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间歇性低氧暴露对小鼠Hb,RBC和WBC影响的观察
1 材料与方法1.1 动物与分组健康纯种雄性ICR封闭群小鼠60只,体重23.6±5.2g,国家标准啮齿类动物饲料喂养,自由饮食.室内空气流通,相对湿度60±10%,温度23±2℃,严格控制实验条件.
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应用微卫星标记对三个昆明小鼠封闭群的遗传学研究
目的 检测和分析我国主要昆明小鼠群体的遗传背景、遗传多样性及其遗传分离情况,为建立标准化昆明小鼠种群及其遗传背景建立和监测提供基础资料.方法 应用筛选获得的15个微卫星标记及其荧光标记一半自动基因分型技术,对我国国家啮齿类实验动物种子中心(北京种群)、国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心(上海种群)、国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心与上海第一生化制药厂的融合F1代(融合种群)昆明小鼠种群进行遗传检测和分析,评估各群体的遗传背景、遗传多样性、群体间的遗传关系及进行品系融合后的遗传学变化.结果 3个昆明小鼠种群在15个微卫星位点共检测到92个等位基因,每位点2～13个,平均6.13个;平均期望杂合度为0.5721,表明昆明小鼠具有较好的遗传多样性.北京种群、上海种群、融合种群分别检测到61、63、51个等位基因,其在15个微卫星位点的平均期望杂合度分别为0.4923、0.5177、0.4550,表明上海种群的遗传多样性略大于北京种群,融合种群的遗传多样性低于北京和上海种群.从等位基因组成上看,上海种群与融合种群共有基因数多(43个),表明其较小的遗传差异;而北京种群和上海种群(37个)、北京种群和融合种群(32个)的共有基因数均明显少于上海种群和融合种群间的共有基因,表明北京种群和上海种群及融合种群间较大的遗传差异.群体间遗传变异分析表明,上海种群和融合种群间的遗传分化程度很弱,其Fst值为0.0222,遗传距离为0.0279;北京种群和上海种群遗传分化为中等,其Fst值为0.1433,遗传距离为0.3881;北京种群与融合种群间有较大遗传分化程度,其Fst值为0.1667,遗传距离为0.4162;根据Nei遗传距离进行UPGMA系统聚类表明上海种群和融合种群先聚为一类,再与北京种群聚为一类.结论 利用15个微卫星标记,初步确定了3个昆明小鼠群体的遗传背景,从分子水平表明不同生产单位的昆明小鼠种群间具有中等或较大的遗传分化程度,种群融合过程中应采取适当措施避免封闭群遗传基因的丢失从而造成遗传多样性减少,研究结果为建立标准化昆明小鼠种群及其遗传背景建立和监测提供了基础资料.
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DNA指纹图技术及其在实验动物学中的应用
实验动物要求具有明确的遗传背景,实验动物的遗传质量直接影响生物医学研究结果的准确性、重复性与科学性,遗传质量监测是保证实验动物遗传质量的重要措施[1].现在实验动物的遗传质量监测运用生化标记等表型检测方法,存在灵敏度低等局限性.随着分子生物学技术的发展,DNA分子标记技术的出现,为实验动物遗传物质DNA的直接检测带来了新的可行的技术方法.
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实验红鲫标准化研究与应用的现状及展望
实验红鲫具有体型大小适当、成熟早、繁殖力强、体外产卵发育、体色全红、杂食性等优点.本世纪初以来,开展了实验红鲫驯化、品(种)系培育、生物学特性、地方标准等研究.实验红鲫已广泛应用于鱼类育种、毒理学、遗传学、生理学、水生态环境监测等.
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猪到人异种移植匹配性研究
器官移植是治疗人类脏器终末期功能衰竭疾病的唯一有效手段.供器官严重短缺是限制临床移植发展的瓶颈之一.全球认为猪是具潜力的异种供器官源.但其能否应用于临床的重要指标是猪-人器官功能是否匹配,是否长期安全和免疫差异能否克服.本研究旨在选择我国自主知识产权的版纳微型猪近交系(Banna minipig inbred line,BMI)和五指山猪近交封闭群(Wuzhisan pig,WZSP),研究其脏器结构、功能与人相应器官的移植匹配性、猪→人异种移植的免疫障碍、评价猪→人异种移植的可行性和安全性.
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Z:ZCLA长爪沙鼠培育及其生物学特性研究
浙江省实验动物中心聂金荣研究员从内蒙古捕捉野生长爪沙鼠,采用国际上培育远交封闭群品系的方法,进行封闭驯养、繁殖、选育,维持种群,经20多年,36代封闭选育,35万只沙鼠的推广应用,已育成一个特性稳定,繁殖性能高的清洁级长爪沙鼠新品系,定名为Z:ZCLA长爪沙鼠,并通过浙江省创新科技成果鉴定.
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房山封闭群小型猪微卫星位点的测定
目的 依据北京市地方标准DB11/T828.3-2011,在DNA水平上对房山封闭群小型猪进行种群遗传质量评价与分析.方法 按照北京市地方标准DB11/T828.3-2011规定,利用25对微卫星引物,对22头房山封闭群小型猪进行PCR检测,利用群体遗传分析软件Popgen32对所得结果进行处理.结果 25对引物中,4对引物经反复调整PCR反应条件不能得到稳定扩增结果,其余21对引物得以稳定扩增;共得到91个有效等位基因型,平均多态性信息含量(PIC)为0.4630,平均杂合度为0.5331.同时,SWr1008位点上的产物与DB11/T828.3-2011标准有所差异;标准对SW271位点所在染色体报道也与美国农业部官网等数据库不同.结论 房山封闭群小型猪群体具有一定的遗传稳定性,符合封闭群动物的遗传结构特征.
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应用微卫星标记对两个豚鼠封闭群的遗传学研究
目的：对国内两家不同单位的封闭群豚鼠开展群体遗传学分析，为封闭群豚鼠遗传检测方法和标准的建立提供基础资料。方法应用筛选获得的25个多态性微卫星标记及荧光标记-半自动基因分型技术，对两个不同封闭群豚鼠进行遗传检测，计算其群体遗传学参数。结果在两个豚鼠群体中共发现等位基因121个，每位点等位基因数2～10个，平均4.84个；平均期望杂合度为0.6067；平均多态信息含量为0.552。两个群体分别检测到103和116个等位基因；平均期望杂合度分别为0.5195和0.5838；平均多态信息含量分别为0.459和0.518；两个群体分别有5个位点和6个位点HWE检验P＜0.05，显著偏离Hardy-Weinberg平衡。杂合子缺失检验表明，两群体在偏离遗传平衡的位点大多数表现出显著的杂合子缺陷（ P＜0.05）。群体间不同微卫星位点的平均Fst值为0.1056，表明两个种群的遗传分化程度为中等；Nei’（1972）遗传距离和Nei’（1978）无偏遗传距离分别为0.3302和0.3204。结论两个种群都符合封闭群动物的群体遗传特征。个别位点偏离遗传平衡，推测在饲养繁殖过程中有一定程度的近交现象存在。
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应用微卫星标DNA记对三个封闭群兔遗传分析
目的 检测国内日本大耳白兔、青紫蓝兔、新西兰白兔的遗传背景及遗传结构,为封闭群兔遗传检测方法建立和标准化提供基础资料.方法 应用18个微卫星标记及荧光标记-半自动基因分型技术对三个群体95个个体进行Hardy-Weinberg检测,统计每个位点等位基因频率、杂合度、F值、遗传距离等信息.结果 三个种群平均等位基因观测数为3.167、4.556、3.444,平均观测杂合度为0.444、0.5230、0.4976.18个位点平均多态信息含量(PIC)为0.410、0.549、0.470,日本大耳白兔6个位点HWE检验(P＜0.05),显著偏离Hardy-Weinberg平衡,并在Satl3,INRCCDDV0088位点基因型完全纯和,新西兰白兔和青紫蓝兔分别有2个位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡.三个种群遗传距离:青紫蓝兔与新西兰白兔遗传距离近,为0.124,与日本大耳白兔遗传关系远,为0.320;新西兰白兔与日本大耳白兔较远,为0.310.结论 三个种群有各自不同遗传特征,遗传多样性较高,种群间分化明显.个别位点偏离遗传平衡,推测人工繁育过程中存在一定问题.
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微卫星技术在NIH小鼠群体遗传结构分析中的应用
目的 应用微卫星DNA技术对A单位NIH小鼠和B单位NIH小鼠的遗传结构进行对比分析.方法 利用30个微卫星位点对2个NIH小鼠种群进行PCR扩增和STR扫描,借助统计软件Popgene 1.32进行群体遗传结构分析.结果 A单位NIH群体获得74个等位基因型,平均杂合度为0.3108,多态性信息含量为0.2637;B单位NIH群体获得76个等位基因型,平均杂合度为0.3257,多态性信息含量为0.2777.群体间比较显示,群体间分化系数为0.3932,遗传一致性指数0.3971,遗传距离为0.9235,群体差异显著.结论 两个NIH小鼠群体间存在严重的遗传分化,形成了两个不同的封闭群群体.
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封闭群斑马鱼的遗传生化标记研究
目的 通过对AB、LF、ST(short tail,本地短尾群)三个封闭群斑马鱼的研究比较,建立封闭群斑马鱼的遗传生化标记.方法 依照国标GB/T 14927.1-2008的遗传操作规程优化实验条件,对三种群斑马鱼的7个遗传生化位点进行研究,以得到其遗传生化图谱.结果 6-磷酸葡萄糖脱氢酶(Gpd)、过氧化氢酶(Ce)、苹果酸脱氢酶(Mod)、葡萄糖磷酸异构酶(Gpi)、酯酶(ES)位点表现出多态性.对三种群多态性位点进行卡方分析,Gpd、Gpi位点群间差异显著(P<0.01),Ce、Mod有群间差异(P<0.05).碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)位点,各品系谱带较一致,未见同工酶多态性.结论 Gpd、Ce、Mod、Gpi、ES可作为3种封闭群斑马鱼群间评价的生化标记,通过进一步研究,可建立封闭群斑马鱼的遗传标准.
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两个封闭群 NIH 小鼠群体的遗传监测结果的比较分析
目的：对近3年北京地区的两个 NIH 封闭群小鼠群体的遗传质量进行监测分析。方法利用生化标记基因检测法，2011年测定 A、B 两单位 NIH 小鼠在碱性磷酸酶－1等14个遗传生化标记位点上的多态性。2014年利用相同方法原则对 B 单位的 NIH 小鼠群体进行抽样检测，比较了该小鼠群体3年来的遗传构成变化。结果2011年，A、B 两单位 NIH 小鼠群体均呈多态性的生化标记位点有6个（Ce2、Car2、Gpi1、Es10、Gpd1、Pgm1），且 B 单位在 Es3位点也呈多态性；两群 NIH 小鼠在 Car2位点有差异（P ＜0．05），在 Es3、Gpd1、Pgm1三个位点有显著差异（P ＜0．01）；两群体的群间分化系数为0．0406，遗传一致性指数为0．9619，遗传距离为0．0388。与2011年相比，B 单位封闭群 NIH 小鼠在2014年出现了2个纯合位点（Ce2和 Gpd1），同时 Es10和 Gpd1两位点差异极显著（P ＜0．01），Pgm1位点差异显著（P ＜0．05）；不同代次 NIH 小鼠群间分化系数为0．1103，遗传一致性指数为0．8847，遗传距离为0．1266。结论群体隔离、选种育种、种群数量和繁育代次等对 NIH 小鼠遗传构成差异影响显著。留种和繁育生产时应加强封闭群 NIH 小鼠的遗传监测，为其遗传质量的稳定性提供保障。
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微卫星标记在布氏田鼠封闭群遗传结构研究中的应用
目的：使用微卫星标记分析连续三代布氏田鼠封闭群遗传结构的稳定性。方法使用高盐沉淀法从鼠尾中提取布氏田鼠基因组DNA，将筛选出7对微卫星引物并用荧光标记（ Fam），然后对布氏田鼠封闭群连续三代的基因组DNA进行PCR扩增，测序仪检测PCR产物，整理原始数据并对布氏田鼠基因组DNA进行微卫星分析。结果由平均有效杂合度和多态信息含量的分析得出该布氏田鼠种群传代过程中保持着较高而且稳定的杂合度。结论该实验结果说明本实验室布氏田鼠封闭群的遗传结构比较稳定。
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封闭群斑马鱼的STR遗传检测技术
目的 以AB、LF、ST(本地短尾,short tail)三个封闭群斑马鱼的基因组DNA为主要研究对象,采用STR (short tandem repeat) 引物扩增方法分析不同种群在核酸水平的异同.方法 利用5对斑马鱼STR引物和3对剑尾鱼STR引物,优化PCR条件,对不同种群斑马鱼DNA进行扩增.结果 Z24、Z9384、Z10508、Z20046这4对引物可扩增出稳定条带.除Z24的3对STR引物在群内和群间均表现出多态性.对扩增不同带型进行统计分析,Z20046群间差异显著(P<0.01),Z9384有群间差异(P<0.05),Z10508扩增结果无统计学差异(P>0.05).结论 鉴于该方法操作简便,通过进一步研究,可为封闭群斑马鱼的遗传质量评价打下基础.
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小型猪表面活性人工心脏瓣膜植换术的围手术期管理
1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物:12头封闭群广西巴马小型猪,雌雄不限,体重27.5～32kg,术前24 h禁食,术前6 h禁水.1.1.2器材:普通外科开胸器械包1个,心脏特殊器械1套,体外循环物品1套,表面活性人工心脏瓣膜1只,胸腔引流袋1个,套管针、三通开关、延长管、输液泵、多功能麻醉机、电凝器、电动吸引器、心电监护仪、除颤器、体外循环机、水温箱等.
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被毛突变无毛昆明小鼠的初步报告
1999年5月，同济大学医学院实验动物中心在一窝封闭群昆明小鼠中发现5只小鼠有脱毛现象，并能将脱毛特性遗传下去，经过近3年的近交培育，已培育了11代。
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广西巴马小型猪的选育研究
广西大学王爱德等从1987年至今历经17年,以广西巴马香猪作为原始材料,采用闭锁纯繁近交方式,选育出16世代适于实验用的、优异小型猪封闭群品系--广西巴马小型猪.
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TS/N猫的毛色基因报告
目的 TS/N猫的毛色基因观察报告.方法 通过30年来对十余代华药虎皮猫TS/N封闭选育的观察,总结了种群毛色基因的情况. 结果 华药虎皮猫TS/N封闭群毛色基因型为:"从,BB,CC,DD,HH,LL,∞,RR,ss,tb tb,ww". 结论 华药虎皮猫TS/N封闭群的11个毛色基因位点(A,B,C,D,H,L,O,R,S,T,W)均纯合.
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扶元补脑冲剂对小鼠中枢神经递质含量影响的实验研究
1材料1.1动物昆明种封闭群小鼠,体重30±2g,雌雄各半.由兰州医学院实验动物中心提供,合格证号:医动字第14-007号.1.2扶元补脑冲剂制备红参、山楂等打粉过100目筛.黄芪、淫羊藿、丹参、泽泻、石菖蒲水煎煮,第1次2h,第2次1.5H,过滤,滤液浓缩至清膏状,加前述药粉混合,制粒,干燥,分装(每克含原药材1.17g).
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封闭群比格犬遗传标志微卫星引物的筛选
目的 筛选出有效的微卫星引物,利用微卫星遗传标志对封闭群内比格犬的个体遗传情况进行分析.方法 从文献中筛选杂合度在0.4～0.8的微卫星引物24对,对本场英系比格犬封闭群中随机筛选出的12只比格犬的混合基因组进行了扩增.结果 24对引物中,有7对微卫星引物的扩增结果具有较好的多态性和重复性.利用这7对引物,对8只玛斯公司美系比格犬的混合基因组进行了扩增,结果与本场英系比格犬的扩增结果具有明显的差异.又利用这7对引物对随机筛选出的6只比格犬的个体遗传情况进行了分析,其中3只比格犬表现出明显的差异.结论 作者筛选的7对微卫星引物可以对本场比格犬种群的个体遗传情况进行初步分析.
