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祛痰活血颗粒对NAFLD模型大鼠脂肪组织AQP-7,p38MAPK表达的影响
目的:探讨祛痰活血颗粒治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的作用,并探讨其相关的作用机制.方法:40只SD大鼠随机分成正常组(6只),模型组(34只);除正常组外,采用高脂饮食诱导的方法诱导NAFLD大鼠模型,确认造模成功后,将剩余模型组(30只)随机分为5组,每组6只,分别为模型组,祛痰活血颗粒高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg-1),SB203580组(3 mg·kg-1),分别予以灌胃祛痰活血颗粒及腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580,连续干预4周.苏木素-伊红(HE)及油红O染色观察肝脏病理变化;试剂盒测定血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),肝脏TG;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测脂肪组织水通道蛋白7(AQP7)及p38分裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK) mRNA表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝脏游离脂肪酸(FFA),脂肪组织AQP7和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肝脏脂肪变性明显,血清TG,TC,AST,ALT和肝脏TG,FFA明显升高,脂肪组织中AQP7 mRNA及AQP7含量表达降低,p38MAPK mRNA及p-p38MAPK含量升高(P＜0.05);与模型组比较,祛痰活血颗粒和SB203580可减轻NAFLD大鼠肝脏脂肪变性程度;明显降低NAFLD大鼠的血清TG,TC,AST,ALT,肝脏TG,FFA(P ＜0.05);各中药组和SB203580组大鼠脂肪组织AQP7 mRNA和AQP7含量表达明显升高,p38MAPK mRNA和p-p38MAPK含量明显降低(P＜0.05).结论:祛痰活血颗粒能减轻或者逆转肝脏的脂肪变性,其机制可能与抑制脂肪组织p38M APK活化、上调AQP7表达,增加甘油人血代谢,减少进入肝脏的FFA,从而降低肝脏TG蓄积有关.
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乌司他丁通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路治疗大鼠脓毒症急性肝损伤的相关性研究
目的 探讨乌司他丁对脂多糖(LPS)诱导的大鼠脓毒症急性肝损伤的治疗作用及相关机制,并与p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路特异性阻断剂SB203580的疗效进行比较.方法 通过尾静脉注射5 mg/kg的LPS制造LPS诱导的大鼠脓毒症急性肝损伤模型.将清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠32只分为4组:空白组(尾静脉注射1 mL等渗NaCl溶液),LPS组(尾静脉注射1 mL的LPS),LPS+乌司他丁(UTI)组(建模后立即腹腔注射1 mL乌司他丁),LPS+p38MAPK通道阻断剂(SB)组(建模后立即腹腔注射1 mL SB203580),每组8只.建模后24 h处死大鼠,取下腔静脉血测定大鼠血清中谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)、胆红素(BIL)和碱性磷酸酶(AKP)的浓度,利用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western-blotting法测定大鼠肝组织磷酸化p38蛋白水平表达,以及通过肝组织病理切片和电镜下观察肝细胞微结构的变化.结果 建模后24 h,LPS组有2只大鼠死亡.四组大鼠血清AKP水平无显著性差异(F=1.153,P=0.351);与空白组比较,LPS组大鼠血清ALT[(10.7±1.8)U/L vs.(46.3±5.0)U/L]、BIL[(0.63±0.12)μmol/L vs.(1.55±0.16)μmol/L]、肝组织TNF-α[(4621±793)ng/L vs.(7222±773)ng/L]、磷酸化p38蛋白水平[(12073±172)ng/L vs.(15515±630)ng/L]均显著升高(P均<0.05);病理切片提示LPS组肝细胞水样变性、炎症细胞浸润、肝细胞再生;电镜结果也提示肝细胞核固缩,线粒体嵴肿胀、断裂或者消失,内质网结构不清.而LPS+UTI组和LPS+SB组肝组织TNF-α、磷酸化p38蛋白表达均与空白组无显著差异(P均>0.05);病理切片提示两组肝细胞水样变性、炎症细胞浸润、肝细胞再生较LPS组轻,但较空白组仍严重;电镜结果显示肝细胞核、线粒体及内质网结构变化较LPS组减轻.与空白组相比,LPS+SB组血清ALT无显著差异(P>0.05),而LPS+UTI组血清ALT明显升高[(10.7±1.8)U/L vs.(29.5±2.5)U/L,P<0.05],提示SB203580对血清ALT作用更明显;而与空白组比较,LPS+UTI组血清BIL水平无显著差异(P>0.05),而LPS+SB组血清BIL明显升高[(0.63±0.12)μmol/L vs.(1.52±0.20)μmol/L,P<0.05],提示乌司他丁对血清BIL作用更明显.结论 乌司他丁可减轻LPS引起的大鼠脓毒症急性肝损伤,是通过p38MAPK通路来发挥炎症抑制作用的.与p38MAPK通路特异性阻断剂比较,两者在减轻TNF-α、磷酸化p38蛋白等作用上相似,但是对血清学指标的影响有一定差别.
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罗格列酮经p38MAPK通路下调胃癌细胞基质金属蛋白酶2表达
在我国,胃癌的死亡率居各类恶性肿瘤之首,侵袭和转移是其主要致死原因.过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ/)是一类由配体激活的核转录因子,与恶性肿瘤的关系已越来越引起人们的关注.以岁格列酮为代表的唑烷二酮类化合物是一类高亲和力PPARγ激动剂,临床用作胰岛素增敏剂.研究证实PPARγ激动剂对多种肿瘤细胞具有抑制作用,我们前期研究已经发现罗格列酮能够通过非PPARγ依赖途径抑制来源于胃癌转移瘤的SGC-7901细胞的侵袭转移,并可下调基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达~[1].本研究拟在此基础上探讨罗格列酮下调MMP-2表达的分子机制.
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探讨PNS对体外高糖培养的大鼠系膜细胞增殖和凋亡的影响及机制
高血糖、糖基化产物、血管紧张素Ⅱ、血流动力学障碍以及多种细胞因子、生长因子及趋炎症反应物质的产生,是导致肾小球硬化和肾间质纤维化主要发病机制.三七总苷(PNS)是三七的主要有效成分,通过下调残肾组织内的TG表达,抑制肾脏固有细胞表型转化而起抗纤维化作用有关.探讨PNS对大鼠肾系膜细胞增殖情况和细胞调亡形态学及P38MAPK通路在该过程中的可能作用,寻找防治糖尿病肾病的新方法.
关键词： 三七总苷 糖尿病肾病 p38MAPK通路 大鼠系膜细胞增殖和凋亡 -
六味地黄丸对椎间盘体外退变模型髓核细胞MAPK信号级联的影响
背景:JNKs和p38作为丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族中重要的成员,对细胞增殖、分化、转化及凋亡起着至关重要的作用.目的:观察六味地黄丸对兔椎间盘体外退变模型髓核细胞MAPK信号级联的影响.方法:将100个带终板软骨的椎间盘随机分为空白对照组、肿瘤坏死因子α组、p38-JNK/SAPK阻断组、六味地黄丸组、肿瘤坏死因子α+含六味地黄丸组,每组20个.肿瘤坏死因子α组培养液中含10 mg/L肿瘤坏死因子α2μL;p38-JNK/SAPK阻断组培养液中含p38MAPK特异性阻断剂SB203580,JNK特异性阻断剂SP600125各20μmol/L 10μL,10 mg/L肿瘤坏死因子α2μL;六味地黄丸组培养液中含体积分数为10%六味地黄丸血清;肿瘤坏死因子α+六味地黄丸组培养液中含10 mg/L肿瘤坏死因子α2μL,体积分数为10%六味地黄丸血清,分别于培养的第2,4,8,14天收集标本待测.结果与结论:RT-PCR、Western Blot检测显示,随着培养时间的延长,髓核细胞JNK及P38通路的mRNA含量、蛋白表达量明显逐步升高,而含六味地黄丸血清可以延缓这一进程,提示六味地黄丸可以通过一定程度阻滞JNK及P38通路的信号表达,延缓椎间盘退变进程,起到保护椎间盘的作用.
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环孢素引起肾小管上皮细胞培养液中肾损伤分子-1水平升高的机制
目的：探讨环孢素（CsA）引起人肾小管上皮细胞（HKC）培养液中肾损伤分子-1（KIM-1）水平升高的作用机制，阐明KIM-1表达与 p38 MAPK通路和 EKR1/2 MAPK通路的关系。方法：将处于对数生长期的 HKC分为空白组、CsA损伤组、CsA与 p38激酶抑制剂合用组、p38激酶抑制剂组、CsA与 ERK1/2激酶抑制剂合用组和 ERK1/2激酶抑制剂组。MTT法检测各组 HKC增殖抑制率，ELISA法测定各组 HKC上清液中 KIM-1水平，流式细胞术检测各组细胞存活率、细胞凋亡率和细胞坏死率。结果：与空白组比较， CsA损伤组细胞上清液中KIM-1水平显著升高（P＜0.05），细胞存活率显著降低（P＜0.05），细胞凋亡率和细胞坏死率显著升高（P＜0.05）；p38激酶抑制剂组和 ERK1/2激酶抑制剂组中细胞存活率、细胞凋亡率和细胞坏死率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。与CsA损伤组比较，CsA与 p38激酶抑制剂合用组、CsA与 ERK1/2激酶抑制剂合用组细胞上清液中KIM-1水平显著降低（P＜0.05），细胞存活率显著升高（P＜0.05），细胞凋亡率和细胞坏死率显著降低（P＜0.05）。结论：p38 MAPK通路和ERK1/2 MAPK通路参与CsA素引起肾小管上皮细胞培养液中KIM-1水平升高的过程，KIM-1的表达可能成为临床监测CsA肾毒性的生化指标。
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卵巢癌耐药细胞株的P38MAPK活性与凋亡关系的研究
目的 研究卵巢癌细胞耐药过程中P38MAPK活性与凋亡的关系,探讨P38MAPK信号转导途径在卵巢癌细胞耐药中的作用.方法 流式细胞技术分析P38MAPK特异性抑制剂SB203580对A2780/Taxol细胞凋亡的影响;利用免疫细胞化学法观察SB203580处理后细胞内P38MAPK表达水平.四甲基偶氮唑蓝检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),Western blot检测细胞内P-gp蛋白表达.结果 与未干预组和对照组比较,SB203580(10μmol/L)干预24h后A2780/Taxol细胞凋亡率为23.7%(P＜0.01);A2780/Taxol细胞的P38MAPK表达颗粒密度减低,数量减少;紫杉醇对A2780/Taxol细胞的IC50显著降低(P＜0.01);P-gp蛋白表达水平明显降低.结论 P38 MAPK信号转导途径与卵巢癌耐药密切相关,可能参与卵巢癌耐药的形成.其可能机制为P38MAPK通路起到保护A2780/Taxol细胞逃避凋亡的作用.因此,阻断该通路可增强卵巢癌耐药细胞发生凋亡.
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利拉鲁肽对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响的体外研究
目的 2型糖尿病治疗药物二甲双胍、胰岛素及类似物、噻唑烷二酮类及磺脲类等可通过调节丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和(或)磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路影响肿瘤细胞生长.利拉鲁肽作为一种新型降糖制剂,其安全性也备受关注.文中探讨胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)类似物利拉鲁肽(Liraglutide)对人乳腺癌细胞系(michigan cancer foundation-7,MCF-7)细胞增殖的影响及其与p38MAPK信号通路的关系. 方法 利拉鲁肽以1、10、100、1000 nmol/L作用于MCF-7细胞24、48、72、96h,MTT法测细胞增殖情况,不同浓度利拉鲁肽及联合p38MAPK抑制剂作用于MCF-7细胞96h,流式细胞术测细胞周期,蛋白免疫印迹(Western blot)测定p38MAPK磷酸化程度. 结果 ①与对照组相比,不同浓度利拉鲁肽作用24h、72h、96h及1nmol/L、10nmol/L作用48h均表现为显著抑制作用(P＜0.05),其中组间两两比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05),且1nmol/L抑制作用明显;1nmol/L利拉鲁肽作用于MCF-7细胞24、48、72、96h均成抑制作用,组间差异有统计学意义(P＜0.05);②不同浓度利拉鲁肽作用于人乳腺癌MCF-7细胞96 h后,与对照组相比,S+G2/M期细胞数目比例均有所减少,差异有统计学意义(P＜0.05);③1 nmol/L利拉鲁肽联合p38MAPK抑制剂SB203580作用于人乳腺癌MCF-7细胞96h后,S+G2/M期细胞数比例较1 nmol/L利拉鲁肽组显著增加(P＜0.05),与对照组相比无显著差异(P＞0.05).④Western blot法测定MCF-7细胞通过1nmol/L利拉鲁肽作用96 h后,与对照组比较,利拉鲁肽组p38MAPK磷酸化程度增加. 结论 利拉鲁肽对乳腺癌MCF-7细胞增殖具有抑制作用,呈时间依赖性;可能涉及p38MAPK信号通路.
关键词： 利拉鲁肽 人乳腺癌MCF-7细胞 细胞周期 p38MAPK通路 -
血管性痴呆患者p38MAPK通路变化及参茸养心益肾胶囊干预作用
目的：观察参茸养心益肾胶囊对血管性痴呆（AD）患者脑脊液和外周血p38MAPK通路主要因子P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达的影响。方法血管性痴呆患者31例为病例组，给予参茸养心益肾胶囊治疗，对比治疗前后简易智能量表（MMSE）评分和长谷川痴呆量表（HDS）评分变化；治疗前后以Western blot检测患者脑脊液和空腹静脉血P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达量。以同期入院的26例非痴呆患者为对照组，进行对比分析。结果病例组治疗前MMSE、HDS评分分别为（21.3±3.5）分、（19.6±3.4）分，治疗后分别上升至（28.2±4.8）分、（24.3±4.2）分，差异有统计学意义（P﹤0.01）。治疗前病例组脑脊液、血P-p38MAPK/p38MAPK表达水平为（0.983±0.106）、（0.867±0.113），明显高于对照组的（0.248±0.042）及（0.336±0.146）（P﹤0.01）；治疗后病例组P-p38MAPK蛋白表达量明显降低，P-p38MAPK/p38MAPK表达水平显著低于治疗前（P﹤0.05）。结论参茸养心益肾胶囊可能通过抑制血管性痴呆患者p38MAPK磷酸化激活，干预p38MAPK信号通路级联反应而获得临床疗效。
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胶质细胞p38MAPK与神经病理性疼痛的相关性研究进展
神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)是指由于中枢或外用神经系统的损伤或功能紊乱引起的疼痛综合征,主要以自发性疼痛、痛觉过敏和痛觉超敏为特征.新研究表明,神经胶质细胞参与痛信号的产生和传递,在诱导和启动痛增强反应中发挥重要作用,胶质细胞在神经病理性疼痛中的作用成为目前疼痛研究的热点.进一步明确胶质细胞p38MAPK在神经病理性疼痛中的作用,将对慢性神经病理性疼痛的治疗提供新的思路.
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p38MAPK/14-3-3γ通路在LPS预处理对抗心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
目的 研究p38MAPK/14-3-3γ通路在LPS预处理对抗缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用.方法 采用原代培养乳鼠心肌细胞,建立A/R损伤模型及APC、LPS预处理保护模型.实验结束后测定p38MAPK 磷酸化蛋白表达及14-3-3γ蛋白表达,同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH) 活性、四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡、线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放、流式细胞仪检测线粒体膜电位.结果 LPS预处理对随后心肌A/R损伤有类似APC的保护作用,同时伴随p38 MAPK的磷酸化水平升高和14-3-3γ蛋白表达升高;给予SB203850特异性阻断p38MAPK通路,则14-3-3γ蛋白表达明显下调,并且心肌细胞LDH值升高,细胞存活率下降,心肌细胞的凋亡指数升高,mPTP开放加剧,线粒体膜电位降低.结论 LPS预处理对心肌细胞A/R损伤有保护作用,其机制可能是通过激活p38 MAPK,上调14-3-3γ的表达实现.
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乳腺癌耐药性中MAPK信号转导通路与EGR-1关系的研究
目的 探讨乳腺癌细胞阿霉素耐药中p38MAPK通路与EGR-1活性的关系.方法 用流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、RT- PCR及Western Blot等方法分别检测SB203580 (15μmol/L)干预后细胞的凋亡、细胞内阿霉素浓度及细胞对阿霉素敏感性的改变;EGR-1 mRNA表达及p-gp、磷酸化p53蛋白及p38蛋白表达情况.结果 经SB203580(15μmol/L)干预,流式细胞仪检测见MCF-7/Adr细胞发生显著凋亡,并呈一定时间依赖性;细胞内阿霉素浓度显著增加;MCF-7/Adr细胞对阿霉素药物的耐受性显著降低;伴随p38MAPK通路活性抑制和EGR-1 mRNA表达增加,磷酸化p53蛋白表达显著上调,而p-gp蛋白显著下调.结论 提示p38MAPK通路与乳腺癌细胞阿霉素耐药密切相关,p38MAPK通路调控的EGR-1激活参与乳腺癌细胞阿霉素耐药的形成.
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乳腺癌耐药性与MAPK信号转导关系的研究
目的 探讨乳腺癌细胞阿霉素耐药性与p38MAPK通路的关系.方法 用流式细胞术检测SB203580 (15μmol/L)干预后细胞的凋亡、细胞内阿霉素浓度的改变、细胞对阿霉素敏感性.结果 经SB203580(15μmol/L)干预24h和48h后,流式细胞仪检测见MCF-7/Adr细胞发生显著凋亡,凋亡率分别为25.36±1.17%和38.21±1.25%,并呈一定时间依赖性 (P<0.05);显著高于空白对照组及DMSO组MCF-7/Adr细胞的0.65±0.21%和0.81±0.16% (P<0.01);细胞内阿霉素浓度亦显著增加,平均荧光强度分别为32.45±2.36及41.66±3.12,均显著高于空白对照组及DMSO组的14.17±1.45及16.28±0.63 (P<0.01);另外,SB203580干预48h使MCF-7/Adr细胞内阿霉素浓度增加的作用强于24h组,两者间差异有统计学意义 (P<0.05).结论 提示p38MAPK通路与乳腺癌细胞阿霉素耐药密切相关.
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顺铂对肿瘤间充质干细胞中IL-6表达的调控及p38MAPK通路参与机制
目的 探讨顺铂(CDDP)对肿瘤间充质干细胞(MSCs)中白细胞介素-6(IL-6)表达的调控作用与参与机制.方法 采用CDDP分别处理小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞和MSCs,聚合酶链反应阵列(PCR Array)检测、筛选其IL-6表达改变,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)等方法进一步验证.Western blotting检测CDDP处理后MSCs中p38MAPK通路的表达改变;并通过该通路特异性抑制剂抑制其激活,ELISA检测IL-6的表达.结果 CDDP处理LLC细胞后,IL-6的表达未见有统计学意义的改变(P>0.05).PCR Array结果显示,CDDP处理MCSs 24 h后,各白细胞介素因子有不同程度的表达改变,其中IL-6表达上升为显著;进一步研究证实,CDDP作用于MCSs 3、6和24 h后,IL-6 mRNA和蛋白表达均升高,差异具有统计学意义(IL-6 mRNA:P=0.218;P=0.007;P<0.001;蛋白表达:P=0.001;P<0.001;P<0.001).CDDP处理后MSCs中p38和pp38的表达均明显增强,且pp38/p38比值明显升高;采用SB203580抑制p38MAPK通路后,CDDP所致的IL-6上调表达被部分逆转.结论 CDDP对LLC细胞中IL-6的表达无统计学意义影响,但可显著上调MSCs中IL-6的表达.CDDP处理后,MSCs中p38MAPK通路表达上调,抑制该通路后可下调IL-6的表达,提示CDDP可能通过p38MAPK通路调控IL-6在MSCs的表达.
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全反式维甲酸在成年小鼠神经干细胞分化中的调控作用及机制
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对成年小鼠神经干细胞(NSCs)的调控、信号通路及对细胞色素P450(CYP450)家族的影响.方法 分离并培养成年小鼠脑室下区NSCs,将细胞分为ATRA组和对照组,ATRA组加入10-6 mol/L ATRA,对照组正常培养.采用流式细胞仪检测两组细胞表面标记物,计算神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和NSCs占总细胞数的百分比;Real-time PCR方法检测CYP450家族相关基因表达情况,筛选出有统计学意义的基因;ELISA法测定细胞色素P450还原酶(CPR)的活性;Western blotting法检测P38 MAPK通路相关蛋白P38、p-P38蛋白的相对表达量.结果 ATRA组NSCs主要是向神经元分化,也有一部分向星形胶质细胞分化,少突胶质细胞较少.与对照组比较,ATRA组P450家族基因中CYP26A1、CYP26B1、CYP26C1表达上调(P均<0.05).ATRA组CPR活性以及p-P38蛋白表达量均较对照组升高(P均<0.05).结论 ATRA促进小鼠NSCs向神经元分化,可能通过上调CYP450中的CYP26家族基因、增加CPR活性以及P38 MAPK通路发挥调控作用.
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针刺"内关"预处理对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用及机制研究
目的 探讨电针"内关"预处理是否通过p38 MAPK信号通路来影响心肌缺血再灌注损伤.方法 选用3月龄Wistar雄性大鼠40只,体重(220±23)g,编号后按随机数字表分入对照组(仅穿线,不结扎)、模型组、电针预处理组、电针预处理+SB230580组,每组10只.通过阻断左冠状动脉前降支缺血30 min,再灌注120 min,检测心肌缺血再灌注损伤后各项心功能指标(舒张末期压力、左室收缩期平均压、短轴缩短率和射血分数),检测心肌组织中活性氧(ROS)含量,超氧化物歧化酶SOD活性,丙二醛(MDA)含量及ATP含量,透射电镜下观察心肌超微结构的变化.结果 与对照组比较,模型组各项心功能指标中舒张末期压力升高,左室收缩期平均压、短轴缩短率和射血分数均降低(均P<0.05),梗死面积和梗死程度均升高(均P<0.01),心肌肌纤维溶解、断裂,间质增大,心肌细胞肿胀明显,SOD活性及ATP含量明显下降,ROS及MDA含量明显上升(均P<0.05),电针预处理可明显减轻这种变化,差异具有统计学意义(均P<0.05),SB230580抑制剂可减弱电针"内关"预处理的这种作用(均P<0.05).结论 电针"内关"预处理能显著改善心肌缺血再灌注损伤后心功能及心肌细胞活性,降低心肌梗死面积,减轻线粒体的肿胀程度,保护线粒体的完整性.这种保护作用可能与改善心肌细胞的呼吸功能有关.
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石决牡蛎汤通过p38MAPK通路改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究
[目的]探讨石决牡蛎汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的作用.[方法]将40只16周龄自发性高血压大鼠随机分为模型对照组,石决牡蛎汤高、中、低剂量组,卡托普利组,每组8只;将8只Wistar-Kyoto大鼠设为正常对照组.治疗8周后,采用苏木精一伊红(HE)染色法观察胸主动脉形态,光镜下采用计算机图像分析系统测量血管内膜中层厚度(IMT)、管腔直径(LD),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中内皮素-1(ET-1)水平,硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)水平,免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在胸主动脉组织中的表达水平.[结果]与模型对照组比较,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组收缩压和舒张压、ET-1水平均显著降低,NO水平增高,中药高剂量组及卡托普利组IMT、IMT/LD值显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学结果显示,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组能较显著抑制p-p38MAPK在胸主动脉的表达.[结论]石决牡蛎汤可能通过抑制p38MAPK信号通路、调节ET/NO系统改善自发性高血压大鼠血管重构.
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右美托咪定对抗化学性低氧引起神经细胞的损伤及其机制
目的 探讨α2肾上腺素能受体激动剂右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)是否通过抑制p38MAPK通路保护PC12细胞对抗化学性低氧引起的损伤.方法 应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞以建立化学性低氧损伤神经细胞模型.采用Western blot法测定p38MAPK蛋白的表达水平,CCK-8比色法检测细胞存活率,Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学及数量改变,罗丹明123染色荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP).结果 在60～180 min 的时间范围内,600 μmol/L CoCl2处理PC12细胞后明显地促进磷酸化p38MAPK表达;在120 min,p38MAPK表达量达到高峰;400 μmol/L Dex不仅能保护PC12细胞对抗CoCl2引起的细胞毒性、致凋亡作用及MMP损伤作用,还能抑制CoCl2对p38MAPK表达的上调作用;p38MAPK抑制剂SB203580能模拟Dex的抗化学性低氧损伤的神经保护作用,使细胞存活率升高,凋亡细胞数量减少及MMP升高.结论 Dex能保护神经细胞对抗化学性缺氧引起的损伤,抑制p38MAPK通路可能是其作用机制之一.
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ERK1和p38MAPK通路在大蒜素抑制缺血再灌注大鼠小肠黏膜细胞凋亡中的作用
小肠黏膜细胞凋亡可在缺血再灌注损伤(I/R)发生后显著增加~([1]),并可能成为其功能障碍的主要原因.
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氯喹通过激活P38MAPK通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡
目的:研究氯喹对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并初步研究其可能的机制.方法:体外培养HepG2细胞,采用MTT检测不同浓度(0、10、20和40μmol/L)氯喹作用不同时间(24、48和72 h)后对细胞增殖的影响;用DAPI染色观察氯喹处理细胞24h后细胞核的变化;流式细胞术检测氯喹对HepG2细胞凋亡的影响;Western blot技术检测氯喹对HepG2细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bax、P-P53、P38MAPK和P-P38MAPK蛋白表达的影响.结果:与对照组比较,在上述3个时间点10、20、40μmol/L氯喹(10 μmol/L氯喹作用24 h组除外)对人肝癌HepG2细胞的增殖均有明显抑制作用(P均＜0.05);荧光显微镜下发现,10、20、40μmol/L氯喹处理24h后均可引起HepG2细胞不同程度的核浓集、固缩等典型凋亡形态变化;流式细胞术结果提示10、20、40μmol/L氯喹能诱导HepG2细胞凋亡(P均＜0.05);Western blot结果显示20和40 μmol/L氯喹作用HepG2细胞后,P-P53、P-P38MAPK、剪切后活化型Caspase-3和Bax蛋白表达量增加(P均＜0.05),Bcl-2表达下降,Caspase-3和P38MAPK表达无明显变化(P＞0.05).结论:氯喹能够抑制人肝癌HepG2细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与P38MAPK通路有关.
