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细胞色素P450基因降低动脉粥样硬化小鼠MMP-9表达
目的 研究血管内皮高表达CYP2C8基因能否降低动脉粥样硬化小鼠的MMP-9的表达.方法 以20周龄APOEKO+/-CYP2C8Tg+/-和CYP2C8Tg+/-小鼠(n=10/组)为研究对象,相同基因背景和周龄的同窝APOEKO+/-和C57BL/6小鼠设为对照.采用PCR技术鉴定小鼠CYP2C8+/-基因;油红O染色检测APOEKO+/-CYP2C8Tg+/-,CYP2C8Tg+/-,APOEKO+/-和C57BL/6小鼠主动脉斑块形成面积;用Real-time PCR法检测各组小鼠的主动脉MMP-9基因表达水平,Western blot分析各组小鼠的主动脉MMP-9蛋白的表达情况.用ELISA法检测各组小鼠的血浆IL-1β和IL-10.结果 APOEKO+/-CYP2C8Tg+/-和CYP2C8Tg+/-小鼠主动脉斑块形成面积明显减少,Real-time PCR分析显示高表达CYP2C8在主动脉中明显下调MMP-9基因的表达,Western blot分析结果显示:高表达CYP2C8在主动脉中明显下调MMP-9蛋白的活性.在血清学上,高表达CYP2C8明显上调IL-lO而下调IL-1β.结论 高表达CYP2C8基因能够降低小鼠的MMP-9的活性、减低炎性介质水平,通过抗炎和稳定粥样斑块而发挥抗粥样硬化作用.
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糖尿病肾病小鼠肾组织基质金属蛋白酶9的表达及其细胞内信号传导机制的探讨
目的观察Kkay小鼠糖尿病肾病(DN)时肾脏基质金属蛋白酶9(MMP-9) 的表达,并探讨其细胞内信号传导机制. 方法 Kkay糖尿病小鼠(KA)组和非糖尿病小鼠(KB)组各8只,以PAS染色、免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察肾脏病变、MMP-9表达水平.经糖基化终末产物(AGEs)作用于脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,分别以RT-PCR和流式细胞技术检测MMP-9表达;以凝胶阻滞电泳(EMSA)检测核转录因子κB(NF-κB)激活情况. 结果 KA组出现明显DN病变,其肾小球硬化指数(GI)明显高于KB组(P<0.05);KA组肾小球 MMP-9阳性着色面积(11.14%)高于KB组(5.68%)(P<0.01),MMP-9 mRNA表达水平有类似变化.AGEs使HUVECs MMP-9表达增强,并伴有NF-κB激活.抑制NF-κB活性可降低MMP-9表达. 结论 Kkay小鼠DN伴有MMP-9表达增高,推测MMP-9在DN发生发展中起一定作用;AGEs可能是通过激活NF-κB使内皮MMP-9表达增强的.
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肺癌组织中相关标志物表达的变化及临床意义
肺癌是目前在全世界范围内发病率及病死率均居于首位的恶性肿瘤,全球每年新发现肺癌患者超过1 000万,占全世界新发现恶性肿瘤患者的12.7％ [1-2],在很多国家肺癌已成为肿瘤患者的第一大死因[3].我国《2012年中国卫生统计提要》显示,2004年至2005年,中国肺癌的死亡率为30.61/10万,居十大恶性肿瘤死亡率之首,且发患者数呈逐年递增的趋势[4].血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及MMP-9由肿瘤细胞合成和分泌,它们与肿瘤的浸润、转移密切相关[5].CA125是一种混合型肿瘤标志物,为一种膜抗原,广泛存在于肿瘤组织中,肿瘤发生时其含量升高.CA153为存在于多种腺癌内的一种多形上皮黏蛋白,有较明显的肿瘤和器官特异性[6].我们通过免疫组化法观察2013年3月至2014年9月我院收治的肺癌患者组织中相关标志物VEGF、MMP-9、CA125、CA153的表达变化,以探讨其对肺癌的临床诊断价值和治疗意义.
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MMP-9、Syndecan-1和E-cadherin在大肠癌中的表达及临床意义
目的:通过研究Syndecan-l,E-cadherin及MMP-9蛋白在大肠癌组织的表达情况,探讨三者在大肠癌发生发展过程中的作用及临床意义.方法: 应用免疫组化(SP)法检测52例大肠癌及18例对照正常大肠粘膜组织中Syndecan-1,E-cadherin及MMP-9蛋白的表达.结果:1.Syndecan-l、E-cadherin蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率为65.38%、61.54%,明显低于止常大肠粘膜上皮(100%),两者比较差异有显著性(P<0.05);2.MMP-9蛋白往人肠癌组织表达的阳性率为86.54%,明显高于正常大肠粘膜上皮(11.11%),两者比较差异有显著性(p<0.01).结论:Syndecan-1,E-cadherin及删P-9蛋白表达与大肠癌的生物学行为密切相关,在火肠癌发生发展过程中,Syndecan-I和E-cadherin蛋白的低表达或失表达和～IP-9蛋白的过度激活,可能参与了促进肿瘤侵袭转移的过程,联合检测Syndecan-I,E-cadherin和MMP-9,有助于大肠癌的诊断及对大肠癌转移潜能、预后的判断.
关键词： 大肠癌 Syndecan-1 E-cadherin MMP-9 免疫组织化学 -
MHCI类链相关蛋白A和基质金属蛋白酶-9在骨肉瘤组织学和血清学中的关系
目的 探讨MHCI类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metallopmteinase-9,MMP-9)在骨肉瘤组织学和血清学中的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白脱落的分子机制提供组织学基础.方法 应用免疫组织化学方法检测16例骨肉瘤中MICA和MMP-9蛋白的表达情况,同时采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测16例骨肉瘤患者血清中MICA和MMP-9的含量.结果 16例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达率分别为42.5%(7/16)和56.3%(9/16),两者的表达无相关性(r=0.454,P>0.05);骨肉瘤患者血清中可溶性MICA(soluble MICA,sMICA)浓度高于健康人(P<0.05),与血清中MMP-9的浓度无相关性(r=-0.429,P>0.05),但与组织中MICA蛋白表达呈负相关(r=-0.502,P<0.05).结论 骨肉瘤患者血清中sMICA浓度升高,而血清中MMP-9含量对MICA浓度无明显影响;骨肉瘤患者可能存在NKG2D-MICA介导的免疫监视功能障碍,MICA蛋白的脱落可能是骨肉瘤逃避免疫监视的一个新机制.
关键词： 骨肉瘤 MHCI类链相关蛋白A MMP-9 -
淫羊藿苷对小鼠破骨细胞 MMP－9、CK mRNA 表达的影响
目的：观察淫羊藿苷对体外培养小鼠破骨细胞MMP－9、CK mRNA表达的影响。方法用浓度分别为25 ng／ml、30 ng／ml、10－8 mol／L的巨噬细胞集落刺激因子（M－CSF）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、1，25（OH）2VitD3体外诱导培养小鼠骨髓源性破骨细胞，分别加入0 mol／L、10－5 mol／L的淫羊藿苷，培养48 h后，抽提总RNA，采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测破骨细胞中基质金属蛋白酶－9（MMP－9）、组织蛋白酶 K （CK） mRNA表达的变化。结果与空白对照组比较，10－5 mol／L的淫羊藿苷可明显下调MMP9mRNA的表达（P＜0．05），但对CK mRNA的表达无明显影响（P＞0．05）。结论淫羊藿可以通过下调MMP－9基因表达，从而抑制破骨细胞的分化形成及骨吸收。
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基质金属蛋白酶-9与创面修复
MMP-9是金属蛋白酶家族中分子量大的酶,它受许多细胞因子的调节.目前认为细胞外基质的降解在很大程度上取决金属蛋白酶与其抑制剂的平衡.MMP-9可作用较广泛的底物,在创面修复中起到重要作用,但在各种创面如急性创面、感染创面和慢性创面中的含量及相应作用有所不同,并且从某种程度上说MMP-9在创面渗液中的含量对创面的愈合趋势有一定的预测作用.对MMP-9的深入研究必将有助于攻克创面愈合中的种种难题.
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肝癌微波治疗后残留肿瘤生物学特性的变化及对机体的影响
目的通过动物实验研究探索肝脏肿瘤微波治疗后的残留肿瘤的生物学特性的变化规律,借此评价非完全性微波治疗的效果,并为治疗后的复查和再次治疗时机提供科学依据.方法建立小鼠微波治疗后肝脏残余肿瘤模型,并分时段检测肿瘤细胞的增殖细胞核抗原和基质金属蛋白酶,并将治疗前后的结果进行比较,观察其生物学特性的变化及与对照组小鼠的生存时间及肺部转移情况.结果 PCNA、MMP-9在微波治疗后两项表达均呈一过性的降低.微波治疗组小鼠与对照组相比生存期平均延长57%,肺部转移率低于对照组.结论微波治疗后残留肿瘤细胞的增殖活性和侵袭能力在短期内有明显的降低,残留肿瘤生长和转移受到一定程度的抑制,肿瘤分化程度较治疗前有一定的改善,微波治疗即使不能一次灭活肿瘤,但在一定程度上可延长机体的生存时间.
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促进瘤周纤维化治疗中晚期肝癌的实验研究
目的为解决中晚期肝癌临床切除率低、手术创伤大、转移率高等问题,我们设计了含瘤肝叶胆管支、门静脉支联合结扎的方法,对大鼠移植性肝癌模型进行了治疗性研究.方法应用R-35大鼠肝癌瘤株制备Wister大鼠移植性肝癌模型,分组实施含瘤肝叶的门静脉支胆管支联合结扎术及对照手术.对比观察大鼠死亡率、转移率、治疗成功率;原位末端检测观察癌细胞凋亡情况;免疫组化测定肝癌细胞MMP-9表达情况;免疫组化方法观察Ito细胞、Ⅰ、Ⅳ型胶原的增生情况;原位杂交检测α1Ⅰ、α1Ⅳ型前胶原mRNA表达及定位情况.结果手术组与对照组相比死亡率31.3%∶68.8%、腹腔转移率31.3%∶62.5%、肝内转移率12.5%∶43.8%、腹腔转移合并肝内转移率6.3%∶37.5%、治疗成功率为43.8%;对照组平均AI值=4.32±0.24,治疗组平均AI值=12.80±1.17;纤维包裹癌团MMP-9表达总阳性率为24.24%、强阳性率为9.09%,自由生长癌团MMP-9表达总阳性率为87.88%、强阳性率为42.42%;Ito细胞和Ⅳ型胶原完成早期瘤周纤维包裹,为I型胶原的沉积做出引导和铺垫;癌周纤维化早期,Ito细胞及MF主要对α1(Ⅳ)前胶原mRNA做出表达,中期α1(Ⅰ)前胶原mRNA杂交信号开始出现并增多,后期二者趋于稳定.结论联合结扎法可使肝癌团块周围发生广泛的肝纤维化,有效的包裹和限制了肝癌细胞团的膨胀性生长,显著地降低了肝癌死亡率、腹腔和肝内转移率;纤维紧密包裹有力影响了癌细胞表达和分泌MMP-9蛋白,降低了癌细胞侵袭和转移的能力,增加了癌细胞凋亡的比例;Ito细胞是癌周纤维化过程中胶原生成的先驱细胞,激活后的Ito细胞可进一步转变为MF和Fb,成为癌周纤维化过程中的主要胶原生成细胞.
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MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D在淋巴结阴性乳腺癌中的表达及其与预后的关系
目的研究MMP-2、MMP-9(matrix metalloproteinase,基质金属蛋白酶)、Cathepsin-D(组织蛋白酶D)在淋巴结阴性乳腺癌中的表达与预后的关系.方法用免疫组织化学ABC法检测270例淋巴结阴性乳腺癌患者肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D的表达.结果肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、Cathepsin-D的阳性率分别为56.7%(153/270)、59.6%(161/270)、55.6%(150/270);单因素分析MMP-2阳性、MMP-9阳性及两者共表达患者有较低的无复发生存率,多因素分析发现MMP-2和MMP-9共表达能独立预测患者的无复发生存率(RR=2.487;P＜0.05).结论在淋巴结阴性乳腺癌患者中MMP-2和MMP-9的阳性表达患者的预后较差.
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参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染的疗效及对血清PCT与hs-CRP及MMP-9的影响
目的 探究参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染患者的疗效及对血清降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量的影响.方法 选取2015年1月-2016年12月医院收治的120例肺癌合并慢性阻塞性肺部感染患者为研究对象,将患者分为试验组和对照组,每组60例;对照组采取呼吸机辅助治疗,同时进行常规的肺癌合并阻塞性肺部感染的治疗;试验组在对照组治疗的基础上,给予参芪扶正注射液;观察记录两组患者机械通气的情况,治疗前后肺功能及血气指标情况和血清中PCT、hs-CRP及MMP-9的含量及治疗期间的疗效和不良反应.结果 试验组患者的总有效率为98.33％高于对照组86.67％(P＜0.05);与对照组相比,试验组患者行机械通气的时间、脱机再上机率及入住ICU的时间减少,脱机成功率增加(P＜0.05);治疗后,两组患者的FEV1、FEV1/FVC及MVV值均增加(P＜0.05);试验组患者肺功能指标FEV1、FEV1/FVC及MVV的值分别为(1.81±0.51)L、(71.08±8.57)％、(75.14±5.82)(L/min)较对照组增加(P＜0.05);治疗后,两组患者的PaO2和pH均升高,PaCO2均降低(P＜0.05);试验组患者PaO2、PaCO2及pH值分别为(73.48±7.51) mmHg、(56.81±6.43) mmHg和(7.61±0.50),PaO2和pH值高于对照组(P＜0.05);PaCO2低于对照组(P＜0.05);接受治疗后,两组患者血清中PCT、hs-CRP及MMP-9含量均有下降(P＜0.05);试验组血清中PCT、hs-CRP及MMP-9含量分别为(0.57±0.08)μg/L,(13.21±3.02)mg/L及(0.30±0.04) μg/L低于对照组(P＜0.05);在接受治疗期间,两组患者均未出现严重不良反应,试验组患者出现1例轻微腹痛,1例腹泻;对照组患者出现2例胸闷.结论 参芪扶正注射液辅助治疗肺癌合并阻塞性肺部感染的临床效果较好,且能降低患者血清中PCT、hs-CRP及MMP-9的浓度.
关键词： 参芪扶正注射液 肺癌合并阻塞性肺部感染 PCT Hs-CRP MMP-9 -
无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病并发感染性肺炎的临床效果及对血清MMP-9与TNF-α和IL-8的影响
目的 探讨无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病并发感染性肺炎患者的临床效果及对血清MMP-9、TNF-α 和IL-8的影响.方法 选取2015年1月-2016年12月医院收治80例慢性阻塞性肺疾病并发感染性肺炎患者作为研究对象,分为研究组和对照组,每组40例.对照组采取常规治疗,研究组在对照组治疗的基础上,实施无创正压通气治疗,两周为一个疗程;完成治疗后,立即对两组患者的临床疗效进行判定,记录临床症状改善时间;进行动脉血血气分析,并测定血清中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)的含量.结果 治疗结束后,研究组临床疗效的总有效率为100.00％,优于对照组(P<0.05);且与对照组相比,研究组患者体温恢复 、咳嗽消失 、肺部啰音消失及白细胞恢复正常水平的时间均缩短(P<0.05);两组患者的肺功能指标较治疗前均有改善,且研究组改善程度优于对照组(P<0.05);两组患者的血气指标较治疗前均有改善,且研究组患者改善情况优于对照组(P<0.05);血清MMP-9、TNF-α 和IL-8的水平均下降,且研究组患者下降情况优于对照组(P<0.05).结论 无创正压通气治疗慢性阻塞性肺疾病并发感染性肺炎的临床效果良好,改善患者的肺功能,降低患者血清中MMP-9、TNF-α 和IL-8的水平,值得推广.
关键词： 无创正压通气 慢性阻塞性肺疾病并发感染性肺炎 MMP-9 TNF-α IL-8 -
腺癌保乳术后调强放疗与三维适形放疗的疗效比较
目的 比较乳腺癌保乳术后调强放疗(IMRT)与三维适形放疗(3D-CRT)的疗效、不良反应及对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响.方法 选择96例接受乳腺癌保乳术的女性患者,按照随机数字表法将患者随机分为对照组和观察组,每组各48例.对照组予以3D-RCT,观察组予以IMRT,处方剂量均为50 Gy/25次.比较两组的照射剂量、不良反应、美容效果及治疗前后的血清MMP-9和TIMP-1水平.结果 观察组计划靶区(PTV)的V105%、V110%及V115%明显低于对照组(P﹤0.01),观察组患侧肺脏及左侧病灶者心脏接受的照射剂量明显低于对照组(P﹤0.01);观察组的皮肤反应率为12.5%(6/48),低于对照组的29.2%(14/48),差异有统计学意义(P﹤0.05);观察组美容优良率为97.9%(47/48),高于对照组的83.3%(40/48),差异有统计学意义(P﹤0.05).放疗后,两组患者的MMP-9及MMP-9/TIMP-1均较本组治疗前降低,但组间比较差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 与3D-CRT相比,IMRT的PTV适形度和剂量均匀性较好,可降低危及器官的受照剂量,皮肤反应较少且美容效果好,值得临床推广.
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凋亡抑制蛋白基因Livin及肿瘤转移相关基因在肺癌组织中的表达及其与肺癌临床特征的关系分析
目的 分析凋亡抑制蛋白基因Livin及肿瘤转移相关基因在肺癌组织中的表达及其与肺癌临床特征的关系.方法 选取确诊并治疗的肺癌患者392例,采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测392例肺癌组织中的Livin、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、趋化因子受体-4(CXCR4)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA的表达水平.同时选取306例肺癌患者癌旁正常肺组织、297例肺部良性病变患者的肺部良性病变组织,采用RT-PCR检测Livin、SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达水平.结果 肺癌组织中Livin、Livinα、Livinβ、SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-9的阳性表达率均高于癌旁正常肺组织和肺部良性病变组织(P﹤0.05);肺癌组织中Livinα表达水平为(0.35±0.09),高于Livinβ的(0.28±0.05)(P﹤0.05).结论 肿瘤组织中的Livin、SDF-1、CXCR4、MMP-2、MMP-9表达水平较高,Livinα和化疗有密切关系,Livinβ和肿瘤位置有相关性,MMP-9与肿瘤是否发生转移有密切关系.
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结肠癌组织MMP-2和MMP-9及VEGF表达临床意义的研究
目的:探讨结肠癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其与肿瘤进展的关系.方法:采用免疫组化SP法检测60例结肠癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF表达情况,并以25例正常结肠组织作为对照.结果:结肠癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为81.6％、78.3％和90.0％,高于正常结肠组织中的表达,两组比较差异有统计学意义,P＜0.05.结肠癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF阳性表达与TNM分期和淋巴结转移相关,差异有统计学意义,P＜0.05.结论:MMP-2、MMP-9和VEGF在结肠癌的发生发展和浸润转移中起到了重要的作用,可作为反映结肠癌进展的生物学指标.
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胰腺癌组织S100A4和MMP-9表达及其预后意义的探讨
目的:探讨钙离子结合蛋白A4(S100A4)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因在胰腺癌组织中的表达和临床病理因素及预后的关系.方法:采用免疫组化二步法检测63例手术切除的原发性胰腺癌组织中S100A4和MMP-9的表达情况,比较S100A4和MMP-9蛋白表达与临床病理因素的关系及对预后的影响.结果:63例胰腺癌标本中S100A4和MMP-9阳性率分别为74.6％(47/63)和68.3％(43/63).S100A4和MMP-9蛋白过表达存在显著相关性,P=0.000.S100A4和MMP-9表达均与TNM分期、淋巴结转移和远处转移显著相关,同时MMP-9的表达也与肿瘤的大小及分化程度存在显著相关.S100A4阴性/MMP-9阴性患者(13例)中位生存时间(23个月)明显大于S100A4阳性/MMP-9阳性患者(36例)中位生存时间(9个月),x2＝15.353,P=0.000.分化程度(P＝0.000)、淋巴结转移(P=0.003)和S100A4过表达(P＝0.001)及MMP-9过表达(P＝0.001)为影响预后的独立因素.结论:S100A4和MMP-9的高表达与临床病理参数密切相关两者在胰腺癌的生长浸润过程中起重要作用,可以作为判断预后的指标之一.
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宫颈癌组织ILK和MMP9表达临床意义分析
目的:探讨宫颈病变组织中整合素连接激酶(integrin-link kinase,ILK)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases,MMP-9)的表达及其临床意义.方法:免疫组化方法检测2010-09-01-2012-06-30我院门诊及住院的60例宫颈鳞状细胞癌、100例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neopla,CIN)、40例慢性宫颈炎组织中ILK和MMP-9的表达.结果:1)宫颈癌组织中ILK表达率为80.0％ (48/60),明显高于正常宫颈黏膜上皮的0％ (0/40),x2=61.54,P＜0.001；高于CIN Ⅰ～Ⅱ的30.77％(16/52),x2 =27.27,P＜0.001；也高于CINⅢ的45.83％ (22/48),x2=13.65,P＜0.001.而CIN Ⅰ～Ⅱ与CINⅢ之间ILK的表达差异无统计学意义,x2=2.404,P=0.121.宫颈癌组织中MMP-9表达率为88.33％ (53/60),明显高于正常宫颈黏膜上皮(0/40),x2=75.18,P＜0.001；高于CIN Ⅰ～Ⅱ的28.85％ (15/52),x2 =41.33,P＜0.001；但与CINⅢ的79.17％ (38/48)相比差异无统计学意义,x2=1.69,P=0.194.MMP-9在CINⅢ的表达明显高于CIN Ⅰ～Ⅱ,x2=25.37,P＜0.001.ILK表达与临床分级、组织学分级和淋巴结转移有关,P值均＜0.05.MMP-9与淋巴结转移有关,P=0.012.ILK和MMP9在宫颈癌组织中表达呈正相关,r=0.429,P＜0.05.结论:ILK、MMP-9在宫颈癌组织中均呈过表达,且两者的过表达可能在宫颈癌浸润转移过程中起重要作用.
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非小细胞肺癌患者血清MMP-9表达及siRNA靶向抑制A549细胞侵袭与转移的研究
目的:探讨非小细胞肺癌患者血清中MMP-9表达与肿瘤转移的关系；MMP-9 siRNA对肺腺癌细胞系A549中MMP-9表达及细胞侵袭与转移抑制作用的影响.方法:ELISA法检测32例非小细胞肺癌(NSCLC)患者及20名健康者空腹血清MMP-9浓度,同时设计合成针对MMP-9的特异性siRNA,采用oligofectamine转染A549细胞,RT-PCR法检测转染细胞后MMP-9 mRNA的表达,Transwell实验检测细胞侵袭情况.结果:NSCLC患者血清中MMP-9浓度[(63.44±7.84) ng/mL]比正常对照组[(21.57±3.29)ng/mL]明显升高(P＜0.01),且浓度随病理分期增加而增强[Ⅰ/Ⅱ:(45.40±5.30)ng/mL,Ⅲ/Ⅳ:(89.80±5.02)ng/mL,P＜0.01],发生淋巴结转移的患者血清MMP-9浓度[(82.26±5.09) ng/mL]明显高于未发生淋巴结转移[(35.92±4.68)ng/mL]的患者P＜0.01；RT-PCR法显示,转染MMP-9 siRNA后,细胞中MMP-9 mRNA表达较阴性对照组和空白组明显降低,P＜0.05.RNA干扰MMP-9基因后A549细胞的侵袭能力也有明显下降,P＜0.01.结论:MMP-9可作为NSCLC患者有无发生浸润转移的良好预测指标,靶向MMP-9的siRNA不仅能特异性的降低MMP-9 mRNA及蛋白的表达,且能抑制人A549细胞的侵袭和迁移.
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抗癌防转汤抑制肝癌淋巴道转移及其对MMP-9和CTL影响的研究
目的:探讨抗癌防转汤抑制小鼠肝癌淋巴道转移效果及其机制.方法:采用随机数字表法将小鼠分为正常对照组、荷瘤对照组、低剂量治疗组和高剂量治疗组,建立小鼠肝癌淋巴道转移模型, 计算接种后фi(21 d小鼠抑瘤率)并运用MTT法检测CTL细胞活性及免疫组织化学方法和Western blot检测各组原发瘤及转移瘤基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的表达水平,运用统计学分析数据意义.结果:治疗组较对照组,小鼠抑瘤率明显提高,MMP-9在原发瘤、转移瘤表达均减少(P<0.05),细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicity T lymphocyte, CTL)活性增强(P<0.05),而且跟药物浓度呈正相关,P<0.05.结论:抗癌防转汤有抑制肝癌淋巴道转移的作用,且其与MMP-9的表达水平降低,CTL细胞活性增强有关.
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KiSS-1基因转染子宫内膜癌HEC-1B细胞系及其意义的研究
目的:构建KiSS-1基因质粒并将KiSS-1基因质粒导入子宫内膜癌细胞HEC-1B中,建立稳定、高效和低毒的转染方法,观察其转染率及表达情况.方法: 采用基因转染技术用阳离子脂质体介导将高纯度的KiSS-1质粒转染到子宫内膜癌细胞株中.用RT-PCR和Western blot技术检测转染前后肿瘤细胞的KiSS-1 mRNA、MMP-9 mRNA和蛋白Metastine的表达.结果:1)使用重组的真核表达载体,将KiSS-1基因转染到子宫内膜癌细胞中,并获得稳定表达.2)子宫内膜癌细胞KiSS-1基因转染前后表达水平有明显差异,空白对照组、空质粒组和质粒转染组HEC-1B细胞中KiSS-1 mRNA蛋白的相对表达量分别为0.123 1±0.036 6、0.148 6±0.028 7和0.506 0±0.019 8,Metastin蛋白的相对表达量分别为0.154 9±0.018 9、0.149 7±0.002 9和0.446 9±0.007 8,质粒转染组与其他两组相比,差异有统计学意义,F=161.547, P=0.000;F=607.993, P=0.000.3)转染后的子宫内膜癌细胞的MMP-9 mRNA表达下调,空白对照组、空质粒组和质粒转染组HEC-1B细胞中MMP-9 mRNA的相对含量分别为0.357 6±0.050 1、0.350 0±0.025 4和0.167 7±0.001 4, 质粒转染组与其他两组相比,差异有统计学意义,F=32.963, P=0.001.结论: 利用脂质体作为载体将KiSS-1基因转染到子宫内膜癌HEC-1B细胞是可行、有效和稳定的;转染后细胞的KiSS-1 mRNA表达明显增强,MMP-9 mRNA的表达明显降低; KiSS-1基因可能参与抑制子宫内膜癌细胞的侵袭和转移,可考虑为子宫内膜癌基因治疗的一个有意义的基因.
