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低氧对小鼠肺组织内Follistatin和Follistatin-like3表达的影响
目的 观察低氧对小鼠肺组织中骨形态发生蛋白4(BMP4)内源性拮抗蛋白基因Follistatin(FSN)和follistatin-like 3 (FSRP) mRNA表达的影响.方法 将30只5周龄雄性同种系BMP4+/+C57BL/6J野生型小鼠按照随机数字表法分为对照组、低氧1d组、低氧3d组、低氧7d组和低氧21 d组,每组6只;6只BMP4+/-C57BL/6J杂合子小鼠按照随机表法分成常氧1d杂合组和低氧1d杂合组.分别给予小鼠不同时长低氧环境后处死并采集肺组织,采用实时定量PCR检测肺组织中FSN和FSRP mRNA的表达水平.结果 FSN和FSRP mRNA的表达随小鼠缺氧的时间呈先上升后下降的趋势,低氧第1天表达增加尤其明显,FSN mRNA的表达趋势较FSRP mRNA明显.常氧及低氧状态下,野生型小鼠与杂合子小鼠肺组织内FSN和FSRP mRNA的表达无明显差异,低氧1d组FSN和FSRP mRNA相对表达量分别为(28.0±9.4)和(2.0±0.4),低氧3d组分别为(6.3±3.2)和(1.7±0.7),低氧7d组分别为(1.77±0.36)和(1.22 ±0.15),低氧21 d组分别为(1.04±0.27)和(0.85±0.10),均高于对照组,差异有统计学意义(均P＜0.05).常氧1d杂合组小鼠肺组织的FSN和FSRP mRNA相对表达量分别为(0.95±0.05)和(1.11 ±0.03),低氧1d杂合组分别为(1.10±0.40)和(0.85±0.18).结论 FSN和FSRP作为内源性拮抗蛋白对低氧状态下mRNA的表达上调依赖于BMP4 mRNA的表达上调,FSN可能在低氧性肺动脉高压发病机制中具有重要的调节作用.
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二十二碳六烯酸干预低氧诱导大鼠肺动脉高压的研究
目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)对低氧性肺动脉高压的影响及机制.方法 实验SD大鼠分为常氧组、常氧DHA组、低氧组和低氧DHA组.肺动脉高压模型采用间断低氧法,大鼠肺小动脉形态学采用HE染色,肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)采用组织贴块法,细胞增殖及迁移分别采用噻唑蓝比色法和改良Boyden小室法.α-肌动蛋白、调宁蛋白和肌动蛋白相关蛋白(SM22α) mRNA水平采用RT-PCR法.结果 低氧组大鼠平均肺动脉压力[mPAP,(30.1±2.6) mmHg,1 mmHg=0.133 kPa],右心室肥厚指数[RV/(LV +S),(40.4±4.2)％],肺小动脉管壁厚度与外径比值[WT％,(44.6±4.1)％]及管壁面积占血管总面积的百分比[WA％,(81.2±5.4)％]与常氧对照组相比均明显升高[mPAP:(18.4±1.2) mmHg；RV/(LV+S):(27.8±1.6)％；WT％:(17.7±3.3)％;WA％:(42.9±3.5)％,P＜0.05]；DHA干预的低氧组大鼠上述各指标[mPAP为(22.7±1.8)mmHg,RV/(LV +S)为(34.2±2.2)％,WT％为(21.6±4.1)％,WA％为(52.0±2.9)％]均低于低氧组(P＜0.05)；常氧DHA组,低氧DHA组与常氧组相比,上述指标无显著差别.在体外,DHA能显著抑制低氧诱导的PASMCs增殖、迁移(P＜0.05).低氧时DHA能促进α-肌动蛋白,调宁蛋白和SM22α的mRNA表达.结论 DHA对低氧所致的肺动脉高压具有较好的抑制作用,其机制可能是通过抑制PASMCs增殖,迁移和表型转换而起作用.
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低氧诱导大鼠肺动脉重塑对肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5表达的影响
目的 探讨慢性低氧性肺动脉高压(CHPH)大鼠模型肺动脉重塑与肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5(KLF5)蛋白表达的关系.方法 雄性SD大鼠20只按随机数字表法分为常氧组和低氧组,每组10只,低氧组放入全自动低氧箱饲养,21 d后用右心室测压法测量右心室收缩压(RVSP)及平均右心室压(mRVP);计算右心肥厚指数RV/(LV+S);取右肺组织包埋切片行HE染色测量肺小动脉血管管腔面积,计算血管中膜厚度百分比(WT％);并取切片行免疫荧光检测KLF5的表达;荧光PCR和Western blot法分别检测远端肺动脉平滑肌组织中KLF5 mRNA、蛋白的表达.显微镜下分离大鼠(6只)远端肺动脉平滑肌组织,胶原酶消化法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),随后置于低氧环境(4％ O2,60 h)培养并获取细胞蛋白检测KLF5的表达.结果 低氧组大鼠RVSP和mRVP与常氧组(28.3±0.4)、(11.3±1.0) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)比较,分别升高至(43.9±1.3)、(26.5±2.3)mmHg(P ＜0.05);低氧组RV/(LV +S)为(0.48±0.03),明显高于常氧组(0.27±0.01,P＜0.05);低氧组血管腔占血管区域的比值(WT％)为(46.1±6.6)％,与常氧组(68.7±3.1)％相比显著降低(P＜0.05);而低氧组WT％(5.6±0.3)％与常氧组(3.7±0.4)％相比显著增加(P＜0.05);低氧组大鼠肺动脉平滑肌组织KLF5蛋白表达量为常氧组的(22±7)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CHPH大鼠模型RVSP、mRVP、右心室肥厚指数均升高,同时伴有肺小动脉重塑,这可能与低氧诱导PASMCs中KLF5的表达升高有关.
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维吾尔族和汉族阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者呼吸中枢低氧反应性损害及其影响因素
目的 探讨维吾尔族和汉族阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者呼吸中枢低氧反应性及其相关影响因素.方法 收集2016年1-12月克拉玛依市中心医院呼吸与危重症医学科睡眠中心住院及门诊的166例OSAHS患者,其中汉族69例,男42例,女27例,年龄(50±9)岁;维吾尔族97例,男58例,女39例,年龄(52±8)岁;同期73名健康维吾尔族体检者73名(对照组),男49名,女34名,年龄(50±7)岁.所有受试者均经睡眠呼吸监测、夜间SaO2监测、肺功能及采用国际标准重复呼吸法测定呼吸中枢低氧反应性,计算△分钟通气量/△血氧饱和度(△VE/△SaO2)得到呼吸中枢低氧反应性.结果 年龄、性别、体重指数和呼吸暂停指数相匹配的汉族与维吾尔族OSAHS患者组间的氧减指数分别为(30±22)和(24±19)次/h,△VE/△SaO2分别为(-0.41±0.23)和(-0.36±0.22)L·min-1·％-1,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).轻度维吾尔族OSAHS患者△VE/△SaO2为(-0.31±0.21)L·min-1·％-1,明显低于汉族OSAHS患者[(-0.41 ±0.22)L·min-1·％-1,P＜0.05],重度维吾尔族OSAHS患者的低氧通气反应性仍低于汉族,但差异无统计学意义.结论 维吾尔族OSAHS患者呼吸中枢低氧反应性低于汉族OSAHS患者及正常值.
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烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α表达的影响
目的探讨烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α(PKC-α)表达的影响.方法健康雄性Wistar大鼠56只,随机分为正常对照组(C组)、烟雾暴露组(S4W组和S8W组)、低氧组(H4W组和H8W组)和烟雾暴露+低氧组(SH4W组和SH8W组),复制大鼠慢性烟雾暴露及低氧模型.右心导管法记录并测定平均肺动脉压(mPAP),分离心脏计算右心室肥厚指数(RVHI).弹力纤维染色计算腺泡内肺动脉3种类型血管的构成比及肺动脉管壁骨架蛋白(α-SM-actin)染色显示肺血管重建,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)染色检测细胞增殖、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PKC-α mRNA表达,免疫荧光及Western blot检测PKC-α蛋白表达.结果与C组大鼠mPAP[(14±4)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]比较,H4W、H8W、SH4W、SH8W组大鼠mPAP均显著增高[(31±7)(32±8)、(32±9)、(31±10)mm Hg,P均＜0.01],而S4W、S8W组均无显著升高[(15±5)、(16±6)mm Hg,P均＞0.05].S4W、S8W、H4W、H8W、SH4W和SH8W组大鼠RVHI(0.258±0.024、0.394±0.021、0.374±0.020、0.414±0.019、0.434±0.023、0.442±0.020)、肌型动脉占血管总数的百分比[(33.5±6.8)%、(41.1±9.8)%、(35.9±6.6)%、(46.0±6.3)%、(42.9±6.5)%、(50.2±9.9)%]及α-SM-actin表达(53±15、75±14、56±11、82±17、83±17、98±16)均显著高于C组(P均＜0.01),凋亡指数(2.5±1.0、3.8±1.4、2.3±1.1、3.3±1.1、3.5±1.4、4.8±1.4)和增殖指数(33.1±11.8、43.8±11.0、36.5±10.6、46.3±12.1、45.3±12.4、53.3±13.4)均高于C组(P均＜0.01).肺动脉PKC-α mRNA和蛋白的表达均增强(P均＜0.01).且SH4W、SH8W组各指标分别与H4W、H8W组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论烟雾暴露和低氧均能诱导肺动脉平滑肌细胞凋亡与增殖,导致肺血管重建,二者协同作用能加重肺血管重建;激活PKC信号转导途径可能是其部分机制.
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肝肺综合征23例临床分析
目的 提高对肝肺综合征(HPS)的临床认识,减少漏诊、误诊.方法 回顾我院确诊的23例肝肺综合征病例,分析肝肺综合征的临床特点.结果 肝肺综合征男、女发病比例为1.3:1,平均年龄(42±21)岁,除1例急性重症肝炎外,其余22例均为肝硬化,门静脉高压发生率为82.6%.根据Child-Pugh分级标准,肝功能B、C级为78.2%.主要临床表现:呼吸困难发生率为91.3%,发绀为91.3%,肝掌为69.5%,杵状指(趾)为65.1%,面部血管扩张为56.5%,蜘蛛痣为56.5%.动脉血氧分压(PaO2)平均值为(50.8±14.1) mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),直立性低氧血症发生率为85.7%(12/14),肺一氧化碳弥散量百分比(DLCO%)平均值为43.1%.39.1%(9/23)患者胸部X线检查表现为HPS而出现双下肺斑点状、小结节影或网状结节影.23例HPS均进行了99m锝-大颗粒聚合白蛋白(99mTc-MAA)核素首次通过肺灌注显像,平均分流率为36.3%.结论 HPS主要发生于肝硬化Child-Pugh分级较重和(或)门静脉高压的患者.临床上对不能解释的低氧血症,同时有门静脉高压、蜘蛛痣(面部血管扩张)和(或)杵状指(趾)表现者应高度怀疑肝肺综合征.直立性低氧血症是HPS较特异性表现.HPS可有肺弥散功能降低、胸部影像学异常改变,但不具有特异性.99mTc-MAA核素首次通过肺灌注显像有助于确定肺血管扩张,明确HPS的诊断.
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慢性间歇低氧对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血压的影响
目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的慢性间歇低氧对血压和NO/内皮素水平的影响.方法 选取2006年6月至8月于北京大学人民医院呼吸科就诊的18岁以上OSAHS患者、该院慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者协会的稳定期COPD患者及健康志愿者85例,根据问卷调查、常规肺功能检查和多导睡眠监测结果分为OSAHS不吸烟组、OSAHS吸烟组、COPD组和健康对照组.测量多导睡眠监测当晚睡前和次日晨起(简称晨起睡前)静息状态血压,采用硝酸还原酶法测定晨起血清中和晨起睡前呼出气冷凝液中NO浓度,放射免疫法测定晨起血清内皮素浓度.计量资料采用方差分析,计数资料采用x2检验,正态分布数据采用Pearson相关分析,非正态分布数据采用Spearman相关分析,并进行多元线性回归分析.结果 OSAHS组晨起舒张压升高幅度[不吸烟组(88±10)mm Hg,吸烟组(95±17)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]明显大于COPD组[(76±7)mm Hg]和对照组[(70±6)mm Hg];OSAHS组晨起睡前呼出气冷凝液中NO浓度差值[不吸烟组(-4.5±7.9)μmol/L,吸烟组(-3.4±5.5)μmol/L]明显低于COPD组[(1.4±6.1)μmol/L]和对照组[(3.1±4.0)μmol/L];OSAHS吸烟组血清NO/内皮素(1.0±0.5)明显低于COPD组(1.4±0.7).控制了性别、年龄、体重指数、颈围、吸烟史、饮酒史、高血压级别、服用高血压药种类后,晨起睡前NO浓度差值与舒张压差值呈负相关,与呼吸暂停低通气指数(AHI)呈正相关;晨起睡前舒张压差值与AHI、脉搏氧饱和度(SpO2)＜90%的氧减幅度、SpO2＜90%的氧减梯度呈负相关.多元线性回归分析结果显示,AHI每增加1次/h,晨起舒张压较睡前增加0.41 mm Hg;晨起睡前NO浓度差值每增加1 μmol/L,晨起睡前舒张压差值减少0.27 mm Hg;AHI每增加1次/h,晨起睡前NO浓度差值增加0.40 μmol/L.结论 OSAHS患者晨起舒张压较睡前明显升高,晨起睡前呼出气冷凝液中NO浓度变化可以间接反映机体NO消耗情况,并与OSAHS病情显著相关,与晨起睡前舒张压变化相关.
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蛋白激酶C对低氧猪肺动脉平滑肌细胞结构型一氧化氮合酶mRNA表达作用的探讨
目的探讨蛋白激酶C(PKC)信号传导通道对低氧猪肺动脉平滑肌细胞(PASMC)结构型一氧化氮合酶(cNOS)mRNA表达的影响.方法采用逆转录-聚合酶链(RT-PCR)方法测定了低氧条件下猪PASMC中PKC-α和cNOS mRNA表达情况,并观察了PKC激活剂和抑制剂对cNOS mRNA表达的影响.结果低氧48、72 h PKC-α mRNA的表达明显升高(P＜0.01),cNOS mRNA的表达明显降低(P＜0.01),cNOS mRNA的表达与PKC-α mRNA的表达呈显著负相关(P＜0.001).PKC激活剂豆蔻酸佛波醇乙酯(PMA)可使cNOS mRNA在低氧PASMC中的表达进一步降低,而PKC抑制剂RO 31-8220的作用相反,使cNOSmRNA的表达明显升高(P＜0.01).NO激活剂左旋精氨酸(L-Arg)和抑制剂Nw硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对PKC-α mRNA的表达无明显影响.结论PKC可抑制cNOS mRNA在低氧PASMC中的表达.PKC在低氧性肺动脉高压的形成机制中的作用可能是通过抑制cNOS mRNA在PASMC的表达和对NO的调控来实现的,PKC信号通道可能作用在NO的上游,但其机制还有待于进一步的研究.
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慢性间歇低氧对大鼠肝脏的损伤及4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶的干预作用
目的 探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠肝脏损伤机制和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶( tempol)的干预作用及其可能机制.方法 应用CIH大鼠模型,模拟OSAS慢性间歇低氧/再氧和病理生理过程.32只雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为低氧对照组、低氧干预组、低氧盐水组和常氧对照组,共4组,每组8只.CIH各组低氧浓度均为5％,低氧频率均为30次/h,8 h/d.暴露6周后处死大鼠,取肝脏组织行石蜡切片HE染色观察肝细胞形态变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肝脏中核因子-κB、谷胱甘肽过氧化物转移酶(GSH-PX)和丙二醛的水平.结果 肝脏病理检查可见低氧对照组及低氧盐水组肝细胞胞膜破坏,细胞水肿,胞质稀疏,核深染；低氧干预组、常氧对照组未见明显肝脏损害.与常氧对照组比较:低氧对照组和低氧盐水组核因子-κB[(12.4±2.0) ng/g,(12.2±1.9) ng/g]和丙二醛[(101±22)μmol/g,(99±18) μmol/g]水平均升高(均P＜0.05),GSH-PX活性[(88±17) U/mg,(90+15) U/mg]均下降(均P＜0.05)；与低氧对照组、低氧盐水组比较,低氧干预组核因子-κB[(7.8 +1.3) ng/g]和丙二醛[(59±10) μmol/g]水平均下降(均P＜0.05),GSH-PX活性[(181±29) U/mg]均升高(均P＜0.05)；低氧干预组与常氧对照组比较,GSH-PX和丙二醛水平差异均无统计学意义(均P＞0.05),但核因子-κB水平高于常氧对照组[(4.1±0.9) ng/g,P＜0.05]；低氧对照组与低氧盐水组比较以上指标差异均无统计学意义(均P＞0.05).核因子-κB水平与GSH-PX活性和丙二醛水平分别呈负相关(r=-0.0754,P＜0.01)和正相关(r =0.689,P＜0.01)关系.结论 CIH可通过氧化应激和激活前炎性转录因子核因子-κB造成肝脏损伤；tempol可通过抗氧化作用清除活性氧干预CIH肝脏损害的发生.
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新型内源性气体信号分子硫化氢对低氧性肺血管胶原重塑的影响
目的研究大鼠低氧性肺血管重塑时硫化氢(H2S)对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白在肺血管壁异常堆积的调节作用,进一步探讨H2S缓解低氧性肺血管重塑的作用机制.方法 19只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧+硫氢化钠(NaHS)组.低氧组和低氧+NaHS组大鼠共低氧21 d,低氧+NaHS组大鼠每天低氧前腹腔注射H2S供体NaHS.低氧结束后,测定肺动脉平均压(mPAP),称重右心室(RV)和左心室+室间隔(LV+SP),计算RV/(LV+SP).亚甲蓝分光光度法测定血浆中H2S含量.免疫组化染色检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,原位杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA在肺血管壁表达.结果 (1)与对照组相比,低氧组大鼠mPAP升高46%,RV/(LV+SP)增加41%,血浆H2S含量下降36%(P均＜0.01);与低氧组相比,低氧+NaHS组大鼠的mPAP降低31%,RV/(LV+SP)减少24%,血浆H2S含量升高65%(P均＜0.01).(2)各组大鼠肺小型、中型肌性动脉中Ⅰ型胶原蛋白表达的比较:低氧组较对照组分别增加81%、62%(P＜0.01);低氧+NaHS组较低氧组分别减少了32%、18%(P＜0.01).(3)各组大鼠肺小型、中型肌性动脉中Ⅰ型前胶原mRNA表达的比较:低氧组较对照组分别增加49%、68%(P＜0.01);低氧+NaHS组较低氧组分别减少了31%、33%(P＜0.01).(4)各组大鼠肺小型肌性动脉中Ⅲ型胶原蛋白表达的比较:低氧组较对照组增加84%(P＜0.01);低氧+NaHS组较低氧组减少了37%(P＜0.01).低氧组大鼠的肺中型肌性动脉中Ⅲ型胶原蛋白表达较对照组增加38%(P＜0.01);但是与低氧+NaHS组相比无明显变化(P＞0.05).(5)各组大鼠肺小型、中型肌性动脉中Ⅲ型前胶原mRNA表达的比较:低氧组较对照组分别增加53%、17%(P＜0.01);低氧+NaHS组较低氧组分别减少了45%、33%(P＜0.01).结论在大鼠低氧性肺血管胶原重塑时,H2S能够抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及其mRNA在肺血管壁的表达,此作用可能是其缓解低氧性肺血管重塑的作用机制之一.
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转化生长因子β1与诱导型一氧化氮合酶相互调控对大鼠低氧性肺动脉高压的作用
目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因在低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉的动态表达变化.方法 40只成年雄性Wistar大鼠随机分成对照组(C组)、缺氧3、7、14和21 d组(H3、H7、H14和H21组),每组8只,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、血管形态学指标、右室肥大指数(RVHI);原位杂交和免疫组化检测TGF-β1、iNOS基因表达.结果 H7组大鼠mPAP[(18.41±0.37)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]显著高于C组(P<0.05),H14组达高峰[(21.17±0.23)mm Hg]并维持于高水平.肺血管重塑、右心室肥大缺氧14 d后出现.C组大鼠肺动脉中膜iNOS蛋白弱阳性(0.109±0.021),H3组增高(0.225±0.030,P<0.01),H7组(0.312±0.036)稳定于高水平.C组大鼠肺动脉壁iNOS mRNA弱阳性(0.112±0.030),H3组表达增强(0.245±0.036),H7组达高峰(0.318±0.034,P<0.01)并维持于高水平.TGF-β1蛋白在C组呈弱阳性(0.042±0.012),H3组表达增强(0.198±0.031),H7组达高峰(0.267±0.035,P<0.01),随着缺氧时间延长,TGF-β1逐渐向基线水平回降;C组TGF-β1 mRNA呈弱阳性表达(0.145±0.018),H3、H7组表达增高不明显(0.163±0.021、0.176±0.026),H14组增高(0.385±0.028,P<0.01),并维持于高水平,TGF-β1 mRNA、蛋白于肺动脉中膜和外膜表达.相关分析表明,TGF-β1、iNOS均与mPAP和血管重塑呈正相关(r=0.843～0.937,P均＜0.01);TGF-β1蛋白(外膜)与iNOS mRNA、蛋白均呈负相关(r分别为-0.856、-0.835,P均＜0.01).结论 TGF-β1和iNOS均参与大鼠HPH的发病,iNOS可能通过NO上调TGF-β1表达,TGF-β1可能通过降低mRNA的稳定性、减慢翻译速率和加快酶蛋白降解抑制iNOS表达.
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低氧性肺动脉高压大鼠肺内肾上腺髓质素及受体表达研究
目的探讨肾上腺髓质素(ADM)及其受体(ADMR)基因表达变化在低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用与意义.方法雄性Wistar大鼠30只,分为对照组和低氧(3,7,14,21天)组, 每组6只,低氧组复制HPH大鼠模型.测定各组平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数 (RVHI)、肺小动脉病理及其形态计量学,组织原位杂交及逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定各基因在肺内的表达.结果 (1)低氧7 天起大鼠mPAP、管壁厚度与血管外径比值及管壁面积与血管面积比值分别为(22.7±2.8) mm Hg, (46±4)%和 (55±6)%, 与对照组 (16.4±1.4) mm Hg、(35±3)%、(42±5)%比较差异有显著性(P<0.01),低氧14天起稳定于高水平;低氧14天RVHI为 (26.5±2.9)%,与对照组(22.9±2.2)%比较差异也有显著性(P<0.01);(2) 原位杂交发现,低氧后ADM及ADMR mRNA 在肺动脉壁呈动态表达变化; 在内皮细胞、低氧3天 ADM与ADMR mRNA分别为6%与8%, 与对照组(3%、27%)比较差异有显著性(P<0.01),低氧7天时分别恢复至33%,52%,低氧14天、21天为高水平表达; 而在外膜细胞、低氧7天 ADM与ADMR mRNA表达分别为42%与46%, 与对照组(19%、21%)比较差异也有显著性 (P<0.01), 低氧14天、21天表达进一步增强;(3)逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)发现,正常大鼠肺匀浆有一定量的ADM、ADMR mRNA表达,吸光度(A)值分别为0.69±0.10、0.48±0.05,低氧3天为0.43±0.48、0.32 ±0.38,与对照组比较(P<0.01),低氧7天ADM开始恢复到0.76 ±0.52, 与对照组比较差异无显著性(P>0.05); ADMR mRNA为0.70±0.50,与对照组比较 (P<0.01),两者低氧14天为高水平表达, 分别为1.13±0.55、0.88±0.60; 常氧时肺内iNOS呈低表达(1.05±0.17),低氧7天后其表达为1.21±0.44,与对照组比较(P<0.01),并与ADM、ADMR分别呈正相关(r=0.893、0.906, P均<0.01) .结论 ADM 很可能以自分泌/旁分泌方式在HPH中起到代偿作用,低氧早期ADM及其受体基因在肺内转录下调可能是导致HPH终形成的一个原因.
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慢性间歇低氧对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者胰岛素功能的影响
目的 探讨慢性间歇低氧及继发的氧化应激对OSAHS患者胰岛素抵抗(IR)、胰腺β细胞功能的影响.方法 研究纳入15例单纯性鼾症患者、31例轻中度OSAHS患者及34例重度OSAHS患者.其中单纯性鼾症患者15例,男14例,女1例;轻中度OSAHS患者31例,男29例,女2例;重度OSAHS患者34人,男31例,女3例.所有患者收集一般临床资料,采用多导睡眠仪整晚监测取得夜间睡眠资料.用ELISA法检测8异前列腺素(8-isoprostane)、空腹血胰岛素(FINS),分光光度计法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px).采用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、FINS评价IR,稳态模型胰腺β细胞功能指数(HOMA-β)评价胰腺β细胞功能.三组数据间的比较采用多个独立样本非参数检验(Kruskal-Wallis H 检验),两两比较采用Nemenyi检验.数据间的相关性采用spearman秩相关分析,采用多元线性回归分析排除数据间的干扰.计数资料采用χ2检验.结果 随着OSAHS病情的加重,3组患者血清8-异前列腺素、GSH-Px、空腹血糖(FBG)、FINS及HOMA-IR整体比较均存在统计学差异(P=0.0034,P<0.0001).3组患者HOMA-β未发现明显差异(P>0.05).血清氧减指数(ODI)、血氧饱和度<90%时间占总睡眠时间的百分比(CT90%)、低氧合血红蛋白饱和度(SaO2)、平均SaO2均与FINS、HOMA-IR存在相关性,相关系数从ODI到平均SaO2逐渐减小.用多元线性回归分析校正年龄、体重指数(BMI)的影响后,ODI、CT90%及低SaO2依然和FINS、HOMA-IR存在相关性,标准化回归系数R从ODI、CT90%到低SaO2逐渐减小.OSAHS患者血清8-异前列腺素、GSH-Px与FINS、HOMA-IR均存在相关性(P<0.05).用多元线性回归分析校正年龄、BMI的影响后,8-异前列腺素仍然和FINS、HOMA-IR存在相关性.HOMA-β与AHI、BMI、ODI、CT90%、低SaO2、平均SaO2、8-异前列腺素、GSH-Px均不存在相关性(P>0.05).结论 OSAHS特征性的慢性间歇低氧与IR独立相关,与低氧严重程度相比,IR与氧减次数的联系更密切.OSAHS增强的氧化应激与IR独立相关,未发现胰腺β细胞功能和慢性间歇低氧及继发的氧化应激之间存在相关性.
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丝裂原活化蛋白激酶调节缺氧诱导因子1α对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达变化在缺氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义.方法 40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C组)和低氧3、7、14、21 d组(H3、H7、H14、H21组),每组8只,低氧组复制HPH大鼠模型.测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;Western blot或免疫组化检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化c-JUN氨基端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化P38(p-P38);原位杂交和免疫组化检测HIF-1α的表达.结果 (1)H7组大鼠mPAP、管壁厚度与血管外径比值及管壁面积与血管面积比值分别为(23.5±1.8)mm Hg、(45.5±3.1)%和(54.7±3.2)%,与C组[(16.2±2.0)mm Hg、(36.8±2.5)%和(63.2±2.5)%]比较差异均有统计学意义(P均＜0.05),H14组稳定于高水平;H14组RVHI为(26.5±2.9)%,与C组[(22.9±2.2)%]比较差异也有统计学意义(P<0.05);(2)p-ERK蛋白在C组表达不明显,在H3组表达上升,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),且在H3、H7、H14、H21组肺小动脉内膜、中膜表达均为阳性.而p-JNK、p-P38蛋白在C组与H组表达均不明显;(3)C组HIF-1α蛋白表达不明显,H3、H7、H14、H21组肺血管内膜均为阳性,肺血管中膜在H3组表达开始升高(0.209±0.009),与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),H7组达高峰(0.232±0.008,P<0.05),H14、H21组下降;HIF-1α mRNA在C组肺动脉血管壁内表达弱阳性,H3、H7组肺血管中表达无明显变化,与C组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).H14组表达增高(0.305±0.104,P<0.05),并持续维持于高水平.相关分析表明p-ERK、HIF-1α mRNA和蛋白与mPAP、血管重塑均呈正相关(P均＜0.01).p-ERK与HIF-1α蛋白(内膜)呈正相关(P<0.01).结论 p-ERK与HIF-1α均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用.p-ERK可能通过使HIF-1α蛋白表达增加的方式上调HIF-1α,进而上调下游目标基因,导致HPH的发生和发展.
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腺苷A2a受体对低氧肺动脉高压大鼠肺血管和肺组织细胞因子信号传导抑制蛋白-3表达的调控作用
目的 探讨腺苷A2a受体(A2aAR)对低氧肺动脉高压大鼠肺血管和肺组织细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS-3)表达的调控作用.方法 SD大鼠30只按照随机数字表法分为3组:对照组,低氧组,低氧+A2aAR激动剂组(激动剂组).低氧组及激动剂组置入常压低氧舱内,氧浓度控制在8％ ～ 11％,CO2浓度维持在1％ ～3％,每天8h(晨8时至16时),每周6d,连续4周,低氧组入舱前腹腔注射生理盐水4 ml/kg,激动剂组入舱前腹腔注射A2aAR激动剂0.2 mg/kg.造模4周后,有心导管法测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP),测定右心室/(左心室+室间隔)厚度[RV/(LV+S)];观察各组肺细小动脉显微结构变化,测定管壁面积/管总面积(WA/TA);用免疫组织化学法测定肺细小动脉管壁A2aAR和SOCS-3含量,实时荧光定量PCR法、Western blot法测定肺组织匀浆A2aAR mRNA、SOCS-3 mRNA和A2aAR蛋白、SOCS-3蛋白含量的变化.结果 低氧组大鼠mPAP为[(20.9±3.9) mmHg,1 mmHg =0.133 kPa],明显高于对照组[(12.6±6.6) mmHg,P＜0.01],激动剂组mPAP为[(14.8±3.8)mmHg],明显低于低氧组(P＜0.01).低氧组RV/(LV+S)为[(35.2±2.0)％],显著高于对照组[(29.6±2.7)％,P＜0.01],激动剂组RV/(LV+S)为[(28.3±8.8)％],显著低于低氧组(P＜0.01).低氧组大鼠WA/TA值为73 ±5,显著高于对照组(48±4,p ＜0.01),激动剂组WA/TA值为54±3,明显低于低氧组(P＜0.01).低氧组大鼠肺血管A2aAR含量为(0.134±0.034),SOCS-3含量为(0.119 ±0.011),两者均高于正常组(P＜0.01),而激动剂组肺血管A2aAR含量(0.201±0.024)和SOCS-3含量(0.136±0.004)较低氧组进一步升高(p＜0.01).与对照组相比,低氧组大鼠肺组织A2aAR mRNA和SOCS-3 mRNA表达增加1.5倍,而激动剂组A2aAR mRNA和SOCS-3 mRNA表达增加2倍.同样,低氧组大鼠肺组织A2aAR蛋白和SOCS-3蛋白表达明显高于对照组,而激动剂组两种蛋白的表达进一步上升.结论A2aAR能够上调低氧肺动脉高压大鼠肺血管和肺组织SOCS-3的表达,该通路可能是其抑制低氧性肺动脉高压和低氧性肺血管重建的重要机制.
关键词： 高血压 肺性 低氧 腺苷A2A受体 细胞因子信号传导抑制蛋白3 -
慢性阻塞性肺疾病患者肺部缺氧诱导因子1α表达研究
近年研究证实,缺氧诱导因子1(HIF-1)在低氧应答反应中起关键作用.我们的实验观察了HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和对照组肺部的表达情况及COPD患者肺构型重建情况.
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阻塞性睡眠呼吸暂停综合征能否引起肺动脉高压
2003年在威尼斯举行的第3届世界肺动脉高压会议修订了肺动脉高压的分类.新分类依然强调了和肺部疾病及缺氧相关的肺动脉高压,其中就包括了睡眠呼吸障碍.按照2005年第2版睡眠疾病国际分类,睡眠呼吸疾病是一组疾病,包括4类:中枢性睡眠呼吸暂停综合征、阻塞性睡眠呼吸暂停综合征、睡眠相关的低通气/低氧综合征及其他睡眠相关呼吸疾病,其中第3类疾病由于会引起夜间持续低氧,将不可避免的导致肺动脉高压.
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双水平气道正压通气治疗70岁以上心力衰竭患者的临床观察
目的：探讨双水平气道正压通气（BiPAP）对高龄慢性心力衰竭急性加重期患者辅助治疗的有效性及安全性。方法分析2011年7月至2012年12月期间在武汉市亚心七医院心内科住院的40例慢性心力衰竭急性加重期的高龄患者[男22例，女18例，年龄（79.0±5.5）岁]的临床资料，对比分析使用BiPAP治疗前、后临床参数的变化（包括呼吸频率、血压、心率、血氧饱和度、血气分析、氨基端脑钠肽前体水平、心功能NYHA分级），统计气管插管率、呼吸机相关并发症发生率。结果与治疗前相比，BiPAP治疗后动脉血气分析氧分压、血氧饱和度均升高（P＜0.001）；收缩压、舒张压、心率、呼吸频率、心功能分级、氨基端脑钠肽前体水平均下降（P＜0.01）；治疗有效38例，气管插管2例；死亡2例。无呼吸机相关性肺炎、恶性心律失常、新发心肌梗死病例。结论 BiPAP辅助治疗能够改善高龄心力衰竭急性加重期患者的多项临床参数，迅速、安全地改善患者的心肺功能。
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急性高原病发病机制的研究进展
高原环境具有低压性低氧、寒冷、辐射强等一系列特点,其中低氧对机体的影响大.急性高原病是指人在到达海拔超过2500米的高原时,可能发生的急性高原反应、高原脑水肿以及高原肺水肿的总称.随着人们对进入高原地区的需求日益增加,急性高原病的发病机制、预防和治疗也得到了更多的关注.目前,该病的发病机制尚未完全阐明,防治也并未出现更多的进展.本文总结了急性高原病发病的可能机制,旨在为急性高原病的预防和治疗提供新的作用靶点.
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低氧习服对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响
目的研究急性低氧和间断低氧习服对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的影响.方法经间断低氧习服(模拟海拔3000m,5000m低氧2周,每天4 h,后8000m低氧4 h)和急性低氧(模拟海拔8000m低氧4 h)的大鼠,麻醉后开胸,迅速取出心脏,观察其离体心脏缺血/再灌注损伤情况.结果离体心脏缺血/再灌时的心率在第3min时低,以后逐渐恢复,低氧习服组和急性低氧组的心率可恢复至缺血前水平,显著高于常氧对照组.反映心脏收缩功能的指标左心室收缩压(LVSP)和+dp/dtmax及反映心脏舒张功能的指标-dp/dtmax在复灌的第3～5 min时降至低,心脏功能损伤较重,以后逐渐恢复.其中低氧习服组大鼠离体心脏的LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax显著高于常氧对照组和急性低氧组.冠脉流出液中的肌酸磷酸激酶(CPK)亦在缺血/再灌后显著升高,且有不断升高的趋势,低氧习服组的CPK含量显著低于常氧对照组和急性低氧组.结论低氧习服可减轻大鼠离体心脏的缺血/再灌损伤.
