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纯钛表面仿生钙磷涂层中牛血清白蛋白的释放行为研究
目的 研究整合牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)后钙磷涂层理化性能的变化,为制备仿生钙磷涂层、探索生长因子的释放行为提供实验基础.方法 将纯钛试件浸入不含BSA(对照组)及含1、10、100mg/LBSA的饱和钙磷溶液中,采用仿生共沉积的方法,形成BSA-钙磷涂层,检测涂层形貌、物相组成、化学官能团,通过BCA蛋白浓度测定试剂盒,定量检测共沉积至涂层的BSA含量,并绘制体外释放曲线.结果 通过仿生共沉积法可成功将BSA整合于钙磷涂层内部;BSA-钙磷涂层主要由羟基磷灰石和磷酸八钙组成;随着饱和钙磷溶液中BSA质量浓度增加,涂层中片状晶体结构转变为细小的网格状结构;1、10、100 mg/L BSA组涂层中BSA的整合率分别为(72.4±2.4)％、(62.3±0.9)％、(42.2±1.7)％,24h和30 d的BSA累积释放量分别为(1.57±0.09)、(8.82±0.93)、(140.24±3.12) μg和(2.39±0.29)、(14.39±0.70)、(151.06±2.00) μg.结论 仿生共沉积法制备的BSA-钙磷涂层可成为有效的BSA载体;BSA的质量浓度可影响其整合率和释放量,BSA质量浓度为10 mg/L时可获得较理想的整合率及体外释放行为.
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牛成牙骨质细胞在体内形成牙骨质样组织的初步研究
目的培养成牙骨质细胞(cementoblasts,CBs),观察以CBs自身作为组织工程支架在裸鼠体内形成牙骨质的可行性. 方法在矿化培养液中培养新生牛的成牙骨质细胞,使其形成多层CBs作为载体(CBs-made carrier)与CBs混合,植入裸鼠皮下.以CBs与胶原膜载体(collagen carrier)复合体作为对照.7周后取材并做HE、von Kossa、茜素红及牙骨质附着蛋白单克隆抗体免疫组化染色. 结果CBs在体内可形成牙骨质样矿化组织,中心矿化程度较高,四周有尚未钙化的类牙骨质及CBs包绕,并有牙骨质细胞埋入矿化组织.以CBs自身作为载体所形成的牙骨质较以胶原膜作为载体所形成的牙骨质样组织多.结论本组分离培养的CBs在体内可形成牙骨质样矿化组织;以多层细胞自身作为载体是一种较理想的生物支架材料.
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bFGF对体外培养新生牛RPE细胞非特异性吞噬功能的影响
目的:为探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对视网膜色素上皮(RPE)细胞吞噬功能的影响.方法:采用新生牛RPE细胞培养,并行免疫组化鉴定.对培养的RPE细胞于0 h、24h、48 h3个时间点分别给予0 ng/ml、1 ng/ml、4 ng/ml、16 ng/ml的bFGF后,加入鸡红细胞悬液,孵育1 h,经清洗固定后于光镜下观察、计数,以判断RPE细胞吞噬功能.结果:应用bFGF后,RPE细胞吞噬率及吞噬指数均明显增加,在一定范围内呈浓度及时间依赖性.结论:bFGF对牛RPE细胞的非特异性吞噬功能有促进作用.
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牛嗜铬细胞体外培养及其分泌多巴胺的测定
为给肾上腺髓质细胞移植治疗帕金森病提供理论依据,观察正常体外培养和冷冻复苏后牛肾上腺嗜铬细胞的形态变化,并检测培养液中的多巴胺含量.结果:悬浮培养嗜铬细胞在培养液中集聚成团,始终保持圆形,并分泌多巴胺,在冷冻复苏后仍存活;单层贴壁培养嗜铬细胞于贴壁后开始变形,伸出短的突起,但于1周后开始退化;体外培养嗜铬细胞分泌多巴胺在5～6 d达高峰.结果提示:肾上腺嗜铬细胞可作为脑内移植治疗帕金森病的细胞来源.
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医用牛颈静脉带瓣管道重建右室流出道临床应用研究
目的 应用牛颈静脉带瓣管道(BJVC)进行心脏右室流出道的重建,探讨BJVC对复杂先天性心脏病外科治疗的效果.方法 2005年10月至2009年5月共应用BJVC治疗复杂先天性心脏病15例.结果 BJVC重建右室流出道15例患者均痊愈出院.随访3～24个月,患者心悸、气促消失,活动耐力明显提高,心功能恢复至Ⅰ～Ⅱ级,超声检测发现15例置入的管道通畅,无扩张,未见血栓形成,瓣叶活动良好,无明显反流,肺动脉跨瓣压差不大,吻合口无狭窄.结论 BJVC用于复杂先天性心脏病右室流出道的重建可获良好的近期治疗效果,但远期效果仍有待进一步观察.
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不同预处理脱细胞牛骨基质复合成骨化骨髓间充质干细胞生物相容性研究
目的 将经成骨化诱导后大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与脱细胞牛骨基质(ABECM)复合,构建组织工程骨.实验着重观察不同预处理方法对构建的组织工程骨的过程--细胞与ABECM复合和生长的影响,为有效快速构建组织工程化骨奠定理论基础.方法 用Wistar大鼠2只,从股骨取MSC在体外扩增、纯化、诱导成骨化,做苏木精-伊红染色鉴定.实验组用胎牛血清(FBS)、多聚赖氨酸(PLL),对照组用磷酸盐缓冲溶液预处理的ABECM复合构建组织工程骨,体外培养.用流式细胞仪计数并计算细胞黏附率、测定碱性磷酸酶活性,倒置光学显微镜、扫描电子显微镜观察细胞生长、增殖情况.结果 接种后6、12h实验组细胞黏附率高于对照组(P<0.05).扫描电子显微镜观察:复合培养第3天,实验组细胞在材料表面已完全伸展,附着在材料表面:对照组细胞大多呈不规则形,未完全伸展.碱性磷酸酶活性测定:复合培养第3、6天,实验组的碱性磷酸酶活性均明显高于对照组(P<0.05).结论用FBS和PLL分别预处理,可以改善ABECM材料表面特性,利于提高细胞接种效率,从而能更有效、更快速地构建组织工程骨.
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妊娠相关血浆蛋白A定量测定方法的建立
目的:建立人外周血妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)定量酶联免疫测定方法.方法:以生物素化牛血清白蛋白-链霉亲和素间接包被微孔板,将标记有生物素的抗PAPP-A抗体作为捕获抗体,结合标本中的抗原成分;标记有辣根过氧化物酶的抗PAPP-A抗体作为检测抗体,经酶催化底物显色,定量测定人体外周血PAPP-A.结果:所建立的测定方法灵敏度为0.31 mg/L,回收率均在95%～100%之间;该方法线性、稳定性及特异性良好;3份低、中、高浓度的血清标本重复测定10次,批内变异系数(CV)均小于10%,批间CV均小于15%;该方法测量结果与国外同类方法测量结果具有相关性(r=0.982,P<0.05),2种检测方法高度相关.结论:本文采用间接包被技术所建立的人外周血PAPPA固相酶联免疫测定方法灵敏、可靠、稳定性好,与国外同类方法的试剂盒之间相关性较高.
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逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞
目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达.方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLC-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒.应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3bGH和2BS/bGH.结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现.RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达.结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高.
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消疣汤联合卡介菌多糖核酸、干扰素霜治疗顽固性扁平疣疗效观察
扁平疣是因感染人乳头瘤病毒而引起的皮肤浅表性良性赘生物.多发于青年人的面部、手背.皮疹为粟粒至黄豆样大小的扁平丘疹,圆形、椭圆形或多角形.表面光滑,稍高于皮肤,正常肤色、淡红色或淡褐色.一般无自觉症状,有时有轻微的瘙痒.2004-01-2006-10,笔者采用消疣汤联合卡介菌多糖核酸、干扰素霜治疗顽固性扁平疣38例,并与卡介菌多糖核酸、干扰素霜治疗30例对照观察,现报告如下.
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注射用阿魏酸钠联合百令胶囊、卡介菌多糖核酸注射液治疗早期糖尿病肾病的疗效观察
2010-04-2012-03,我们应用注射用阿魏酸钠联合百令胶囊及卡介菌多糖核酸注射液治疗早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)46例,并与应用注射用阿魏酸钠治疗36例对照观察,结果如下.
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母牛分支杆菌菌苗辅助治疗初治肺结核的临床研究
目的观察和评价母牛分支杆菌茵苗对初治肺结棱患者免疫功能的影响和疗效.方法采用随机配对分组法将80例痰涂片阳性初治肺结棱患者分为Ⅰ组(40例)和Ⅱ组(40例),均采用2个月异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)、乙胺丁醇(E)和4个月异烟肼、利福平(2HRZE/4HR)化疗方案治疗,Ⅰ组加用母牛分支杆菌茵苗治疗6个月;观察治疗后临床症状改善、肺部病灶吸收、痰菌阴转及免疫功能改善情况.结果Ⅰ、Ⅱ组临床改善情况比较,差异无统计学意义(P＞0.05); Ⅰ组第1个月痰涂片阴转率30.0%,痰培养阴转率30.0%,第2个月痰涂片阴转率70.0%,痰培养阴转率70.0%,Ⅱ蛆第1个月痰涂片阴转率25.0%,痰培养阴转率27.5%,第2个月痰涂片阴转率45.0%,痰培养阴转率47.5%;初始2个月痰茵阴转率Ⅰ组显著高于Ⅱ组(P＜0.05);治疗6个月后Ⅰ组痰涂片阴转率97.5%,痰培养阴转率97.5%,Ⅱ组痰涂片阴转率95.0%,痰培养阴转率95.0%,两蛆痰菌阴转率比较差异无统计学意义(P＞0.05); Ⅰ组病灶吸收好转及空洞缩小关闭速度优于Ⅱ组;Ⅰ组的细胞免疫功能显著改善.结论母牛分支杆菌菌苗能加快痰菌阴转、病灶吸收及空洞缩小关闭的速度,提高免疫细胞活性,是一种较好的免疫调节剂,不良反应少且较轻微,母牛分支杆菌菌苗可用作初治肺结核化疗的辅助治疗.
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宰杀病死牛导致皮肤炭疽3例
炭疽是一种人畜共患的急性传染病,属自然疫源性疾病,曾对人类健康造成极大威胁和危害,按《中华人民共和国传染病防治法》属乙类传染病,其中肺炭疽按甲类传染病管理.我县今年出现了因宰杀病死牛3名屠宰工同时导致了皮肤炭疽,现就有关情况报道如下.
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牛链球菌群感染的研究进展
牛链球菌为β-溶血性链球菌,牛链球菌的分类比较混乱,从人类分离的牛链球菌按其能否发酵甘露醇而分成2个生物型,能发酵甘露醇的菌株称生物Ⅰ型,不能发酵甘露醇的菌株称生物Ⅱ型.现在牛链球菌包括6个种,即解没食子酸链球菌解没食子酸亚种、解没食子酸链球菌巴氏亚种、解没食子酸链球菌马其顿亚种、婴儿链球菌婴儿亚种、婴儿链球菌结肠亚种和不解乳链球菌.牛链球菌与结肠疾病有关,牛链球菌血症和自然及人工瓣膜心内膜炎均与结肠癌有关,因为这种细菌常可从肿瘤患者的粪便和血液中分离到,从肿瘤患者的粪便中分离到更有意义.结肠癌患者粪便的细菌检出率是56%,而其他疾病患者粪便的细菌检出率仅为10%.鉴于国内尚无报告,为了引起大家注意,现仅就牛链球菌的分类及其引起人类感染的情况作一简介,供大家参考.
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花生四烯酸表氧化酶代谢产物促进内皮细胞趋化和迁移
目的研究花生四烯酸表氧化酶代谢产物环氧二十碳四烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)对牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)趋化和迁移的影响及机制.方法 BAECs给予EETs和(或)信号转导抑制剂,以刮痕修复、Boyden小室方法检测细胞趋化和迁移的改变.结果 EETs均显著促进BAECs的趋化和迁移,并呈剂量依赖效应,而一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂、胞外信号调节蛋白激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)抑制剂可显著抑制上述效应.结论 EETs可显著促进BAECs的趋化和迁移,其作用由MAKP和PI3K介导,部分由EETs上调的内皮NOS介导.
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BCG-DNA和BCG-PSN对诱导IFN-γ产生的比较研究
目的 比较研究卡介菌基因组DNA(genomic DNA from mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG-DNA)和卡介菌多糖核酸(polysaccharide nucleic acid fraction from mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG-PSN)的免疫调控活性.方法 制备高纯度BCG-DNA,小鼠脾细胞和人外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cell,hPBMC)分别与BCG-DNA和BCG-PSN共同培养72 h,采用酶联免疫吸附方法检测细胞培养上清中干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平.结果 所制备的BCG-DNA纯度较高(DNA 95.3%),片断大小均匀一致,集中于200～250 bp.BCG-DNA与BCG-PSN均可诱导小鼠脾细胞和hPBMC产生IFN-γ,且当浓度≥10 mg/L时,BCG-DNA诱导产生IFN-γ水平显著强于BCG-PSN(P＜0.01),IFN-γ水平与BCG-DNA浓度呈正相关.结论 BCG-DNA 可显著诱导辅助性T细胞1型细胞因子IFN-γ的产生,其免疫调控活性优于BCG-PSN.
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应用牛颈静脉行上腔静脉置换治疗上腔静脉阻塞综合征的临床观察
目的 探讨应用牛颈静脉行上腔静脉置换治疗上腔静脉阻塞综合征的可行性.方法 2008年2月-2011年5月收治胸部肿瘤侵犯上腔静脉引起上腔静脉阻塞综合征12例,均应用牛颈静脉置换受肿瘤侵犯的上腔静脉.结果 本组术后均恢复顺利,术后12~36 h上腔静脉阻塞症状缓解.术后所有患者接受化疗,2例恶性胸腺瘤术后6个月接受局部放疗.牛颈静脉1年通畅率为100%.1例肺癌术后18个月肿瘤复发未接受治疗,1例肺癌和2例恶性胸腺瘤均于术后24个月死亡.随访期间未见移植的牛颈静脉内血栓形成及钙化.结论 应用戊二醛处理的牛颈静脉对胸部肿瘤引起的上腔静脉阻塞综合征行上腔静脉置换治疗安全可行.
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注射用母牛分枝杆菌菌苗试用于顽固性荨麻疹疗效观察
荨麻疹又称风疹块,是一种皮肤或黏膜发生的、具有剧痒的、一时性迅速出现和消退的局限性水肿性皮疹,部分病例可有发热、恶心、呕吐、腹痛等全身症状[1],是抗原成分(过敏原)引起的变态反应.一般可自行消退或服药后好转,但一些顽固性荨麻疹既找不出过敏原又没有不良反应小的控制药物,使患者非常痛苦.受其病因和母牛分枝杆菌菌苗(微卡)双向免疫调节作用的启示,我们试用微卡治疗顽固性荨麻疹,取得一定效果,现报告如下.
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河南新乡地区牛弓形虫感染情况及危险因素分析
目的 了解新乡地区牛弓形虫感染情况及其危险因素.方法 采用间接血凝法(indirect haemagglutination assay,IHA)对新乡地区2015-2016年采集的牛血样进行弓形虫抗体检测.用SPSS 18.0统计分析年份间及各危险因素的差异.结果 新乡地区牛弓形虫血清阳性率为16.3％ (109/670),其中2015年和2016年牛弓形虫血清阳性率分别为15.1％(48/317)和17.3％ (61/353),年份间弓形虫血清阳性率差异无统计学意义(x2=0.561,P＞0.05);牛弓形虫感染的危险因素中,猫出现次数的多少(x2=41.962,P＜0.05)、是否接触鼠类(x2=34.839,P＜0.05)、消毒次数的多少(x2=24.168,P＜0.05)、有无流产史(x2=213.53,P＜0.05)和磺胺类药物的使用与否之间(x2=77.074,P＜0.05)差异有统计学意义.结论 新乡地区牛弓形虫感染普遍存在,猫多次出现、接触鼠类、消毒次数少、有流产史和未使用磺胺类药物等因素对牛感染弓形虫有影响.
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国外牛、马弓形虫感染及影响因素分析
弓形虫可以感染多种动物和人导致人兽共患弓形虫病.牛和马感染后不仅影响其发育、繁衍,而且对畜牧业发展造成一定的经济损失.若以感染动物来源的奶和肉制品为食物,还可能威胁到人类的健康.本文对境外的牛、马弓形虫感染及影响因素进行了分析.
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2,3,4-三羟基苯甲醛缩4-氨基水杨酸希夫碱的合成表征和性质研究
目的 以2,3,4-三羟基苯甲醛和4-氨基水杨酸为前体,合成2,3,4-三羟基苯甲醛缩4-氨基水杨酸希夫碱.方法 采用回流方法得到产物,对产物进行紫外、红外和核磁的表征和使用荧光光谱进行性质研究.结果 通过荧光光谱法研究HL与牛血清蛋白(BSA)之间存在的相互作用,研究它的猝灭机制,以及HL与BSA在不同温度下相互作用的结合常数Ka,结合位点数n以及热力学参数,以及HL与BSA之间作用的主要作用力.结论 HL与BSA的猝灭机制为静态猝灭,结合位点为1,范德华力和氢键是HL与BSA之间作用的主要作用力.
