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三叶肽家族研究进展
三叶肽是一类由一个或多个"三叶形结构"组成的具有抵御蛋白酶水解作用的小分子多肽物质.其分子结构中都有一至数段由 38~39个氨基酸组成的特定区域,其中的6个半胱氨酸按1~5,2~4和3~6的顺序以二硫键的形式两两相接.三叶形结构的稳定性使三叶肽能在消化道复杂的内环境中保持其生物活性 .三叶肽的表达同胃肠道中粘液糖蛋白的合成密切相关,目前已知哺乳动物体内的3类三叶肽都是由胃肠道粘液分泌细胞合成的.而三叶肽在胃肠道炎症周围组织的异位表达使其在保护胃肠粘膜,促进粘膜修复中起重要作用.
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肠黏膜屏障的研究进展
胃肠黏膜固有屏障正常稳态的维持,对于防止胃肠腔内细菌、食物抗原、酶和化学药物等直接与黏膜裸露面接触引起的相关疾病至关重要.本文就胃肠黏膜固有屏障的关键结构、成分和功能、调节因素等方面研究进展予以综述.
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三叶因子1与胃癌关系的研究进展
三叶因子家族(trefoil factor family,TFF)是一族主要表达于胃肠道黏膜的小分子多肽.其主要功能是维持黏膜的完整性和促进损伤上皮修复.三叶肽还具有促进肿瘤侵袭,促进血管生长和抑制凋亡的功能,因此,在炎症和肿瘤过程中都起到了重要作用.研究显示,三叶因子1与胃癌的关系密切,TFF1基因是胃癌发生的抑癌基因.本文就近年三叶因子1与胃癌关系研究的进展进行综述.
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一种新型胃粘膜保护剂三叶肽
三叶肽家族是一类较新的、对胃粘膜有保护作用的因子,主要由乳癌相关肽、解痉多肽和肠三叶因子组成,其特征是都由6个半胱氨酸残基借3个二硫键连接形成,呈三叶状结构.三叶肽对粘膜的保护作用,可能在于增强受损粘膜周围完好的上皮细胞向粘膜损伤表面迁移覆盖,或与粘液中的糖蛋白相互作用,加强粘液凝胶层,抵抗粘膜表层有害物质的损伤等.三叶肽的研究可能为治疗胃十二指肠溃疡与修复开辟了新途径.
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三叶因子在消化性溃疡愈合过程中的作用及其机制
1 三叶因子的结构、分布1989年,Thim[1]首先发现三叶肽,它是一族富含半胱氨酸的小分子肽,由59个氨基酸组成,为一些高度保守与半保守的氨基酸组成的区域,这些小分子多肽带有三对二硫键,呈"三叶草"状结构.
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大鼠实验性胃溃疡期间胃黏膜三叶因子3的改变
三叶因子家族(trefoil factor family, TFF)是一群主要由胃肠道黏液细胞分泌的小分子多肽.目前在哺乳动物体内发现的三叶肽(trefoil peptide)有3种,即乳癌相关肽(pS2或TFF1)、解痉多肽(SP或TFF2)和肠三叶因子(ITF或TFF3)[1].
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三叶肽在胃肠黏膜重建中的作用研究进展
早期胃肠黏膜修复主要通过伤缘残留上皮快速迁移来完成黏膜重建过程.三叶肽家族在维护胃肠道黏膜的完整性和损伤后修复方面起重要作用.迄今,三叶肽在胃肠黏膜重建中所起的作用尚未完全阐明.此文就胃肠黏膜重建和三叶肽在该领域中作用的研究进展作一综述.
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三叶肽对胃肠道粘膜损伤的保护作用
三叶肽(trefoil peptide8)家族是一类对胃肠道粘膜有保护作用的因子,主要由解痉多肽(spasmolytic polypep-tide,SP)、乳癌相关肽(PS2)和肠三叶因子(intestinal tre-foil factor,ITF)组成,其特征是由6个半胱氨酸残基借3对二硫键连接而呈三叶状结构.三叶肽对粘膜的保护作用可能在于其能增强受损粘膜周围完好的上皮细胞向损伤表面迁移覆盖,或与粘液中的糖蛋白相互作用,加强粘液凝胶层,从而抵抗粘膜表层有害物质的损伤.本文就三叶肽保护胃肠道粘膜损伤的作用及机制研究进展作一综述.一、三叶肽的分子结构及分布三叶肽是一族小分子肽,迄今发现哺乳动物有3种三叶肽,并将其归为三叶因子家族(trefoil factor family,TFF)肽[1].1982年Masiskowski等从MCF-7乳腺癌细胞系中寻找雌激素诱导的信使RNAs时发现PS2,即TFF1.同年Jorgensen等在分离猪胰岛素时发现SP(TFF2).1987年一组研究者首次在鼠体内发现ITF(TFF9).这3种肽均有人类同源染色体,其基因密集在染色体21q22.3上[2].三叶肽在人胃肠上皮内通常以部位特异性方式表达:遍布胃的TFF1在胃小凹上皮表面细胞表达;TFF2在远端胃和下段十二指肠腺表达;TFF3在全小肠和大肠上皮表达.三叶肽分子很稳定,能抗酸、抗蛋白酶和抗热分解.二、三叶肽的胃肠道粘膜保护和修复作用
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三叶肽与胃黏膜保护研究进展
三叶肽(trefoil peptides)家族是一类较新的、对胃黏膜有保护作用的因子,主要由乳癌相关肽(PS2或TFF1)、解痉多肽(SP或TFF2)和肠三叶因子(ITF或TFF3)组成,其特征是都由6个半胱氨酸残基借3个二硫键连接形成的三叶状结构.三叶肽对黏膜的保护作用,可能在于增强受损黏膜周围完好的上皮细胞向黏膜损伤表面迁移覆盖,或与黏液中的糖蛋白相互作用,加强黏液凝胶层,抵抗黏膜表层有害物质损伤等.三叶肽的发现提高了人们对黏膜保护的认识,促进了其对胃黏膜保护分子机制的研究.
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三叶肽与胃肠道肿瘤关系探讨
三叶肽(trifoil peptides)家族目前被归为三叶因子家族肽(trifoil factor family,TFF),主要由乳癌相关肽(PS2)、解痉多肽(SP)和肠三叶因子(ITF)组成,其特征是都由6个半胱氨酸残基借助3个二硫键连接形成,呈三叶状结构.三叶肽在人体内有广泛的分布及表达,如呼吸系统、消化系统、泌尿系统及中枢神经系统的下丘脑等.本文简介其生物学特性,在消化系统的分布及功能,以及在胃肠肿瘤的恶性生物学特征.
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贲门肠上皮化生与三叶肽的研究进展
肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)作为远端胃和贲门部肿瘤的癌前病变,在肿瘤的演变过程中起重要作用.IM发生机制的研究将为肿瘤的病因研究提供重要线索,到目前为止,机制还不十分明确.
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三叶肽在胃肠道中的作用及研究进展
三叶肽(trefoil peptides)家族主要由解痉多肽(SP)、乳癌相关肽(PS2)和肠三叶因子(ITF)组成.三叶肽对黏膜具有保护作用,其机制在于增强受损黏膜周围完好的上皮细胞向黏膜损伤表面迁移覆盖,或与黏液中的糖蛋白相互作用,加强黏液凝胶层,抵抗黏膜表层有害物质损伤等.另外,三叶肽还参与调节胃肠运动、胃酸分泌及生长等.
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三叶肽与消化系疾病
三叶肽是新近发现的一族富含半胱氨酸的小分子多肽.它在人体胃肠道上皮呈特异性表达,可以增加胃肠粘膜的防御能力,促进溃疡愈合,抑制肿瘤生长.现就近年的研究进展综述如下.
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三叶肽结合蛋白研究进展
三叶因子家族(trefoil factor family,TFF)是一群主要由胃肠道黏液细胞分泌的小分子多肽.目前在哺乳动物体内发现的三叶肽(trefoil peptide)有3种,即乳癌相关肽(pS2或TFF1)、解痉多肽(SP或TFF2)和肠三叶因子(ITF或TFF3).其共同特征为均含一特殊结构-p结构域,由一段38~39个氨基酸序列通过6个高度保守的半胱氨酸残基由3个分子内的二硫键(Cysl-Cys5,Cys2-Cys4,Cys3-Cys6)相互联接,使整个肽链扭曲、折叠形成三叶状结构,由此命名.这种三叶形结构的稳定性使三叶因子家族具有明显的抗蛋白酶水解、抗酸消化及耐热特性,因而能在消化道复杂的环境中保持生物活性.在哺乳动物体内,三叶肽具有黏膜保护与修复、肿瘤抑制、信号传导、诱导细胞凋亡等功能,但其发挥功能的具体机制尚不明了.
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重组人TFF2乳酸链球菌表达载体pTRTFF2的构建
目的 构建带c-myc分子标签的人三叶因子家族2(hTFF2)融合基因c-myc-hTFF2的乳酸链球菌表达载体,以便进一步构建能表达活性c-myc-hTFF2融合蛋白的乳酸链球菌工程菌.方法 根据hTFF2的氨基酸表达序列和乳酸链球菌的氨基酸密码子,以c-myc作为分子标签,设计c-myc-1 TFF2的cDNA序列,并在其5'端和3'端添加SalⅠ和BamHI酶切位点;将目的基因片段设计成14个相互互补的寡核苷酸,经聚合酶链式反应,得到目的基因c-myc-hTFF2;将c-myc-hTFF2连入pBluescriptⅡsk(+)载体,构建其克隆载体pBS-TFF2并进行酶切鉴定及DNA测序;分别用SalⅠ/BamHI和XhoⅠ/BamHI对pBS-TFF2和pNBC1000进行双酶切反应,再通过连接反应将c-myc-hTFF2融合基因插入pNBC1000,构建c-myc-hTFF2大肠杆菌表达载体(pNTFF2);用XbαⅠ对pNTFF2和穿梭载体pTRKH2单酶切反应,并通过连接反应将c-my-hTFF2的表达载体连入穿梭载体pTRKH2,完成乳酸链球菌表达载体pTRTFF2的构建,并进行酶切鉴定.结果 成功构建了c-myc-hTFF2的乳酸链球菌表达载体pTRTFF2.结论 体外基因拼装是构建目的基因有效的方法;pTRTFF2的构建为构建乳酸链球菌工程菌奠定了基础.
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三叶肽因子(TFF1 、TFF3)在结肠息肉中的表达及其与临床病理参数的关系
目的 评估三叶肽因子(TFF1 、TFF3)在结肠息肉组织中的表达情况及其与临床病理参数的关系.方法 选择结肠息肉患者120例作为结肠息肉组(包括增生性息肉组40例及腺瘤性息肉组80例) ,另选择结肠癌患者30例(结肠癌组)及正常结肠黏膜者20例(正常结肠黏膜组)作为对照.采用实时荧光定量PCR 、蛋白质印迹及免疫组织化学等方法检测各组织中TFF1和TFF3的表达情况并分析其与临床病理参数的关系.结果 TFF1蛋白在正常结肠黏膜、增生性息肉组织、腺瘤性息肉、结肠癌组织中表达阳性率分别为0 、0 、53.8%、80.0%,差异均有统计学意义(χ2=66.614 ,P<0.05). TFF3蛋白在正常结肠黏膜、增生性息肉组织、腺瘤性息肉、结肠癌中表达阳性率分别为90.0%、77.5%、55.0%、30.0%,差异有统计学意义(χ2=24.688 ,P<0.05). 4组总体TFF1 mRNA 、TFF3 mRNA 、TFF1蛋白、TFF3蛋白的表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05).与轻度异型增生性息肉相比,中重度异型增生性息肉中 TFF1 蛋白表达显著增加(t= 2.760 ,P=0.009) ,而TFF3蛋白表达显著降低(t=2.556 ,P=0.015) ,差异有统计学意义;与管状腺瘤相比,绒毛状腺瘤性息肉中 TFF1蛋白表达水平显著增加(t=2.549 ,P=0.013) ,而 TFF3蛋白表达水平显著降低(t=2.108 ,P=0.038) ,差异有统计学意义.结论 TFF1和 TFF3的表达情况与结肠恶性癌变过程密切相关,可作为结肠良性疾病鉴别和结肠癌早期诊断的生物标志物.
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基因拼装构建c-myc-hTFF2融合基因克隆载体pBS-TFF2
目的 体外拼装带c-myc分子标签的人三叶因子家族2(human trefoil factor family 2,hTFF2)的融合基因c-myc-htff2,并构建其克隆载体pBS-TFF2,以便为进一步构建TFF2各种表达载体打下基础.方法 根据hTFF2氨基酸序列,结合乳酸链球菌氨基酸表达密码子,设计编码htff2的基因序列(cDNA);在其上游添加c-myc碱基序列作为分子标签,设计融合基因c-myc-htff2;参照pBluescriptⅡ sk(+)载体的酶切位点碱基序列,分别在c-myc-htff2的5'和3'端设计SalⅠ和BamHⅠ酶切位点;用DNAWORKS在线程序指导,将c-myc-htff2设计成14个相互互补的寡核苷酸片段,经PCR扩增得到目的基因片段c-myc-htff2;再将目的基因片段亚克隆至pBluescriptⅡ sk(+)载体,进行酶切鉴定及DNA测序.结果 成功地在体外拼装了c-myc-htff2基因,完成了pBS-TFF2构建,且DNA测序结果与设计序列完全一致.结论 在DNAWORKS程序指导下设计寡核苷酸并进行体外基因拼装是合成目的基因的有效方法;成功构建了c-myc-htff2融合基因的克隆载体pBS-TFF2.
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新生儿粪便中肠三叶因子影响因素的研究
近十几年来,一个具有特定三叶结构且与粘糖蛋白相关的胃肠肽家族--三叶因子家族已得到确认.肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)为三叶肽家族成员之一,存在于多种哺乳动物组织中.与其他胃肠肽激素相同,ITF由肠道分泌后,一部分进人血液循环,一部分随粪便排出体外.