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超声引导下胸膜活检与外周血结核感染T细胞斑点试验对结核性胸膜炎的诊断价值
目的 分析超声引导下胸膜活检联合外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对结核性胸膜炎的诊断价值.方法 采用随机数字表法随机抽取2012年1月至2016年12月解放军第三○九医院全军结核病研究所就诊的156例疑似结核性胸膜炎患者作为研究对象,其中确诊为结核性胸膜炎患者115例,非结核性胸膜炎患者41例.分别对两组患者先后进行超声引导下胸膜活检和外周血T-SPOT.TB检测,比较两种方法单独及联合诊断的效能.结果 超声引导下胸膜活检、外周血T-SPOT.TB检测、联合诊断的敏感度分别为79.13％(91/115)、89.57％(103/115)、95.65％(110/115),联合诊断与各单项诊断比较差异均具有统计学意义(x2值分别是6.11、4.47,P值均＜0.05).超声引导下胸膜活检、外周血T-SPOT.TB检测、联合诊断的特异度分别为100.00％(41/41)、85.37％(35/41)、100.00％(41/41),联合诊断与外周血TSPOT TB检测结果比较差异具有统计学意义(x2=4.82,P=0.028).超声引导下胸膜活检、外周血T-SPOT.TB检测、联合诊断的阳性预测值分别为100.00％(91/91)、94.50％(103/109)、100.00％(110/110),联合诊断与外周血T-SPOT.TB检测结果比较差异具有统计学意义(x2=4.21,P=0.035).超声引导下胸膜活检、外周血T-SPOT.TB检测、联合诊断的阴性预测值分别为63.08％(41/65)、74.47％(35/47)、89.13％(41/46),联合诊断与各单项诊断结果比较差异均具有统计学意义(x2值分别是9.42、4.87,P值均＜0.05).超声引导下胸膜活检、外周血T-SPOT.TB检测、联合诊断的的诊断率分别为84.62％(132/156)、88.46％(138/156)、96.79％(151/156),联合诊断与各单项方法的诊断结果比较,差异均具有统计学意义(x2值分别是4.29、4.07,P值均＜0.05).结论 超声引导下胸膜活检联合外周血T-SPCT.TB检测对结核性胸膜炎有较高的诊断价值.
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结核感染T细胞斑点试验联合腺苷脱氨酶检测诊断结核性胸膜炎的价值
目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合腺苷脱氨酶(ADA)检测诊断结核性胸膜炎的价值.方法 对2015年1-12月黑龙江省传染病防治院确诊或临床诊断为结核性胸膜炎的145例患者和非结核性胸膜炎的59例患者进行回顾性分析.204例患者均于治疗前进行了胸腔积液T-SPOT.TB和ADA检测及外周血T-SPOT.TB检测;对患者胸腔积液T-SPOT.TB、胸腔积液ADA、外周血T-SPOT.TB单独检测,以及胸腔积液T-SPOT.TB与胸腔积液ADA联合检测的结果进行比较.结果 胸腔积液T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的敏感度(98.62％,143/145)高于外周血T-SPOT.TB(88.97％,129/145)和胸腔积液ADA(87.59％,127/145),差异均有统计学意义(x2=11.61,P＜0.001;x2=13.75,P＜0.001);胸腔积液ADA检测的特异度(91.53％,54/59)均高于胸腔积液T-SPOT.TB(64.41％,38/59)和外周血T-SPOT.TB(61.02％,36/59),差异均有统计学意义(x2=12.63,P＜0.001;x2=15.17,P＜0.001);将胸腔积液T-SPOT.TB与ADA联合检测和胸腔积液T SPOT.TB单独检测进行比较,诊断结核性胸膜炎的敏感度由98.62％(143/145)降低至86.21％(125/145),差异有统计学意义(x2=15.94,P＜0.001),但特异度由64.41％(38/59)升高至100.00％(59/59),差异有统计学意义(x2=25.55,P＜0.001).结论 胸腔积液T-SPOT.TB检测结核性胸膜炎具有较高的敏感度和特异度,胸腔积液T-SPOT.TB和ADA联合检测可明显提高诊断的特异度.
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痰标本PCR-反向斑点杂交法对疑似非结核分枝杆菌肺病的诊断价值
目的 探讨痰PCR-反向斑点杂交法对疑似非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值.方法 搜集2014年1月至2017年10月同济大学附属上海市肺科医院收治的、通过临床症状和影像学检查疑诊为NTM肺病的患者334例,分别取痰液行PCR-反向斑点杂交法分枝杆菌菌种鉴定基因检测及分枝杆菌传统培养法[对硝基苯甲酸(PNB)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)培养基生长试验]检测,终确诊为NTM肺病患者218例(NTM肺病组)、结核病患者42例(结核病组)、其他肺部疾病患者74例(研究中予以排除).以终确诊结果为金标准,对痰PCR-反向斑点杂交法诊断临床疑诊NTM肺病患者的敏感度、特异度、阳性预测值和符合率进行分析.结果 疑诊NTM肺病的334例患者中,培养法分枝杆菌检出率为67.66％ (226/334),PCR-反向斑点杂交法分枝杆菌检出率为64.67％(216/334),两种方法分枝杆菌检出率的比较,差异无统计学意义(x2=0.67,P=0.231).确诊的218例NTM肺病患者中,PCR-反向斑点杂交法检出NTM的敏感度为82.57％ (180/218),阳性预测值为98.36％(180/183);培养法检出NTM的敏感度为87.61％(191/218),阳性预测值为100.00％ (191/191);两种方法检出NTM的敏感度比较,差异无统计学意义(x2=1.20,P=0.169).以42例结核病组患者作为对照,PCR-反向斑点杂交法检测的特异度为78.57％ (33/42),诊断结核病的阳性预测值为100.00％ (33/33);培养法的特异度为83.33％(35/42),诊断结核病的阳性预测值为100.00％(35/35);两种检测方法特异度的比较,差异无统计学意义(x2 =0.31,P=0.391).PCR-反向斑点杂交法在两组患者中的诊断符合率为83.08％(216/260),培养法在两组患者中的诊断符合率为86.92％(226/260),差异无统计学意义(x2=1.51,P=0.134).结论 以胸部CT检查为诊断基础的疑似NTM肺病患者中,应用PCR-反向斑点杂交法行痰液NTM检测具有较高的敏感度和特异度,对临床的快速准确诊断和及时治疗有一定的参考意义.
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结核感染T细胞斑点试验在不同患者群中的检测结果分析
目的 探讨影响结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测结果的因素.方法 收集2014年5月至2015年4月同济大学附属上海市肺科医院共1537例住院患者的临床资料.以《临床诊疗指南:结核病分册》的标准将患者分为临床诊断结核病组(1159例)和临床诊断非结核病组(378例);再经病原学诊断及随访排除不能做出终诊断的39例患者后,将患者分为结核病组(1103例;包括经分枝杆菌培养及菌种鉴定确诊的229例和终临床诊断的874例)和非结核病组(395例;包括既往有结核病史或肺部存在陈旧性病灶者94例,无病史者301例1103例结核病组患者中,肺结核557例,结核性胸膜炎107例,淋巴结结核16例,骨关节结核51例,脑结核7例,多组织器官结核363例,其他肺外结核2例;395例非结核病组患者中,经分枝杆菌培养及菌种鉴定确诊的非结核分枝杆菌(NTM)感染患者93例.回顾性分析临床诊断结核病组和结核病组患者T-SPOT. TB检测结果的敏感度、特异度,结核病组与非结核病组患者T-SPOT. TB检测反应强度,不同结核病类型T-SPOT. TB检测阳性率,以及NTM感染患者与结核病患者的年龄差异.结果 (1)临床诊断结核病组T-SPOT. TB检测的敏感度为81.97％ (950/1159)、特异度为53.44％(202/378);结核病组T-SPOT.TB检测的敏感度为83.77％(924/1103)、特异度为54.43％(215/395);结核病组中抗酸染色阳性患者T-SPOT. TB检测阳性率为90.73％(235/259);培养阳性患者T-SPOT. TB检测阳性率为92.58％(212/229).(2)非结核病组有结核病史或肺部显示陈旧性结核病灶的患者与无病史者T-SPOT. TB检测的阳性率分别为69.15％(65/94)和38.21％(115/301),两组间差异有统计学意义(χ2=27.65,P=0.000).(3)结核病组与非结核病组T-SPOT. TB检测结果以斑点计数表示反应强度,结核病组对A、B抗原刺激出现阳性反应(斑点数≥1)的患者中,明显阳性及超强阳性(斑点数≥11)的比率分别为 69.81％(652/934)和69.67％(627/900),明显高于非结核病组[分别为46.83％(96/205)和46.63％(83/178)];经曼-惠特尼秩和检验,差异有统计学意义(Z值分别为-14.20、-14.63,P值均<0.01).(4)1103例结核病组患者中,T-SPOT.TB检测阳性率以淋巴结结核(87.50％,14/16)为高,随后依次为多组织器官结核(87.33％, 317/363)、肺结核(86.54％, 482/557)、结核性胸膜炎(74.77％, 80/107),脑结核(57.14％, 4/7)和骨关节结核(50.98％,26/51)相对较低.(5)T-SPOT. TB检测阳性的NTM感染患者的平均年龄[(53.61± 18.43)岁]较 T-SPOT.TB检测阳性的确诊结核病患者[(44.98±18.88)岁]高,差异有统计学意义(t=- 2.63,P=0.009).结论 T-SPOT. TB检测结果受结核病诊断依据、痰菌量、既往结核病史或肺部陈旧性结核病灶、NTM感染、结核病灶存在的部位等多种因素的影响;T-SPOT. TB检测用于指导结核病诊断时,需综合考虑各项因素.
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胸腔积液γ-干扰素释放试验对老年结核性胸膜炎的诊断价值
目的 评价胸腔积液γ-干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA)对老年结核性胸膜炎(pleural effusion,PE)的诊断价值.方法 选取2013年1月至2015年7月在河北省胸科医院结核内科疑似为结核性胸膜炎的133例老年住院患者,同时进行胸腔积液和外周血的IGRA,依据终结果将患者分为确诊结核性胸膜炎组(简称“确诊组”)、临床诊断结核性胸膜炎组(简称“临床诊断组”)、非结核性胸膜炎组,比较各组胸腔积液和外周血IGRA的敏感度与特异度、阳性预测值与阴性预测值.结果 13例(9.77％)确诊为结核性胸膜炎,63例(47.37％)临床诊断为结核性胸膜炎,57例(42.86％)为非结核性胸膜炎.胸腔积液IGRA的敏感度为90.79％(69/76),明显高于外周血的67.11％(51/76),差异有统计学意义(x2=12.826,P＜0.001);胸腔积液IGRA的特异度为98.25％(56/57),明显高于外周血的84.21％(48/57),差异有统计学意义(x2=7.015,P=0.016);胸腔积液IGRA的阳性预测值为98.57％(69/70),高于外周血的85.00％(51/60),差异有统计学意义(x2=8.380,P＜0.001);胸腔积液IGRA的阴性预测值为88.89％(56/63),明显高于外周血的65.75％(48/73),差异有统计学意义(x2=10.059,P=0.002).结论 与外周血IGRA相比,胸腔积液IGRA可大幅提高对老年结核性胸膜炎的敏感度和特异度、阳性预测值和阴性预测值,明显提高对老年结核性胸膜炎的诊断水平.
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全血γ-干扰素释放试验在结核病辅助诊断中的价值
目的 评价全血γ-干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA)-QuantiFERON@-TBGold IT试验试剂盒在结核病辅助诊断中的价值.方法 搜集重庆市公共卫生医疗救治中心结核科和感染科2014年7月1日至2015年12月31日期间同步进行痰液抗酸杆菌涂片、快速培养(BACTECTM MGITTM 960)及采用IGRA测定外周血结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素(IFN-γ)应答水平的1440例患者临床资料,采用卡方检验分析不同类别患者间不同检测技术阳性率的差异,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与临床诊断结果相比,IGRA检测全血诊断结核病的敏感度为77.6％(716/923),特异度为69.9％(158/226).与痰涂片[肺结核、肺外结核、HIV感染或AIDS患者并发肺结核的阳性率分别为28.5％(226/792)、5.3％(7/131)、6.1％ (6/98)]、液体培养[肺结核、肺外结核、HIV感染或AIDS患者并发肺结核的阳性率分别为40.9％ (324/792)、13.0％(17/131)、11.2％(11/98)]检测结果相比,IGRA诊断肺结核[77.0％(610/792)]、肺外结核[80.9％(106/131)]和HIV感染或AIDS患者并发肺结核[50.0％(49/98)]的阳性率更高,差异有统计学意义(与痰涂片比较,x2值分别为373.52、152.51、46.73,P值均＜0.01;与液体培养比较,x2值分别为212.03、121.38、34.68,P值均＜0.01).结论 IGRA检测快速便捷,有着较高的敏感度.IGRA对结核病辅助诊断有一定的价值,尤其对肺结核、肺外结核,以及HIV感染或AIDS并发肺结核患者的诊断有一定意义.
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PstS1-ESAT-6抗原血清学和γ-干扰素释放试验辅助诊断结核病的价值
目的 分析重组融合蛋白PstS1-ESAT-6抗原血清学和γ-干扰素释放试验辅助诊断结核病的潜在价值.方法 选取40只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级BALB/c小鼠和18只SPF级豚鼠,均分别注射卡介苗(BCG)或热灭活结核分枝杆菌.选取解放军第三○九医院全军结核病研究所于2012年3-8月收治入院的129例结核病患者(结核病组)、54例非结核性肺部相关疾病患者(非结核病组)和194名健康者(健康对照组)作为研究对象.研究对象均采集外周静脉血.外周血单个核细胞(PBMC)和免疫的小鼠脾淋巴细胞经重组融合蛋白PstS1-ESAT-6体外刺激,应用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测经抗原刺激后释放γ-干扰素(IFN-γ)的效应T淋巴细胞即斑点形成细胞(SFC);应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血浆和免疫小鼠血清抗重组融合蛋白PstS1-ESAT-6的IgG;应用孟都法(Mantoux)检测健康者BCG-PPD皮试、免疫豚鼠BCG-PPD皮试及重组融合蛋白PstS1-ESAT-6皮试.结果 结核病组PBMC体外经重组融合蛋白PstS1-ESAT-6刺激,分泌IFN-γ的SFC数为(45.02±68.03)/2.5×105个PBMC,高于非结核病组的(11.87±38.63)/2.5×105个PBMC和健康对照组的(5.24±15.46)/2.5×105个PBMC (F=32.96,P=0.000).ELISPOT诊断结核病患者的敏感度为82.2％(106/129),诊断非结核病组患者和健康者的特异度分别为87.0％(47/54)和90.2％(175/194),两者特异度比较差异无统计学意义(x2=0.45,P=0.500).结核病组血浆中抗重组融合蛋白PstS1-ESAT-6的IgG水平(平均A492值为0.82±0.66)高于非结核病组[平均A492值为(0.60±0.30)]和健康对照组[平均A492为(0.36±0.20)](F=43.60,P=0.000);ROC分析确定检测临界值为0.49,其用于诊断结核病的敏感度为62.2％(69/111)、诊断非结核病组的特异度为40.4％(19/47)、诊断健康者的特异度为84.5％(164/192),诊断非结核病组与健康组的特异度比较,差异有统计学意义(x2=42.60,P＜0.01).热灭活结核分枝杆菌免疫豚鼠均产生BCG-PPD和重组融合蛋白PstS1-ESAT-6皮试反应,所有豚鼠皮肤出现红肿或硬结平均直径＞5 mm;热灭活结核分枝杆菌免疫小鼠,重组融合蛋白PstS1-ESAT-6的ELISPOT和ELISA检测均为阴性.BCG免疫豚鼠只产生BCG-PPD皮试反应,硬结平均直径为(10.08±0.36) mm,不产生重组融合蛋白PstS1-ESAT-6皮试反应;BCG免疫小鼠,重组融合蛋白PstS1-ESAT-6的ELISPOT检测阴性,而ELISA检测为阳性.结论 ELISPOT用于结核病诊断优于血清学诊断,但其诊断活动性结核病价值还需进一步论证.
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γ干扰素释放试验检测颈部淋巴结细胞悬液辅助诊断颈部淋巴结结核的初步报告
目的 评估γ干扰素释放试验(IGRA)检测颈部淋巴结细胞悬液对颈部淋巴结核的辅助诊断价值.方法 将2015年1月至2016年5月在新疆维吾尔自治区人民医院收治的48例颈部淋巴结肿大患者采用复合诊断标准分为颈部淋巴结结核组(21例),非颈部淋巴结结核组(27例),对48例患者的外周血和颈部淋巴结细胞悬液进行γ干扰素释放试验检测,运用SPSS 19.0软件进行数据分析,两组间斑点形成细胞(SFCs)个数的比较采用Mann-Whitney U检验,样本间率的比较采用χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 IGRA检测颈部淋巴结细胞悬液和外周血的敏感度分别为90.48%(19/21)、95.24%(20/21),差异无统计学意义(χ2=0.00,P>0.05),颈部淋巴结细胞悬液和外周血的特异度分别为70.37%(19/27)、92.59%(25/27),差异有统计学意义(χ2=4.43,P<0.05).颈部淋巴结结核组中IGRA检测外周血和颈部淋巴结细胞悬液的SFCs中位数及上下四分位数[M(Q1,Q3)]分别为109(52,186)个、68(30,156)个,不同标本间检测的SFCs中位数差异无统计学意义(U=175.00, P>0.05).非颈部淋巴结结核组中IGRA检测外周血和颈部淋巴结细胞悬液的SFCs M(Q1, Q3)分别为0(0,18)个、0(0,3) 个,不同标本间检测的SFCs中位数差异无统计学意义(U=271.00,P>0.05).颈部淋巴结结核组的淋巴结细胞悬液SFCs明显高于非颈部淋巴结结核组的淋巴结细胞悬液SFCs,差异有统计学意义(U=45.00,P<0.05).结论 γ干扰素释放试验检测颈部淋巴结细胞悬液具有可行性,对颈部淋巴结结核的辅助诊断有一定的价值.
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结核感染T细胞斑点试验对使用免疫抑制剂患者并发肺结核的诊断价值
目的 探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对使用免疫抑制剂患者并发肺结核的诊断价值.方法 收集2013年7月至2015年12月广州市胸科医院收治的197例使用免疫抑制剂并发肺结核患者(简称“观察组”),及同期住院的200例未使用免疫抑制剂的肺结核患者(简称“对照组”)作为研究对象.所有患者均通过痰液或支气管灌洗液(BALF)的涂片或培养查找抗酸杆菌,对阳性菌株行菌种鉴定以排除非结核分枝杆菌,结合胸部X线摄影检查符合活动性肺结核表现,肺结核诊断均符合《肺结核诊断和治疗指南》标准.比较两组患者血T-SPOT.TB、抗酸杆菌金胺O荧光染色涂片镜检(简称“金胺O涂片镜检”)、BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960”),以及结核菌素纯蛋白衍生物试验(PPD试验)检测阳性率的差异.采用SPSS 19.0软件对计数资料进行x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 观察组与对照组患者的血T-SPOT.TB检测阳性率[分别为85.28％(168/197)、96.00％(192/200)]均明显高于金胺O涂片镜检[36.55％(72/197)、35.50％(71/200)](x2值分别为98.24、162.53,P值均=0.000),MGIT 960[53.81％(106/197),57.50％(115/200)](x2值分别为46.06、83.06,P值均=0.000),PPD试验[34.52％(68/197),63.50％(127/200)](x2值分别为105.66、65.40,P值均=0.000).观察组患者T-SPOT.TB、PPD试验检测阳性率均明显低于对照组(x2值分别为13.50、33.36,P值均=0.000).结论 在使用免疫抑制剂患者并发肺结核时采用血T-SPOT.TB技术进行检测仍具有较高的阳性率,较传统的检测方法具有更高的辅助诊断价值.
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三种检测方法联合使用对结核性胸膜炎的诊断价值
目的 探讨结核性胸膜炎患者外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)及胸腔积液结核分枝杆菌DNA荧光定量聚合酶链反应(TB-DNA-PCR)联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值.方法 收集2012年1月至2014年5月在上海市肺科医院住院的胸腔积液患者399例,其中确诊为结核性胸膜炎296例,非结核性胸膜炎103例.分别采集患者外周血和胸腔积液,进行外周血T-SPOT.TB、胸腔积液ADA和胸腔积液TB-DNA PCR的检测,分别计算3项检测的敏感度和特异度,以及串联联合检测(ADA、TB-DNA-PCR和T-SPOT.TB检测结果均为阳性视为阳性结果)和并联联合检测(ADA、TB-DNA-PCR和T-SPOT.TB任意一项检测结果为阳性视为阳性结果)的敏感度和特异度.样本“率”的比较采用x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 分别采用ADA检测、TB-DNA-PCR和T-SPOT.TB的方法对296例结核性胸膜炎和103例非结核性胸膜炎患者进行检测,敏感度分别为90.88％(269/296)、31.42％(93/296)和81.76％(242/296);胸腔积液ADA检测的敏感度高于外周血T-SPOT.TB,差异有统计学意义(x2=11.23,P=0.000);外周血T-SPOT.TB的敏感度高于胸腔积液TB-DNA-PCR,差异有统计学意义(x2=152.66,P=0.000).ADA检测、TB-DNA-PCR和T-SPOT.TB方法的特异度分别为78.64％(81/103)、97.09％ (100/103)和73.79％(76/103);胸腔积液TRDNA-PCR的特异度高于外周血T-SPOT.TB,差异有统计学意义(x2=22.47,P=0.000);胸腔积液TB-DNA-PCR的特异度高于胸腔积液ADA检测,差异有统计学意义(x2=16.43,P=0.000);而胸腔积液ADA检测与外周血T-SPOT.TB的特异度差异无统计学意义(x2=0.67,P=0.513).对3项诊断方法进行联合检测,行串联试验时,特异度高达99.03％(102/103),敏感度为28.38％(84/296);行并联试验时,敏感度高达99.32％(294/296),特异度为69.90％(72/103).结论 胸腔积液ADA检测、胸腔积液TB-DNA-PCR及外周血T-SPOT.TB进行串联联合检测特异度较高,能够更好地降低误诊率;并联联合检测敏感度较高,能够更好地降低漏诊率.
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结核感染T细胞斑点试验在糖尿病并发肺结核诊断中的价值
目的 探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对糖尿病并发肺结核患者的诊断价值.方法 回顾性分析了2012年12月至2015年11月在北京胸科医院、苏州市第五人民医院、湖南省胸科医院、新疆维吾尔自治区胸科医院、河北省胸科医院、昆明市第三人民医院结核科住院的207例糖尿病并发肺结核及95例单纯糖尿病患者临床资料,其中糖尿病并发培养阳性肺结核患者组141例(简称“Ⅰ组”)、糖尿病并发培养阴性肺结核患者组(简称“Ⅱ组”)66例、单纯糖尿病患者组(简称“Ⅲ组”)95例.应用全血T-SPOT.TB试剂盒检测外周血淋巴细胞对MTB菌株早期分泌性靶抗原6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)的免疫反应.结果 T-SPOT.TB检测在Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组患者中的阳性率分别为92.9％ (131/141) (95％CI:87.3％～96.5％)、86.4％ (57/66)(95％CI:75.7％～93.6％)、48.4％ (46/95)(95％CI:38.0％～58.9％).Ⅰ组的T-SPOT.TB检测阳性率高于Ⅲ组,差异有统计学意义(x2=59.91,P＜0.01);Ⅱ组的T-SPOT.TB检测阳性率高于Ⅲ组,差异有统计学意义(x2=24.33,P＜0.01).Ⅰ组的T-SPOT.TB检测阳性率与Ⅱ组接近,差异无统计学意义(x2=2.31,P=0.129).以肺结核临床诊断为金标准,T-SPOT.TB检测糖尿病并发肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断准确度分别为90.8％ (188/207) (95％CI:86.0％～94.3％)、51.6％(49/95) (95％CI:41.1％～62.0％)、80.3％(188/234) (95％CI:74.7％～85.2％)、72.1％(49/68) (95％CI:59.9％～82.3％)、78.5％(237/302) (95％CI:73.4％～83.0％).结论 T-SPOT.TB检测糖尿病并发肺结核具有较高的阳性率、敏感度和特异度,可以作为糖尿病并发肺结核的一种辅助诊断方法.
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结核分枝杆菌效应T细胞检测在诊断活动性结核病中的价值
目的 分析结核分枝杆菌效应T细胞检测法在诊断活动性结核病中的价值.方法 选取2015年1-12月来自上海市公共卫生临床中心、上海市肺科医院和沈阳市胸科医院的708例活动性结核病患者、289例非结核肺部疾病患者和55名健康志愿者作为研究对象.将55名健康志愿者和289例非结核肺部疾病患者作为非活动性结核组.活动性结核组包括68例肺外结核患者和640例肺结核患者,肺结核并发肺外结核者归属为肺结核患者;在肺结核患者中有230例患者痰标本的细菌学检查呈阳性,410例痰标本细菌学检查阴性.分离研究对象外周血单核细胞,应用结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒进行检测,评价该检测方法的诊断效能.结果 结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒检测活动性结核组的敏感度为81.78％(579/708);检测非活动性结核组的特异度为79.36％(273/344);检测健康志愿者的特异度为89.09％(49/55).在经检测结果为阳性的650例研究对象中,正确检出阳性579例,阳性预测值为89.08％;在所有检查结果为阴性的402例研究对象中,正确检出阴性273例,阴性预测值为67.91％(273/402);阳性似然比、阴性似然比和正确诊断效率依次为3.96、0.23和80.99％(852/1052).检测痰检阳性患者的阳性检出率相对更高,为84.78％(195/230);检测肺结核并发肺外结核患者的阳性检出率为91.49％(43/47).结论 结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒对于活动性结核病的诊断具有较高的敏感度和特异度,尤其在肺结核并发肺外结核的患者以及痰检阳性的肺结核患者中效果较好,可用于辅助诊断活动性结核病.
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结核感染T细胞斑点试验在恶性肿瘤并发结核病患者中的应用价值
目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测恶性肿瘤并发结核病患者的应用价值.方法 选取西安市胸科医院2016年1-12月期间收治确诊的恶性肿瘤并发结核病的患者102例、恶性肿瘤患者64例、单纯结核病患者80例.抽取研究对象外周血并分离出外周血单个核细胞(PBMC),分析T-SPOT. TB检测不同人群的结果.同时分析T-SPOT. TB检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度,及其与抗酸染色和(或)病理检查结果的一致性.结果 T-SPOT. TB检测恶性肿瘤并发结核病组阳性率为85.29％(87/102),检测恶性肿瘤组的阳性率为26.56％(17/64),差异有统计学意义(χ2=57.97,P<0.01);检测单纯结核病组的阳性率为91.25％(73/80),与恶性肿瘤并发结核病组比较,差异无统计学意义(χ2=1.50,P=0.221);进一步比较A、B抗原反应点数,恶性肿瘤并发结核病组与单纯结核病组患者A抗原阳性斑点数的中位数(四分位数:Q1,Q3)分别为56.50(30.25,83.25)个和45.50(32.00,75.00)个;B抗原阳性斑点数的中位数(四分位数,Q3)分别为63.50(43.25,98.00)个和55.00(24.00,101.50)个,两组比较差异均未见统计学意义(Z值分别为-0.66和-0.30,P值分别为0.539和0.796).T-SPOT. TB检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度分别为85.29％(87/102)和73.44％(47/64);与抗酸染色和(或)病理检查比较,T-SPOT. TB检测的Kapta值为0.61.结论 T-SPOT. TB检测对恶性肿瘤并发结核病患者有较好的检测效能,可用于辅助诊断.
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γ-干扰素诱导蛋白10在结核病诊断中的研究进展
γ-干扰素诱导蛋白10(interferon-γ inducible protein 10,IP-10)属于CXC趋化因子,CXC趋化因子受体3(CXCR3)是其唯一的配体,IP-10主要由γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)诱导产生,介导1型辅助性T细胞(Th1细胞)炎症反应.IP-10有强大的趋化淋巴细胞能力,检测血清中的IP-10水平在活动性肺结核、肺外结核及儿童肺结核的诊断中都表现出了较高的诊断效能,其诊断敏感度和特异度均高于γ-干扰素;而且血清中IP-10水平降低与抗结核药物治疗表现出良好的相关性,对抗结核药物治疗的疗效监测是一个有效的生物标志物.随着I-P10检测技术的发展与完善,其对结核病的诊治能起到更积极的作用.
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结核病诊断中酶联免疫斑点试验检测试剂临床应用的风险评估与控制
通过对可能影响γ干扰素释放试验(IGRA)的酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测结果的受试者、检测方法、环境设施和仪器等因素的风险识别与分析,提示ELISPOT检测试剂在临床结核病诊断应用中可能产生的风险,并提出相应的风险控制措施,以降低该类试剂的检测风险.
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酶联免疫斑点试验在脊柱结核辅助诊断中的应用价值
目的 评价酶联免疫斑点(ELISPOT)试验在脊柱结核诊断中的应用价值.方法 选择2013年5月至2017年1月在安徽省胸科医院确诊为脊柱结核的患者98例(脊柱结核组)和非结核病患者77例(非结核组).采用ELISPOT检测脊柱结核组和非结核组外周血单个核细胞,观察斑点形成细胞的个数;患者同时接受结核菌素皮肤试验(PPD)及血结核抗体(TB-Ab)检测,其中PPD皮肤试验分别采用红肿硬结平均直径≥5mm和≥15 mm两种标准,标记为PPD-5和PPD-15,并对比分析以上检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值.结果 ELISPOT在脊柱结核诊断中的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为93.88％(92/98)、92.21％(71/77)、93.88％(92/98)和92.21％(71/77).PPD-5和PPD-15皮肤试验的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为86.73％(85/95)和52.04％(51/98)、74.03％(57/77)和89.61％(69/77)、80.95％(85/105)和86.44％(51/59)、81.43％(57/70)和59.48％(69/116).血TB-Ab检测的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为48.98％(48/98)、61.04％(47/77)、61.54％(48/78)和48.45％(47/97).血ELISPOT的敏感度、阴性预测值高于PPD-15试验(x2=43.47,P＜0.01;x2 =28.65,P＜0.01);特异度、阳性预测值、阴性预测值高于PPD-5试验(x2 =9.07,P＜0.01;x2=7.45,P＜0.01;x2=4.98,P=0.026);敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于血TB-Ab试验(x2=48.40,P＜0.01;x2=20.88,P＜0.01;x2=29.59,P＜0.01;x2=44.97,P＜0.01),以上差异均有统计学意义.非结核组标本中早期分泌抗原靶蛋白6 (ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)特异性T淋巴细胞分泌γ干扰素的淋巴细胞斑点数[中位数(四分位数),M(Q1,Q3)]分别为0(0,3)和0(0,2)个,脊柱结核组标本中ESAT-6和CFP-10特异性T淋巴细胞分泌γ干扰素的淋巴细胞斑点数分别为29.00(9.57,57.75)和20.00(7.50,73.75)个,脊柱结核组均高于非结核组,差异均有统计学意义(U值分别为492.00和427.00,P值均＜0.01).结论 ELISPOT应用于脊柱结核的诊断有良好的敏感度和特异度,可作为脊柱结核感染辅助诊断的有效方法.
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γ-干扰素释放试验对不同年龄组疑似肺结核的辅助诊断价值
目的 探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对不同年龄疑似肺结核病例的辅助诊断价值.方法 回顾性分析2012年11月至2014年2月首都医科大学附属北京胸科医院收治的疑似肺结核病例1 518例,所有病例均无结核病史,并在抗结核治疗前行T-SPOT.TB检测.根据诊断结果分为肺结核确诊组599例,男388例,女211例,年龄16 ～89岁;非结核组235例,男144例,女91例,年龄14～ 85岁,剔除其余诊断不明和临床诊断肺结核病例684例.按照年龄将纳入人群分为中青年组536例(14 ～ 59岁)和老年组298例(60 ～ 89岁).将T-SPOT.TB结果与诊断结果进行比较,分析T-SPOT.TB的诊断效能.组间样本率比较采用x2检验,组间非正态分布计量资料比较采用Mann-Whitney U检验.结果 T-SPOT.TB诊断的敏感度为90.1％(540/599),特异度为65.5％(154/235),阳性预测值为86.9％(540/621),阴性预测值为72.3％(154/213),阳性似然比为2.61,阴性似然比为0.15.中青年组T-SPOT.TB诊断的敏感度和特异度为92.6％(375/405)和75.6％(99/131),老年组T-SPOT.TB诊断的敏感度和特异度为85.0％ (165/194)和52.9％ (55/104),前者的诊断敏感度和特异度均显著高于后者(P＜0.01),且外周血单个核细胞(PBMC)斑点形成数显著高于后者[300个(128 666个)/106pBMCs,258个(79 621个)/106pBMCs,P=0.037].结论 T-SPOT.TB对中青年肺结核有较好的辅助诊断价值,但对老年肺结核的诊断性能相对较低.
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上海市流动人口肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌潜伏感染情况及危险因素
目的 了解上海市流动人口肺结核患者密切接触者MTB潜伏感染(LTBI)情况及相关危险因素.方法 本研究以上海市徐汇区、闵行区和松江区2013-2014年确诊、登记的流动人口肺结核患者及其密切接触者作为研究对象,以问卷调查收集研究对象的基本情况和MTB感染相关信息,应用γ-干扰素释放试验(IGRAs)中的结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)结合肺结核相关检查识别LTBI感染者.采用单因素及多因素logistic regression模型分析影响研究人群LTBI感染的相关因素.结果 研究共纳入360名密切接触者,年龄2 ～ 83岁,平均(34±14)岁;男160名,女200名.360名密切接触者中T-SPOT.TB试验阳性62名,且均无肺结核相关症状和体征,LTBI感染率为17.2％(62/360).所有LTBI感染者均与肺结核患者共同居住(x2=16.814,P＜0.001).多因素分析结果显示,与有症状(咳嗽、咳痰等)的患者接触(aOR=2.696,95％ CI为1.060～6.857)以及接触时间长(aOR=1.007,95％ CI为1.001～1.014)是密切接触者发生LTBI的危险因素,与年龄、性别、卡介苗接种、患者诊断延误天数、初复治以及接触场所环境等因素无关.结论 上海市流动人口肺结核患者密切接触者的LTBI感染率为17.2％,与有症状的结核患者接触及接触时间是LTBI的危险因素,及时治疗和隔离有症状的结核病患者可有效降低密切接触者LTBI感染风险.
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慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T细胞Tim-3表达及意义
目的 分析慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD8+T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)的表达及其意义.方法 用流式细胞术检测58例CHB患者和16名健康体检者PBMC中CD8+T细胞Tim-3的表达水平.采用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测Tim-3单克隆抗体阻断Tim-3/Tim-3L通路前后HLA-A2阳性患者PBMC中产生IFNγ的HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)数量的改变.阻断前后斑点数量的比较采用配对t检验,定量资料用Spearman非参数检验进行相关性分析.结果 CHB患者PBMC中CD8+T淋巴细胞Tim-3分子表达水平为(14.2±8.98)％,明显高于健康体检者的(4.80±2.92)％,差异有统计学意义(x2=92.48,P＜0.05).16例重度CHB患者和42例轻度CHB患者CD8+T细胞Tim-3表达分别为( 19.54±10.95)％和(9.58±7.30)％,差异有统计学意义(x2=77.24,P＜0.05).Tim-3单克隆抗体阻断Tim-3通路前,CHB患者PBMC中产生IFNγ的HBV特异性CTL数量为7.27 ±3.14,阻断后为19.62 ±4.97,差异有统计学意义(t=2.95,P ＜0.05).结论 CHB患者PBMC中CD8+T细胞高表达Tim-3分子抑制了HBV特异性CTL功能,阻断Tim-3通路可以促进表达IFNγ的HBV特异性CTL增殖,增强抗病毒效应.
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T细胞斑点试验在肺结核诊断和疗效评价中的意义
目的 探讨基于γ-干扰素释放的T细胞斑点试验( T-SPOT.TB)对诊断肺结核及评价抗结核疗效的意义.方法 采用T-SPOT.TB检测55例活动性肺结核患者、14例肺部病变非肺结核患者和12名健康体检者外周血特异性T细胞释放IFNγ的斑点形成细胞数(SFC),并对20例痰菌及T-SPOT.TB均阳性的活动性肺结核患者在治疗前、治疗第2个月末和第6个月末分别行T-SPOT.TB检测.多组间的比较采用多个独立样本Kruskal-Wallis H检验,组间两两比较采用Mann-Whitney U检验,治疗前后SFC数值差异比较采用Wilcoxon符号秩检验.结果 肺结核组T-SPOT.TB阳性率(85.5％,47/55)显著高于肺部疾病组(2/14)和健康对照组(1/12)(x2 =40.926,P＜0.05).肺结核组T-SPOT.TB的早期分泌抗原(ESAT-6)孔(A孔)和培养滤过蛋白(CFP-10)孔(B孔)SFC分别为70.00(27.00～125.00)和80.00(17.00～ 180.00),显著高于肺部疾病组和健康对照组,差异具有统计学意义(x2 =35.376和30.485,P值均＜0.05).T-SPOT.TB诊断菌阳和菌阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.6％和80.0％,88.5％和88.5％,91.2％和84.2％,85.0％和85.2％,差异无统计学意义(P＞0.05).痰菌及T-SPOT.TB均阳性的20例活动性肺结核患者治疗前测试孔A和孔B的SFC分别为75.50(41.25 ～116.25)和56.25(105.00～225.00),治疗2个月的测试孔A和孔B的SFC分别为41.0(18.00～68.75)和72.50(42.25～158.75),较治疗前下降(Z=-3.213和- 3.622,P值均＜0.05)；治疗6个月末,测试孔A和B的SFC分别为25.00( 5.75～52.25)和55.00(6.25 ～ 122.50),较治疗前明显下降(Z=-3.921和-3.923,P＜0.05),较治疗2个月时下降差异也有统计学意义(Z=-3.926和-3.884,P＜0.05).结论 T-SPOT.TB对诊断结核分枝杆菌感染及监测抗结核治疗疗效上有重要意义,且对痰菌阴性肺结核具有重要的诊断价值.
