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利用优选的微卫星标记建立常用大小鼠品系的遗传监测体系
目的 利用微卫星位点在不同近交系小鼠、大鼠中可能具有的多态性,分别筛选出可以一次性区别5种常用近交系小鼠和3种常用近交系大鼠的微卫星引物组合,为近交系小鼠和大鼠的遗传监测分析提供高效的微卫星位点与简易可靠的鉴定条件.方法 通过查询相关数据库以及文献报道,按照已有明确的微卫星实验数据记录为原则,进行比对和筛选,组成了小鼠37个和大鼠24个微卫星位点库.通过PCR扩增和5％琼脂糖电泳鉴定,优化筛选出可以区分单一品系和所有品系的微卫星位点组合.结果 小鼠优选出11个位点可用于5种常用近交系的鉴定,并建立了1个包含6个微卫星位点的库可用于5种小鼠品系的遗传监测;大鼠优选出6个微卫星位点,可用于3种常用近交系的监测.结论 成功建立了一套可以区分常用5种小鼠和3种大鼠品系的微卫星监测方法.
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雌性实验恒河猴下颌骨多变量相关性分析
分析了22例人工饲养实验雌性恒河猴下颌骨的25项变量,并对14例成年猴的18项变量进行相关分析和聚类分析.结果表明除SB、MT、CB、CA、IMD外,其余变量都与年龄密切相关.下颌骨各变量间的相关性以正相关为主(56.9%),其余为负相关(43.1%),且多数相关程度不显著.
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野生来源TW近交系小鼠的遗传监测
目的对中国特有野生来源的TW(Tianjin Wild)小鼠近交系进行遗传质量检测.方法按照国标GB/T14927.1-2001、GB/T14927.2-2001及WHO(国际实验动物科学理事会)遗传检测操作规程,对TW近交系小鼠进行Akp1等25个遗传生化标记基因纯合度测定,进行组织相容性基因纯合度的测定.结果对TW近交系小鼠进行Akp1等25个遗传生化标记基因的测定,所检基因均为纯合体.同时,在所检的25个遗传位点中,发现有8个罕见生化标记基因多态性位点;检测的组织相容性基因为纯合.结论按照国家标准,野生来源的TW小鼠近交系遗传纯合度已达国标,成为高度纯合的近交实验小鼠品系,并可望成为具有标准基因库(型)的近交小鼠品系.
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利用微卫星遗传标记对恒河猴进行遗传同质性分群的探索
目的 探索建立利用微卫星遗传标记对中国恒河猴免疫遗传学同质性分群的方法.方法 根据已报道的中国恒河猴和印度恒河猴微卫星标记和与MHC基因高度连锁的微卫星遗传标记,对52只恒河猴进行了微卫星检测和遗传同质性分群.结果 依据判断标准,可以将检测的恒河猴分为印度恒河猴,中国恒河猴和无法判定来源的恒河猴3个地理类别,并根据MHC附近的微卫星遗传标记将其分为若干MHC基因相同的同质性群体.结论 此方法的建立将有利于恒河猴参与的实验分组,也为恒河猴繁殖管理提供了参考.
关键词： 恒河猴 主要组织相容性复合物基因 微卫星遗传标记 遗传监测 -
食蟹猴微卫星DNA标记遗传监测及多态性分析
目的 研究国内食蟹猴种群的遗传背景特性,建立食蟹猴种群遗传质量监测方法.方法 采用微卫星DNA遗传标记技术对50只食蟹猴种群个体进行遗传质量监测及DNA多态性分析.结果 从100个微卫星DNA位点中筛选出20个多态性高的位点,其食蟹猴种群个体的等位基因数目为5-10条,个体间均呈现高度的多态性;其观察等位基因数(Na)为5.0～10.0,有效等位基因数(Ne)为4.6118～8.3404,基因多样性(H)为0.7832～0.8801和香隆信息指数(I)为1.5651～2.1592.结论 本实验有效地分析了食蟹猴种群的遗传多态性,为今后筛选特异性微卫星位点来建立食蟹猴种群遗传质量监测方法提供了理论依据.
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IRM-2近交系小鼠的遗传监测
目的观察IRM-2小鼠基因纯合性和遗传质量.方法用电泳法对IRM-2近交系小鼠进行了生化标记基因检测,并做了毛色基因和皮肤移植试验.结果分析测定了第23代小鼠13条染色体上25个基因位点和第38代的13个生化标记基因,所查基因位点全部纯合;同系异体间背部皮肤移植100 d后,未见排斥现象,为同系组织遗传性;与BALB/c白化系小鼠交配进行的毛色基因测试,杂交第一代小鼠的毛色与IRM-2小鼠一致, 均为浅桂皮色,基因型为AAbbCCDD.结论可以认为,IRM-2小鼠是遗传上高度纯合的近交系小鼠.
关键词： IRM-2近交系小鼠 遗传监测 生物学标记 毛色基因 皮肤移植 -
PLCε基因敲除小鼠微卫星DNA遗传监测分析
目的 利用多态性微卫星DNA位点分析PLCε基因敲除小鼠的遗传特性.方法 用所筛选的15个微卫星DNA位点对28只PLCε基因敲除小鼠的DNA进行了PCR扩增,通过基因片段大小来分析群体的遗传多样性.结果 13个微卫星DNA位点中(D1Mit365、D3Mit51、D4Mit235、D6Mit102、D7Mit281、D8Mit113、D9Mit23、D10Mit180、D13Mit88、D16Mit145、D17Mit36、D18Mit94、D19Mit97)每个位点的28只小鼠DNA片段泳动距离一致,呈现单态性,表明该群体符合近交系的遗传特性;而利用Dq(敲基因型)和Dy(野生型)两个位点对28只小鼠的PCR扩增结果进行了鉴别分析,其中敲除基因型小鼠为6只;野生型为7只;杂合型为15只.结论 利用微卫星标记技术可以对群体进行遗传质量监测,并能有效地鉴别不同的基因型,为小鼠的遗传质量监测提供了一种可行的方法.
关键词： 微卫星DNA PLCε基因敲除小鼠 遗传监测 -
微卫星DNA多态性在十种近交系小鼠遗传监测中的应用研究
目的研究微卫星DNA多态性在近交系小鼠遗传监测中的应用.方法选取小鼠不同染色体上的16个微卫星位点,应用PCR技术对常用的10个近交系小鼠进行了微卫星DNA多态性分析.结果 14个微卫星DNA具有稳定扩增效果,在同一品系不同个体之间表现单态性;在不同品系之间表现多态性.结论运用所筛选的14个位点进行微卫星多态性分析,能够快速、经济地对近交系小鼠进行遗传监测.
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两个封闭群 NIH 小鼠群体的遗传监测结果的比较分析
目的：对近3年北京地区的两个 NIH 封闭群小鼠群体的遗传质量进行监测分析。方法利用生化标记基因检测法，2011年测定 A、B 两单位 NIH 小鼠在碱性磷酸酶－1等14个遗传生化标记位点上的多态性。2014年利用相同方法原则对 B 单位的 NIH 小鼠群体进行抽样检测，比较了该小鼠群体3年来的遗传构成变化。结果2011年，A、B 两单位 NIH 小鼠群体均呈多态性的生化标记位点有6个（Ce2、Car2、Gpi1、Es10、Gpd1、Pgm1），且 B 单位在 Es3位点也呈多态性；两群 NIH 小鼠在 Car2位点有差异（P ＜0．05），在 Es3、Gpd1、Pgm1三个位点有显著差异（P ＜0．01）；两群体的群间分化系数为0．0406，遗传一致性指数为0．9619，遗传距离为0．0388。与2011年相比，B 单位封闭群 NIH 小鼠在2014年出现了2个纯合位点（Ce2和 Gpd1），同时 Es10和 Gpd1两位点差异极显著（P ＜0．01），Pgm1位点差异显著（P ＜0．05）；不同代次 NIH 小鼠群间分化系数为0．1103，遗传一致性指数为0．8847，遗传距离为0．1266。结论群体隔离、选种育种、种群数量和繁育代次等对 NIH 小鼠遗传构成差异影响显著。留种和繁育生产时应加强封闭群 NIH 小鼠的遗传监测，为其遗传质量的稳定性提供保障。
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实验动物环境设施监测分析
实验动物环境及设施(Laboratory animalrequirements of environment and housing facilities)是影响动物进化、生态反应、育种、保种、动物生产及动物实验重要基本条件.定期或不定期监测实验动物生长发育的环境条件是否维持在适应状态至关重要,因此,实验动物的环境设施监测与遗传监测、营养监测、微生物监测一样,是保证实验动物质量的基本手段.本文对2005年江苏省已取得实验动物使用许可证的14家单位,23处环境设施监测结果进行分析.
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近交系长爪沙鼠生化标记遗传监测方法的建立及其应用
目的 建立近交系长爪沙鼠生化标记遗传检测方法,开展对长爪沙鼠脑缺血模型CMU/1和CMU/2近交系的纯合度进行分析,为判定其遗传状况提供依据.方法 采用醋酸纤维板电泳法,选26个生化标记进行近交系长爪沙鼠各组织器官样品电泳,参考前期方法优化佳电泳条件,并对样品处理和染色的方法进行一定的改良后;针对F21～23代77只CMU/1和44只CMU/2近交系动物26个生化标记的纯合度进行检测.结果 在2个近交系长爪沙鼠共121只动物中均能成功检测到26个生化标记.其中有24个位点在CMU/1和CMU/2品系内和品系间均显示单态性,但是Es-3和Es-4位点在2个品系间有差异.结论 建立了长爪沙鼠近交系生化标记遗传检测方法;确定近交系CMU/1和CMU/2动物26个生化标记,其纯合度达到100％,说明2个近交系品系符合近交系动物的标准(GB14923-2010).
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上海地区常用近交系小鼠品系的单核苷酸多态性分型研究
目的 比较上海地区常用近交系小鼠单核苷酸多态性(SNP)位点分型情况.方法 采用多重PCR-LDR检测技术,选取上海地区2家单位的10个近交系小鼠,对21条染色体上的44个SNP位点进行分型检测,同时,随机选取上海地区2个近交系品系作为双盲样本,对分型方案进行验证,差异位点利用测序法进行验证.结果 同一来源的10个近交系小鼠,同品系间SNP分型结果完全一致;不同种群来源6个品系SNP分型结果提示,BALB/c,FVB,DBA/2和C3H/He在44个位点上分型结果均相同,CBA和C57BL/6分别在7个和2个位点存在差异;差异位点经测序验证结果与SNP分型方案一致.结论 上海地区常用近交系小鼠中,同一来源的品系中SNP遗传质量具有良好稳定性和一致性,不同种群来源的相同品系间SNP分型存在差异.
关键词： 近交系小鼠 遗传监测 单核苷酸多态性(SNP)分型 -
微卫星DNA多态性在大鼠遗传监测中的应用研究
目的 选用有较好多态性的微卫星位点对6种品系大鼠DNA多态性进行分析，以期建立一种准确可靠、高效可行的遗传监测方法.方法 选择大鼠不同染色体上的15个微卫星位点，应用PCR技术对6个品系大鼠进行了微卫星多态性分析.结果 9个微卫星位点均具有稳定扩增效果，在同一品系不同个体之间表现为单态性；在不同品系之间表现多态性，可用于大鼠遗传监测.结论 随着微卫星DNA多态性研究的不断深入，微卫星DNA可以取代生化标记分析法，广泛应用于大鼠的遗传监测中去.
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三个品系转基因小鼠的遗传监测
为了解转基因小鼠在繁育过程中其遗传特性的稳定情况,用特异性引物以PCR方法分别对IL-4T、IL-10T、IFNgR%三个品系转基因小鼠进行了遗传监测.结果表明,三个品系的转基因小鼠中的部分小鼠其整合基因发生了不同程度的改变与丢失.
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代谢组学在自发性疾病模型动物遗传质量监测和饲料开发中的应用
自发性模型动物是研究糖尿病、高血压和肥胖等疾病的有力工具,但是这些特殊的动物模型容易受环境及饮食的影响而产生变异.本文通过简要的诠释代谢组学这一新型研究手段,介绍这种方法在发掘特殊模型动物生物标志的应用,引出其用于监测特殊模型动物遗传质量的可行性和开发专门适用于这些特殊模型动物的饲料的必要性和前景,为以后的研究提供参考.
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三个品系小鼠的遗传监测
目的 检测新培育的IRM-1近交系小鼠的基因纯合性,并与IRM-2、615近交系小鼠进行比较,确定其遗传特性.方法 按照国家标准GB/T14927.1-2001、GB/T14927.2-2001遗传检测操作规程,对IRM-1近交系小鼠进行Akpl等25个遗传生化标记基因纯合度、组织相容性基因纯合度的测定,用同系异体间进行移植试验;以及毛色基因测试.结果 IRM-1近交系小鼠的25个遗传生化标记基因均为纯合体,其中有5个生化标记基因多态性位点与IRM-2近交系小鼠不同,有8个生化标记基因多态性位点与615近交系小鼠不同;皮肤移植100d后,未见排斥现象;毛色基因测试,F1的毛色全部为野生色,基因型为aaBBCCDD.结论 IRM-1小鼠遗传纯合度已达国家标准,是基因位点高度纯合的近交系小鼠.
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近交系小鼠微卫星位点的遗传标记多态性研究
目的研究近交系小鼠微卫星位点的遗传标记多态性及其意义.方法随机选取不同染色体的5个微卫星位点,应用PCR技术对BALB/C、豫医无毛小鼠、CBA、C57、DBA/2、C3H/HeJ、FVB/NJ及昆明小鼠共八种小鼠的DNA多态性进行研究.结果 5对引物在近交系小鼠各基因座上均出现一条清晰的带,D16mit4、D3mit17、D3mit18具有多态性,D4mit2、D2Nds3不具有多态性.结论筛选出的引物D16mit4、D3mit17、D3mit18可用于检测近交系小鼠的品系来源和遗传背景,且所检测的小鼠符合近交要求.
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近交系小鼠6个短串联重复序列位点遗传多态性分析
目的:分析5品系近交系小鼠6个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性.方法:选择位于3号、6号、7号染色体上的6个STR位点,采用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染方法对5品系近交系小鼠(BALB/C、豫医无毛小鼠、C57、DBA/2、FVB/NJ)各5只进行遗传多态性分析.结果:不同品系近交系小鼠在6个位点(D3Mit15、D3Mit85、D3Mit21、D6Mit81、D7Mit164、D7Nds1)上均出现一清晰条带,不同品系小鼠之间有4个位点(D3Mit15、D3Mit21、D6Mit81、D7Nds1)表现为多态性,2个位点(D3Mit85、D7Mit164)表现为单态性.结论:筛选出4个近交系小鼠STR多态性位点.
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近交系豫医无毛小鼠微卫星DNA多态性分析
目的:研究微卫星DNA多态性在豫医无毛小鼠等近交系小鼠遗传监测中的应用.方法:选取小鼠不同染色体上的18个微卫星位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1、D2Nds3、D3Mit16、D3Mit85、D3Mit41、D4Mit2、D5Mit66、D7Mit164),应用PCR技术对7个近交系小鼠(豫医无毛小鼠、BALB/C、C57、CBA、DBA/2、C3H/HeJ、FVB/NJ)进行了微卫星多态性分析.结果:18个微卫星DNA具有稳定扩增效果.不同品系个体之间11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)具有多态性,其中5个位点(D6Mit36、 D6Mit81、 D16Mit4、D6Mit149、D7Nds1)具有显著多态性;同一品系不同个体之间表现为单态性.结论:所检测的小鼠符合近交要求,运用筛选出的11个位点(D3Mit17、D3Mit18、D3Mit15、D3Mit21、D3Mit22、D6Mit192、D6Mit81、D6Mit36、D6Mit149、D16Mit4、D7Nds1)进行微卫星多态性分析,能够快速、经济地对近交系小鼠进行品系鉴别和遗传背景监测.同时也反映了近交系豫医无毛小鼠与其他品系小鼠之间亲缘关系的远近.
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近交系小鼠微卫星位点的多态性观察
目的:观察不同品系小鼠微卫星位点的多态性.方法:取6～10周龄近交系BALB/C、豫医无毛小鼠、C57、CBA及DBA/2小鼠各5只,颈椎脱臼处死后取新鲜的脑组织0.3～0.5 cm3,提取DNA.随机选择位于小鼠2、3、4和16号染色体上的5对微卫星引物(D2Nds3、D3mit17、D3mit18、D4mit2、D16mit4),应用PCR技术对5种近交系小鼠的DNA多态性进行研究.结果:5对引物在近交系小鼠各基因座上均出现一清晰条带,D16mit4、D3mit17、D3mit18具有多态性,D4mit2、D2Nds3不具有多态性.结论:筛选出的引物D16mit4、D3mit17、D3mit18可用于检测近交系小鼠的品系来源和遗传背景,且所检测的小鼠符合近交要求.
