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  • 脑苷肌肽治疗急性脑梗死的疗效及对血清基质金属蛋白酶-7水平的影响

    作者:李玉文

    目的:探讨脑苷肌肽注射液治疗急性脑梗死患者的临床效果及对血清基质金属蛋白酶7(MMP‐7)水平的影响。方法选取我院住院治疗的急性脑梗死患者70例,随机均分为2组,分别行常规治疗与脑苷肌肽治疗,对比2组疗效与MMP‐7水平。结果治疗3周后观察组治疗有效率显著高于对照组,NIHSS评分与血清MMP‐7水平显著低于对照组。结论脑苷肌肽注射液能够有效改善患者神经功能缺损情况,并有效降低患者血清基质蛋白酶水平。

  • MMP3、MMP7在腰椎间盘突出组织中的表达及其临床意义

    作者:钱祥;姜宏;王拥军;刘锦涛;徐坤林;李晓春

    目的:检测腰椎间盘突出症患者突出椎间盘组织中基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶7(MMP-7)的表达,为研究椎间盘突出重吸收提供生化依据,以便进一步了解腰椎间盘突出组织重吸收的发生机制.方法:运用免疫组织化学法,通过兔抗人MMP-3、MMP-7的单克隆抗体,对30例突出腰症椎间盘标本进行染色.结果:在突出椎间盘组织中,破裂型比非破裂型MMP-3、MMP-7的阳性表达率更高,其差异有统计学意义.结论:MMP-3、MMP-7与椎间盘突出重吸收可能有关,破裂型比非破裂型更易于重吸收.

  • 子宫内膜癌中MMP-7、E-CAD的表达及意义

    作者:关小倩;王志坚

    目的探讨MMP-7、E-CAD在子宫内膜癌组织中的表达及意义.方法利用免疫组化方法观察72例内膜癌组织、64例癌前病变组织和80例正常子宫内膜中MMP-7及E-CAD的表达情况.结果内膜癌组、癌前病变组MMP-7的阳性表达明显高于正常内膜组(P<0.01),而前两组之间无显著差异.内膜癌组E-CAD的阳性表达明显低于正常内膜组和癌前病变组(P<0.05),后两组之间无显著差异.随临床分期增高、组织分化程度降低、淋巴结转移,MMP-7表达明显增强,E-CAD表达明显下降(P<0.01).E-CAD与MMP-7表达之间存在负相关(r=-0.360,P<0.001).结论 MMP-7在内膜癌发生过程中起了重要作用,MMP-7表达增强和E-CAD表达减少,是内膜癌浸润和转移的重要促进因素.

  • 硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化及基质金属蛋白酶7和缝隙连接蛋白43表达的影响

    作者:孟艳霞;邓立普

    目的 探讨硫化氢(H2S)对糖尿病大鼠心肌纤维化及基质金属蛋白酶7(MMP-7)和缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响.方法 将52只SD大鼠随机分为4组,每组13只:糖尿病模型组(STZ组),硫化氢干预模型组(STZ+H2S组),硫化氢干预正常组(H2S组),正常对照组(Control组).予以链脲佐菌素(STZ)(40 mg/kg)处理STZ组和STZ+H2S,复制糖尿病大鼠模型,复制成功后,每天予以硫氢化钠NaHS溶液(100μmol/kg)处理STZ+H2S组与H2S组,予以等量生理盐水对Control组行腹腔注射,8周后将大鼠处死.VG染色观察4组大鼠心肌组织病理学改变,Western blot检测IV型胶原蛋白、MMP-7、Cx43蛋白的表达.结果 STZ组与Control组相比,STZ大鼠心肌细胞排列紊乱明显,细胞间胶原沉积增加,心室肌组织中Ⅳ型胶原蛋白及MMP-7蛋白表达增加(P<0.05),而Cx43蛋白表达降低(P<0.05);STZ+H2S组与STZ组相比,STZ+H2S组心肌细胞排列紊乱有所改善,细胞间胶原沉积减少,心室肌组织中Ⅳ型胶原蛋白及MMP-7蛋白表达也减少(P<0.05),Cx43蛋白表达上调(P<0.05).结论 H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与通过调控MMP-7上调Cx43蛋白表达有关.

  • 脑苷肌肽辅助治疗脑梗死老年患者的临床价值分析

    作者:蔡秀颜;杨职;袁莉;沐泽凤

    目的:探讨脑苷肌肽辅助治疗脑梗死老年患者的临床价值.方法:选择茂名市人民医院在2012年1月-2014年1月期间接受治疗的130例脑梗死老年患者,按照随机数字表法分成研究组与对照组,对照组患者按照常规方法进行治疗,研究组于此基础上应用脑苷肌肽进行辅助治疗,对两组患者临床疗效及治疗后血清基质金属蛋白酶7(MMP-7)表达进行统计分析.结果:研究组在完成治疗后患者总有效率为93.85%,比对照组的83.08%明显提高,其血清MMP-7表达对比对照组有降低现象,组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:脑苷肌肽辅助治疗脑梗死老年患者具有较为明显效果,可以提高临床疗效,降低血清MMP-7表达.

  • Survivin和MMP-7在结肠癌组织中的表达及临床意义

    作者:王国强;卢震海;方淯靖;陈功;周志伟;潘志忠;万德森

    背景与目的:临床发现同一分期的结肠癌患者实行同一方案治疗预后不同.寻找能单独或结合临床病理分期更准确地判断患者预后的指标非常必要.本研究选择有争论的增殖转移相关蛋白生存素(survivin)、基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7),研究它们与结肠癌患者临床病理参数及预后的关系,为结肠癌的分子病理分期提供理论基础.方法:选取1995年1月至2003年5月在中山大学肿瘤防治中心住院手术的620例有完整随访资料的结肠癌患者临床资料及病理蜡块,应用组织芯片及免疫组化技术检测survivin、MMP-7表达,研究其与结肠癌患者临床病理参数及预后的关系.结果:本组病例survivin表达正常肠黏膜阳性率为0,而癌组织阳性率为41.0%.两者差异有统计学意义(P<0.001).MMP-7表达正常肠黏膜阳性率为40.9%.而癌组织阳性率为88.8%,两者差异有统计学意义(P<0.05).X2检验分析结果显示survivin的表达各TNM分期之间差异有统计学意义(P<0.05),分期越晚阳性率越高.MMP-7的表达在患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大径、肿瘤分化程度、肿瘤大体、组织类型、TNM分期之间差异均无统计学意义(P>0.05).Cox单因素及多因素分析结果显示MMF-7阳性、survivin阳性是结肠癌患者肿瘤死亡的独立危险因素.结论:MMP-7、survivin均与结肠癌的发生相关,是影响结肠癌患者肿瘤死亡的独立危险因素.

  • 鼻咽癌组织中Cathepsin D和MMP-7表达的特点及意义

    作者:龚永谦;程爱兰;廖剑绚

    目的 探讨鼻咽癌组织中组织蛋白酶D(Cathepsin D)和基质金属蛋白酶7(MMP-7)表达特点及其联合评估肿瘤侵袭转移的价值.方法 采用免疫组化法检测42例鼻咽癌活检组织(A组)和30例同期慢性鼻咽炎活检组织(B组)中Cathepsin D和MMP-7蛋白表达情况.比较鼻咽癌组织Cathepsin D和MMP-7蛋白阳性表达与其阴性表达患者的肿瘤T分期、N分期、微血管密度(MVD)及淋巴管密度(LVD)等.采用Spearman无条件相关分析法分析鼻咽癌组织Cathepsin D蛋白阳性表达率和MMP-7蛋白阳性表达率与其T分期、N分期、MVD及LVD的关系.结果 与B组比较,A组Cathepsin D和MMP-7蛋白阳性表达率均提高(P<0.05).A组Cathepsin D蛋白阳性表达+MMP-7蛋白阳性表达患者的T3~4分期患者比例、N2~3患者比例均高于其Cathepsin D蛋白阴性表达+ MMP-7蛋白阳性表达患者和Cathepsin D蛋白阴性表达+MMP-7蛋白阴性表达患者(P<0.05).A组Cathepsin D蛋白阳性表达+MMP-7蛋白阳性表达患者的MVD及LVD均高于其Cathepsin D蛋白阳性表达+ MMP-7蛋白阴性表达患者、Cathepsin D蛋白阴性表达+MMP-7蛋白阳性表达患者和Cathepsin D蛋白阴性表达+ MMP-7蛋白阴性表达患者(P<0.05).A组Cathepsin D蛋白阳性表达+MMP-7蛋白阴性表达患者和Cathepsin D蛋白阴性表达+MMP-7蛋白阳性表达患者的MVD及LVD亦均高于其Cathepsin D蛋白阴性表达+ MMP-7蛋白阴性表达患者(P<0.05).Spearman无条件相关分析结果显示,鼻咽癌组织Cathepsin D蛋白阳性表达率和MMP-7蛋白阳性表达率与其T分期、N分期、MVD及LVD均呈正相关(r=0.798、0.785、0.855、0.842,P<0.05).结论 鼻咽癌组织Cathepsin D和MMP-7蛋白阳性表达率高且均与其T分期、N分期、MVD及LVD相关,联合检测鼻咽癌组织Cathepsin D和MMP-7蛋白表达可作为鼻咽癌肿瘤侵袭转移的评估的参考指标.

  • 吲哚美辛对结肠癌细胞HCT116的影响及机制探讨

    作者:王国强;方洧靖;卢震海;潘志忠;万德森

    目的:研究吲哚美辛对结肠癌细胞株HCT116增殖及体外侵袭的影响并对其机制进行探讨.方法:应用WST-8法和体外侵袭小室测定吲哚美辛对结肠癌细胞株HCT116增殖和侵袭能力的影响;Westenblotting方法检测吲哚关辛作用后HCT116细胞β-连环素(β-Catenin)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)蛋白的表达.结果:吲哚关辛能够明显抑制结肠癌细胞株HCT116的增殖,呈时间-剂量依赖性,作用24、48、72 h的IC50值分别为440.36、323.90、254.37μmol/L;吲哚美辛能够明显抑制结肠癌细胞株HCT116的体外侵袭,呈剂量依赖性;吲哚美辛作用24、48、72 h后,β-Catenin、cvclin D1、MMP-7蛋白表达均有下降.结论:吲哚美辛能抑制结肠癌细胞株HCT116的增殖与迁移,其作用机制之一可能是通过Wnt/β-catenin信号通路.

  • 脑苷肌肽治疗脑梗死老年患者疗效及其对血清中S100B、MMP-7和MMP-8的影响

    作者:张红心

    目的:观察脑苷肌肽辅助治疗脑梗死老年患者的疗效及其对血清中S100B蛋白(S100B )、基质金属蛋白酶-7(M M P-7)和基质金属蛋白酶-8(M M P-8)的影响。方法选择110例脑梗死老年患者,按患者的入院顺序分为观察组和对照组,每组55例。对照组应用常规治疗,观察组加用脑苷肌肽进行治疗,观察两组疗效及治疗后血清中S100B、M M P-7和M M P-8的表达差别。结果观察组治疗的显效率明显高于对照组,观察组的NIHSS评分明显低于对照组,治疗后观察组患者血清中S100B、M M P-7和MMP-8的表达明显低于对照组。结论在常规治疗基础上应用脑苷肌肽对脑梗死老年患者的疗效明显,并使患者血清中S100B、M M P-7和M M P-8的表达下降,减少脑损伤后基质的降解,临床治疗中可以积极应用。

  • 脓毒症患者病情严重程度与血浆可溶性Fas受体、可溶性Fas配体及基质金属蛋白酶7水平相关性研究

    作者:尹建永;刘嘉琳;刘召军;王晓丽;瞿洪平

    目的 探讨早期脓毒症患者血浆中可溶性Fas受体(sFas)、可溶性Fas配体(sFas-L)及基质金属蛋白酶7(MMP-7)水平与患者病情严重程度及预后的关系.方法 采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定并比较32例脓毒症患者及24例年龄性别匹配的健康对照组血浆中sFas、sFas-L、sFas/sFas-L比值和MMP-7的水平差异.根据脓毒症患者的28 d预后不同分为生存组和死亡组,比较两组之间各指标的差异.结果 脓毒症患者血浆sFas、sFas-L和MMP-7水平均较正常对照组明显升高,差异均具有统计学意义(P均<0.01).sFas和sFas-L与患者疾病严重程度评分急性生理学和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)及序贯器官衰竭(SOFA)呈正相关.MMP-7与APACHEⅡ评分、SOFA评分之间存在较弱的负相关,但无统计学意义(P>0.05).与存活患者相比,死亡患者血浆中的sFas-L水平明显升高,而sFas/sFas-L比值则明显降低(P<0.05).结论 脓毒症患者病情严重程度与血浆中sFas、sFas-L及MMP-7水平密切相关,这些指标有望成为判断脓毒症预后的生物标志物.

  • 基质金属蛋白酶7处理猪脱细胞真皮基质大鼠体内移植后组织学观察及其血管化评价

    作者:王芳;武岩;石文;邵阳;马印东;贾军;辛乃军;吴秋合;宋国栋

    目的 探讨经基质金属蛋白酶7 (matrix metalloproteinase 7,MMP-7)处理的猪脱细胞真皮基质(porcine acellular dermal matrix,P-ADM) (P-ADM-pm)植入大鼠体内后的组织学变化及其血管化过程. 方法 取家猪腹部皮肤,采用机械法制备网织层真皮62块,随机分为A、B两组(n=31);A、B组真皮均经脱细胞处理制成P-ADM,B组再用MMP-7溶液处理制备P-ADM-pm;两组各取1块进行鉴定.取成年雄性Wistar大鼠30只,每只大鼠背部皮下左、右侧各植入1块P-ADM(A组)、P-ADM-pm(B组).术后观察大鼠一般情况,于3、7、14、21、28d行大体、组织学及免疫组织化学染色观察,14d时行扫描电镜观察,比较两组移植物宿主细胞、血管浸润及组织学变化. 结果 术后大鼠均存活至实验结束,切口愈合良好,无明显炎性反应.大体观察示,术后7d两组移植物表面均形成一层有少量微血管的纤维膜,随时间延长微血管增多、变粗并浸润移植物,且B组较A组明显;至21d两组纤维膜微血管减少、增粗,B组移植物完全血管化.组织学及免疫组织化学染色观察示,术后各时间点A组移植物炎性反应较B组严重;B组浅层成纤维细胞、微血管长入分别出现于术后3、7d,并于14、21d时贯穿移植物全层;A组分别出现于术后3、14d,至28 d时均未贯穿移植物全层;各时间点B组成纤维细胞及新生微血管计数均显著多于A组(P<0.05).14 d扫描电镜观察B组移植物内长入较多成纤维细胞并可见其分泌的胶原原纤维. 结论 与P-ADM比较,P-ADM-pm植入大鼠体内后,宿主对其反应与正常创伤愈合过程相似,其作为植入性支架材料具有良好的模板引导作用.

  • 荧光定量RT-PCR检测早期宫颈鳞癌组织中MMP-7和CK20的表达

    作者:高颖;娄阁;王耀先

    目的:检测宫颈癌组织中基质金属蛋白酶7(MMP-7)mRNA和细胞角蛋白(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床意义.方法:采用实时荧光定量RT-PCR检测33例宫颈鳞癌和12例正常宫颈组织中MMP-7 mRNA和CK20 mRNA的表达水平.结果:MMP-7 mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.018),与宫颈鳞癌病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与临床分期、年龄因素无关(P均0.05);CK20 mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.002),与宫颈鳞癌分期、病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与年龄无关(P0.05);MMP-7 mRNA与CK20 mRNA之间存在正相关(r=0.427,P=0.026).结论:MMP-7 mRNA及CK20 mRNA的高表达与宫颈鳞癌的侵袭转移有关.

  • MMP-7蛋白在肺癌患者和正常人外周血中的表达水平及临床意义

    作者:孙小亮;肖汀;杨磊;高燕宁;程贵余;孙克林

    背景与目的 基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase 7,MMP-7)又称基质溶解素,是MMPs家族成员之一,本研究旨在检测MMP-7在肺癌患者和正常人外周血血浆中的蛋白水平,并探讨其临床意义.方法 采用酶联接免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)检测114例肺癌患者和100名正常人外周血血浆标本中的MMP-7浓度.结果 肺癌患者外周血血浆中的MMP-7蛋白浓度(n=114,median=0.72 ng/mL)明显高于正常人外周血血浆中的MMP-7蛋白浓度(n=100,median=0.30 ng/mL,P<0.001),当cutoff值为0.56 ng/mL时,MMP-7检测肺癌的敏感性为62.3%,特异性为76.0%.但是,肺癌患者外周血血浆中MMP-7的蛋白水平与患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、病理类型、淋巴结转移及分期均无关(P>0.05).结论 外周血血浆中MMP-7可以作为辅助肺癌诊断的一种肿瘤标志物,但其与肺癌的各项临床参数之间无明显联系,需要进一步扩大样本进行分析.

  • 基质金属蛋白酶7在胶质母细胞瘤中的表达及其与患者术后生存期的关系

    作者:杨波;唐伏秋

    目的 探讨胶质母细胞瘤中基质金属蛋白酶7(MMP-7)的表达及其与患者术后生存期之间相关性.方法 采用免疫组织化学法检测60例胶质母细胞瘤组织标本中MMP-7的表达,统计分析其表达强弱与患者术后生存期之间的关系.结果 MMP-7在胶质母细胞瘤中总表达率为73.3%,强表达组生存期明显短于弱表达组(X2=7.043,P=0.008).结论 MMP-7可以作为胶质母细胞瘤预后的重要因素之一.

  • 梗阻性黄疸患者胆汁基质金属蛋白酶7、肿瘤标记物水平变化及其临床意义

    作者:吴县斌;苏东星;潘志刚;陆才金;庞丽兴;梁梓宇

    目的 研究梗阻性黄疸(OJ)患者胆汁基质金属蛋白酶7(MMP-7)、肿瘤标记物水平变化及其临床意义.方法 选择2012年3月至2015年3月在我院接受治疗的从OJ患者200例作为研究对象,导致OJ恶性病因80例,导致OJ良性病因120例,分析不同时期(入院时及术后2周)OJ患者胆汁肿瘤标记物及MMP-7水平变化情况,评估CA19-9、CEA及MMP-7指标对OJ恶性肿瘤的诊断效果.结果 恶性病因患者胆汁CA19-9及CEA水平均显著高于良性病因患者(F=4.542,P=0.030).恶性病因组内CA19-9及CEA水平差异无统计学意义(F=1.259,P=0.063),恶性病因组内术后2周的CA19-9及CEA水平均分别显著低于入院时的水平,(均P<0.05).恶性病因患者组内的MMP-7水平差异无统计学意义(F=0.833,P=0.123),但恶性病因组内术后2周MMP-7水平均分别显著低于入院时的水平(均P<0.05).胆汁CA19-9、CEA及MMP-7指标联合检测的敏感性、特异性及准确度均高.结论 OJ患者胆汁MMP-7及肿瘤标记物CA19-9及CEA水平的变化对临床病情具有较大的显示价值,三者联合检测,可以更加准确地诊断患者病情.

  • 乳腺癌中 MMP-7的表达与微血管密度的相关性研究

    作者:段筱娟;李志义;杨玉涛;钟美;饶家秋;何常

    基质金属蛋白酶7(M M P‐7)是基质溶解素的一种,参与肿瘤的侵袭和转移,与肿瘤血管生成密切相关。而肿瘤的生长又依赖于血管的生成,微血管密度则是反映肿瘤血管生成情况的一项客观指标。本实验通过免疫组化法检测 MMP‐7和微血管密度(M VD ,由CD105标记),探讨乳腺癌中M M P‐7的表达及其与M VD、临床病理参数之间的关系。

  • 巢式RT-PCR扩增CK20、MMP-7诊断大肠癌淋巴结微转移的初步研究(摘要)

    作者:龚丽明;程若川;李恩全

    目的建立巢式逆转录聚合酶链式反应(nested reversetranscriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增CK20mRNA、MMP-7mRNA,检测大肠癌淋巴结的微转移并评价其应用前景.

  • 基质金属蛋白酶7在肾细胞癌中的表达及意义

    作者:张冠军;梁华;王春宝

    目的 探讨基质金属蛋白酶7(MMP-7)在肾细胞癌组织中的表达及其与临床病理因素及预后的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测78例肾细胞癌组织及相对应的癌旁肾脏组织中MMP-7的表达情况.结果 MMP-7在癌旁肾脏组织中几乎不表达,在肾细胞癌组织中MMP-7阳性表达率为55.1%.MMP-7的异常表达在患者的不同性别、年龄、肿瘤大小和病理组织学类型及有无血尿、腰痛、肾盂浸润、肾静脉癌栓无显著性差异(P>0.05),与肾细胞癌包膜浸润、淋巴结转移有显著性差异(P<0.05),并与病理组织学分级、临床分期相关(P<0.05),有包膜浸润、淋巴结转移以及病理组织分级高、临床分期晚的肾细胞癌MMP-7表达率高于无包膜浸润、淋巴结转移和病理组织分级低、临床分期早的肾细胞癌(P<0.05).MMP-7表达阳性病例术后生存时间显著短于阴性表达病例(P<0.05).结论 MMP-7在肾细胞癌中有较高程度表达,并与肾细胞癌的浸润、转移及生存时间有一定的关系,检测MMP-7可作为判断肾细胞癌恶性程度及预后的指标.

  • MMP-7、MMP-2在新疆维吾尔族食管癌中的表达及其相关性研究

    作者:缪文强;李惠武;王洪江;李卉;郭文佳;庞作良

    目的:探讨基质金属蛋白酶7(MMP-7)基因、基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因在维吾尔族食管癌和正常组织中的表达及相互关联性.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测MMP-7、MMP-2在30例食管癌组织及其相应30例正常组织中的表达.结果:MMP-7、MMP-2在30例癌组织中的阳性表达率均为90.0%(27/30),在30例正常组织中的阳性表达率均为56.7%(17/30),MMP-7、MMP-2的表达在癌组织与正常组织中的差异有统计学意义(P<0.05).MMP-7和MMP-2 mRNA的表达与肿瘤大小,分化程度、分期及淋巴结转移之间差异无统计学意义(P>0.05).MMP-7和MMP-2 mRNA在癌组织中的表达有正相关性.结论:MMP-7、MMP-2基因的表达可能与维吾尔族食管癌的发生、发展有关,两者之间可能具有协同作用,共同促进食管癌的发生及发展.

  • 低免疫原性猪真皮支架制备及其细胞相容性评价

    作者:邵阳;武岩;贾军;马印东;辛乃军;常朋飞;宋国栋

    目的 观察基质金属蛋白酶7(MMP-7)、京尼平及真空冷冻干燥处理对猪脱细胞网状层真皮基质组织结构及细胞相容性的影响. 方法 取清洁级健康大约克夏猪边腹部皮肤,采用机械法制作54块网状层真皮,面积10.0 mm ×5.0 mm,厚0.5~0.6mm,按随机数字表法分为正常对照组(A1组,不行处理)、脱细胞组(R组,行脱细胞处理)、脱细胞+ MMP-7组(C组,行脱细胞和MMP-7处理)、脱细胞+ MMP-7+京尼平组(D组,脱细胞处理后用MMP-7和京尼平处理)和脱细胞+MMP-7+京尼平+真空冷冻干燥组(E组,除行D组处理外,加真空冷冻干燥处理),A1组6块,其余毎组均为12块.另取6块相同面积人ADM设为人ADM组(A2组,不行处理),即细胞相容性实验中的对照组.采用HE染色、扫描电镜检测A1、B~E组真皮支架中细胞数量及组织结构变化,采用免疫组织化学染色法检测A1、B、C组样本中波形蛋白、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白残留情况,采用细胞毒性试验检测B~E组浸提液的细胞毒性.接种人Fb于B~E组和A2组真皮支架表面培养,观察培养3、7、14 d时 Fb生长情况,采用ELISA法检测培养3、7 d 上清液中IL-6、IL-8含量.对数据进行双因素方差分析及LSD-t检验. 结果 A1组可见含毛囊的浅黄包颗粒状结构,B组标本毛囊内仍有少量毛发、上皮根鞘、细胞核、细胞碎片样结构及波形蛋白、LN、Ⅳ型胶原蛋白残留,C~E组经MMP-7处理后上述物质被完全去除.大体观察显示,D、E组真皮支架韧性较B、C组增加.C ~E 组胶原纤维结构完整,排列与A1组相似且胶原纤维之间间隙增大,其中C、D组间隙相近但均大于B组,E组大 .B~E组真皮支架浸提液细胞毒性为0或1级.Fb于A2和B~E组真皮支架上均能增殖,并且随培养时间延长逐渐由单层变成复层生长进而向标本内部生长.D、E组真皮表面细胞密度较高,A2、C组细胞则主要存在于组织内部.培养7 d,A2、B~E组培养上清液中IL-6含量分别为(132±14)、(104 ±9)、(122±14)、(120±12)、(128±17) pg/mL,IL-8含量分别为(135±18)、(102±17)、(127±18)、(134 ±23)、(141±24) pg/mL,分别较培养3d的(55±13)、(34±8)、(48±8)、(50±13)、(49±12)pg/mL和(93±19)、(63±11)、(82±15)、(82±16)、(89±16) pg/mL明显增高(F值分别为98.869、184.038、125.531、93.237、87.265和 15.694、23.451、22.801、19.607、1 8.808,P值均小于0.05);同一时相点A2、B~E组组间IL-6、IL-8含量比较,差异均有统计学意义(F值分别为2.809、3.301 和3.757、3.266,P值均小于0.05);LSD-t检验结果表明,A2、C~E组组间IL-6、IL-8含量比较差异无统汁学意义(t值分别为0.058 ~1.905、0.034 ~1.295,P值均大于0.05),但均较B组高(t值分别为3.707~ 5.612、2.785~4.079,P值均小于0.05).结论 脱细胞联合MMP-7、京尼平及真空冷冻干燥方法制备的低免疫原性猪真皮支架具有较好的细胞相容性,细胞长人组织内部较少可能与京尼平增加组织韧性有关.

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