首页 > 文献资料
-
慢性间歇低氧对大鼠肝脏的损伤及4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶的干预作用
目的 探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠肝脏损伤机制和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶( tempol)的干预作用及其可能机制.方法 应用CIH大鼠模型,模拟OSAS慢性间歇低氧/再氧和病理生理过程.32只雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为低氧对照组、低氧干预组、低氧盐水组和常氧对照组,共4组,每组8只.CIH各组低氧浓度均为5％,低氧频率均为30次/h,8 h/d.暴露6周后处死大鼠,取肝脏组织行石蜡切片HE染色观察肝细胞形态变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肝脏中核因子-κB、谷胱甘肽过氧化物转移酶(GSH-PX)和丙二醛的水平.结果 肝脏病理检查可见低氧对照组及低氧盐水组肝细胞胞膜破坏,细胞水肿,胞质稀疏,核深染；低氧干预组、常氧对照组未见明显肝脏损害.与常氧对照组比较:低氧对照组和低氧盐水组核因子-κB[(12.4±2.0) ng/g,(12.2±1.9) ng/g]和丙二醛[(101±22)μmol/g,(99±18) μmol/g]水平均升高(均P＜0.05),GSH-PX活性[(88±17) U/mg,(90+15) U/mg]均下降(均P＜0.05)；与低氧对照组、低氧盐水组比较,低氧干预组核因子-κB[(7.8 +1.3) ng/g]和丙二醛[(59±10) μmol/g]水平均下降(均P＜0.05),GSH-PX活性[(181±29) U/mg]均升高(均P＜0.05)；低氧干预组与常氧对照组比较,GSH-PX和丙二醛水平差异均无统计学意义(均P＞0.05),但核因子-κB水平高于常氧对照组[(4.1±0.9) ng/g,P＜0.05]；低氧对照组与低氧盐水组比较以上指标差异均无统计学意义(均P＞0.05).核因子-κB水平与GSH-PX活性和丙二醛水平分别呈负相关(r=-0.0754,P＜0.01)和正相关(r =0.689,P＜0.01)关系.结论 CIH可通过氧化应激和激活前炎性转录因子核因子-κB造成肝脏损伤；tempol可通过抗氧化作用清除活性氧干预CIH肝脏损害的发生.
-
间歇低氧对大鼠交感神经兴奋性的影响及抗氧化剂的干预作用
目的 探究大鼠交感神经兴奋性在慢性间歇低氧(CIH)诱发高血压过程中的作用及交感神经兴奋性增强的机制与氧化应激的关系,观察抗氧化剂4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶( Templ)对血压的干预作用.方法 48只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为6组,每组8只,分别为常氧对照组、间歇低氧空白对照组(低氧对照组)、Tempol预干预组(干预1组)、Tempol后干预组(干预2组)、生理盐水预对照组(对照1组)及后对照组(对照2组).除常氧对照组外均给予间歇低氧环境,其中干预1组和干预2组分别于实验前和实验后第28天给予10％ Tempol 100 mg·kg-1·d-1腹腔注射,对照1组和对照2组同时分别给予等量生理盐水腹腔注射.测定大鼠动脉收缩压、血清去甲肾上腺素、肾上腺素水平以及肾上腺组织匀浆中丙二醛水平.结果 6周后,低氧对照组收缩压与干预1组和干预2组相比,差异无统计学意义.干预1组收缩压[(114±6) mmHg,1 mm Hg=0.133 kPa]与常氧对照组和实验前相比无明显变化,其余各组大鼠收缩压均高于常氧对照组和实验前水平(F值为15.045,均P＜0.05).干预1组和干预2组收缩压[(128 ±6)mm Hg]均低于对照1组[( 138±10)mm Hg]和对照2组[(138±10)mm Hg,均P＜0.05],但干预2组高于干预1组(P＜0.01).常氧对照组收缩压水平与实验前比较差异无统计学意义.低氧对照组与对照1组和对照2组相比,血清去甲肾上腺素、肾上腺素及肾上腺匀浆中丙二醛水平均无统计学意义.干预1组和干预2组去甲肾上腺素、肾上腺素及丙二醛水平均低于对照1组和对照2组(P＜0.05),但干预2组各指标仍高于常氧对照组(P＜0.05)及干预1组(P＜0.05或P＜0.01).干预1组去甲肾上腺素、肾上腺素及丙二醛水平与常氧对照组比较无明显差异.结论 CIH可能导致交感神经活性增强,其途径可能为通过氧化应激产生活性氧,可能是CIH引起高血压的重要机制.抗氧化剂干预可能对防治OSAS合并症高血压发生起到一定作用.
-
4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶基-N-氧化物对高原缺氧小鼠心肌组织损伤的保护作用及机制研究
目的 研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶基-N-氧化物(tempol)对高原缺氧小鼠心肌组织的保护作用及机制.方法 将110只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺组和tempol组,单次腹腔注射给药30 min后,在模拟海拔8 000 m环境停留12h,眼眶取血后,测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性,然后处死小鼠,检测心肌组织中过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量以及ATP酶和抗氧化酶的活性,蛋白印迹法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶-l(HO-1)蛋白的表达水平.结果 与正常对照组相比,缺氧模型组血清中CK和LDH的活性显著增加,心肌组织中H2O2和MDA含量显著升高,ATP酶和抗氧化酶的活性显著降低,HIF-1α、VEGF、Nrf2和HO-1蛋白表达增强.经tempol预处理后能够显著降低高原缺氧小鼠血清中CK和LDH的活性,减少心肌组织中H2O2和MDA含量,提高ATP酶和抗氧化酶的活性,降低HIF-1 α、VEGF蛋白表达,显著提高Nrf2和HO-1蛋白表达.结论 Tempol对高原缺氧诱导的心肌组织损伤具有保护作用,该作用与改善能量代谢,清除自由基,激活Nrf2/HO-1信号途径,提高抗氧化酶活性,降低机体氧化应激有关.
关键词： 4-羟基-2 2 6 6-四甲基哌啶基-N-氧化物 低压低氧 心肌损伤 抗氧化酶 Nrf2/HO-1途径 -
慢性间歇低氧对大鼠血管内皮功能的影响以及抗氧化剂干预作用
目的 通过测定血清中血管活性物质,探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠血管内皮功能的影响,以及抗氧化剂4-羟基-2,2,6,6四甲基哌啶(Tempol)的防治作用.方法 将48只Wistar雄性大鼠随机分为6组,每组8只,包括常氧对照组(NC组)、间歇低氧组(IH组)和4组间歇低氧Tempol干预及其对照组:IHT1组、IHT2组、IHN1组、IHN2组.IHT1、IHT2组分别为实验前和实验后第28天给予10％ Tempol100mg· kg-1·d-1腹腔注射,IHN1、IHN2组于相同时间给予等量生理盐水腹腔注射.结果 IHT2组与IHN2组比较,ET-1水平显著降低(P＜0.05),NO、eNOS水平升高(P值均＜0.05)；但ET-1水平仍高于NC组(P＜0.01),NO、eNOS较其降低(P值均＜0.01).IHT1组ET-1水平低于IHT2组(P＜0.01),NO、eNOS水平较其升高(P值均＜0.01)；各指标与NC组差异无统计学意义.IH组与IHN1组、IHN2组相比,各指标差异均无统计学意义.结论 CIH可能通过氧化应激引起血清ET-1、NO含量失衡,导致内皮功能障碍.抗氧化剂Tempol可减轻血管内皮氧化应激损伤,在改善血管内皮功能方面具有一定的意义.
-
4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶对糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平的影响
目的:研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(tempol)对糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平表达的影响.方法:选取雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及治疗组.糖尿病大鼠造模成功后,给药组灌胃Tempol,其他两组灌胃等量生理盐水.实验4周后检测各组大鼠空腹血糖(BG)、24 h尿白蛋白(UAlb/ 24 h)、肾重/体重(KW/BW),肾皮质中丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,并统计分析.结果:与对照组比较,其他两组BG、UAlb/24 h、KW/BW和MDA含量均升高,SOD活性减弱,GSH-Px活性增强,差异均有统计学意义(P＜0.05);与糖尿病组比较,治疗组UAlb/24 h、KW/BW和MDA含量减少,SOD和GSH-Px活性增强,CAT活性减弱,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:Tempol可降低糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平,延缓其糖尿病肾病的发展.
-
一种消除维生素C干扰的血清尿酸检测方法
目的利用4-羟基-2,2,6,6-四甲基-1-氧-哌啶(AAQ-2)作为维生素C(Vit C)的熄灭剂,建立双试剂终点法测定血清尿酸(UA),以消除Vit C在UA测定中的干扰.方法采用双试剂终点法测定UA.结果方法重复性:日内相对标准差(RSD)为1.50%、1.37%,日间RSD为1.55%、1.40%;平均回收率:99.34%;本法线性可达50～1 550 μmol/L.结论本方法可消除血清中高浓度Vit C对UA测定的干扰,且适用于自动分析仪.
-
Tempol对过氧化氢致RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的保护作用
目的:研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对过氧化氢(H2O2)引起的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的影响.方法:建立H2O2诱导的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤模型,分为空白对照组、H2O2损伤组(0.2 mmol/L H2O2)、低剂量Tempol组(0.2 mmol/L H2O2+0.4 mmol/L Tempol)和高剂量Tempol组(0.2 mmol/L H2O2+0.8 mmol/L Tempol),测定每组细胞培养上清液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:与空白对照组相比,H2O2损伤组培养上清中MDA含量和LDH活性显著升高,SOD活性显著降低(P均< 0.05).与H2O2损伤组相比,低剂量Tempol组与高剂量Tempol组细胞培养上清中MDA的含量[(7.27±0.35) nmol/mL和(7.27±0.26) nmol/mL对(9.55±0.31) nmol/mL, P均<0.05]和LDH的活性[(509.36±38.73) U/L和(492.81±40.36) U/L对(706.24±48.46) U/L,P均<0.05]均显著降低,而SOD的活性[(24.84±0.54) U/mL和(24.84±0.28) U/mL对(21.16±0.61) U/mL, P均<0.05]均显著升高.低剂量Tempol组和高剂量Tempol组MDA含量、SOD和LDH活性无明显差异,Tempol的作用不呈剂量依赖性.结论:Tempol可能通过调节细胞氧化还原系统,对H2O2引起的RAW264.7氧化损伤起到保护作用.
-
Tempol对UVB所致HaCaT细胞凋亡的抑制作用
目的: 确定4-羟基-2,2,6,6-四甲基氧基哌啶(Tempol)对UVB所致HaCaT细胞凋亡的抑制作用.方法: HaCaT细胞分7组,A组:对照组;B组:UVB辐照组;C组:0.5 mM Tempol实验组;D组:1 mM Tempol实验组;E组:2 mM Tempol实验组;F组:4 mM Tempol实验组;G组:8 mM Tempol实验组.除A组外,其余组均辐照UVB,分析各组间HaCaT细胞增殖效应及细胞凋亡率差别.结果: 与B和G组比较,各组HaCaT细胞增殖效应显著升高(P<0.01);与A组比较,(除B组外),各组HaCaT细胞凋亡率随Tempol药物浓度的升高而显著升高(P＜0.01).结论: Tempol对UVB所致HaCaT细胞凋亡有抑制作用,一定范围内其作用随Tempol浓度的升高而降低.
-
Tempo 对肝硬化大鼠肝组织缺血再灌注后肝功能的保护作用及机制
目的：探讨4-羟基-2．2．6．6-四甲基哌啶（ Tempo）对肝硬化大鼠肝组织缺血再灌注后肝功能的保护作用。方法取90只SD成年大鼠采用传统四氯化碳（ CCL4）法制作肝硬化模型并随机分为假手术组、模型组及治疗组各30只。模型组及治疗组行开腹肝门阻断术（假手术组只暴露肝门，不阻断），肝门阻断后30 min恢复血流。治疗组术前缓慢静脉注射TEMPO 10 mg／100 g（用生理盐水稀释10倍），术后每12 h静注1次；模型组及假手术组术前均缓慢静脉注射与治疗组所用药物等体积的生理盐水，术后每12 h静注1次。术后72 h观察两组肝组织病理学变化、细胞凋亡情况；测定肝组织上清液超氧化物歧化酶（ SOD）、过氧化物酶（ CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px）活性及丙二醛（ MDA）水平；测定三组肝功能指标。结果治疗组肝组织上清液中SOD、CAT、GSH-Px活性明显高于模型组（P＜0．05），MDA水平明显低于模型组（P＜0．05）；ALT、AST及LDH水平明显低于模型组（P＜0．05）。结论 TEMPO对肝硬化缺血再灌注损伤大鼠的肝功能有保护作用。
-
Tempol 对肝硬化大鼠肝门阻断后肠道菌群移位及内毒素血症的作用
目的：探讨4-羟基-2，2，6，6-四甲基哌啶（Tempol）对肝硬化大鼠肝门阻断后肠道细菌移位和内毒素血症的作用。方法选择SD大鼠30只，采用四氯化碳诱导行肝硬化建模，将建模大鼠随机均分为假手术组（不阻断肝门）、对照组（阻断肝门）、实验组（阻断肝门前后静注Tempol ）。3组均取门静脉、腔静脉血检测血清内毒素，取肠系膜淋巴结、肝组织、肺组织行细菌培养，以及小肠黏膜形态与细胞凋亡检测。结果与假手术组及对照组比较，实验组可明显减少肝门阻断后的肠道细菌移位及血清内毒素水平（ P均＜0．05）。结论 Tempo1可有效地预防肝硬化大鼠肝门阻断后的肠道细菌移位和内毒素血症。
-
4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶对间歇低氧PMN导致的血管内皮细胞损伤的影响
目的 探讨间歇低氧(IH)模式下多形核中性粒细胞(PMN)对血管内皮细胞造成氧化应激损伤的机制,以及抗氧化剂4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对减轻该损伤的作用.方法 通过向低氧仓中循环充入氮气和压缩空气模拟阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者IH病理生理过程,制造IH大鼠模型.将大鼠随机分为IH组、常氧组、IH+ Tempol组、IH十生理盐水(NS)组.IH组低氧浓度为5％,低氧频率均为30次/h,8 h/d,IH+ Tempol 组及IH+ NS组每天低氧开启前腹腔分别注射Tempol 1 mg/10 g及与Tempol同等体积的NS(已经大鼠体质量校正),常氧组内皮细胞不经过IH处理.大鼠低氧暴露6周后取血分离PMN,将PMN和大鼠动脉内皮细胞共培养后,收集上清液,用ELISA法测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的浓度.结果 与常氧组比较,IH、IH+ NS及IH+ Tempol组CAT和SOD低,MDA高(P均＜0.05);与IH及IH+ NS组比较,IH+ Tempol 组CAT和SOD高(P＜0.05),MDA低(P均＜0.05).结论 IH环境来源的PMN会对血管内皮细胞造成氧化应激损伤,抗氧化剂Tempol能缓解PMN的氧化应激攻击作用而保护OSA患者血管内皮.
-
eNOS和NADPH氧化酶在慢性缺氧条件下小鼠肺组织中表达关系的研究
目的：探讨eNOS和NADPH氧化酶在慢性缺氧条件下小鼠肺组织中表达的关系。方法将野生型及eNOS基因敲除的C57BL/6雄性小鼠各30只随机分为常氧组、低氧7 d组、低氧21 d组、治疗7 d组和治疗21 d组，每种每组小鼠各6只。低氧和治疗组小鼠在10%氧浓度条件下进行饲养，治疗组小鼠饮水中加入10 mmol/L 4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶（TEMPOL）进行干预。比较各组小鼠肺小动脉重塑（MT%）及右心室肥厚指标的变化；ELISA法检测各组肺组织ROS浓度的变化；RT-PCR法检测各组肺组织NOX2、4及eNOS基因表达的变化。结果野生型及基因敲除低氧组小鼠肺血管重塑及右心室肥厚指标较常氧组和治疗组均明显上升（P<0.05），而治疗组和常氧组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。野生型低氧及治疗组小鼠肺组织ROS浓度均低于常氧组（P<0.05），而低氧组和治疗组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。野生型低氧组小鼠eNOS、NOX2和NOX4的mRNA表达较常氧组均显著上升（P<0.05），TEMPOL干预可逆转上述指标的过度表达。基因敲除常氧组小鼠NOX2和NOX4 mRNA表达高于同组野生型小鼠（P<0.05）；慢性缺氧后NOX4 mRNA表达较常氧组差异无统计学意义（P>0.05），NOX2 mRNA表达较常氧组显著下降（P<0.05）；治疗组NOX2 mRNA表达较低氧组进一步下降，而NOX4 mRNA表达较低氧组明显上升（P<0.05）。结论 eNOS是低氧条件下NOX2、4表达的重要调控因素，eNOS和NOX在低氧性肺血管重塑过程中可能有着重要的联系。
