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基质细胞衍生因子(SDF)-1对人类伴糖尿病牙周病患者的人牙周膜干细胞增殖、分化影响及其可能机制的研究
目的 针对伴糖尿病牙周病患者群体,研究基质细胞衍生因子(SDF)-1对人牙周膜干细胞增殖、分化影响及其再生修复的可能机制.方法 拟从伴糖尿病牙周病患者的炎症牙周组织分离培养鉴定牙周膜干细胞,100 ng/mL SDF-1的培养液添加与否分为两组进行比较.通过MTT法实验方法来检测细胞增殖能力;Real time PCR检测碱性磷酸酶alkaline phosphatase(ALP)表达水平来确定细胞的分化水平.结果 MTT法显示P.g+diabetes+SDF-1组中人牙周膜干细胞增殖能力提高;PCR结果显示P.g+diabetes+SDF-1组中,炎性牙周膜干细胞中的ALP mRNA表达明显增高(P<0.05).结论 对于伴糖尿病牙周病患者群体,基质细胞衍生因子SDF-1作为重要的细胞因子诱导并促进了人类牙周膜干细胞的增殖和分化,起到类似中间衔接和催化的作用.
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低氧环境下SDF-1对间充质干细胞迁移影响的初探
目的 探讨低氧环境下基质细胞衍生因子(SDF-1)促进间充质干细胞的迁移影响.方法 2017年3月—2018年3月期间利用三气培养箱建立低氧微环境,加入120 ng/mL浓度SDF-1间充质干细胞为实验组,在低氧环境下培养的间充质干细胞为低氧对照组,在正常环境下培养的间充质干细胞为正常对照组;利用Transwell细胞迁移实验检测各组细胞迁移;利用MTT实验检测每组间充质干细胞的增殖抑制率.结果 Transwell细胞迁移实验表明细胞迁移率实验组(43.5±8.4)×103与正常对照组(26.7±5.6)×103比较差异有统计学意义(P<0.01),低氧对照组(37.5±7.2)×103与正常对照组(26.7±5.6)×103相比较差异有统计学意义(P<0.05);在低氧环境下,与低氧对照组相比较,实验组间充质干细胞的细胞活性明显升高(P<0.01);同时低氧对照组与正常对照组相比间充质干细胞的细胞活性也明显升高(P<0.01).结论 在低氧环境下加入趋化因子SDF-1可有效的趋化间充质干细胞,在低氧环境下加入趋化因子度SDF-1因子对间充质干细胞活性增强.
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补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区域SDF-1、CXCR4蛋白及mRNA表达的影响
目的：观察补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区新生微血管数目以及基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、趋化因子受体（CXCR4）蛋白及mRNA表达的影响。方法：建立大鼠急性心肌梗死动物模型，采用免疫组化SP法检测心肌组织中VIII因子相关抗原（vWF）蛋白的表达，计数微血管数目（MVC）；用Western Blot和Real-Time PCR技术检测各组大鼠梗死心肌边缘区域的SDF-1因子和其特异性受体CXCR4蛋白和基因表达情况。结果：假手术组、模型组、各给药组大鼠梗死心肌边缘区域均可见vWF因子标记染色的新生微血管，假手术组大鼠心肌中新生微血管不明显，模型组大鼠梗死心肌边缘区域可见到少量新生成的微血管，各给药组大鼠梗死心肌边缘区域可见较多新生微血管。模型组与假手术组比较差异有统计学意义（P约0.05）；各给药组与模型组相比较差异有统计学意义（P约0.05或P约0.01）。与假手术组比较，模型组大鼠心肌中SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达明显增多（P约0.05或P约0.01）；与模型组比较，各给药组SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达均明显增多（P约0.05或P约0.01）。结论：丹参、丹参黄芪药对等药物可以促进血管的生成，推测这些药物促进血管生成的机制可能是通过促进SDF-1、CXCR4蛋白及mR原NA表达水平，从而增加SDF-1、CXCR4的含量以促进新生血管的生成。
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独活寄生汤延缓人椎间盘髓核细胞退变机制的研究
探讨独活寄生汤(Duhuo Jisheng decotion,DHJSD)延缓人椎间盘退变的作用及其可能的分子机制.术中摘取人椎间盘标本,根据磁共振Pfirrmann退变程度分为正常组和退变组.Western blot和Real-time PCR法检测椎间盘组织中炎症因子TNF-α,IL-1β和胞外基质分解酶MMP-3,MMP-13的表达.体外培养人髓核细胞,用CCK-8法测定在基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1,10 μg-L+1)和各种不同浓度的DHJSD共同处理下,髓核细胞的活力情况,并筛选出DHJSD合适的作用浓度.随后分为3组:对照组、SDF-1组、DHJSD+ SDF-1组,检测各组细胞TNF-α,IL-1β,Agg,colⅡ,MMP-3,MMP-13的表达情况.为进一步探讨其分子机制,采用NF-κB抑制剂(BAY1 1-7082)或CXCR4-siRNA转染髓核细胞,检测CXCR4,NF-κB主要基团P65磷酸化水平(p-P65)以及P65核转移情况,细胞炎症因子和细胞外基质的表达情况.通过检测2组椎间盘组织发现退变髓核组织中TNF-α,IL-1β,MMP-3,MMP-13的表达明显升高(P＜0.05).而体外细胞实验发现,CCK-8法检测显示当DHJSD质量浓度为300 mg·L-1时髓核细胞的活力明显增加.将实验分为3组后,检测发现与单独SDF-1组相比,用DHJSD处理后TNF-α,IL-1β,MMP-3,MMP-13含量明显降低,而Agg和coIⅡ表达明显上升.采用CXCR4-siRNA转染髓核细胞后发现,SDF-1可以明显提高CXCR4和p-P65的表达,促进P65向核内转移,而给予DHJSD或CXCR4-siRNA处理后其作用明显被抑制.进一步采用BAY 11-7082处理髓核细胞后发现,能明显降低髓核细胞炎症因子TNF-α和IL-1β,以及胞外基质分解酶MMP-3和MMP-13的表达.独活寄生汤可抑制炎症因子表达,促进胞外基质合成,其潜在机制与SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路有关.
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SDF-1-CXCR4轴与缺血性心脏病的干细胞治疗
干细胞治疗为缺血性心脏病患者提供了一种简单、经济、有效的全新治疗方法 ,其早期临床实验也取得了令人振奋的结果 ,然而更广泛的临床应用亟需更深入的基础研究的支持.SDF-1-CXCR4轴在干细胞的动员和归巢中起着关键作用,将SDF-1与干细胞治疗结合将为缺血性心脏病的细胞治疗提供一个新的途径.本文就缺血性心脏病的干细胞治疗,SDF-1-CXCR4轴在干细胞动员和心脏损伤、修复中的作用作一综述.
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SDF-1/CXCR4对缺血性卒中后神经发生的调节作用研究进展
脑缺血损伤后表达增高的基质细胞来源因子-1(SDF-1)和C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)可以调控内源性神经干细胞增殖、分化和迁移.
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SDF-1/CXCR4与血液系统恶性肿瘤的关系研究进展
基质细胞衍生因子(SDF-1)及其受体CXCR4相互作用转导特定信号,在许多生理和病理过程中都发挥了重要的效应.CXCR4在多种血液系统肿瘤中高表达,与疾病的预后、耐药、复发密切相关.用SDF-1抗体或CXCR4抗体能有效的抑制肿瘤细胞的生长,为治疗血液系统肿瘤开辟了新途径.本文就SDF-1/CXCR4在血液系统肿瘤中的表达,及其与预后、耐药、复发和治疗关系的研究进展作一综述.
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SDF-1/CXCR4在小儿急性白血病中的表达及其意义
本研究探讨儿童急性白血病(AL)血浆基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的水平和骨髓细胞SDF-1受体CXCR4的表达与髓外浸润的关系.分别收集48例AL患儿、20例非恶性血液病患儿(对照组)外周血浆及骨髓细胞,采用ELISA法分别检测AL患儿和对照组儿童外周血浆SDF-1水平;用流式细胞术检测AL患儿和对照组儿童骨髓细胞CXCR4的表达.结果表明:血浆SDF-1水平及骨髓细胞CXCR4表达,在AL组明显高于对照组(P<0.001),在急性淋巴细胞白血病(ALL)组明显高于急性髓细胞白血病(AML)组(p<0.01),在髓外浸润组也高于非髓外浸润组(p<0.05).结论:SDF-1和CXCR4在AL儿童呈高水平表达,与白血病的类型、骨髓白血病细胞的迁移、浸润密切相关.
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基质细胞衍生因子在不同的急性髓系白血病细胞系的迁移、黏附和细胞凋亡中的生物学作用
本研究探讨基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor 1,SDF-1)在急性髓系白血病(AML)细胞的迁移、黏附和细胞凋亡中的生物学作用及有关的信号转导.采用流式细胞术检测AML的细胞系KG1a、ML1、U937细胞表面标记物的表达;以免疫荧光技术检测SDF.1对肿瘤细胞膜表面分子的影响;通过微孔细胞转移实验检测SDF-1对AML细胞的趋化作用及磷脂酰肌醇3激酶(P13K)在趋化过程中的作用;用蛋白免疫印记技术检测P13K信号途径有关的细胞凋亡分子BCL-XL在SDF-1活化此途径后的变化.结果表明:3种AML细胞系不同程度表达CD34(KG1a=95.6%、ML1=4.6%、U937=4.8%)、CIM5(KG1a=98.3%、U937=97.5%、ML1=17.8%)、CXCR4(ML1=85.4%、U937=43.6%、KG1a=3.8%)、ICAM(KG1a=75.8%、U937=41.8%、NIL1=46.3%).SDF-1能促进CXCR4高表达的ML1和U937细胞在基质细胞的黏附并能够诱导此类细胞的迁移,上述作用被G蛋白抑制剂pertussis toxin(PTx)、PI3K抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)明显抑制;而对CXCR4低表达的KG1a细胞则无上述作用.SDF通过此途径还促进肿瘤细胞存活;此作用同样可被P13K抑制剂明显抑制,加用wortman-nin后促肿瘤细胞调亡显著增加.蛋白免疫印记检测phospho-AKT、BCL-XL显示,在SDF组明显增强,加用PTX、wortlnannin组则减弱.结论:SDF-1能触发CXCR4高表达的ML1和U937细胞的极化形态的建立及诱导黏附分子的重新分布.从而通过P13K信号途径促进此类AML细胞的迁移,减少肿瘤细胞的调亡,而对CXCR4低表达的KG1a细胞则无上述作用.上述作用可以被PDK信号途径阻断剂和G蛋白抑制刺所阻断.
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抗CXCR4单克隆抗体对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响
本研究通过观察抗CXCR4单克隆抗体(12G5)对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响,探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存中的作用.培养HL-60细胞,并再与骨髓基质细胞共培养,在抗CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后,观察骨髓基质层上HL-60细胞的粘附情况并测定其粘附率;应用免疫组织化学技术检测HL-60细胞BCl-2及Fas蛋白的表达.结果显示,12G5显著降低HL-60细胞的粘附率,与此同时Bcl-2表达下调,Fas表达上调.结论:抑制SDF-1活性可一定程度地阻抑白血病细胞生存,促进凋亡.
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不同检测体系下骨髓源间充质干细胞迁移特征的比较
为研究不同检测体系下骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移特征的差异,本研究利用Boyden chamber观察hSDF-1对MSC迁移的影响是否存在浓度依赖性;观察上述体系经50 nmol渥曼青霉素(wortmannin),10 μmol/LLY294002,50 μmol/L PD98059, 10 μmol/L U73122,126 μmol/L AMD3100以及50 nmol/L维拉帕米等处理MSC后对MSC迁移的影响.结果表明:MSC迁移能力随着hSDF-1α浓度的递增而逐渐增强,并且发现Wortmannin、LY294002、PD98059、U70312、AMD3100、Verapamil对MSC迁移均有影响,其中U73122、AMD3100对MSC迁移阻断的效应显著.结论:SDF-1/CXCR4所介导的MSC迁移可能与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)和蛋白激酶C(PKC)等信号途径有关.
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低危骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞的生物学特性的实验研究
骨髓增生异常综合征的发病机制至今尚未明确,有研究表明MDS患者骨髓基质微环境功能的异常与其发病有关.间充质干细胞是造血微环境的重要成分,本研究拟探讨低危MDS患者间充质干细胞(MSC)的生物学特性及功能.采集低危MDS患者的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,观察细胞形态,进行免疫表型、成骨分化能力鉴定,检测其增殖能力及对体外造血的支持功能;用实时定量RT-PCR法测定MSC中相关细胞因子及化学趋化因子的表达,并与健康供者的MSC进行比较.结果表明:培养低危MDS患者的MsC呈典型的成纤维细胞样,细胞表达SH2(CD105),SH3(CD73),Thy-1(CD90),CD34及CD45均为阴性,诱导后可向成骨细胞分化.其体外扩增能力与与健康供者相比无显著差异(P＞0.05),但体外支持造血功能较后者显著减低(P＜0.05).实时定量PT-PCR显示SDF-1基因在低危MDS患者MSC中显著高表达(P＜0.01).结论:间充质干细胞的功能异常与低危MDS患者骨髓微环境的造血调控失常相关,这为MDS发病机制的认识及治疗提供了新的思路,值得进一步探讨.
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抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响
本研究通过观察抑制SDF-1活性对HL-60细胞增殖活性的影响,探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存能力中的作用.培养骨髓基质细胞,并与HL-60细胞共培养,采用SDF-1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后,用MTT法检测HL-60细胞活力、用流式细胞术观察HL-60细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达,同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL-60细胞内钙离子浓度变化.结果显示,抗CXCR4单克隆抗体可下调HL-60细胞膜表面CXCR4的表达,同时处于G0/G1期的细胞增多,处于S期的细胞减少,而白血病细胞存活率下调,细胞内钙离子浓度降低.结论:抑制SDF-1活性可在一定程度上抑制白血病细胞的增殖.
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SDF-1/CXCR4轴在人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖中的作用
本研究探讨基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood-derived stromal cells,hUCBSCs)促进巨核细胞增殖中的作用.以巨核细胞系HEL细胞作为研究对象,实验分HEL/hUCBSC共培养组、HEL/骨髓基质细胞(human bone marrow stromal cells,hBMSCs)共培养组和HEL悬浮培养组.应用ELISA法检测hUCBSC和hBMSC培养上清SDF-1水平,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测HEL细胞CXCR4蛋白表达,RT-PCR检测CXCR4 mRNA表达.结果表明:hUCBSC高分泌表达SDF-1,其分泌高峰在培养第8天,稍迟于hBMSCs.与hUCBSCs共培养的HEL细胞,流式细胞仪和激光共聚焦检测均显示其CXCR4蛋白的表达较弱(P<0.05),且可在部分HEL细胞胞浆中发现红色点状荧光.RT-PCR检测结果显示,不同培养条件下HEL细胞CXCR4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05).结论:hUCBSC在分泌SDF-1和调控巨核细胞表达CXCR4方面起重要作用.
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SDF-1/CXCR4对脐血AC133+细胞趋化功能的影响
本研究探讨SDF1/CXCR4系统在脐血AC133+细胞趋化中的作用.用跨膜迁移实验(Transwell实验)确定SDF-1佳趋化浓度,采用双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪测定脐血AC133+细胞表面CXCR4表达水平,并评价SDF-1佳趋化浓度条件下细胞迁移率.结果发现,随着SDF-1浓度的增加,新鲜脐血AC133+细胞迁移率升高,但SDF-1浓度达到150 ng/ml时迁移率趋于平稳;当CXCR4阻断型抗体作用后,迁移率与未加SDF-1组无差异.重组人造血生长因子组合SCF、FL、TPO体外培养AC133+细胞时,在培养的早期趋化因子SDF-1受体CXCR4的表达升高,同时迁移率也升高,但随着培养时间的延长,CXCR4表达量渐渐降低,迁移率随之降低.结论:AC133+细胞趋化率与CXCR4表达量间存在相关性.
关键词： 脐血 AC133+细胞 SCF1/CXCR4 SDF-1 CXCR4 -
SDF-1所修饰的包裹吲哚菁绿和液态氟碳纳米粒造影剂在兔舌癌颈部转移淋巴结的应用
目的 观察SDF-1所修饰的包裹吲哚菁绿和液态氟碳造影剂对于兔舌癌颈部转移淋巴结的光声成像效果及安全性检测.方法 采用乳溶剂挥发法制备出聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,SDF-1为配体,吲哚菁绿(ICG)和液态氟碳(PFH)为内核的纳米粒,构建SDF-1所修饰的包裹吲哚菁绿和液态氟碳的纳米粒造影剂,检测患有舌癌并发生颈淋巴转移的新西兰大白兔的光声成像效果.健康的新西兰大白兔在注射造影剂后第1周和第3周,进行血常规,肝、肾功能检测并观察新西兰大白兔的精神、外貌等体征.1个月后处死动物,进行照射区域皮肤、肺脏、肝脏以及肾脏的病理检测.结果 注射SDF-1修饰的包裹吲哚菁绿和液态氟碳的造影剂后,20 min可见光声信号,24 h后完全消失,实验组较对照组有明显增强转移淋巴结成像效果,空白组未见明显光声信号.健康的兔子经静脉注入造影剂后1个月内,生命体征无明显异常.病理检查照射区域皮肤、肝、肺及肾脏组织学检测学与正常兔子无明显差异.结论 SDF-1所修饰的包裹吲哚菁绿和液态氟碳的纳米粒造影剂有明显增强转移淋巴结的光声成像效果,是一种安全、有效、价廉的光声成像增效剂.
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Wistar大鼠心肌梗死造模后SDF-1/CXCR4的表达
目的 检测基质细胞来源因子-1(SDF-1)和其受体CXCR4在心肌梗死后不同部位心肌组织的表达,研究SDF-1/CXCR4轴在心肌梗死后血管新生中的作用,为近一步的研究进行基础研究.方法 结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支复制的心肌梗死大鼠模型术后,分别于0.5 h,7 d,14 d,28 d处死后提取总RNA和总蛋白,分别用RT-PCR,PCR和Western印迹检测心肌组织正常区,边缘区,梗死区在梗死后0.5 h,7 d,14 d,28 d时SDF-1、CXCR4在mRNA和蛋白水平表达变化情况.结果 假手术组和对照组比较,SDF-1在心肌梗死后大鼠的心脏组织中表达有明显的增高(P＜0.01),一直持续到14 d以后,在不同心肌部位的表达有明显的差异;CXCR4在心肌梗死后大鼠的心脏组织中表达有明显的增高(P＜0.01).结论 SDF-1/CXCR4轴在心肌梗死后修复中有着重要的作用.
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犬间质来源细胞因子-1的基因克隆和体内分布及在急性心肌梗死中的表达变化
目的 克隆犬间质来源细胞因子-1(Stromal derived factor-1,SDF-1)全长cDNA,并研究其在犬体内不同组织的表达分布情况及其在急性心肌梗死后的动态变化规律.方法 用RT-PCR的方法 克隆出犬SDF-1全长cDNA,经过双向序列测定加以确认.通过结扎冠状动脉左前降支制备犬急性心肌梗死模型.实验动物分为2组:心肌梗死组犬(MI组)和假手术组犬(S组),MI组再按观察时点随机分为2 h,7 d和4周,采用Real-time RT-PCR检测SDF-1的mRNA表达情况,用HE染色观察心肌形态变化.结果 (1)成功克隆犬SDF-1全长cDNA;(2)SDF-1在正常犬的心肌、脑、脾脏、肝脏、血管、肾脏、骨骼肌、睾丸和肺中均有构成性表达;(3)AMI后,心梗区的SDF-1 mRNA的表达于2 h开始下降,7 d继续下降,4周开始回升,接近正常对照(假手术组)的水平,周围正常心肌于2 h开始下降,7 d开始回升,4周继续上升.心梗2 h,SDF-1 mRNA表达水平,心梗区高于周围正常区(P＜0.01),7 d和4周时则低于周围正常区(P＜0.05).结论SDF-1在正常的生理功能调节中具有重要的意义,它还可能与干细胞向缺血心肌的动员和归巢相关.
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基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用
目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)在支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症及气道重塑中的作用.方法 将18只SPF级SD雌性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只.卵清白蛋白(OVA)致敏后,雾化吸人OVA制作哮喘模型.哮喘模型成功后,测定气道压力;通过HE染色、Image-Pro Plus图像分析软件分析大鼠气道平滑肌的嗜酸粒细胞浸润情况,测定支气管管腔的内周长、管壁面积、支气管平滑肌面积以及平滑肌细胞核数;RT-PCR、Western blot方法检测各组大鼠肺组织SDF-1、CXCR4的表达变化;免疫组织化学法检测各组大鼠气道壁SDF-1表达的变化;统计数据并分析SDF-1、CXCR4与哮喘气道重塑及气道炎症的关系.结果 哮喘4周组、哮喘8周组大鼠的气道反应性、气道壁嗜酸粒细胞计数、支气管管壁面积、支气管平滑肌面积、平滑肌细胞核数目均明显高于对照组,哮喘两组间上述指标差异均有统计学意义(均P＜0.01);RT-PCR检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠肺组织SDF-1(分别为0.583±0.004和0.724±0.008)、CXCR4(分别为0.467±0.003和0.655±0.002)的表达明显高于对照组(SDF-1为0.146 ±0.003、CXCR4为0.281±0.002),哮喘8周组的SDF-1及CXCR4的表达亦明显高于哮喘4周组,差异均有统计学意义Western blot检测结果显示,(均P＜0.01).Western blot检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠气道壁SDF-1的表达(分别为0.270 ±0.006和0.350±0.009)明显高于对照组(0.180±0.009),哮喘8周组的SDF-1的表达量亦高于哮喘4周组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);各组大鼠肺组织、气道壁SDF-1、CXCR4mRNA及蛋白的表达与气道反应性、嗜酸粒细胞浸润数、支气管壁面积、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数均呈正相关(均P＜0.01).结论 SDF-1/CXCR4信号轴可能在哮喘气道炎症及气道重塑病理过程中起重要作用.
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SDF-1/CXCR4信号轴调控骨髓间充质干细胞向哮喘小鼠肺组织的迁移
目的:探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXCR4轴在外源性骨髓间充质干细胞(MSC)向哮喘模型小鼠肺组织迁移的作用.方法:无菌条件下取GFP转基因小鼠骨髓MSC,体外扩增,鉴定.采用Transwell培养系统,观察0、50、100、150和200 ng/ml SDF-1和CXCR4阻断剂AMD3100对MSC体外定向迁移的影响.取60只雌性BALB/c小鼠,随机分为6组(n=10):PBS非哮喘组、MSC非哮喘组、PBS哮喘组、MSC哮喘组、SDF-1处理哮喘组、AMD3100处理哮喘组.哮喘组采用哮喘致敏液0.2 ml(含100 μg卵白蛋白)致敏,并使用卵白蛋白雾化吸入激发哮喘.非哮喘组在致敏和激发时均予以PBS处理.MSC处理组于哮喘激发前移植外源性MSC.SDF-1处理哮喘组在MSC移植前气管内注入SDF-1,AMD3100处理哮喘组注入AMD3100预先孵育的MSC.PBS哮喘组注射等量的PBS液.采用Westernablot和RT-PCR方法检测肺组织中SDF-1的表达水平,通过荧光显微镜观察表达GFP的外源性MSC在哮喘小鼠肺组织中的分布情况,比较SDF-1和CXCR4阻断剂AMD3100干预对MSC向肺组织迁移的影响.结果:Transwell实验显示MSC的迁移水平与SDF-1(0~150军ng/ml)成浓度依赖性.与正常小鼠比较,哮喘小鼠肺组织SDF-1表达增强.与MSC非哮喘组比较,MSC哮喘组小鼠肺部有更多MSC聚集.在哮喘肺组织中增加外源性SDF-1能够促进MSC向肺组织迁移.通过AMD3100阻断MSC的CXCR4可以明显减少MSC向肺组织的迁移水平.结论:SDF-1/CXCR4轴参与了MSC迁移到哮喘小鼠肺组织的过程.
