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二维超声联合CA199对提高胆总管结石检出的价值
目的 探讨CA19 9与B型超声联合诊断胆总管结石的价值.方法 120例经ERCP或者外科手术证实为胆总管结石的患者,对术前腹部B超与血清CA19 9水平进行分析.结果 术前B超检查发现胆总管结石90例,占75%,术前血清CA19 9水平升高68例,占57%,B超检查未发现胆总管结石而血清CA19 9升高15例,占25%.结论 术前腹部B超检查结合术前血清CA19 9检查可以提高胆总管结石的诊断率.
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凝胶色谱净化联合气相色谱串联质谱法同位素内标法测定茶叶中9,10-蒽醌
目的 建立GPC-GC-MS/MS、同位素内标法测定茶叶中9,10-蒽醌的方法.方法 称取经均质混匀处理后的茶叶样品,加入一定量d8-蒽醌同位素内标,经环己烷-乙酸乙酯(1∶1,V/v)混合溶剂提取,GPC净化、减压浓缩后,经Agilent DB-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm)色谱柱分离,GC-MS/MS测定,采用MRM多反应监测模式扫描,以保留时间、定性定量离子对的比率定性,内标法定量.结果 该方法的线性范围为10 μg/L～ 200 μg/L,线性相关系数(r)=0.999;检出限和定量限分别为0.003 mg/kg、0.01 mg/kg;该方法的加标回收率为92.2％～95.5％,加标回收试验的精密度为2.70％ ～ 18.80％.结论 该方法定性准确、灵敏度高、线性范围宽、准确度好、精密度高,能满足对茶叶中9,10-蒽醌的定性定量检测;GPC净化茶叶样品,操作简单,适于批量操作.
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辛伐他汀对大鼠心肌梗死后MMP-2,9 mRNA表达的影响
目的: 观察辛伐他汀对大鼠心肌梗死(MI)后心肌基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,9)mRNA表达的影响.方法: 结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)制成急性心肌梗死模型,随机分为3组:分别为辛伐他汀干预组(MI-S)、心肌梗死对照组(MI-C)和假手术组(sham).4周后,RT-PCR法检测左心室梗死区及非梗死区心肌MMP-2和MMP-9 mRNA表达的情况.结果: 大鼠MI4周后左心室心肌MMP-2和MMP-9 mRNA表达较假手术组明显升高(P<0.05),辛伐他汀组上述指标较梗死对照组显著降低(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.05),三组血脂无显著性差异.结论: 辛伐他汀减少大鼠心肌梗死4周后左心室心肌MMP-2和MMP-9 mRNA表达,此改变不依赖其降脂作用.
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槟榔碱诱导上皮细胞凋亡相关蛋白caspase-3,8,9、Bcl-2和Bax的表达
目的:观察槟榔碱刺激上皮细胞后凋亡相关蛋白caspase-3,-8,-9、Bcl-2和Bax的表达情况.方法:0,25,50,75,100,125 μg/mL槟榔碱刺激上皮细胞Hacat 24 h,Western Blot法检测caspase-3,8,9、B(cl-2和Bax的表达情况.结果:随着槟榔碱浓度的增加,caspase-3、caspase-8表达量逐渐增强,但casapse-9表达未见明显上调;胞内Bcl-2表达受到明显抑制,Bax在槟榔碱浓度为125 g/mL时,可见表达明显上调.结论:槟榔碱可通过内源性和外源性途径诱导上皮细胞Hacat发生凋亡,但高浓度槟榔碱对外源性凋亡途径的活化更为显著;槟榔碱可上调促凋亡蛋白Bax的表达并下调抗凋亡蛋白Bcl-2.
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近红外量子点表皮生长因子单克隆抗体荧光探针对金黄地鼠颊黏膜癌变过程的动态可视化荧光成像研究
目的 利用近红外量子点表皮生长因子单克隆抗体荧光探针对由9,10-二甲基1,2苯并蒽(9,10-dimethylen-1,2-benzanthracene,DMBA)诱导建立的金黄地鼠颊黏膜癌变过程进行动态可视化荧光成像研究.方法 (1)用0.5％DMBA丙酮液诱导建立金黄地鼠颊黏膜癌变各期模型;(2)将水溶性近红外荧光量子点(QD800)表面功能性的修饰藕连表皮生长因子受体单克隆抗体(EGFR mAb)后,形成具有靶向功能性的QD800-EGFR mAb荧光探针;(3)将QD800-EGFR mAb经金黄地鼠各期癌变模型尾静脉注射入血液循环系统以靶向适配原理显示其颊黏膜动态癌变过程荧光图像.结果(1)QD800-EGFR mAb能够通过血液循环系统与金黄地鼠颊黏膜癌变细胞上的EGFR特异性的靶向适配并荧光显影;(2)QD800-EGFR mAb显示的荧光图像随着金黄地鼠颊黏膜癌变程度的加深而增强,且能准确地显示癌灶的形状及浸润深度.结论 QD800-EGFR mAb 通过与口腔癌不同癌变阶段癌细胞表面的 EGFR 靶向性适配结合来显示个体化荧光图像,可能对以后临床研治口腔癌的发生发展及转移规律发挥巨大的影响.
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乙肝病毒X蛋白相互作用蛋白促进HepG2细胞迁移并调节β-catenin表达
目的:检测乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(hepatitis B virus X-interacting protein,HBXIP)对HepG2肝癌细胞迁移及β-catenin表达的影响,为深入研究HBXIP与肝细胞癌发生发展的相关性奠定基础.方法:以建立的稳定高表达HBXIP的HepG2细胞系为实验材料,Transwell 实验观察HBXIP 高表达对细胞迁移能力的影响;明胶酶谱分析法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性;免疫印迹实验检测MMP-9、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、p-GSK-3β、β-catenin及p-β-catenin的表达.结果:Transwell 实验结果表明,HBXIP 能够促进HepG2细胞的迁移能力;高表达 HBXIP 的肝癌细胞中,MMP-9的活性及蛋白表达水平均升高;免疫印迹结果表明HBXIP促进了β-catenin的表达,并抑制β-catenin的磷酸化;同时促进GSK-3β(Ser9)的磷酸化.结论:HBXIP与肿瘤细胞的迁移密切相关,HBXIP高表达促进肝癌细胞的迁移可能是其调控GSK-3β/β-catenin表达的结果.
关键词： 肝肿瘤 乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 基质金属蛋白酶 9 β-连环蛋白 -
新型氮杂大环化合物的合成与表征
目的 与方法以邻菲罗啉5,6-二酮和乙二胺为原料,合成了两个新型大环化合物2,3,8,9-二邻菲罗啉-1,4,7,10-四氮杂十二环-1,3,7,9-四烯(化合物1)和2,3,8,9-二邻菲罗啉并-1,4,7,10-四氮杂十二环-1,3,5,7,9,11-六烯 (化合物2).采用元素分析,电喷雾质谱,核磁共振以及电子吸收光谱和荧光发射光谱对化合物进行表征.结果 与结论确定了目标产物的结构,并且推断出在过量的乙二胺存在下,化合物2的脱氢机理.
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瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血浆基质金属蛋白酶-2,9及预后的影响
目的:观察瑞舒伐他汀是否能降低急性冠脉综合征(ACS)患者血浆基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2、MMP-9)水平并降低主要的心脏不良事件(MACE)发生率.方法:34例ACS患者随机分为常规治疗组19例和瑞舒伐他汀结合常规治疗组15例.ELISA法测定入院治疗前和开始治疗后第6个月各组患者血浆MMP-2和MMP-9水平.随访6个月内的MACE发生情况.结果:两组ACS患者治疗前血浆MMP-2和MMP-9水平差异无显著性(P>0.05),且均高于健康对照组(P<0.05).与常规治疗组相比,瑞舒伐他汀结合常规治疗组6个月后血浆MMP-2、MMP-9水平(P<0.05)和MACE发生率显著降低(P<0.05).结论:早期应用瑞舒伐他汀能显著降低ACS患者血浆MMP-2和MMP-9水平,从而减少MACE发生.
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纳米烧伤膏与重组人表皮细胞生长因子联合治疗褥疮创面疗效观察
目的 观察纳米烧伤膏与重组人表皮细胞生长因子联合治疗褥疮创面的疗效.方法 对2005年5月-2008年5月住院的Ⅱ期褥疮患者64例,随机分为观察组和对照组,每组32例.观察组为纳米烧伤敷料和人表皮细胞生长因子(rhEGF)40 u/联合应用在创面上,每日一次;对照组为10%的碘伏清洗创面后外用丁胺卡那霉素换药,每日一次.两组患者均全程记录创面分泌物,创面愈合情况及愈合时间;用明胶酶普法检测褥疮伤口渗液中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)含量水平.结果 观察组患者创面愈合时间为(12.8±1.7)d;对照组患者创面愈合时间为(20.6±2.4)d.两组患者差异有统计学意义(P<0.05).经治疗后两组患者MMP-2,9均呈下降趋势,观察组患者MMP-2,9水平在7 d及21 d时均较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 纳米烧伤膏与重组人表皮细胞生长因子联合治疗能促进褥疮创面的愈合.
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大鼠皮肤MMP-2,MMP-9表达与损伤时间相关性的实验研究
目的:探讨创伤皮肤组织基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase-s,MMPs)-2、9的表达与损伤时间的相关性,为损伤时间推断提供实验依据.方法:建立大鼠皮肤切创模型,应用免疫组织化学技术、图像分析技术检测不同损伤时间大鼠皮肤组织生前及死后MMP-2与MMP-9表达.结果:生前伤组大鼠损伤后皮肤组织内MMP-2与MMP-9在损伤区及损伤区周围皮肤组织中表达明显高于正常埘照组(P<0.05).死后伤组皮肤组织中MMP-2与MMP-9表达与正常对照组比较无明显差异(P>0.05).生前伤组中MMP-2在损伤后0.5 h可见在中性粒细胞中阳性表达,随时间进展表达逐渐增强,并可见在少量血管内皮细胞中阳性表达.12 h后明显增多,3 d达到高峰,维持到第5 d后在炎细胞中表达显著减少,而在成纤维细胞,血管内皮细胞中表达增加,维持在一个相对稳定的水平,12～14 d恢复正常.MMP-9在损伤后1 h可见在中性粒细胞中阳性表达,随时间进展表达逐渐增强,12 h后明显增多,3 d达到高峰,维持到第5 d,5 d后在炎细胞中表达显著减少,而在成纤维细胞,血管内皮细胞中表达增加,维持在一个相对稳定的水平,12～14 d恢复正常.结论:皮肤损伤组织MMP-2与MMP-9表达具有规律性且有良好的时间相关性,可望成为法医学损伤时间推断的指标.
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HGF、c-met蛋白在家兔颊黏膜癌变过程中的表达
目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)、c-met蛋白在家兔口腔颊黏膜鳞状上皮细胞癌变过程中的表达.方法 将含有致癌剂二甲基苯并蒽(DMBA)的溶液及药膜涂抹或贴附于家兔口腔颊黏膜后,应用DMBA 16周后,作病理组织学检查和免疫组织化学检查.结果 口腔颊黏膜中、重度不典型增生发生率达64.6％,不典型增生程度越重,HGF及c-met蛋白表达率越高,染色越明显.结论 应用致癌剂DMBA可初步构建家兔口腔颊黏膜鳞状上皮癌前病变模型,在癌变过程中间质成纤维细胞分泌的细胞因子可能起到重要的促进作用.
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BPDE-DNA加合物体外生成实验研究
目的:探讨体外合成苯并(a)芘与DNA形成加合物的条件.方法:以一定比例混合苯并(a)芘丙酮溶液、DNA溶液、S9混合液、于37℃孵育24 h后,紫外分光光度计扫描DNA图谱,得出DNA结构改变的信息;同时用HPLC检测反应体系中的苯并(a)芘含量、苯并(a)芘代谢物及DNA加合物酸水解后的产物.确定BPDE-DNA加合物生成,质谱验证生成物的结构.结果:反应后DNA紫外大吸收峰红移;HPLC检测发现孵育后反应体系中苯并(a)芘含量降低,反应管有新的物质生成;质谱分析生成物的分子量同于目标产物.结论:一定条件下体外可合成苯并(a)芘-DNA加合物.
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大鼠BPDE-DNA加合物生成及其高效液相色谱测定
目的 研究苯并(a)芘(BaP)诱导大鼠产生(7R,8S)-二羟基-(9S,10R)-环氧-7,8,9,10-四氢苯并(a)芘(BPDE)-DNA加合物的生成.建立以血液为样品的检测染毒大鼠BPDE-DNA加合物的高效液相色谱法.方法 选用清洁级SD大鼠,一次性腹腔注射苯并(a)芘二甲基亚砜溶液(以1%羧甲基纤维素钠为助溶剂)100 mg/kg,5 h后取股静脉血.提取抗凝全血中的DNA,采用琼脂糖凝胶电泳确认DNA的提取效果.将提取的DNA在 0.1 nmol/L HCl、90 ℃恒温水浴箱中酸水解4 h,乙酸乙酯提取酸水解产物--四醇-苯并(a)芘.高效液相色谱法检测,后用高效液相色谱-质谱法确认.结果 BaP 染毒组与溶剂对照组和阴性对照组比较,高效液相色谱检测有新的色谱峰产生,质谱确定其相对分子质量与四醇-苯并(a)芘一致.结论 本实验的染毒方法能使大鼠产生 BPDE-DNA 加合物;建立的高效液相色谱法可以血液为样品检测 BPDE-DNA 加合物.
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复方真武汤对慢性心力衰竭心肌凋亡基因学的相关进展
心肌细胞凋亡是心肌肥大向心衰转化的关键因素,因此,抑制心肌细胞的凋亡对心衰的治疗十分重要.复方真武汤在治疗CHF心肌细胞凋亡方面取得了长足的进展.
关键词： 复方真武汤 慢性心力衰竭 细胞凋亡 sFas sFasL Caspase3 9 -
子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的表达及临床意义
目的 研究半胱天冬氨酸蛋白酶-3,8,9(caspase-3,8,9)在子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义.方法 选择2010年8月至2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇40例,分为子痫前期组20例、正常妊娠对照组20例,采用免疫组化法、蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘中caspase-3,8,9的表达.结果 caspase-3,8,9在子痫前期胎盘和正常妊娠胎盘中均有表达;在子痫前期患者胎盘中,caspase-3,8,9表达与正常胎盘相比显著升高(t值分别为25.09、14.65、8.10,均P<0.01).结论 子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的异常表达与滋养细胞凋亡增加有关,可能是导致子痫前期发生发展的重要病理因素.
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基质金属蛋白酶-2,9,8在成人成牙本质细胞中的表达及转移生长因子对其分泌的影响
目的:观察研究基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在成牙本质细胞中的表达和调控.方法:利用酶谱、Western blot和免疫组化等方法,研究MMP-2,9,8的表达以及转移生长因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)作用后MMP-2,9,8的表达变化.结果:酶谱显示MMP-2、MMP-9在成牙本质细胞中均有表达,TGF-β1上调MMP-2下调MMP-9;Western blot显示成牙本质细胞中有MMP-8的表达,TGF-β1增强其表达;免疫组化检测到MMP-8定位表达在成牙本质细胞层.结论:成牙本质细胞是MMP-2,9,8的来源之一;TGF-β1可能调节MMP-2,9,8的表达.
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龈沟液中MMP-2,9的量与牙周炎的关系
目的观察慢性牙周炎患者在牙周基础治疗前后龈沟液(GCF)中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)水平的变化.方法采用滤纸条的袋内取样法取40例患者40个牙位治疗前(BT组)、治疗后(AT组)的GCF样本,同时取40例健康人的40个牙位的GCF样本,用酶联免疫法(ELISA)检测其中的MMP-2,9的水平.结果牙周基础治疗后GCF中MMP-2,9的总量均较治疗前显著下降(P<0.01),治疗前后MMP-2,9的总量均与对照组有显著差别(P<0.01),治疗前后GCF中MMP-2与MMP-9的含量呈显著正相关(P<0.01).结论 GCF中MMP-2,9的总量在牙周基础治疗后降低,其水平反映牙周组织的破坏和炎症程度,可作为评价疗效的客观指标.
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固相萃取-液相色谱法测定黄芪注射液2个黄烷类化合物的含量
目的:建立黄芪注射液中2个黄烷类化合物的高效液相色谱含量测定方法.方法:采用Agilent ZORBAX-SB-C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(43∶57);流速:1 mL·min-1;检测波长:277 nm;佳固相萃取洗脱条件减少了定量分析的杂质干扰.结果:9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(HQ-1),线性范围为0.0888～1.4208μg,相关系数为0.9999;平均回收率为104.4%,RSD=0.4%.2'-羟基-3',4'-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(HQ-2),线性范围为0.0555～0.888μg,相关系数为0.9999;平均回收率为97.72%,RSD=1.4%.结论:该方法简便、准确、快速,结果可靠,为今后对黄芪注射液的质量控制研究提供了补充依据.
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HPLC法同时测定蒙古黄芪中6个有效成分的含量
目的:建立1种用HPLC同时测定蒙古黄芪中4个黄酮和2个皂苷含量的方法.方法:采用Inertsil ODS-SP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～9 min,25％ A→45％ A;9～20 min,45％A→75％A),黄芪甲苷(S1)、3'-羟基-4-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(S2)和黄芪皂苷Ⅱ(S3)的检测波长为205 nm(检测时间段0 ～9 min),4-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(S4)、9,10-二甲基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(S5)和7-羟基-3',4 '-二甲基-异黄烷醌(S6)的检测波长为245 nm(检测时间段9～ 20 min);柱温为40℃.结果:在选定的实验操作条件下,S1、S2、S3、S4、S5和S6对照液分别在20.00 ～ 100.00 μg·mL-1(r =0.9992)、1.00～ 10.00μg·mL-1(r=0.9997)、20.00 ～ 100.00 μg·mL-1(r=0.9991)、1.00～10.00μg· mL-1(r=0.9999)、10.00 ～ 60.00 μg·mL-1(r =0.9995)和1.00～10.00 μg· mL-1(r=0.9997)浓度范围内具有良好的线性关系,平均回收率分别为96.5％(RSD=2.0％),98.4％(RSD=1.4％),95.5％ (RSD =2.1％),98.5％ (RSD=1.1％),98.8％(RSD=1.3％),98.7％ (RSD=1.1％).结论:采用HPLC在多波长检测条件下可同时测定4个黄酮(2个异黄酮、2个黄烷醇)和2个皂苷的含量,方法简便快速,可为评价该药材质量提供依据.
