首页 > 文献资料
-
花生四烯酸的CYP代谢途径与心肌缺血再灌注损伤
花生四烯酸(从)主要由环氧化酶(COX)、脂加氧酶(LOX)及细胞色素P450(CYP)途径代谢.近年来发现,AA的CYP代谢途径与心肌缺血再灌注(MIR)损伤的关系密切.本文就AA的CYP代谢酶在心脏中的表达、CYP代谢途径对MIR的影响及作用机制做一综述.
-
花生四烯酸表氧化酶代谢产物促进内皮细胞趋化和迁移
目的研究花生四烯酸表氧化酶代谢产物环氧二十碳四烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)对牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)趋化和迁移的影响及机制.方法 BAECs给予EETs和(或)信号转导抑制剂,以刮痕修复、Boyden小室方法检测细胞趋化和迁移的改变.结果 EETs均显著促进BAECs的趋化和迁移,并呈剂量依赖效应,而一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂、胞外信号调节蛋白激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)抑制剂可显著抑制上述效应.结论 EETs可显著促进BAECs的趋化和迁移,其作用由MAKP和PI3K介导,部分由EETs上调的内皮NOS介导.
-
A2A受体-EETs途径在盐敏感性高血压治疗中的作用
激活大鼠腺苷2A受体(A2AR)可使表氧化酶活性增强,从而提高环氧二十碳三烯酸(EETs)的水平,因EETs有扩张肾血管、降血压等作用,故A2AR-EETs途径有抗升压作用.通过盐敏感性高血压遗传模型Dahl盐敏感性(Dahl SS)大鼠和Dahl盐抵抗性(Dahl SR)大鼠的相关实验得知,高盐喂养的Dahl SR大鼠,其腺苷水平及肾脏对腺苷的反应性均提高,使其表氧化酶活性和EETs的水平升高,因而引发更加明显的肾血管舒张反应,即Dahl SR大鼠可通过上调A2A R-EETs途径来调节盐负荷时的血压水平;而Dahl SS大鼠却无上述调节能力.因此在盐负荷时上调Dahl SS大鼠的A2A R-EETs途径,有利于治疗盐敏感性高血压.
-
细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶在人肿瘤组织及肿瘤细胞系中的特异性表达
背景与目的:细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶(cytochrome P450 arachidonic acid epoxygenase 2J2.CYP2J2)作为花生四烯酸的新型代谢途径,在人体中的生物学及病理生理学意义还远未被认识和阐明.本研究主要探讨CYP2J2基因在人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中的表达及其意义.方法:采用RT-PCR、Westem blot和免疫组化法检测CYP2J2在130例不同类型的人癌组织及相应的癌旁正常组织.4例炎性假瘤组织以及8种常见人源肿瘤细胞系和两种非肿瘤细胞系中的表达情况.结果:CYP2J2在78%(101例)的癌组织中特异性高表达,而癌旁正常组织未能检测到CYP2J2表达.而且CYP2J2 mRNA和蛋白表达水平呈高度的相关性(r=0.613,P<0.01).同样.免疫组化结果分析发现78%肿瘤组织中有CYP2J2表达,而癌旁正常组织及4例炎性假瘤均阴性.此外还发现CYP2J2主要在肿瘤细胞中表达.而周围的炎性细胞及间质组织均无CYP2J2表达.8种肿瘤细胞中均高表达CYP2J2,而非肿瘤细胞系则无CYP2J2表达.结论:CYP2J2在肿瘤细胞中选择性高表达,CYP2J2可能是肿瘤发生发展的一个标志物.
-
细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶对肿瘤细胞增殖的影响
背景与目的:细胞色素P450(eytochrome P450,CYP)花生四烯酸表氧化酶对内皮细胞具有促进增殖、抑制凋亡的作用.本研究主要探讨CYP表氧化酶对肿瘤细胞增殖的影响,并初步探讨其影响细胞增殖的相关信号转导机制.方法:用重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)介导CYP花生四烯酸表氧化酶基因CYP2J2(cytochrome P450 2J2)、CYPF87V (cytochrome P450 F87V)和反义CYP2J2基因分别转染A549、Tca-8113、HepG2、Nel.H446 4种肿瘤细胞,采用MTT法、细胞计数法和流式细胞术分析CYP表氧化酶对肿瘤细胞增殖的影响;并用Western blot法检测转染前后Tca-8113细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、ERK1/2和Akt磷酸化水平;后将转染rAAV-CYP2J2、rAAV-CYPF87V、rAAV-antiCYP2J2和rAAV-GFP的Tca-8113细胞分别接种至裸鼠皮下,观察皮下移植瘤的生长情况.结果:转染CYP2J2和CYPF87V后,A549、Tea-8113、HepG2和Ncl-H446细胞的细胞增殖数分别是相应未转染细胞的1.7倍和2.0倍、1.4倍和1.5倍、1.6倍和1.8倍、2.2倍和2.0倍:转染反义CYP2J2阻断细胞自身CYP2J2表达后,上述4种细胞增殖显著减低.流式细胞术结果显示转染CYP表氧化酶基因的肿瘤细胞中S/G2/M期细胞增加了210%.Western blot结果显示,转染CYP2J2基因后,EGFR、ERK1/2和Akt磷酸化水平分别为未转染细胞的2倍、2.3倍和2.4倍.同时P13K表达水平也上调为未转染细胞的1.9倍;相反,转入反义CYP2J2基因明显抑制这些蛋白的磷酸化和表达.在体皮下移植瘤实验结果显示,转染rAAV-CYP2J2、rAAV-CYPF87V组裸鼠皮下移植瘤出现的时间(分别为5.8 d和6.0 d)明显较对照组和转染rAAV-GFP组(分别为8.4 d和8.6 d)短:而转染反义rAAV-CYP2J2组移植瘤生长缓慢,出现时间也明显较长(约10 d).结论:CYP花生四烯酸表氧化酶能促进肿瘤细胞的增殖,其机制可能与激活EGFR、ERK1/2和P13K/Akt途径密切相关.
-
花生四烯酸表氧化酶代谢产物EETs促内皮细胞的增殖
目的研究花生四烯酸表氧化酶及其代谢产物环氧二十碳烯酸(EETs) 对牛主动脉内皮细胞(BAECs)增殖的影响及机制.方法 BAECs使用腺相关病毒介导的表氧化酶转染或给予EETs,或同时给予信号转导抑制剂,分别行细胞计数、噻唑蓝比色法(MTT)检测、流式细胞仪检测.结果表氧化酶转染或EETs刺激均显著促进BAECs的增殖并呈剂量依赖效应,而氧化亚氮合酶抑制剂、胞外信号调节蛋白激酸1/2(extracellular siynal-regulated kinase,ERK)和磷脂酰肌醇3-激酸(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)均可显著抑制上述效应.结论 EETs可显著促进BAECs增殖,其作用由ERK和PI3K介导,部分由EETs上调的NO介导.
