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护骨素与代谢骨病和血管钙化
素或称骨保护素(osteoprotegerin, OPG)发现于1997年[1],后相继被不同领域的研究者分别鉴定为破骨细胞生成抑制因子(OCIF)[2]、肿瘤坏死因子受体-1(TNFR -1)[3]和滤泡树状细胞受体-1(FDCR-1)[4].互补脱氧核糖核酸(cDNA)测序分析证明, 它们均属同一基因编码的同一分子.因OPG具有抑制破骨细胞(OC)分化、活化和上调骨密度的生物学作用[1]而得名.研究证实,OPG转基因(OPG+/+)过量表达OPG的小鼠呈现骨硬化症表型[1] ,OPG基因敲除(OPG-/-)所致OPG缺乏小鼠在成熟前即显示严重骨质疏松(OP)及主动脉和肾动脉钙化[5].用重组OPG预防治疗,可防止OP和血管钙化的发生及逆转OP [6].OPG缺乏与代谢性骨病和血管钙化之间的关系正日益引起重视.
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结缔组织生长因子及其生物学作用
1991年Bradham等[1]在筛选人类脐静脉内皮细胞cDNA(互补脱氧核糖核酸)文库时,首次发现了人类结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF).在病理情况下,其过度表达与某些增生性或纤维化性疾病的发生、发展密切相关,如硬皮病、肾纤维化、肝硬化、肺纤维化、动脉粥样硬化等,因此CTGF在组织器官纤维化的发生、发展中起着重要作用.
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结缔组织生长因子及其在心血管疾病中作用的研究进展
结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是由Bradham 等人[1]首次发现的,1991 年Bradham 等在应用血小板源性生长因子(platete derived growth factor,PDGF) 抗体筛选人类脐静脉内皮细胞cDNA(互补脱氧核糖核酸) 文库时发现的.结缔组织生长因子在成年哺乳动物心、脑、肾、肺、肝胎盘中均有表达.近年来研究发现,结缔组织生长因子的过度表达与多种器官疾病的发生发展关系密切,因此有关结缔组织生长因子与多种疾病发病机制的关系研究成为近年研究的热点.本文就其研究进展做一综述.
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重组人类促红细胞生成素治疗贫血研究进展
1906年Carnot发现贫血动物血液中存在调节造血的因子,1948年Bonsdloff等提出这种造血因子是促红细胞生成素(erythropoietin).直到1985年Lin等人成功地克隆出人EPO互补脱氧核糖核酸(cDNA)和基因后,才开始利用基因工程大批量生产重组人EPO,并广泛用于临床.EPO治疗肾性贫血已为世人公认,随着EPO临床应用的研究深入,EPO治疗贫血的范围在不断扩大,并取得了较好的疗效,但亦存在一定的副作用,现如下综述.
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骨桥蛋白在心脏重构中的作用研究进展
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)为磷酸化糖蛋门,在多种细胞有表达.Oldberg等[1]通过对大鼠骨肉瘤涎蛋白互补脱氧核糖核酸克隆而分离出来的一种酸性蛋白并命名为OPN.初了解其介导骨细胞与骨基质的连接,在骨基质矿化及重吸收过程的作用.
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肝癌组织差异表达基因cDNA序列的筛选与鉴定
目的筛选并鉴定肝癌组织特异表达基因.方法通过菌落原位杂交技术筛选用抑制消减杂交法构建肝癌与癌旁肝组织差异表达基因消减cDNA文库,用PCR方法进一步筛选出有插入片段的阳性克隆,将阳性克隆进行DNA测序和同源性比较分析,用Northern印迹方法对新的cDNA序列进行初步鉴定.结果从消减文库中随机挑取的100个白色克隆中筛选出13个阳性克隆,DNA测序获得11个不同的cDNA序列;同源性比较分析表明,6个cDNA片段与已知基因高度同源,5个cDNA片段为新的序列.其长度大于300 bp的3个新序列,Northern印迹证实它们都来源于肝癌组织.结论用抑制消减杂交方法构建的肝癌差异表达基因消减cDNA文库富含肝癌特异表达基因,经验证的3个新的cDNA序列可能为肝癌特异的基因序列.
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人肺鳞癌全长cDNA文库的构建
从肺鳞状细胞癌患者经开胸手术切除癌瘤标本中提取总RNA,采用高效cDNA合成技术构建人肺鳞癌全长cDNA文库,为进一步研究肺鳞癌分子病因学奠定实验基础.1材料和方法