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通络中药对大鼠急性脑损伤的保护作用
目的 观察反复缺血再灌注致血管性痴呆(Vascular dementia,以下简称VD)大鼠血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素(6-Keto-PGF1a)变化及通络中药的影响,探讨通络中药对急性脑损伤的干预机制.方法 实验采用反复夹闭双侧颈总动脉,同时腹腔注射硝普钠的方法复制血管性痴呆大鼠模型.于灌胃干预2周后放射免疫法检测大鼠血浆中TXB2、6-Keto-PGF1a含量,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清MMP-9表达.结果 ①通络中药可使血管性痴呆大鼠血浆中TXB2表达显著减少, 6-Keto-PGF1a含量明显升高,T/P比值下调;②各组大鼠血清加MMP-9表达未见明显差异.结论 通络中药可通过降低TXB2/6-Keto-PGF1a比值纠正二者之问的平衡失调,改善脑部供血,发挥脑保护作用.缺血再灌注后两周模型组大鼠血清MMP-9表达呈现正常水平,其表达高峰可能已经结束.
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MMP-9、Survivin、COX-2在胃癌组织中的表达及相关性
目的 探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、凋亡抑制蛋白(Survivin)、环氧合酶-2(COX-2)的表达及其相关性.方法 采用免疫组化S-P法,分别检测58例人胃癌手术标本及正常胃黏膜中MMP-9、Survivin、COX-2的阳性率.结果 在胃癌组织中MMP-9、Survivin、COX-2阳性率分别为68.9%、79.31%、82.76%,均高于正常胃粘膜(P<0.01).MMP-9、Survivin、COX-2的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),而与胃癌的性别、年龄、部位及大小无相关性(P>0.05),MMP-9又与胃癌分化程度相关(P<0.05).三者在胃癌中表达有相关性(P<0.05).结论 MMP-9、Survivin、COX-2共同促进肿瘤的发生、侵袭和转移,可作为反映胃癌生物学行为的指标.
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MMP-9和E-cadherin在胃腺癌中的表达及其关系的研究
①目的 检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及上皮型粘附素(E-cadherin,E-cad)在胃腺癌中的表达,探讨二者在胃腺癌发生发展及转移中的作用.②方法本实验以54 例胃腺癌标本作为研究对象,11 例胃粘膜作为对照,采用免疫组织化学方法,分别检测MMP-9 和E-cad 的表达在不同临床病理特征之间的关系.③结果胃腺癌组织中MMP-9 表达阳性率为66.7%,明显高于正常胃组织,E-cad表达阳性率42.6%,明显低于正常胃组织,MMP-9及E-cad 在胃腺癌中的表达都与分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关,二者在胃腺癌中的表达呈负相关.④结论免疫组化检测MMP-9 和E-cad 蛋白的表达可能在胃腺癌发生发展中起一定促进作用.
关键词： 胃腺癌 MMP-9 E-cadherin 免疫组织化学 -
参芎注射液对缺血再灌注损伤大鼠炎症损伤的影响
为研究参芎注射液对脑缺血再灌注老龄大鼠炎症损伤的影响.将84只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫通组、参芎注射液高、中、低剂量组.连续腹腔注射给药3d,采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,再灌注24h,神经功能评分,取脑TTC染色,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,荧光实时定量PCR(RT-PCR)对海马区IL-1β,TNF-α,ICAM-1和MMP-9 mRNA的表达量进行检测.结果,参芎注射液可使脑梗死体积减少,明显改善神经功能,参芎注射液能减少IL-1β,TNF-α,ICAM-1和MMP-9 mRNA的表达量,并减少IL-1β和TNF-α的含量.表明参芎注射液对大鼠缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子表达有关.
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柚皮苷对破骨细胞分化的影响
目的:探讨骨碎补单体成分柚皮苷对小鼠单核细胞RAW264.7诱导分化为破骨细胞的影响.方法:通过100μg·L-1核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导RAW264.7细胞株分化为成熟破骨细胞,经TRAP特异性染色和骨吸收陷窝对破骨细胞进行鉴定.采用MTT法筛选抑制破骨细胞强的浓度.在诱导过程中,采用筛选后含柚皮苷的培养基,诱导5d后,通过TRAP阳性细胞计数和骨吸收面积分析来观察柚皮苷对破骨细胞的形成和骨吸收功能情况;流式细胞术检测柚皮苷对破骨细胞增殖的影响,RT-PCR检测柚皮苷对破骨细胞分化过程中核因子κB受体活化因子(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)与C-fos mRNA表达的影响.结果:采用100 μg· L-1的RANKL可成功诱导成熟的、有功能的破骨细胞.柚皮苷可以抑制破骨细胞的分化和骨吸收功能;抑制破骨细胞的增殖活性;柚皮苷可明显下调破骨细胞分化过程中的RANK,TRAP,MMP-9,NFATc1 mRNA的表达,上调C-fos mRNA表达.结论:柚皮苷可抑制破骨细胞分化、增殖和骨吸收功能,其机制可能是通过抑制破骨细胞分化过程中特异性基因表达实现的.
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生脉增液活血汤对糖尿病合并冠心病患者临床疗效及Hcy、MMP-9水平的影响
目的:观察生脉增液活血汤对糖尿病合并冠心病患者临床疗效及Hcy、MMP-9水平的影响.方法:将糖尿病合并冠心痛患者随机分为两组,对照组采用基础治疗,观察组加服生脉增液活血汤,疗程均为8周.观察两组临床疗效及血清Hcy、MMP-9水平的变化.结果:观察组临床症状、心电图总有效率明显高于对照组;观察组HbA1c及Hcy、MMP-9水平较对照组明显降低.结论:于基础疗法基础上,加用生脉增液活血汤治疗糖尿病合并冠心病疗效显著,其通过对Hcy、MMP-9水平的影响发挥稳定斑块作用可能为其作用机制之一.
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黄芪三七汤对心源性脑栓塞致MMP-9升高及其出血转化的临床研究
目的:分析黄芪三七汤对心源性脑栓塞患者MMP-9表达的影响,探讨该药物用于防治心源性脑栓塞出血转化的可行性.方法:将我院2017年3月-2018年7月期间收治的120例心源性脑栓塞患者随机分为治疗组和对照组,两组患者均实施常规治疗,治疗组患者在常规治疗的基础上给予黄芪三七汤治疗.结果:两组入院24h内的血浆MMP-9检测结果、NIHSS评分、脑出血转化评分比较均无明显差异(P>0.05),治疗后7d、14d治疗组患者血浆MMP-9水平、NIHSS评分、脑出血转化评分均低于对照组患者(P<0.05).治疗组患者的脑出血转化发生率为15.0%,低于对照组患者的28.3%、(P<0.05).结论:黄芪三七汤能够抑制心源性脑栓塞患者血浆中MMP-9的高表达,降低患者脑出血转化发生率,用于防治心源性脑栓塞出血转化具有可行性.
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丹红注射液对慢性阻塞性肺疾病急性力口重期的临床疗效及CRP、MMP-9、TIMP-1的影响
目的:探讨丹红注射液对慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床疗效及CRP、MMP-9、TIMP-1的影响.方法:将80例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者随机分为治疗组和对照组,两组均采用吸氧、抗感染等常规对症治疗,治疗组同时加用丹红注射液,每日1次,疗程均为14天.均于治疗前、治疗14天后,检测CRP、MMP-9、TIMP-l.结果:治疗结束后,治疗组疗效优于对照组(P＜0.05),两组患者CRP、MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1与治疗前比较均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),治疗组CRP、MMP-9下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组间TIMP-1、MMP-9/TIMP-1下降幅度比较无统计学差异(P＞0.05).结论:丹红注射液可降低慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者细胞因子、炎症因子的含量,对基质金属蛋白酶有抑制作用.
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黄芪联合红花注射液治疗脑出血患者效果观察
目的:观察黄芪注射液联合红花注射液治疗脑出血患者的临床疗效.方法:收集整理我院脑出血患者90例,随机分为3组,即黄芪注射液组、红花注射液组、联合治疗组,各30例患者.对比各组治疗前后疗效并检测每组患者治疗前后血清中VEGF、MMP-9含量的变化.结果:联合治疗组患者治疗后CSS评分、血肿体积、水肿带体积、血清中MMP-9含量明显低于黄芪注射液组、红花注射液组(P<0.01);BI评分、血清中VEGF含量水平显著高于黄芪注射液组、红花注射液组(P<0.01).结论:黄芪注射液联合红花注射液治疗脑出血患者有较好的效果,无不良反应,希望此方法推广于临床治疗.
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尿液MMP-9和肌氨酸在前列腺癌患者中的诊断价值
目的 探讨肌氨酸和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在前列腺癌早期诊断中的应用价值.方法 分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和液相色谱质谱技术(LC/MS)测定54例前列腺癌(PCa)患者、35例前列腺增生(BPH)患者和30例对照组受试者尿液中的MMP-9和肌氨酸水平,并应用ROC曲线分析二者对PCa的诊断价值,同时抽取空腹静脉血应用化学发光法检测各组的前列腺特异抗原(PSA)水平.结果 PCa患者尿液MMP-9、肌氨酸和PSA明显高于BPH组和正常对照组.PSA诊断前列腺癌的灵敏度、特异度分别为90.5％、26.4％.ROC曲线分析显示,MMP-9和肌氨酸及两者联合检测诊断PCa的ROC曲线下面积分别为0.732、0.886和0.924.联合诊断效率高于二者单独使用.MMP-9和肌氨酸的升高程度和PCa的临床分期正相关.结论 MMP-9和肌氨酸联合检测可以很好地鉴别PCa,具有较高的诊断价值,可以作为PCa的早期诊断指标.
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结肠癌患者体内MMP-9、ICAM-1、Ang-2和VEGF表达与侵袭转移的相关性研究
目的 研究结肠癌患者体内基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein,MMP-9)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管生成素-2(Angiogenin-2,Ang-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达与侵袭转移的相关性.方法 选取本院2017年1月至2017年12月收治的结肠癌患者60例,收集患者结肠癌组织、癌旁组织(距癌组织2cm)和结肠正常组织(距癌组织5 cm),采用Western Blot法和免疫组化法检测患者组织中MMP-9、ICAM-1、Ang-2和VEGF蛋白水平和阳性表达.结果 患者结肠癌组织MMP-9、ICAM-1、Ang-2和VEGF蛋白表达水平和阳性表达情况显著高于正常组织和癌旁组织(P＜0.05).MMP-9、ICAM-1、Ang-2和VEGF阳性表达和结肠癌的淋巴结转移、浸润深度和TNM分期具有明显的相关性,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 癌组织内高表达MMP-9、ICAM-1、Ang-2和VEGF与结肠癌的侵袭转移具有明显的相关性.
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HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达及其与肾细胞癌血管生成的关系分析
目的 探讨HIF-2α(缺氧诱导因子-20α)、VEGF(血管内皮生长因子)、COX-2(环氧化酶-2)、MMP-9(金属基质酶-9)表达及其与肾细胞癌血管生成的关系.方法 应用免疫组化方法,检测79例肾细胞癌手术切除标本的HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达情况,并与MVD(微血管密度)表达进行关联性分析.结果 肾癌组织MMP-9、VEGF的表达均显著高于正常肾组织(P＜0.05);不同临床分期肾癌组织中的MMP-9、VEGF表达有明显差异(P＜0.05).MVD与VEGF、MMP-9蛋白表达呈显著正相关(r=0.381、0.375,P＜0.05);MVD与COX-2表达有关,COX-Z表达0级和4级MVD值低,与1、2、3级之间比较差异有统计学意义(P＜0.05),0级与4级之间比较差异无统计学意义(P＞0.05),1、2、3级之间差别无统计学意义(P＞0.05).肾细胞癌中HIF-2α阳性组的MVD值高于HIF-2α阴性组中MVD值,差异有统计学意义(t=4.374,P＜0.05);Spearman等级相关分析发现,HIF-2α的表达与MVD间存在正相关关系(r=0.545,P＜0.01).结论 HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达及其与肾细胞癌血管生成之间有明显相关性,在临床上可以根据相关基因表达情况而采取相应的干预措施.
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前列腺炎合并前列腺增生患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平及意义
目的 探讨前列腺炎(CP)合并前列腺增生(BPH)患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平及意义.方法选取2014年04月至2016年03月于我院行前列腺手术120例患者,52例单纯BPH为对照组,68例CP合并BPH为观察组,观察比较两组患者一般资料,检测患者前列腺液中IL-8、COX-2、MMP-9水平及WBC计数及对各因素进行Spearman分析和Logsitic多元回归性分析.结果 观察组患者在年龄、平均病程、IPSS、前列腺体积等均显著高于对照组(P<0.05),观察组患者前列腺液中IL-8、COX-2、MMP-9水平及WBC计数显著高于对照组(P<0.05).经Spearman相关性分析显示,前列腺液中IL-8与COX-2、MMP-9、EPWBC均呈显著正相关(r=0.987、0.951、0.187,P<0.05),同时COX-2与MMP-9呈显著正相关(r=0.571,P<0.05),而MMP-9与EPWBC呈显著正相关(r=0.857,P<0.05).Logisitic多元回归分析显示EPWBC、IL-8、COX-2、MMP-9是BHP合并CP的独立影响因子或预测因子.结论 BHP合并CP患者前列腺液中IL-8、COX-2及MMP-9表达水平较单纯BPH显著升高,有利于BPH和BPH合并CP患者的诊断和鉴别.
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TMPRSS2-ERG及MMP-9基因对前列腺癌侵袭性的影响
目的 探讨TMPRSS2-ERG(T-E)及MMP-9基因在提高前列腺癌侵袭性方面的关联.方法 分别使用FISH和RT-PCR方法检测转移性前列腺癌、局限性前列腺癌及良性前列腺增生患者组织中T-E和MMP-9基因的表达,制备抗ERG及MMP-9的siRNA并转染两种前列腺癌细胞系,采用Transwell实验检测转染siRNA后前列腺癌细胞的侵袭能力.结果 T-E融合基因的阳性率及MMP-9基因的相对表达量在3组间逐渐下降(P＜0.01),转移性前列腺癌组中两基因分别与Gleason评分(P＜0.05)及血清PSA水平(P＜0.05)呈正相关.转移性前列腺癌组T-E基因融合阳性的患者MMP-9基因表达显著高于T-E基因融合阴性者(P＜0.05),且两基因间表达呈正相关(r=0.875,P＜0.05).下调ERG及MMP-9基因的表达分别能显著降低VCAP细胞(T-E融合基因阳性)和LNCaP细胞(T-E融合基因阴性)的侵袭性.结论 T-E融合基因和MMP-9基因在提高前列腺癌侵袭性方面有协同作用,但MMP-9可能不是T-E融合基因的关键靶基因.
关键词： 前列腺癌 侵袭性 TMPRSS2-ERG MMP-9 FISH -
ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达差异
目的 分析ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达,探讨其与乳腺癌细胞转移的相关性.方法 Transwell小室实验检测两种乳腺癌细胞系的转移能力,免疫细胞化学法对ADAM15、MMP-2及MMP-9在两种细胞中的表达进行定性、定位及半定量检测,Western blot对其进行定量检测.结果 MDA-MB-231乳腺癌细胞系的运动和侵袭能力均强于MCF-7乳腺癌细胞系.ADAM15、MMP-2及MMP-9在MDA-MB-231细胞系中的表达分别高于MCF-7细胞系(免疫细胞化学:P＜0.001,P＜0.05,P＜0.001;Western blot:P ＜0.01,P＜0.05,P＜0.01),且三者在两系乳腺癌细胞表达的差异中,ADAM15表达的差异性大,其次为MMP-9,MMP-2的差异性小.结论 ADAM15、MMP-2及MMP-9均促进乳腺癌转移,且ADAM15与转移相关性强而可能成为判断乳腺癌恶性生物学行为的指标.
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NS-398抑制肝癌SMMC-7721细胞及组织MVD值、VEGF、MMP-9的表达
目的 探讨NS-398对肝细胞癌MVD值、VEGF、MMP-9表达的影响.方法 采用RT-PCR和流式细胞术检测肝癌SMMC-7721细胞VEGF、MMP-9表达.采用免疫组化法检测裸鼠移植瘤MVD,ELISA法测定血清中PGE2水平.结果 在体外,NS-398可以呈剂量和时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的VEGF、MMP-9 mRNA和蛋白表达;在体内,可显著降低裸鼠移植瘤MVD、VEGF、MMP-9基因和蛋白表达(P＜0.001),并能降低裸鼠血清中PGE2水平(P＜0.001).结论 COX-2与肝细胞癌血管生成密切相关,NS-398可通过下调VEGF和MMP-9的表达而抑制肝细胞癌血管生成.
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血浆sES、MMP-9和TIMP-1与冠状动脉扩张的关系
目的 探讨炎症因子可溶性E选择素(sES)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)与冠脉扩张的关系及其临床意义.方法 选择我院行冠脉造影的部分患者,根据冠造结果分三组,其中Ⅰ组为冠状动脉扩张,共11例;冠状动脉粥样硬化为Ⅱ组,共35例;造影正常者为Ⅲ组,共24例.用ELISA法检测血浆MMP-9及其抑制物TIMP1水平.结果 sES及MMP-9水平在冠脉扩张组明显高于冠脉粥样硬化组及冠脉造影正常组(P＜0.05).血浆TIMP1水平在三组中相近.结论 sES、MMP-9/TIMP-1与冠脉扩张相关,它们可能参与了冠脉扩张的发生,在冠脉疾病的进展中起重要作用.
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电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响
目的 探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响.方法 采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型.将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组.缺血2h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和7d3个时间点.取双侧“合谷”穴(LI4)为电针刺激穴位.免疫组化法检测eNOS蛋白的表达；反转录聚合酶链法检测eNOS mRNA的表达；Western blot法检测eNOS、MMP-9蛋白的表达.结果与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区eNOS蛋白及mRNA表达显著增加(P＜0.01)；与模型组比较,电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA明显增加(P＜0.01).eNOS蛋白表达于再灌注3d达高峰,假手术组表达为0.4291±0.0173,模型组再灌注3 d表达为0.7374 *0.0252,电针组表达为0.8536±0.0212,各组比较有显著差异(P＜0.01).与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区MMP-9蛋白的表达显著增加(P＜0.01)；与模型组比较,电针组MMP-9蛋白的表达于再灌注1d显著低于模型组(P＜0.01),再灌注3、7d电针组MMP-9蛋白的表达明显高于模型组(P＜0.01).结论 电针可上调局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血皮质区eNOS蛋白及mRNA、MMP-9蛋白的表达.
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MMP-9-siRNA对乳腺癌细胞中MMP-9表达的影响
目的:探讨MMP-9小分子干扰RNA(MMP-9-siRNA)对乳腺癌MDA-MB-231细胞中MMP-9表达的影响.方法:化学合成针对MMP-9的小分子干扰RNA(MMP-9-siRNA),并将其转染到乳腺癌MDA-MB-231细胞.本实验分为空白组(不转染任何siRNA)、对照组(转染Control-siRNA 50 nmol/L)和实验组(又分为3个亚组,分别转染10、50、100 nmol/L MMP-9-siRNA)3组.应用RT-PCR法及Western blot法分别在mRNA水平及蛋白水平检测并比较空白组、对照组和实验组中MMP-9表达及其差异.结果:RT-PCR结果显示,对照组MMP-9 mRNA表达率为99.2%±4.9%,与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05);实验组10、50、100 nmol/L MMP-9-siRNA 3个亚组MDA-MB-231细胞MMP-9 mRNA表达率分别为80.3%±5.0%、65.2%±4.5%、55.9%±5.1%,与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示,对照组蛋白表达率为101.7%±3.1%,与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05);实验组 10、50、100 nmol/L MMP-9-siRNA 3个亚组MDA-MB-231细胞MMP-9蛋白质表达率分别为77.6%±3.9%、62.7%±4.1%、55.0%±4.8%,与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:构建的MMP-9-siRNA能够抑制MDA-MB-231细胞中MMP-9的表达,为基因水平治疗乳腺癌提供实验依据.
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Syncytin、MMP-2、MMP-9的表达与胎儿生长受限的关系
目的 探讨Syncytin表达异常对滋养细胞侵袭能力的影响.方法 选取我院2014年4月至12月的58例胎儿宫内生长受限患者作为试验组,选取58例正常妊娠妇女及胎盘植入患者作为对照组,采用荧光定量PCR和Western Blotting方法检测不同胎盘组织中Syncytin、MMP-2、MMP-9的表达;20只SD受孕大鼠随机分为处理组(静脉注射Syncytin抗体,n=10)和对照组组(n=10,不注射Syncytin),妊娠足月时终止妊娠,比较两组胎鼠重量,采用HE染色,比较两组母鼠胎盘的显微结构及胎盘侵袭子宫的程度,荧光定量PCR、Western blotting检测胎盘组织Syncytin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达.结果 试验组Syncytin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白水平表达水平明显少于对照组(P<0.05),且Syncytin的表达与MMP-2、MMP-9呈正相关(P<0.05);处理组孕足月胎鼠的体重明显小于对照组(P<0.05);处理组Syncytin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白水平表达明显少于对照组(P<0.05).结论 胎盘组织Syncytin表达下调与胎儿生长受限发病密切相关,Syncytin基因在胎儿生长受限疾病的发生、发展过程中起重要作用.
