首页 > 文献资料
-
尼莫地平对脑缺血大鼠存活素表达的影响
目的 观察尼莫地平对脑缺血大鼠存活素表达的影响.方法 28只Wista:大鼠随机分为假手术组、缺血组、尼莫地平治疗组、盐水对照组,每组7只,后3组建立局灶脑缺血模型,采用PV-6000两步免疫组化染色法检测,光学显微镜观察大脑皮质存活素阳性表达,比较各组存活素阳性表达细胞数.结果 存活素在大鼠大脑皮质和海马区及血管内均有表达;其中大脑皮质表达显著,假手术组、缺血组、尼莫地平治疗组、盐水对照组存活素阳性表达细胞数分别为(16.7811.03),(61.41±3.74),(67.41±4.78),(60.15±4.58)个/HP,尼莫地平治疗组明显高于缺血组和盆水对照组差异有统计学意义(P<0.05).结论 尼莫地平对脑缺血后存活素的表达起促进作用.
-
脑缺血大鼠大脑皮层存活素及血管内皮生长因子的表达
目的 探讨存活素(Survivin)对大鼠脑缺血区神经细胞凋亡抑制的影响和介导血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达的微血管修复再通的作用.方法 18只Wistar大鼠随机分为缺血组、盐水组、假手术组、正常组,建立局灶脑缺血模型,采用PV-6000两步免疫组织化学染色法检测,光学显微镜观察大脑皮层Survivin及VEGF阳性细胞并计数.结果 缺血组、盐水组、假手术组、正常组Survivin阳性表达数分别为67.32±7.34、23.63±4.63、18.21±2.17、2.56±0.11,VEGF阳性表达数分另1为47.83±5.04、19.33±4.10、14.12±1.21、1.47±0.03,缺血组Survivin和VEGF阳性表达明显高于其他3组(P<0.05),缺血组大脑皮层神经元和室管膜上皮细胞等处Survivin阳性细胞表达明显.结论 脑缺血大鼠大脑皮层Survivin阳性细胞的表达可抑制或减慢细胞调亡,介导VEGF促进微血管修复的形成过程.
-
子痫前期患者胎盘组织及外周血中Smac、Survivin和PTEN的表达及其相关性
目的 探究子痫前期胎盘组织及外周血中第二线粒体源半胱天冬酶激活物(Smac)、存活素(Survivin)及抑癌基因(PTEN)的表达及其相关性. 方法 对本院收治的35例正常妊娠产妇(对照组)、31例子痫前期轻度产妇(轻度组)、32例子痫前期重度产妇(重度组)的胎盘组织及外周血中Smac、Survivin、PTEN mRNA、蛋白表达水平进行测定并比较. 结果 轻度组、重度组胎盘组织及外周血中的Survivin、PTEN mRNA、蛋白表达水平均显著低于对照组,重度组显著低于轻度组;轻度组、重度组胎盘组织及外周血中的Smac mRNA、蛋白表达水平显著高于对照组,重度组显著高于轻度组;子痫前期的胎盘组织及外周血中Smac与Survivin(r=-0.410,P＜0.001)、PTEN(r=-0.418,P＜0.001)蛋白表达水平均呈负相关. 结论 子痫前期的胎盘组织及外周血中Smac高表达、Survivin与PTEN低表达,三者可能呈相互协同的关系.
关键词： 抑癌基因 存活素 子痫前期 第二线粒体源半胱天冬酶激活物 相关性 -
新加良附方联合5-氟尿嘧啶对裸鼠胃癌移植瘤存活素、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响
目的：观察新加良附方联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）对人胃癌细胞（SGC-7901）裸鼠移植瘤生长抑制作用及其对肿瘤组织中存活素（Survivin）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白表达的影响。方法建立移植性人胃癌细胞（SGC-7901）裸鼠移植瘤模型，随机分为模型对照、5-Fu组及新加良附方高、中、低剂量组，联合给药组（新加良附中剂量＋5-Fu）6组。连续给药10 d，计算肿瘤抑制率，检测Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果5-Fu组，新加良附方高、中、低剂量组和联合给药组抑瘤率分别为55.03%、56.38%、41.23%、23.09%、60.28%。与模型对照组、5-Fu组、新加良附方高剂量比较，联合用药组抑瘤率较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型对照组Caspase-3[（18464.71±7537.01）、Suvivin（63449.4±50498.8）]比较，联合给药组可上调肿瘤组织Caspase-3蛋白（77539.74±50912.5）表达、下调Suvivin 蛋白（35709.1±10404.4）（，P＜0.05或0.01）；与5-Fu组Caspase-3[（47198.89±10751.2）、Suvivin（37016.8±6024.4）]、新加良附高剂量组[Caspase-3（44213.57±7041.6）、Suvivin（38811.1±7313.0）]比较，联合给药组Caspase-3蛋白表达升高（P＜0.05）、Survivin蛋白表达下降（P＜0.05）。结论联合给药组抑瘤率、调节Caspase-3、Survivin表达均优于新加良附高剂量组、5-Fu组，两药协同更有优势。
-
华蟾素对子宫内膜癌HHUA细胞存活素表达的影响
目的 探讨华蟾素对体外培养的内膜癌HHUA细胞存活素表达的影响.方法 体外培养内膜癌HHUA细胞,以不同浓度的华蟾素干预后,应用RT-PCR检测存活素的表达,以流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 内膜癌HHUA细胞对照组的存活素mRNA表达为(1.22±0.23),细胞凋亡率为(3.11±0.98)%.0.25 mg/ml 华蟾素对内膜癌HHUA细胞存活素mRNA和细胞凋亡率无影响(q=2.89、P>0.05; q=3.12、P>0.05);2.5 mg/ml华蟾素干预后,内膜癌HHUA细胞存活素mRNA表达为(0.73±0.26)、癌细胞凋亡率为(26.50±6.36)%,与对照组比较有统计学意义(q=5.68、P<0.05;q=10.23、P<0.05);但25 mg/ml华蟾豢组与2.5 mg/ml华蟾素组比较,存活素mRNA表达、细胞凋亡率均无统计学意义(q=3.49、P>0.05;q=4.35、P>0.05).结论 2.5 mg/ml华蟾素可抑制内膜癌HHUA细胞存活素mRNA的表达,抑制癌细胞增殖.
-
显性负突变存活素质粒的构建
目的 构建显性负突变存活素质粒.方法 从大鼠心脏微血管内皮细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,利用巢式PCR扩增存活索基因全序列,并引入酶切位点,利用重叠PCR对存活素基因进行定点突变,然后与带绿色荧光的真核表达载体pEGFP-N3进行重组,经测序鉴定后转染细胞,观察对细胞凋亡的影响.结果 用巢式PCR扩增出含存活素基因的496 bp产物,和引入酶切位点后452 bp产物.通过重叠PCR 3次PCR反应,得到452 bp大小的定点突变产物.重组载体经测序鉴定表明插入片段无误,转染细胞后能发出明亮的绿色荧光,Hochest染色显示细胞凋亡比空质粒对照组显著.结论 成功构建了显性负突变存活素质粒.
-
苯丁酸氮芥对淋巴瘤细胞凋亡信号通路的影响
目的:探讨苯丁酸氮芥对B细胞淋巴瘤细胞株A20细胞是否具有促凋亡效应及其在凋亡信号通路中的具体作用机制.方法:实验组使用终浓度为20 μmol/L的苯丁酸氮芥处理A20细胞,对照组使用PBS处理A20细胞.使用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞的凋亡情况,使用Western blot检测淋巴瘤细胞中Activecaspase-3、Survivin、NF-κB和pAKT的表达,使用荧光定量PCR检测淋巴瘤细胞中Survivin mRNA的表达.结果:与对照组相比较,苯丁酸氮芥干预组的A20细胞FITC+/PI+凋亡细胞的比例显著增高,而Active caspase-3的表达显著上调(=7.384,P=0.000),Survivin mRNA的表达显著降低(t=4.384,P=0.000),Survivin蛋白的表达显著降低(t=12.360,P=0.000),NF-κB蛋白的表达显著降低(=5.462,P=0.000),pAKT的表达显著降低(=7.183,P =0.000).结论:苯丁酸氮芥促进淋巴瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路、NF-κB和Survivin的表达有关.
-
垂体腺瘤中存活素和E-钙黏附蛋白及Ki-67的表达与其侵袭性的关系
垂体腺瘤是垂体前叶细胞形成的良性肿瘤,当伴有鞍区局部硬膜和骨质的侵犯及破坏时,称之为侵袭性垂体腺瘤[1],它是介于良性肿瘤和腺癌之间的、具有恶性肿瘤生物学行为的肿瘤,手术切除后容易复发.由于它的诊断不能以肿瘤细胞的异型性和核分裂来判断,且电镜检查与非侵袭性腺瘤形态也相似[1],所以诊断不能只是依靠常规病理,必须结合临床及影像学表现.我们通过观察垂体腺瘤和侵袭性垂体腺瘤中E-钙黏附蛋白(E--eadherin)和凋亡抑制因子存活素(survivin)的表达情况,以及与Ki-67表达的相关性,分析其与垂体腺瘤侵袭性的关系,为ll缶床术后进行预后判断及指导治疗提供理论依据.
-
次声对大鼠骨髓间充质干细胞分泌存活素能力影响的研究
目的:探讨次声对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌存活素(survivin)能力的影响,初步探讨次声提高BMSCs增殖活性和抑制凋亡的机制.方法:应用全骨髓培养法获取SD大鼠原代的BMSCs,培养传代,取第三代细胞分为次声干预组与空气暴露组,两组的处理时间均为60min.采用免疫荧光技术检测两组细胞存活素表达的情况.结果:次声处理组的存活素阳性细胞率(59.9±6.1),空白对照组存活素阳性细胞率(24.3±5.8),两组具有显著性差异(P＜0.05).从荧光发光强度来看次声处理组BMSC单个细胞表达存活素的荧光强度也明显大于对照组.结论:经次声作用的BMSCs在培养72h后其存活素的表达能力明显大于空气暴露组,说明次声促进BMSCs增殖、抑制其凋亡的可能机制之一为次声提高了BMSCs分泌存活素的能力.
-
胃十二指肠黏膜防护研究进展
胃肠道对于药物、缺血及再灌注、H pylori感染等内源性和外源性损伤具有多重保护机制,包括胃黏膜血流、上皮细胞屏障、碳酸氢盐分泌调节上皮细胞表面pH值等. 本文就近来宿主对H pylori感染的防御、十二指肠花生四烯酸分泌、非甾体类消炎药诱发的胃肠道损伤的保护、凋亡及治疗进行综述.
-
存活素基因表达与膀胱癌细胞增殖活性的关系
目的:探讨存活素基因在膀胱移行细胞癌中的表达,以及存活素基因表达与癌线胞的凋亡和增值活性的关系.方法:应用Western blot定量分析检测存活素蛋白在128例膀胱移行细胞瘤组织中的表达水平,原位DNA片段末端标记法检测肿瘤细胞的凋亡指数(A1),Ki-67单克隆抗体检测肿瘤细胞的增殖活性(Ki-67LI).结果:Wstern blot分析结果表明在肿瘤组织中可检测到存活素的高表达,而正常膀胱组织中无存活素蛋白的表达.存活素蛋白的表达水平在肿瘤的临床分期和病理分级间差异具有显著性(P＜0.05).Spearman秩和相关检验提示存活素蛋白的表达水平与肿瘤的增值活性呈正相关(P＜0.001),而与肿瘤细胞的AI无明显的相关性(P＞0.005).结论:存活素蛋白表达在膀胱移行细胞癌的恶性进展中起重要作用,可作为评估膀胱移行细胞癌的恶性程度和预后的指标.
-
存活素mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义
5),临床分期T<,1>～T<,2>组与T<,3>～T<,4>组在存活素mRNA表达上差异有统计学意义(P<0.05),病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间表达差异无统计学意义(P>0.05). 结论 存活素mRNA在膀胱TCC组织中表达上调,其表达与肿瘤的临床分期呈正相关,与肿瘤复发、多发有关,有望成为判断膀胱TCC分期和监测复发的重要指标.
-
存活素基因表达与前列腺癌激素依赖性的实验研究
目的 探讨存活素(survivin)基因表达与前列腺癌激素依赖性间的关系.方法 应用雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP和非依赖性细胞系PC3构建2种BALB/C鼠肿瘤模型,每组16只.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测动物去势术前后2种癌结节中存活素基因和蛋白的水平.结果 2种癌结节中均检测到存活素mRNA,而在非癌组织均未检测到.LNCaP组去势手术前、后存活素mRNA表达值分别为0.95±0.12和0.80±0.10;PC3组分别为0.93±0.11和0.85±0.10,2组间及组内比较差异均无统计学意义(P＞0.05).LNCaP组术前蛋白含量相对值(1.25±0.15)与PC3组(1.15±0.10)比较差异无统计学意义(P=0.220).去势术后LNCaP组蛋白水平(0.48±0.08)显著下降(P=0.001),而PC3组(0.90±0.10)与术前比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 存活素基因转录后水平的调控差异可能是前列腺癌对激素依赖性差异的机理之一.
-
尿脱落细胞中存活素和微小染色体支持蛋白5检测在膀胱癌诊断中的价值
目的探讨尿脱落细胞中存活素和微小染色体支持蛋白5(MCM5)检测在膀胱癌诊断中的价值. 方法膀胱移行细胞癌患者70例,平均年龄61岁,男54例,女16例.G1 25例,G2 27例,G3 18例.浅表性肿瘤(Tis～T1)47例,浸润性肿瘤(T2～T4)23例.泌尿系良性疾病患者40例,平均年龄54岁.健康志愿者10例,平均年龄55岁.采用RT-PCR方法检测尿液标本中存活素和MCM5的表达. 结果存活素、MCM5、联合存活素和MCM5检测诊断膀胱癌的敏感性分别为84.3%(59/70)、87.1%(61/70)、98.6%(69/70).膀胱癌患者尿脱落细胞中存活素与MCM5阳性率与表达水平均随病理分级及临床分期的升高而增加,但各病理分级和临床分期间存活素表达的差异无统计学意义(P>0.05),而MCM5表达在病理分级和临床分期间的差异有统计学意义(P<0.05).3种方法诊断膀胱癌的敏感性均明显高于尿细胞学检查(48.6%,P<0.05);联合存活素和MCM5诊断敏感性明显高于单独检测存活素或MCM5(P<0.05);存活素与MCM5检测敏感性的差异无统计学意义(P>0.05).4种方法诊断膀胱癌的特异性分别为94.0%、92.0%、88.0%、100.0%,差异无统计学意义(P>0.05). 结论尿液中存活素与MCM5检测是膀胱肿瘤早期诊断和预后评估的敏感、非侵入性方法,二者联合分析可提高诊断率.
关键词： 膀胱肿瘤 存活素 微小染色体支持蛋白5 -
存活素、bcl-2在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义
目的探讨存活素、bcl-2在肾透明细胞癌(RCCC)中的表达及意义.方法应用免疫组化技术检测存活素、bcl-2在82例RCCC和20例正常肾组织的表达.RCCC患者年龄26～78岁,肿瘤大小0.8～7.2 cm结果存活素在RCCC的阳性表达率为78%(64/82),高于正常肾组织的0%(0/20),P＜0.01,存活素表达与临床分期有关,但与性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无明显相关;bcl-2在RCCC的阳性表达率为70%(57/82),高于正常肾组织的35%(7/20),P＜0.01,bcl-2表达与肿瘤分化程度、临床分期无明显相关.RCCC组织中存活素表达与bcl-2表达无相关性.结论存活素、bcl-2异常表达与RCCC的发生发展密切相关,存活素高表达预示不良预后.存活素可能成为RCCC的一个重要诊断指标和治疗靶点.
-
存活素反义寡核苷酸诱导肾癌细胞凋亡及机制的实验研究
目的 观察存活素反义寡核苷酸封闭存活素的表达对肾癌细胞凋亡的影响.方法 采用脂质体介导的存活素反义寡核苷酸技术转染肾癌细胞786-0.电镜观察细胞超微结构,免疫组织化学、Western blot及RT-PCR方法检测存活素蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐比色法检测癌细胞抑制率.酶标免疫测定caspase-3活性.结果 存活素反义寡核苷酸能显著降低存活素蛋白和mRNA的表达,并呈浓度和时间依赖效应.转染后的肾癌细胞出现了大量凋亡小体.400、600、800 ng/ml反义寡核苷酸细胞凋亡率分别为(10.54±0.72)%,(12.80±0.38)%,(22.30±1.23)%,较空白对照组[(6.05±0.48)%]和正义对照组[(5.70±0.41)%]显著增加(P＜0.05).反义寡核苷酸各组caspase-3的相对活性分别为0.052±0.009,0.078±0.004和0.092±0.002,与空白对照组(0.027±0.008)和正义对照组(0.028±0.001)相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 存活素反义寡核苷酸能显著下凋存活素基因表达,明显促进肾癌细胞786-0凋亡并抑制其增殖;可能是通过上调caspase-3表达来促进凋亡.
-
尿膀胱癌抗原、透明质酸和存活素联合应用对膀胱癌的诊断价值
目的评价联合运用尿膀胱癌抗原(UBC)、透明质酸(HA)和存活素诊断膀胱癌的临床应用价值. 方法 64例膀胱癌患者、20例泌尿系良性疾病患者在膀胱镜检查前留尿,分别进行UBC、HA、存活素和脱落细胞学检测,比较4种方法诊断膀胱癌的价值.膀胱癌患者肿瘤分级G1 11例,G2 38例,G3 15例;病理分期pTis 2例,pT1 36例,pT1 16例,≥pT2 10例. 结果 UBC、HA和存活素诊断膀胱癌的敏感性分别为85.9%(55/64)、89.1%(57/64)、93.8%(60/64),与脱落细胞学(40.6%)比较,差异有统计学意义(P<0.01),4种方法诊断膀胱癌的特异性分别为85.0%(17/20)、80.0%(16/20)、95.0%(19/20)和95.0%(19/20).各分级和分期UBC、HA和存活素诊断膀胱癌的敏感性均高于尿脱落细胞学检查;UBC值各分级和分期比较差异无统计学意义(P>0.05).HA检测值G2、G3组均明显高于G1组(P<0.01),但G2、G3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各分期之间比较差异无统计学意义(P>0.05).存活素检测各分级和分期之间比较差异无统计学意义(P>0.05).而对尿细胞学来说,肿瘤分级越高,敏感性越高(P<0.01),各分期之间比较差异无统计学意义(P>0.05).联合应用UBC、HA和存活素诊断膀胱癌的敏感性和特异性均达到100%. 结论尿中UBC、HA和存活素是早期诊断膀胱癌的较好肿瘤标记物,3项检测联合能提高诊断的敏感性和特异性.
-
凋亡抑制基因存活素在膀胱癌中的表达及意义
目的探讨膀胱癌组织中凋亡抑制基因存活素(survivin)表达在膀胱癌发生发展中的作用.方法应用免疫组化(SP)法,对60例膀胱移行细胞癌组织标本中存活素的表达进行检测.男48例,女12例.平均年龄59岁.病理分级Ⅰ级16例,Ⅱ级24例,Ⅲ级20例.临床分期T113例,T215例,T3 21例,T411例.复发性膀胱癌21例.10例非肿瘤膀胱组织作对照.结果60例膀胱癌组织中存活素阳性表达36例(60.0%),10例非肿瘤膀胱组织存活素表达均为阴性.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌组织存活素阳性表达率分别为37.5%(6/16)、66.7%(16/24)、70.0%(14/20),Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ级比较差异有统计学意义(P《0.01).T1、T2、T3、T4期膀胱癌组织存活素阳性率分别为53.8%(7/13)、60.0%(9/15)、61.9%(13/21)、63.6%(7/11),呈逐渐增高趋势,但组间两两比较差异均无统计学意义(P》0.05).复发性膀胱癌存活素阳性率为80.9%(17/21).结论存活素与膀胱癌发生发展有关,检测膀胱癌组织中存活素表达可能对判断膀胱癌预后有一定意义.
-
存活素、caspase-3在不对称良性前列腺增生中的表达及意义
目的 观察存活素、caspase-3在不对称BPH中的表达情况,探讨凋亡在BPH发病机制中的作用. 方法 采用自身对照设计,应用PV二步法免疫组织化学方法检测25例不对称BPH增生明显叶与不明显叶中存活素、caspase-3的表达情况. 结果 增生明显叶组存活素蛋白阳性率为(22.08±16.33)%,不明显叶组为(7.64±5.45)%,2组间差异有统计学意义(t=4.817,P<0.01).增生明显叶组caspase-3蛋白阳性率为(33.12±21.01)%,不明显叶组为(51.52±27.27)%,2组间差异有统计学意义(t=5.770,P<0.01).两者在增生明显叶组表达呈负相关(r=0.474,P<0.05);而在增生不明显叶组表达无相关性(r=0.313,P>0.05). 结论 存活素、caspase-3引起腺体的不同凋亡状态与前列腺增生程度密切相关,提示凋亡机制在BPH的发生与发展中发挥重要作用.
-
存活素及人类白细胞抗原I类分子与肾透明细胞癌患者预后的关系
目的：探讨存活素和人类白细胞抗原I类分子（ HLA-Ⅰ）在肾透明细胞癌（ CCRCC）组织中的表达及其与CCRCC患者预后的关系。方法应用免疫组化方法检测2006年2月至2010年2月90例CCRCC组织及其中10例癌旁正常肾组织中存活素和HLA-Ⅰ的表达情况，应用单因素及多因素分析存活素和HLA-Ⅰ与CCRCC患者年龄、性别、分级、分期、淋巴结情况等临床特征以及与预后的关系。结果 CCRCC 组织中存活素的表达阳性率为82．2％（74/90），HLA-Ⅰ表达下调率为67．8％（61/90），存活素阳性率与肿瘤分级（P＝0．016）、分期（P＝0．000）及淋巴结转移（P＝0．001）相关，而HLA-Ⅰ的表达下调率与患者年龄、性别以及肿瘤分级、分期和淋巴结转移均无关（ P＞00．5）。存活素表达阴性者的无瘤生存率（25．0％，4/16）高于表达阳性者（52．7％，39/74），差异有统计学意义（P＝0．037）；HLA-Ⅰ表达正常者的无瘤生存率（27．6％，8/29）高于表达下调者（60．7％，37/61），差异有统计学意义（ P＝0．020）。单因素及多因素分析结果表明存活素（P ＝0．033）、HLA-Ⅰ（ P＝0．026）及两者结合（P＝0．014）可作为预测CCRCC患者预后的重要指标。结论存活素阳性表达及HLA-Ⅰ表达下调对预测CCRCC患者无瘤生存期及总生存期有重要意义。
关键词： 肾透明细胞癌 存活素 人类白细胞抗原Ⅰ类分子 免疫组化 预后
