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HPLC方法检测水及水生动物中软骨藻酸
为了解水及水生动物体内软骨藻酸的污染状况,采用高效液相色谱(HPLC)方法检测了部分水及水生动物中软骨藻酸的含量.结果表明,HPLC方法是检测水及水生动物中软骨藻酸的简便有效方法.部分海洋贝壳动物体内检出软骨藻酸;海水及地面淡水中未检出软骨藻酸.为防止软骨藻酸中毒,应加强软骨藻酸污染状况的监测.
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调肝、补肾、健脾方药对慢性心理应激大鼠单胺类神经递质影响的比较研究
目的:观察慢性心理应激反应大鼠血浆和下丘脑多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)的变化及调肝、补肾、健脾方药对其影响.方法:Wistar大鼠按体重随机分为6组,即对照组(C),模型组(M),调肝中药(加味四逆散)组(C1),人参总皂甙组(C2),补肾中药(肾气丸)组(C3),健脾中药(四君子汤)组(C4).采用束缚限制活动空间的方法造成慢性心理应激大鼠模型,所有药物灌胃给药.采用电化学高效液相色谱分析方法检测血浆和下丘脑DA、5-HT、E、NE含量.结果:应激大鼠血浆和下丘脑DA、5-HT含量明显降低(均P＜0.01),血浆NE、E含量明显升高(均P＜0.01),而下丘脑NE含量无明显变化.血浆5-HT/NE、5-HT/E及下丘脑5-HT/NE均明显降低(均P＜0.01).加味四逆散可以升高应激大鼠下丘脑和血浆中DA、5-HT含量(均P＜0.01),并能降低血浆中NE、E含量(均P＜0.01),升高下丘脑和血浆5-HT/NE以及血浆5-HT/E(P＜0.05或P＜0.01).肾气丸、四君子汤及人参总皂甙虽然对有些指标有影响,但对心理应激的整体调节作用不如加味四逆散.结论:加味四逆散对慢性心理应激大鼠血浆和下丘脑单胺类神经递质的代谢紊乱均有良好的调节作用,调肝、补肾、健脾治法方药中以调肝治法方药的综合调治作用为显著.
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复方中药及植物药产品质量控制的现状与展望
近20年来中药及植物药的质量控制有了飞跃的进步,产品质量评价由单一指标成分的分析逐步向多组分化学成分分析,有效地阻止了市场上掺假的商业行为,以确保产品质量稳定.近几年对复方植物药的研究分析有了突破性的进展,通过对单味药材及其复方中的多组方化学成分群在同一平面上的含量分布变化的分析比较,为药理及临床研究提供了十分有意义的信息,为进一步挖掘中医药资源宝库提供了强有力的手段.
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H1受体介导对疼痛调节机制的影响
目的: 利用组胺H1受体遗传基因敲除模型鼠(-/-)与野生鼠(+/+)前脑切片进行灌流实验,探讨H1受体介导对疼痛调节机制影响的机理.方法 : 取(-/-)与(+/+)鼠的前脑组织纵横两方向切成 450 μm 间隔的棒状脑切片,与林格氏液混合后装在双通体玻璃圆筒内,以微量泵抽出,通过装有脑切片的玻璃瓶中收集标本,对两次高钾浓度的林格氏液刺激的游离量S2/S1的比进行评价,并在填加各种药物下进行灌流实验,从而检测其对游离出的5-羟色胺( 5-HT)的影响.结果: 没加药物负荷的对照组中(-/-)和(+/+)之间的5-HT游离量没有差别.添加组胺抑制了5-HT的游离,(-/-)鼠没有被抑制.添加相关药物进行药理学的方法学的实验结果也支持组胺通过H1受体介导抑制5-HT的游离. 结论: 在中枢神经系统中,组胺通过H1受体的介导抑制5-HT的游离使疼痛感受性增强.
关键词： H1受体遗传基因敲除 5-羟色胺 疼痛 高效液相色谱分析 -
小儿先天性心脏病术后肠道通透性的研究
目的 心脏手术中体外循环(extracorporeal circulation,ECC)的运用可引起肠道细胞的缺血缺氧,导致营养吸收障碍和肠粘膜屏障受损,缺血状态下肠道上皮通透性的增加早于肠道粘膜形态学的改变,所以测定肠道通透性的改变可反应先心病术后早期肠粘膜屏障功能的损伤.方法 选取先天性心脏病患儿10名,除外肠道病变和感染性疾病.分别于术前、术后24 h、术后96 h测定肠道通透性和血中内毒素浓度.采用高效液相色谱分析法(HPLC)测定尿中乳果糖(L)和甘露醇(M)的排泄比率(L/M)作为测定肠道通透性的指标,采取静脉血利用鲎试剂与合成基质(鲎三肽)的偶氮显色法来测定样品中微量的内毒素浓度.结果 先天性心脏病患儿手术后24 h肠道通透性增加(P＜0.01),血中内毒素浓度较术前上升(P＜0.01),术后96 h肠道通透性恢复,而血中内毒素仍维持在较高水平(P＜O.05).结论 小儿先天性心脏病术后肠道通透性增高,并出现内毒素血症.
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2′,3′-二脱氢-2′,3′-二脱氧-2-氨基-6-环丙胺基嘌呤核糖核苷在大鼠体内的药物代谢动力学和生物利用度
目的研究2′, 3′-二脱氢-2′, 3′-二脱氧-2-氨基-6-环丙胺基嘌呤核糖核苷(Cyclo-D4G, D4G前药)在大鼠体内经静注和口服的药物代谢动力学特征.方法采用高效液相色谱法测定Cyclo-D4G在大鼠血浆和尿液中的浓度.结果静注后, 血浆中Cyclo-D4G的消除半衰期是0.78±0.14 h (±s), 总清除率为0.90±0.21 L·h-1·kg-1, 原药在尿中的排泄分数约为20%, 稳态分布体积为0.91±0.07 L·kg-1.口服后,血浆中Cyclo-D4G的消除半衰期为0.83±0.13 h (±s),总清除率为3.81±2.03 L·h-1·kg-1,原药在尿中的排泄分数约为9%.Cyclo-D4G的口服生物利用度为26.9%.结论 Cyclo-D4G表现出较好的药代动力学性质和较低的毒性,可以做进一步的动物试验和临床试验.
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小鼠急性重复缺氧后心脏匀浆中出现的一种新物质
对小鼠进行急性重复性缺氧,并测定未缺氧小鼠及缺氧小鼠心脏匀浆高效液相色谱图.发现小鼠缺氧后,心脏匀浆中出现一种新物质,且随小鼠缺氧耐受的增加,该物质的生成量增大.提示:该物质是与缺氧密切相关的物质,可能是一种能抵抗缺氧、增强耐受的物质抗缺氧因子,也可能是机体在抵抗缺氧过程中产生的代谢产物.
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美多芭对帕金森病患者血小板中五羟色胺影响的临床研究
目的 观察口服美多芭治疗帕金森病运动障碍时对体内的五羟色胺(5-HT)能神经体系的不良反应.方法 观察帕金森病35例口服美多芭1年后患者血小板5-HT含量的变化,同时给患者汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分,观察治疗前后患者精神症状改变.结果 美多芭治疗1年后患者血小板中5-HT含量明显降低,HAMD评分结果较治疗前明显增高.结论 美多芭治疗PD运动障碍症状的同时能导致体内的5-HT含量降低,这可能会加重患者的抑郁症状.
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三步法制备级纯化抗CD20(Fab')2
目的 在小规模蛋白纯化系统AKTA prime上建立制各级纯化抗CD20(Fab')2:的方法.方法 将通过高渗溶液提取的周质腔蛋白抗CD20(Fab')2依次经过离子柱、疏水柱和亲和柱纯化,采用蛋白电泳和高效液相色谱法分析检测其分离效果及纯度,同时测定其与Raji细胞的结合活性.结果 在该纯化条件下一次可获得8 mg纯度为96.678%的抗CD20(Fab')2,其与CD20+Raji细胞的结合活性与采用亲和柱联合分子筛柱得到的抗体活性基本一致.结论 三步法制备级纯化抗CD20(Fab')2操作简单,能获得制备级高纯度抗 CD20(Fab')2.
关键词： 抗CD20(Fab')2 三步法纯化 高效液相色谱分析 -
脊髓组织胍丁胺含量的测定及脊髓损伤后内源性胍丁胺含量的变化
目的 测定大鼠脊髓损伤前后内源性胍丁胺的浓度.方法 SD大鼠42只,随机分为假手术组和损伤后1、4、8、24、48、72 h组.采用改良Allen's打击法建立大鼠脊髓损伤实验模型.将各时段损伤部位的脊髓组织OPA-MCE柱前衍生处理后,行高效液相色谱分析及荧光检测,并以外标法计算样品浓度.结果 损伤前大鼠脊髓组织内源性胍丁胺含量为(0.64±0.11)μg/g;脊髓损伤后1 h,胍丁胺浓度轻度下降,损伤后4 h胍丁胺浓度开始升高,8～24 h达到高峰,以后逐渐回落,至3d时已接近正常水平.结论 哺乳动物中枢神经系统中胍丁胺浓度的大致范围应在0.2～1.1 μg/g之间.脊髓损伤后内源性胍丁胺浓度虽有明显升高,但尚未达到离体实验中阻断N-甲基-D门冬氨酸受体和抑制一氧化氮合酶活性的有效浓度,从而也就难以发挥其神经功能保护效应.
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党参中党参炔苷的HPLC分析
目的:分析不同来源党参中党参炔苷的含量.方法:采用高效液相色谱分析,依利特E1515900色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以乙腈-0.1%HAc(28:72)为流动相,检测波长267.3nm.结果:在选定的色谱条件下,党参炔苷分离度良好,线性好,线性范围宽,r=0.999 0,平均回收率98.1%,RSD=0.81%(n=6).测定结果显示,不同来源党参中党参炔苷的含量不同.结论:所建立的方法简便,灵敏,可以快速检测不同样品中的党参炔苷的含量.
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党参不同部位中党参炔苷的RP-HPLC分析
目的:分析不同产地党参其芦头、参体和参尾中党参炔苷的含量.方法:采用高效液相色谱分析,依利特E1515900C18色谱柱(4.6 mm×200 inrn,5μm),以乙腈腈-0.1%HAc(28:72,v/v)为流动相,检测波长267.3 nm.结果:在选定的色谱条件下,党参炔苷分离度好,线性范围宽,r=0.999 0,平均回收率98.1%,RSD=0.81%(n=6).结论:此方法简便、灵敏,可以快速检测不同样品中党参炔苷的含量,测定结果显示,党参不同部位党参炔苷含量不同.
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胆红素在肝脏的代谢及调节机制研究进展
胆红素是血红素的代谢产物,主要来源于红细胞血红蛋白的分解代谢,其他来源于肌红蛋白,细胞色素等的破坏降解.胆红素的清除在肝脏完成.在临床上,利用重氮法将人体内胆红素分成两种形式:直接胆红素和间接胆红素.然而,利用高效液相色谱分析,可将胆红素细分为4个组分:(1)α胆红素,即非结合胆红素.(2)β胆红素,即单葡萄糖醛酸胆红素;(3)γ胆红素,即双葡萄糖醛酸胆红素;(4)δ胆红素(Bδ),该胆红素与血清白蛋白结合,不能被肝细胞摄取,循环于血清中,在血浆中与清蛋白共价结合.它也是一种结合胆红素,但它不同于正常条件下,游离胆红素与血液中清蛋白松散结合后运输至肝脏时的形式,它是各种原因导致的结合胆红素反泵入血液循环,超过肾阂值,在非酶促条件下与白蛋白结合形成的.未进入肝细胞进行葡糖醛酸化的胆红素是非结合胆红素( unconjugated bilirubin,UCB),在血清里大多数与白蛋白结合而降低毒性;进入肝细胞经过生物转化的葡糖醛酸胆红素又名结合胆红素,具有亲水性[1].
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全自动高效液相色谱分析系统在地中海贫血诊断中的应用
目的：探讨全自动高效液相色谱（HPLC）分析检测系统在地中海贫血(地贫)诊断和筛查中的临床应用价值。方法入选100例基因诊断确诊地贫患儿及35例正常儿童，应用HPLC检测系统以及传统碱变性法、醋纤电泳法定量分析HbF和HbA2；并比较不同检测方法与相应β地贫基因诊断结果的符合率、敏感性与特异性。结果β地贫74例，64例单杂合子，10例复合杂合子；α地贫26例，1例单杂合子，25例复合杂合子。在地贫患儿和正常儿童中，HPLC法测定的HbF百分含量均高于碱变性法，差异有统计学意义（P<0.01）。HPLC法测得的HbF在α地贫患儿和正常儿童间的差异亦有统计学意义（P=0.011），对α地贫的分辨力高于碱变性法。α地贫患儿，HPLC法测得的HbA2百分含量高于醋纤电泳法，差异有统计学意义（P=0.010）；β地贫患儿，HPLC法和醋纤电泳法测得的单杂合子的HbA2含量均高于复合杂合子，差异有统计学意义（P<0.01）。HPLC方法测定HbF-HbA2（≥4.0%）联合MCV（<80 lf）、MCH（<27 pg），与α或β基因诊断的符合率达99.3%，灵敏度和特异度分别为99.0%和100.0%。结论采用HPLC法检测HbA2和HbF，并结合MCV、MCH，与基因诊断结果的符合率、灵敏度和特异度均高，可成为大规模筛查β地贫的一种理想方法。
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新建一种HPLC法测定不同产地连翘子中连翘苷含量
目的 建立检测连翘子中连翘苷含量的高效液相色谱分析方法.方法 采用Waters Symmetry C18(150 mm ×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(24∶76),流速为1.0 ml/min,检测波长205 nm,柱温35℃,检测各产地连翘子药材中连翘苷含量.结果 连翘苷浓度在0.59 ～ 59.00 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(r =0.9999,P=0.01),平均回收率为101.4％,RSD为0.6％(n=9).结论 该方法快速、灵敏、准确,可用于连翘苷的含量控制和连翘子药材的质量检查.
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国产美洛昔康片在健康人体内的药代动力学及相对生物利用度
目的研究国产美洛昔康片和德国产美洛昔康片(莫比可片,参比制剂)在20名健康志愿者体内的药代动力学及相对生物利用度.方法双交叉设计、反相高效液相色谱法测定美洛昔康血药浓度.结果国产美洛昔康片主要药动学参数分别为:半衰期(half time,t1/2,h):24.16±4.43;峰值浓度(peak concentration,Cmax,mg·L-1):1.637±0.279;达峰时间(peak time,Tmax,h):4.9±1.6;0～96h曲线下面积(areaunderthe curve,AUCo～96,mg·h·L-1):55.80±14.35;0～∞小时曲线下面积(AUC0～∞,mg·h·L-1):59.99±15.91.美洛昔康片对参比片的相对生物利用度(F,%)为:101.3±9.0.两者的lnAUC、lnCmax、平均峰保留时间(mean reserve time,MRT)经交叉试验下的方差分析和双单侧检验证明无显著性差异(P》0.05).结论美洛昔康片和莫比可片具有生物等效性.
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我国周期型马来丝虫六个省区虫株氨基酸的比较分析
目的本实验进行丝虫种内分类学研究探讨我国六个省七个不同地区马来丝虫是否存在种内的生物学特性差异.方法采用HPLC对贵州独山株、贵州荔波株、四川乐山株、湖北谷城株、安徽泾县株、浙江安吉株、福建建阳株马来丝虫成虫的18种虫体氨基酸含量及种类进行分析比较.结果七个地区马来丝虫虫体氨基酸的总含量经统计分析无明显的差异(P＞0.05),碱性氨基酸、酸性氨基酸以及芳香族氨基酸亦无明显的差异(P＞0.05),但在一些种类的氨基酸含量高低和个别氨基酸的缺如有一定的差异.结论七个虫株丝虫虽有微小的生物学差异,但目前尚未发现有明显的种内分化的迹象.
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射干中射干苷含量的高效液相色谱分析
目的:建立射干Belamcanda chinensis(L.)DC.异黄酮类成分射干苷(tectoridin)的含量分析方法.方法:C<,18>柱,流动相乙腈-水(12:88),柱温25℃,流速1.0mL·min<'-1>检测波长266 nm.结果:tectoridin的线性范围为0.002724～0.02724mg/mL(r=0.9999).平均加样回收率为98.55%,精密度RSD<2%(n=5).射干苷含量为0.30%-3.88%之间,均小于5%,鸢尾中射干苷的含量均大于5%,说明植物鸢尾中射干苷的主含量较高,因此,可从含射干苷5%的上下界限,将两种药材区别开来.结论:本方法简单、有效、可行,可用于射干的质量评价.
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高效液相色谱法对保健食品中低聚木糖的分析
低聚木糖作为一种新兴的保健产品,凭借其低热值和对双歧杆菌的高选择性增殖效果等品质而倍受关注.添加了低聚木糖的保健食品具有维持肠道菌群平衡,治疗肠胃功能紊乱,抗肿瘤,增强免疫系统功能,延缓机体衰老等一系列保健作用[1].作为保健食品,其含量的控制很关键,为了更好地控制产品质量,本文结合有关样品中低聚木糖含量的测定,进行了高效液相色谱分析的方法研究,现将研究结果报告如下.
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兔视网膜脱离眼后段谷氨酸含量的动态变化
目的观察兔视网膜脱离状态下玻璃体、视网膜内谷氨酸含量及其动态变化.方法建立视网膜脱离模型,应用高效液相反相柱前衍生法分别对正常眼及视网膜脱离后3,7,14,28天的兔玻璃体及视网膜内谷氨酸含量进行动态检测.结果视网膜脱离后玻璃体内谷氨酸含量各时间点明显增高,与正常对照组相比有显著性差异(P＜0.05);视网膜内谷氨酸含量3天,7天明显升高,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),以后逐渐减少.结论玻璃体、视网膜内谷氨酸含量的动态检测有助于视网膜脱离后视网膜结构与功能损害机制的探索.
