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Ⅷ因子相关抗原、基质金属蛋白酶9与米非司酮药物流产后子宫异常出血的相关性研究
目的 探讨Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-R Ag)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)与米非司酮药物流产(药流)后子宫异常出血的相关性.方法 采用免疫组织化学法,对正常早孕人工流产(人流组)、药流完全和不完全组蜕膜组织中Ⅷ-R Ag和MMP-9进行标记,应用图像分析仪对标记结果进行定量观察,SPSS 10.0统计软件进行数据分析. 结果 药流完全组和药流不全组出血区与人流组和药流不全组无出血区比较,蜕膜血管内皮细胞Ⅷ-R Ag和基质细胞MMP-9的表达,均有显著性差异(P＜0.01),而药流完全组和药流不全组出血区之间,人流组和药流不全组无出血区之间无显著差异. 结论 米非司酮药流后子宫异常出血与蜕膜血管内皮Ⅷ-R Ag和基质细胞MMP-9的表达异常相关.
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与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗凝血因子、粘附分子
目的探讨平滑肌细胞对内皮细胞功能的影响,为内皮细胞种植的组织工程学提供理论基础. 方法模拟血管壁的内层结构及内皮细胞与平滑肌细胞间的相互影响途径,建立内皮细胞与平滑肌细胞接触生长的联合培养模型,用免疫细胞化学、放射免疫学技术和图像分析等方法研究内皮细胞vWF、PGI2、CD29的合成、分泌及表达. 结果联合培养的内皮细胞的Ⅷ因子相关抗原(vWF)的合成减弱,前列腺环素的分泌增加,整合素β1亚族的表达增强. 结论联合培养内皮细胞的细胞因子的合成、分泌和表达的变化更有利于其抗凝血及抗应力功能的调节.
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淋巴管内皮细胞特异性标志物研究现状与探讨
长期以来,由于淋巴管在形态上与小血管特别是小静脉很相似,而癌组织内部的淋巴管和血管由于受到癌细胞的侵袭和破坏使得它们在形态上更加难以区别.而且比较常用的血管内皮标志物如Ⅷ因子相关抗原、CD31、CD34等实际上也难将血管与淋巴管内皮鉴别开,从而影响了部分研究结果[1].特别是由于淋巴管特异性标志物的缺乏,造成了癌的淋巴管研究远远落后于血管研究.
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HIF-1α、CD105及F-8RAg标染的MVD在子宫内膜癌中的表达及价值评价
目的 研究探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、内皮糖蛋白(CD105)及Ⅷ因子相关抗原(F-8RAg)在子宫内膜癌中的表达并对其价值进行评价.方法 选取子宫内膜癌患者48例作为子宫内膜癌组,其中Ⅰ期22例,Ⅱ期14例,Ⅲ期7例,Ⅳ期5例;另选同期子宫内膜不典型性增生11例(不典型性增生组)和正常子宫内膜患者12例(正常组).采用免疫组化SP法对三组子宫内膜组织进行染色和血管标记,测定其在子宫内膜组织癌中的表达情况.结果 ①子宫内膜癌组和不典型增生组中,用CD105与用F-8RAg标染的微血管密度(MVD)呈显著正相关(r=0.653、0.597,P<0.05),CD105标染的MVD明显高于F-8RAg,差异具有统计学意义(P<0.05);而正常组中,CD105标染MVD与F-8RAg比较差异无统计学意义(P>0.05).②子宫内膜癌组HIF-1α、CD105、F-8RAg阳性表达率均显著高于正常组和不典型性增生组,且子宫内膜癌组HIF-1α阳性表达率随FIGO分期的升高而增加,差异具有统计学意义(P<0.05).③HIF-1α与CD105或F-8RAg标染的MVD均显著相关(r=0.772、0.621,P<0.05),但与CD105标染的MVD相关性更强.结论 CD105、F-8RAg的MVD与HIF-1α的表达与子宫内膜癌的发生密切相关.
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大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞的分离和培养
目的建立分离大鼠肠系膜淋巴管的技术及其内皮细胞的培养方法.方法利用手术显微镜及显微手术器械分离大鼠肠系膜淋巴管.采用植块培养法进行内皮细胞原代培养并传代培养.用免疫过氧化氢酶染色法鉴定Ⅷ因子相关抗原.结果分离大鼠的肠系膜淋巴管,其内皮细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列,产生接触抑制现象,抗人Ⅷ因子相关抗原的免疫过氧化氢酶染色反应阳性.结论本实验方法简单、经济、可靠,保持了内皮细胞的结构和功能,可用于其功能特性的进一步研究.
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CD105与HIF-1α在子宫内膜癌中的表达及其意义
目的探讨CD105与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在子宫内膜癌中的表达及临床意义.方法应用CD105抗体、Ⅷ因子相关抗原(F-8RAg)抗体和HIF-1α抗体,采用免疫组化SP法对42例子宫内膜癌组织、10例不典型增生子宫内膜和10例正常子宫内膜组织进行染色和血管标记.结果①子宫内膜癌组织中CD105标染的MVD显著高于F-8RAg标染的MVD,二者显著相关,且均与肌层浸润深度密切相关,但CD105标染的MVD还与临床分期及病理分级显著相关.②内膜癌组织中HIF-1α的表达与临床分期、病理分型显著相关.③内膜癌组织中CD105标染的MVD与HIF-1α的表达均显著高于不典型增生和正常内膜组织,二者密切相关.结论在标染子宫内膜癌组织的微血管方面,CD105比Ⅷ因子更具优越性,可认为CD105标染的MVD与HIF-1α的表达是与子宫内膜癌发生和发展密切相关的重要指标.
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大鼠胸导管内皮细胞生物学特性的探讨
目的通过培养大鼠胸导管内皮细胞,探讨其生物学特性,为研究淋巴管内皮细胞的功能提供体外实验材料.方法培养的胸导管内皮细胞用常规免疫组织化学染色和半薄切片光镜观察、超薄切片电镜观察.结果胸导管内皮细胞呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原和Flt-4(VEGFR-3)的免疫组化染色阳性;光镜和电镜下具有内皮细胞的形态特征.结论体外培养的大鼠胸导管内皮细胞具有体内淋巴管内皮细胞的生物学特征,可作为研究大鼠淋巴管内皮细胞功能和进一步研究癌转移机制的体外实验材料.
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大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病Ⅷ因子相关抗原及纤维蛋白原的影响
目的:探讨大黄(庶虫)虫丸对非胰岛素依赖型Ⅳ期糖尿病肾病(DN)Ⅷ因子相关抗原(vWF:Ag)、纤维蛋白原(Fbg)的治疗作用.方法:选择Ⅳ期DN患者60例,用美国IL公司生产ACL-200自动凝血机检测vWF:Ag、Fbg的变化,并随机分为治疗组和对照组,治疗组用大黄(庶虫)虫丸,对照组用潘生丁干预治疗,观察大黄(庶虫)虫丸对Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg的影响.结果:Ⅳ期DN患者血vWF:Ag、Fbg含量显著增高,与正常对照组比较有极显著差异(P＜0.001).用大黄(庶虫)虫丸治疗后,vWF:Ag、Fbg浓度显著降低(P＜0.05;P＜0.005),明显优于潘生丁组.结论:大黄(庶虫)虫丸能显著降低Ⅳ期糖尿病肾病患者血vWF:Ag、Fbg含量,改善高凝状态.
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原代大鼠脑微血管内皮细胞的培养及鉴定
目的:建立一种纯度较高的原代大鼠脑微血管内皮细胞的分离培养方法.方法:取7～10日龄SD大鼠脑组织,经匀浆,牛血清白蛋白密度梯度离心,Ⅱ型胶原酶消化获得脑微血管段后,置于CO2培养箱中进行原代培养.通过细胞形态学观察、第Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色鉴定所培养的细胞.结果:在倒置显微镜下,体外培养24～48 h后,细胞从贴壁的脑微血管段周围爬出,单个细胞为短梭形或多角形,呈团簇状单层贴壁生长,待细胞密集融合后,则成典型的“铺路石样”涡旋状排列;Ⅷ因子免疫细胞化学染色检测,相关抗原表达为阳性,细胞胞质显棕黄色,阳性细胞率达99％以上.结论:该方法能够成功分离培养出原代大鼠脑微血管内皮细胞.
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ECV304细胞株用于体外血管新生的实验研究
血管新生与肿瘤的生长、组织损伤修复等病理生理过程密切相关而备受关注.体外血管新生模型有助于研究某种因素对血管形成的影响而成为常用的研究手段.体外血管新生研究中,由于原代培养的人脐静脉内皮细胞增殖活性低、传代次数少,因而多采用细胞株作为内皮材料.ECV304细胞是自发转化的人脐静脉内皮细胞株,但是Ⅷ因子相关抗原为阴性,因此部分学者对ECV304的应用产生质疑[1,2].本研究采用ECV304细胞构建体外血管新生二维、三维模型,对其可行性进行探讨.
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胃血管球瘤并出血一例
患者男,39岁.间断黑便3个月余,伴头晕乏力入院.体检:中度贫血貌,剑突下深压痛.实验室检查:血红蛋白62g/L.胃镜:胃窦后壁"溃疡"出血.术中所见:胃浆膜面正常,大、小网膜未见肿大淋巴结,胃窦后壁可触及一小硬结.遂行毕Ⅱ式胃大部切除术.病理检查:大体检查见胃窦后壁黏膜下肿物0.5 cm×0.6 cm×0.8 cm,暗红色、实性,周围境界清楚,向黏膜面溃破.镜下检查:胃窦后壁黏膜下肿物表面有破损,光镜下瘤内可见较丰富血管,其周围有多层排列的上皮细胞围绕,细胞大小相近,呈圆形,胞质淡红,核圆形,瘤体周围有明显网状纤维包绕,病理诊断为血管瘤型血管球瘤.肿瘤免疫组化:Vementin阳性,Desmin和Ⅷ因子相关抗原阴性.
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高压氧对脑出血大鼠脑内血管新生因子的影响研究
目的 研究高压氧对脑出血大鼠脑内血管新生因子的影响及作用机制.方法 将60只大鼠按数字表法随机分为假手术组、脑出血组和高压氧组,每组20只大鼠.观察各组大鼠行为学改变情况;检测各组大鼠脑内增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ⅷ因子相关抗原(von Willebrand factor,vWF)、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达量.结果 实验大鼠行为学评分,高压氧组与脑出血组比较14、21、28 d差异均有统计学意义(P＜0.01);血肿周围脑组织的HIF1-α蛋白表达均高于脑出血组,2组14、21、28 d比较差异有统计学意义(P＜0.01);血肿周围脑组织的PCNA蛋白表达高压氧组均高于脑出血组,7、14、21、28 d差异均有统计学意义(P＜0.05);VEGF蛋白表达高压氧组高于脑出血组,2组14、21、28 d比较差异均有统计学意义(P＜0.01);高压氧组vWF蛋白表达均高于脑出血组,2组7、14、21、28 d比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 高压氧能通过促进血管新生相关因子HIF1-α、VEGF、PCNA及vWF蛋白的表达,促进脑出血损伤组织血管的新生,增加血肿吸收,促进行为能力的恢复和机体的康复.
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食管鳞癌中VEGF表达与血管生成关系的研究
我们采用免疫组化S-P法检测食管鳞癌组织中的VEGF表达,并通过血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原染色,对食管鳞癌血管形成进行研究,以探讨其对食管鳞癌发生、发展的意义.
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大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞体外培养方法的建立及鉴定
目的建立分离大鼠肠系膜淋巴管的技术及其内皮细胞的培养方法并证实体外培养的大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞具有合成一氧化氮及第Ⅷ因子相关抗原的能力. 方法利用手术显微镜及显微手术器械分离大鼠肠系膜淋巴管,采用植块培养法进行内皮细胞原代培养并传代培养.用免疫组织化学的方法鉴定第Ⅷ因子相关抗原及一氧化氮合酶在体外培养的大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞中的表达.测定一氧化氮代谢产物的含量. 结果体外培养的大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列.第Ⅷ因子相关抗原的免疫过氧化氢酶染色反应阳性,阳性率98%.一氧化氮合酶表达阳性率为83%,阳性反应产物在细胞核周围呈棕黄色.一氧化氮代谢产物含量(10.26±2.17) mol·L-1(n=7).结论本实验采用培养方法可行性强,简单可靠,保持了内皮细胞的结构和功能.并证实了体外培养的大鼠肠系膜淋巴管内皮细胞能表达一氧化氮合酶及第Ⅷ因子相关抗原.
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诱导型一氧化氮合酶在大鼠脉络膜新生血管中的表达及其与血管生成的关系
目的 探讨氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和血管内皮生长因子(vessel endothelial growth factor,VEGF)的表达及其与CNV形成的关系.方法 对5组30只BN大鼠行单眼视网膜氪激光光凝,诱导脉络膜新生血管形成.分别在光凝后3 d、1周、2周、3周、4周摘除眼球,应用免疫组织化学技术对光凝区进行Ⅷ因子相关抗原(factor Ⅷ related antigen,FⅧR:Ag)检测以观测CNV形成,并检测CNV形成过程中iNOS、VEGF蛋白的表达,半定量分析iNOS、VEGF表达变化与CNV生成的相关性.结果 FⅧR:Ag免疫组织化学检查结果显示,光凝后1周开始形成CNV,3～4周达到高峰.正常BN大鼠视网膜中,iNOS在神经节细胞、内核层表达;VEGF在视网膜神经节细胞层、内核层、色素上皮层、视网膜和脉络膜血管内皮细胞均有表达.视网膜光凝后,除上述部位外,iNOS和VEGF均在外核层和脉络膜的光凝损伤区阳性表达.光凝后3 d～4周,光斑区内FⅧR:Ag、iNOS和VEGF阳性染色密度逐渐增加(P＜0.05);iNOS、VEGF与FⅧR:Ag阳性染色密度正相关(r=0.89,r=0.78,P＜0.05);iNOS与VEGF阳性染色密度正相关(r=0.78,P＜0.05).结论 iNOS与VEGF同步表达,其阳性表达密度与CNV生成正相关,iNOS在CNV生成中可能起着重要的作用.
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重组人血管抑制因子Vasostatin抑制兔角膜新生血管的研究
目的探讨重组人血管抑制因子(Vasostatin)对于碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的抑制作用.方法采用1mol/LNaOH溶液烧伤家兔角膜,建立碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的动物模型;将家兔分为A、B、C、D 4组,每组10只眼.伤后24h后分别给予1×PBS缓冲液,25、50、100μg/mL Vasostatin球结膜下注射,2次/周,共4周.测量各时间点角膜新生血管的生长面积,并在伤后28d处死动物,取其角膜行Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色,观察血管的生长情况.结果各时间点角膜新生血管的面积,B组、C组及D组均低于A组(P＜0.05),C组及D组均低于B组(P＜0.05),C组与D组相比,差异无显著性(P＞0.05).结论重组人Vasostatin蛋白可有效抑制角膜新生血管的形成.
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卵巢上皮性肿瘤组织中微血管密度与VEGF的表达
目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)及血管生成与卵巢上皮性肿瘤发展的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测61例卵巢上皮性肿瘤组织(良性17例、交界性15例及恶性29例)VEGF蛋白表达,并用第八因子相关抗原抗体(FⅧ)单抗标记肿瘤新生血管内皮,计算肿瘤内微血管密度(MVD).结果:良性、交界性及恶性肿瘤组织中VEGF阳性表达率分别为35.3%、60.0%、72.4%.交界性及恶性肿瘤中VEGF的表达显著高于良性肿瘤(P＜0.05);从良性组到恶性组3组肿瘤中,其MVD依次升高(P＜0.05),且与VEGF表达密切相关.VEGF表达及MVD与卵巢癌淋巴结转移有关(P＜0.05),而与病理学分级、临床分期无关.结论:VEGF和MVD可作为反映卵巢上皮性肿瘤生物学行为的指标之一.
关键词： 血管生成 血管内皮细胞生长因子 微血管密度 卵巢上皮性肿瘤 Ⅷ因子相关抗原 -
异体去细胞真皮基质重建真皮的实验研究
目的通过不同形式去细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)与单纯自体刃厚皮片移植的比较研究,探讨异体ADM作为真皮替代物的机制及效果.方法猪全层皮肤缺损创面分别行颗粒状(实验组1)及网状异体ADM(实验组2)结合自体刃厚皮移植,以单纯自体刃厚皮移植作对照,观察各组移植术后皮片存活率、创面收缩率、组织学变化及血管化程度等.结果移植术后,各组皮片均全部存活;与对照组相比:两实验组创面收缩较小,弹性较好,创面充血程度轻 (P<0.01),瘢痕增生程度也明显小于对照组.结论网状及颗粒状异体ADM结合自体刃厚皮移植较好地封闭了全层皮肤缺损创面;其愈后功能优于单纯自体刃厚皮移植;颗粒状ADM制作简单,使用方便,值得进一步探索研究.
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卵巢上皮性肿瘤血管生成的研究
目的探讨不同性质卵巢上皮性肿瘤的血管生成情况及微血管生成与卵巢癌组织类型、病理分级、临床分期的关系.方法采用免疫组化SP法.结果卵巢肿瘤依良性、临界恶性、恶性的不同,其微血管密度(MVD)依次升高.卵巢临界恶性肿瘤组与良性肿瘤组、正常卵巢组MVD均有显著差异(P＜0.05),而卵巢癌组与卵巢临界恶性肿瘤组,良性肿瘤与正常卵巢组的MVD无显著差异(P分别为0.34和0.46),单因素采用生存率时序检验(Log rank test)结果表明,MVD与卵巢癌预后无关(Log-rank P=0.27).结论 MVD在卵巢发生发展过程中起重要作用,可作为判断卵巢肿瘤恶性程度的一项指标,但不是判断预后的指标.
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CD105在结直肠癌中的表达及其临床意义
目的探讨 CD105在结直肠癌中的表达及其作为肿瘤新生血管标记物的临床价值. 方法采用鼠抗人 CD105单克隆抗体 (MAb),应用免疫组织化学技术检测 48例结直肠癌手术切除标本及 48例对照组织的微血管密度( MVD),并以Ⅷ因子相关抗原( F- 8 RAg)及血管内皮生长因子 (VEGF)的表达作为对照研究.结果 ( 1) MVD及 VEGF在结直肠癌组织与对照组织间表达的差异具有非常显著性意义( P< 0.001, P< 0.01);( 2)以 CD105和 F- 8 RAg测得的 MVD差异具有非常显著性意义( P< 0.001);( 3) VEGF在结直肠癌的表达与 CD105的表达呈显著正相关( P< 0.01),而与 F- 8 RAg的表达无关( P >0.05).结论 CD105在结直肠癌组织新生血管有良好表达,可以作为结直肠癌新生血管有价值的标志物.以 CD105测得的 MVD可以被认为是与肿瘤生长、转移及预后有关的一种重要指标.
