记忆障碍大鼠中枢双孔钾通道亚型mRNA表达的改变
目的研究聚集态β-淀粉样肽25-35(β-AP25-35)致记忆障碍大鼠模型中枢双孔钾通道亚型mRNA表达的变化.方法 Morris水迷宫实验检验大鼠空间学习记忆能力,用RT-PCR方法检测大脑皮层和海马中3种双孔钾通道TREK-1,TREK-2和TRAAK mRNA的表达.结果在Morris水迷宫实验中,β-AP25-35注射组大鼠d 1,d 2和d 4的潜伏期均比对照组显著延长.β-AP25-35注射组大鼠大脑海马中TREK-1,TREK-2和TRAAK mRNA的表达比对照组明显升高;而在皮层中的表达变化不显著.结论侧脑室注射聚集态β-AP25-35致大鼠学习记忆障碍的同时可诱发中枢双孔钾通道亚型的表达改变.
关键词： β-淀粉样肽 双孔钾通道 逆转录聚合酶链式反应 -
皮肤羧酸酯酶代谢的立体选择性
目的研究人皮肤羧酸酯酶代谢的立体选择性,为利用前体药物方法促进透皮吸收提供分子生物学基础.方法以酮洛芬乙酯为模型药物,利用皮肤匀浆代谢方法考察皮肤羧酸酯酶代谢的立体选择性.以人肝脏L02细胞株中羧酸酯酶的表达为对照,采用RT-PCR方法从mRNA水平研究皮肤组织及其细胞中羧酸酯酶的表达.结果酮洛芬乙酯在人皮肤匀浆中的代谢产物以R-酮洛芬为主.人羧酸酯酶-2(hCE-2)在皮肤组织及其细胞中都有很强的表达,而人羧酸酯酶-1(hCE-1)在皮肤组织及其细胞中的表达量很小或不表达.结论皮肤表达的hCE-2是透皮吸收常用酯类前体药物的主要水解酶,其对手性酯类前体药物的水解具有立体选择性.
关键词： 羧酸酯酶 酮洛芬乙酯 立体选择性 逆转录聚合酶链式反应 -
大脑中动脉栓塞模型大鼠的中枢电压依赖性钾通道mRNA表达的改变
目的观察几种代表性电压依赖性钾通道亚型在脑缺血不同时间大鼠海马和皮层mRNA表达水平的变化.方法采用大脑中动脉栓塞模型致大鼠脑缺血损伤,应用RT-PCR方法检测Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1和Kv4.2mRNA表达水平在海马和皮层中的改变.结果大脑中动脉栓塞模型大鼠出现明显的神经损伤症状.缺血2 h时,海马组织的Kv1.4,Ky2.1和Kv4.2 mRNA表达水平分别增加了50%,67%和90%,在缺血24 h时Kv1.4和Kv4.2mRNA仍保持高水平表达.大鼠皮层组织在缺血2 h后,Kv1.4,Kv1.5,Kv2.1和Kv4.2 mRNA水平均无明显改变,缺血24 h后,Kv2.1和Kv4.2 mRNA水平分别增加了70%和62%.结论大脑中动脉栓塞模型大鼠的海马和皮层组织中电压依赖性钾通道亚型的mRNA表达发生明显上调.
关键词： 钾通道 逆转录聚合酶链式反应 大脑中动脉栓塞 mRNA表达 -
参麦注射液对大鼠肝脏CYP450酶的影响
目的:考察参麦注射液及各单药注射液对大鼠肝脏CYP450酶活性及mRNA表达的影响.方法:采用超速离心法制备大鼠的肝微粒体,与探针药物共孵育,应用LC/MS法测定各同工酶特异性底物非那西丁,甲苯磺丁脲,安非他酮,咪达唑仑在大鼠肝微粒体的代谢产物的生成量,间接反映各同工酶的活性.应用RT-PCR方法计算CYP1A2,CYP2B,CYP2C和CYP3A条带灰度与CYC条带灰度的比值,间接反映各处理组亚酶mRNA表达水平的改变.结果:参麦注射液可增加CYP2B6,2C9酶活性,与空白组比较具有显著性差异(P＜0.05),对CYP1A2,SA酶活性无明显影响;红参注射液对CYP1A2,2B6和2C9酶活性具有明显诱导作用(P＜0.05),对CYP3A酶活性有抑制趋势,无统计学差异;麦冬注射液显著诱导CYP2C9酶活性(P＜0.05).参麦注射液能诱导CYP1A2,2B,2C mRNA表达,红参注射液和麦冬注射液能诱导CYP2C mRNA的表达;红参注射液有抑制CYP3A mRNA表达的趋势,但无统计学差异.结论:参麦注射液及其各单药对CYP450同工酶不同程度的诱导或抑制作用,提示当药物联合应用时应关注可能产生的药物间相互作用.
关键词： 参麦注射液 细胞色素P450酶 Cocktail 逆转录聚合酶链式反应 -
Cx30.2和Cx45在急性心肌梗死大鼠心脏结区组织中的表达
目的 探讨急性心肌梗死大鼠心脏结区组织中连接蛋白(Cx30.2、Cx45)的表达.方法 结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,随机分为模型组(MI组,n=10)和假手术组(只穿线不结扎,SH组,n=10).术后4周取心脏标本,采用免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测心脏结区组织中Cx30.2和Cx45蛋白及mRNA的表达.结果 术后4周MI组Cx30.2和Cx45蛋白表达增加,分布不均,无规则,与SH组相比,蛋白表达差异有高度统计学意义(P=0.00);Cx30.2和Cx45 mRNA在MI组的表达量亦增加,与SH组相比,差异有高度统计学意义(P=0.00);Cx30.2和Cx45 mRNA的表达具有明显正相关(r=0.938,P＜0.05).结论 急性心肌梗死后心脏结区组织中Cx30.2和Cx45表达增加,二者mRNA表达呈正相关.
关键词： 急性心肌梗死 连接蛋白30.2 连接蛋白45 免疫组化 逆转录聚合酶链式反应 -
前列腺癌患者前列腺癌基因3的表达
目的 评价前列腺癌基因3(PCA3)在前列腺癌诊断中的临床应用价值.方法 选取我院2009年11月～2010年11月收治的30例前列腺癌(前列腺癌组)、22例前列腺增生(前列腺增生组)患者及12例健康男性(对照组),采用逆转录聚合酶链式反应方法检测其外周血中PCA3 mRNA表达情况.结果 对照组及前列腺增生组外周血标本中未见PCA3 mRNA阳性表达,而前列腺癌组患者外周血标本中PCA3 mRNA阳性率为99.3%(28/30),差异有高度统计学意义(χ2 = 65.283,P < 0.01).结论 前列腺癌中PCA3 mRNA有明显组织特异性的阳性表达,有望成为前列腺癌诊断的新肿瘤标志物.
关键词： 前列腺癌 前列腺基因3 逆转录聚合酶链式反应 -
外周血中PIPmRNA的表达及在乳腺癌微转移中的临床意义
目的：探讨泌乳素诱导蛋白( PIP) mRNA对乳腺癌微转移的临床价值。方法采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）技术检测75例乳腺癌患者、21例乳腺良性病变患者和20例健康者外周血中PIPmRNA的表达情况。结果75例乳腺癌患者外周血中PIP mRNA有23例表达，阳性率为30.7%，乳腺良性肿瘤组和对照组中PIP mRNA表达为阴性。两组比较差异有显著性（P＜0.05）。PIPmRNA阳性表达与患者的淋巴结转移状况、原发肿瘤大小、分期显著相关（P＜0.05）；而与患者的年龄、病理类型、ER、PR等无显著相关（P＞0.05）。结论外周血PIP mRNA阳性表达与乳腺癌微转移有关。
关键词： 泌乳素诱导蛋白 逆转录聚合酶链式反应 乳腺肿瘤 微转移 -
小鼠MⅡ卵母细胞中人类21号染色体同源基因的表达分析
目的考察人类21号染色体(HC21)同源基因在成熟的小鼠MⅡ卵母细胞中的表达模式,探讨其与早期胚胎发育以及唐氏综合征(DS)表型发生的关系.方法采用单个卵母细胞cDNA Array和Global RT-PCR方法,对93个人鼠同源的HC21基因在卵母细胞中的表达进行分析和鉴定.结果 93个基因中,有26个在成熟的MⅡ卵母细胞成熟表达,这些基因涉及转录调节、代谢、离子通道和泛素作用等多个生物学环节.结论表达模式的考察和验证表明这26个基因直接参与正常胚胎发育的早期过程,这种表达模式的建立不仅为系统研究染色体不分离所致的基因表达失衡奠定了坚实的理论基础,同时也为深入了解DS表型发生分子机制的开辟了新的研究途径.
关键词： 同源基因 MⅡ卵母细胞 基因表达 逆转录聚合酶链式反应
