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氟铝联合对MC3T3-E1细胞Runx2、Osterix mRNA表达的影响
目的 观察氟铝单独及联合对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化及Runx2、Osterix mRNA表达的影响.方法 在细胞培养液中加入50μmol/L氟化钠或/和5μmol/L氯化铝,观察MC3T3-E1细胞增殖和分化能力,用RT-PCR法测定MC3T3-E1细胞Runx2和Osterix mRNA表这的情况.结果与对照组相比.氟铝联合染毒可显著提高MC3T3-E1细胞增殖和分化能力(P<0.05),MC3T3-E1细胞Runx2和Osterix mRNA的表达水平也显著提高(P<0.05),且氟铝具有协同作用(P<0.05).结论 氟铝联合通过刺激成骨细胞增殖、分化,提高成骨细胞Runx2和Osterix基因表达水平,从而促进骨形成.
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慢性氟砷联合暴露对大鼠骨骼Runx2及其下游相关因子的影响
目的 研究慢性氟砷联合暴露对大鼠骨骼代谢Runx2及其下游相关因子的影响.方法 将54只8周龄清洁级SD大鼠按析因设计方法随机分成9组,每组6只,雌雄各半,分为对照组、低氟组、高氟组、低砷组、高砷组、低氟低砷组、低氟高砷组、高氟低砷组及高氟高砷组.使用氟化钠(NaF,低氟组5mg/kg、高氟组20 mg/kg)和亚砷酸钠(NaAsO2,低砷组2.5 mg/kg、高砷组10 mg/kg)灌胃染毒6个月；测定大鼠骨骼中Runx2、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、成骨相关转录因子(Osterix)核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)蛋白浓度.结果 对照组、低砷组、高砷组无氟斑牙出现,低氟组、高氟组氟斑牙比例(分别为5/6、6/6)与对照组(O)相比,差异均有统计学意义(x2=8.57、12.00,p＜0.05).骨氟含量随着氟染毒剂量的增加而升高,无氟染毒组[对照组、低砷组、高砷组的几何均数(小值～大值)分别为0.005(0.003 ～0.009)、0.006(0.003～0.021)、0.007(0.002～0.100)mg/g]、低氟组[低氟组、低氟低砷组、低氟高砷组分别为3.395(2.416 ～5.871)、3.809(1.471 ～7.799)、3.853(1.473～6.732)mg/g]、高氟组[高氟组、高氟低砷组、高氟高砷组分别为70.086(46.183～ 131.927)、69.925 (40.503 ～ 96.183)、67.950(52.622 ～ 89.487) mg/g]组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).骨砷含量随着砷染毒剂量的增加而升高,其中低砷组[低砷组、低氟低砷组、高氟低砷组分别为7.195(5.060 ～9.860)、6.518(2.960 ～ 12.130)、6.970(3.400 ～9.730)μg/g]、高砷组[高砷组、低氟高砷组、高氟高砷组分别为8.823 (5.760 ～ 10.840)、9.470(7.230～12.860)、8.321(2.420 ～17.540)μg/g]浓度均高于无砷染毒组[对照组、低氟组、高氟组分别为1.785(0.300～3.750)、2.226(1.410～3.980)、2.030(1.040 ～3.850) μg/g],差异有统计学意义(P＜0.05),而低砷组与高砷组骨砷含量差异无统计学意义(P＞0.05).氟与Runx2、MMP-9、Osterix、RANKL蛋白含量间呈正相关(氟染毒量与蛋白含量间相关系数分别为0.647、0.354、0.582和0.613),骨氟含量与蛋白含量间相关系数分别为0.559、0.387、0.487、0.525,P值均＜0.01,砷染毒剂量与Runx2呈负相关(相关系数为-0.527,P＜0.05),与MMP-9、RANKL、Osterix无相关关系(P＞0.05).氟砷联合染毒与Runx2、MMP-9、RANKL、Osterix蛋白含量具有交互效应(F值分别为3.88、15.66、2.92、6.42,P值均＜0.05).结论 氟砷联合暴露对大鼠骨骼代谢Runx2及其下游相关因子的交互作用表现为拮抗作用.
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长期注射激素对兔股骨头骨组织中TGF-β1、MMP-2、BGP及RunX2表达的影响
目的:观察激素性股骨头坏死兔模型骨组织中相关因子的表达情况,探讨激素性股骨头坏死的可能作用机制.方法:健康普通级新西兰家兔20只按完全随机原则分成两大组(试验组10只,对照组10只),试验组注射甲基泼尼松龙造激素性股骨头坏死兔模型.两组兔行X线片、MRI检查,并采用免疫组织化学检测股骨头标本骨组织中TGF-β 1、MMP-2、BGP表达水平,采用qPCR检测股骨头标本骨组织中RunX2的表达水平.结果:试验组兔X线片检查、MRI检查以及病理检查均示股骨头坏死,对照组兔X线片检查、MRI检查以及病理检查均无股骨头坏死征象.免疫组织化学检测试验组兔股骨头骨组织中TGF-β 1、MMP-2、BGP的表达结果较对照组低,差异均具有统计学意义(P＜0.001);qPCR检测试验组兔股骨头骨组织中RunX2信号的表达结果较对照组低,差异均具有统计学意义(P＜0.001).结论:激素性股骨头坏死的机制可能与股骨头骨组织中的TGF-β 1、MMP-2、RunX2、BGP表达水平过低相关.
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沉默Cx43基因对左归丸调控MC3T3-E1细胞Runx2、Osterix表达的影响
目的:研究沉默Cx43基因对左归丸含药血清调控MC3T3-E1细胞成骨相关基因Runx2、Osterix表达的影响.方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默Cx43基因,培养细胞分为正常对照(A)组、基因沉默(B)组、含药血清(C)组、中药加基因沉默(D)组.RT-PCR法检测培养第7、14、21天细胞Runx2、Osterix mRNA表达情况,进行组间对比.结果:左归丸含药血清可以促进MC3T3-E1细胞分化,显著增加分化中后期Runx2,尤其是Osterix mRN A的表达,A、C组比较,P＜0.05或P＜0.01.沉默Cx43基因导致细胞分化中后期Runx2、Osterix mRNA表达显著下降,A、B组比较,P＜0.05;同时导致左归丸上述作用显著下降,C、D组比较,P＜0.05.结论:沉默Cx43基因导致左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞Runx2、Osterix mRNA表达的作用显著下降.
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补肾活血汤调控Runx2及Osterix促进BMSCs成骨分化的作用研究
目的:探讨补肾活血汤提高骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal cells,BMSCs) Runx2及Osterix基因表达,促进成骨分化的作用.方法:从双侧股骨和胫骨分离大鼠BMSCs并使用腺病毒载体转染BMSCs细胞,构建过表达Runx2细胞株,Q-PCR法对转染细胞株进行鉴定,CCK8法评价补肾活血汤对BMSCs活性的影响,ALP半定量活性检测法评价补肾活血汤对BMSCs成骨分化的影响,RT-PCR、Western Blot法检测补肾活血汤对成骨相关标志物Runx2和Osterix表达量的影响.结果:成功构建过表达Runx2的BMSCs细胞,补肾活血汤组在25 μg/m-200 μg/ml之内对细胞活性没有影响,与正常培养组比较补肾活血汤100 μg/ml组ALP活性显著提高,与正常培养组比较补肾活血汤50 μg/ml、100 μg/ml组Runx2和Osterix的mRNA和蛋白相对表达量显著增加.结论:补肾活血汤能提高BMSCs中Runx2和Osterix的表达,促进成骨分化.
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miR-30 a抑制人骨肉瘤细胞143 B的迁移、侵袭和活力
目的：探讨miR-30a对人骨肉瘤细胞143B侵袭、迁移和细胞活力的影响。方法过表达或抑制miR-30a分别处理人骨肉瘤细胞143B。划痕实验观察细胞划痕愈合能力；Transwell 实验检测143B细胞迁移和侵袭能力；MTT实验检测细胞活力；定量PCR实验确认过表达miR-30a腺病毒有效性并且检测RUNX2 mRNA表达；Western blot检测细胞中RUNX2总蛋白表达。结果过表达miR-30a抑制了骨肉瘤细胞143B迁移和侵袭（P＜0.05），在72 h时， miR-30a明显抑制细胞活力（ P＜0.01）；抑制miR-30a的内源性表达后，143B细胞的迁移和侵袭能力增加（ P＜0.05），细胞活力也表现出上升水平（ P＜0.01）；同时过表达miR-30 a可以抑制RUNX2的蛋白表达，抑制内源性miR-30a后RUNX2蛋白水平表达增加（P＜0.05）。荧光素酶活性检测，miR-30a可以靶向于RUNX2（P＜0.01）。结论 miR-30a抑制骨肉瘤细胞143B的迁移、侵袭和活力，其作用可以能是通过抑制RUNX2的表达来实现。
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腺相关病毒介导的klotho基因表达对去势大鼠骨Runx2及MMP-13表达的影响
目的 探讨腺相关病毒介导的klotho(KL)基因表达对去势骨质疏松大鼠的调控作用.方法 SD雌性大鼠随机分为假手术组(S组)和手术组,外科去势术后12周再随机分为模型组(O组)、17β-雌二醇组(E组)、KL基因组(KO组)和空质粒组(GO组),实验12周后处死.取股骨、胫骨测骨密度；冰冻切片及免疫组化法观察肾KL荧光及KL蛋白表达；RT-PCR和免疫组化法检测骨Runx2、MMP-13 mRNA及蛋白表达；HE染色观察骨组织形态学变化.结果 KO组和E组骨密度高于O组和GO组(P＜0.05)；KO组大鼠肾有小鼠KL基因特异性表达；与O组相比,KO组Runx2 mRNA表达明显上调,MMP-13 mRNA表达显著下调(P＜0.05)；免疫组化分析KO组Runx2吸光度值为411±96,显著高于O组的353±50(P＜0.05)；KO组MMP-13吸光度值为397±84,显著低于O组的656±89(P＜0.05).KO组、E组和S组大鼠骨小梁排列紧密,连接成网,形态结构较完整,明显优于O组和GO组.结论 KL基因表达上调可减缓去势大鼠骨质疏松症的发展及骨组织微结构的破坏,提示KL基因可能在骨质疏松症的发展中扮演重要角色.
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酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响及机制研究
目的：探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及可能机制。方法体外分离培养大鼠 VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将 VSMCs 按随机数字表法分为正常对照组、高磷+ pH7.4、高磷+ pH7.1和高磷+ pH6.8(在高磷培养基的基础上调整 pH 值为6.8、7.1和7.4三个亚组)。刺激4 d 后,采用 RT-PCR 检测 L 型钙通道(LTCC)α1C、β2和β3亚基, Runt 相关转录因子2(Runx2)及 Smad1基因的表达；应用钙离子探针 Fluo-3/ AM 检测 VSMCs 胞外钙离子内流的效应变化。刺激14 d 后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组钙含量、ALP 活性、Runx2和 Smad1mRNA 的表达明显增高(88.26±6.43比22.39±3.19、94.33±3.08比20.39±1.18、0.37±0.02比0.01±0.00、0.65±0.05比0.07±0.01,均为 P ﹤0.05)；与高磷+ pH7.4组比较,高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的钙含量、ALP 活性、Runx2和 Smad1mRNA 的表达均降低(69.95±1.72和50.74±3.29、51.11±2.05和34.62±1.13、0.25±0.02和0.09±0.01、0.44±0.04和0.23±0.01,均为 P ﹤0.05)。与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组的 LTCCβ3亚基 mRNA 表达水平增加(0.80±0.01比0.34±0.13, P ﹤0.01),高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的 LTCCβ3亚基 mRNA 表达水平均下降(0.64±0.11和0.43±0.01,均为 P ﹤0.01)。各组之间 LTCCα1C 和β2亚基 mRNA 的表达差异无统计学意义(P =0.08和0.74)。与正常对照组比较,高磷+ pH7.4组的 VSMCs 胞内钙离子浓度增加(438.33±7.50比149.54±20.89,P ﹤0.05)；高磷+ pH7.1组和高磷+ pH6.8组的 VSMCs 胞内钙离子浓度均降低(329.66±16.64和234.00±17.43,均为 P ﹤0.01)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs 钙化,其可能是通过抑制 LTCC β3亚基表达,降低 VSMCs 钙离子内流,阻滞 VSMCs 发生表型转化来实现的。
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锁骨颅骨发育不全1个家系2例患者RUNX2基因突变检测报告及文献复习
目的 探讨RUNX2基因突变在锁骨颅骨发育不全(CCD)发病中的意义及中国家族性CCD的发病机制.方法 一个中国家系2例CCD患者均表现为锁骨发育不良、头颅矢状缝明显增宽、巨大骨质缺损和坐骨支缺失.本研究提取该家系中2例患者、6位健康成员的外周血及100名健康志愿者进行RUNX2基因测序.结果 发现2例患者均携带RUNX2基因第5外显子新突变(p.Arg225Gln).家庭中其他健康成员及100名健康志愿者均未发现RUNX2基因突变.结论 通过RUNX2基因检测,在中国人群中发现1个RUNX2基因新致病突变,扩展了CCD的基因突变谱,对阐明该病的发病机制及早期分子诊断有重要的意义.
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钛合金微粒通过smad通路下调成骨细胞Runx2表达
目的：探讨钛合金微粒（ Ti－6Al－4V）对smad4、 smad5、 smad8影响，了解微粒对促骨形成信号通路影响。方法根据Ti－6Al－4V微粒浓度高低，将成骨细胞分为正常对照组（0μg／mL）、 Ti－6Al－4V组（5、10、15μg／mL），采用RT－PCR和蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测培养72 h成骨细胞smad4、 smad5、smad8 mRNA和蛋白表达。结果培养72 h后，与对照组比较， smad 4、 smad5、 smad8 mRNA水平下降，差异有统计学意义（P＜0．05）， smad4 mRNA水平随Ti－6Al－4V微粒浓度增加呈抑制作用，差异有统计学意义（P＜0．05）， smad4、 smad5、 smad8蛋白水平分别与其mRNA表达变化趋势一致。结论 Ti－6Al－4V微粒下调受体调节蛋白smad5、 smad8和公用型蛋白Smad4表达，是Ti－6Al－4V微粒抑制核转录因子runx2表达关联因素之一。
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基底拉伸应变对小鼠成骨细胞Runx2表达的影响
目的 研究基底拉伸应变对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞Runx2表达的影响.方法 实验随机分为0 με、1000 με、1500 με、2000 με、2500 με、5000 με六组,采用卫生装备研究所自行研制的细胞基底应变加载装置对细胞进行加载,Western blot检测不同应变对成骨细胞Runx2蛋白表达的影响.此外采用Real-time PCR检测0 με、2500 με、5000 με三种强度应变对成骨细胞Runx2 mRNA表达的影响.结果 Western blot结果显示:1500 με、2000 με、2500 με组与0 με组相比Runx2蛋白表达显著增强(P＜0.01);5000με组与0 με组相比Runx2蛋白表达显著降低(P＜0.01);Real-time PCR结果显示:2500 με组与0 με组相比Runx2 mRNA表达显著降低(P＜0.01);5000 με组与0 με组相比Runx2 mRNA表达显著增加(P＜0.01).结论 ①生理强度的拉伸应变可显著增加MC3T3-E1细胞Runx2蛋白的表达,并且呈剂量依赖性,超生理强度5000 με显著降低Runx2蛋白表达.②同样强度的拉伸应变刺激下,Runx2基因表达与蛋白表达并不一致.
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葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系
目的 研究葛根素作用于成骨细胞MC3T3-E1后miRNA表达的变化以及与Runx2基因表达的关系.方法 RT-PCR和western blot法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平;miRNA表达谱检测葛根素作用于成骨细胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、PicTar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA;RT-PCR测定miRNA-204表达量;构建Runx23' UTR/突变型Runx2 3'UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor转染MC3T3-E1细胞,RT-PCR和western blot检测转染前后Runx2的mRNA表达量和蛋白表达量的变化.结果 与空白组比较葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表达均上升;miRNA-204表达水平下降;表达谱和靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;过表达miRNA-204后Runx2的蛋白表达水平下降,干扰miRNA-204表达后Runx2的蛋白水平上升.结论 葛根素在成骨细胞中可通过调节靶向Runx2基因的miRNA-204来促进细胞增值分化.
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补肾益髓中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Runx2 mRNA 及蛋白表达的影响
目的：观察去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织 Runx2 mRNA 及蛋白表达，探讨绝经后骨质疏松症（ Postmenopausal Osteoporosis，PMOP）的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理。方法去卵巢复制骨质疏松症大鼠模型，实验设正常组、模型组、假手术组、补肾益髓中药复方组、钙尔奇D组、骨疏康组。术后7d开始灌胃给药12周。应用XR－36型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度，应用OLYMPUS BX51显微镜观察股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构，实时定量RT－PCR及Western Blot检测骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达。结果（1）与正常组、假手术组比较，模型组股骨骨密度明显降低（ P＜0．001、P＜0．05），骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达明显降低（P＜0．001）。（2）与模型组比较，补肾益髓中药复方组、骨疏康组股骨骨密度明显升高（P＜0．05），补肾益髓中药复方组（P＜0．001）、钙尔奇D组（P＜0．05）、骨疏康组（P＜0．01）骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达明显上调。（3）与钙尔奇D组、骨疏康组比较，补肾益髓中药复方组骨组织Runx2 mRNA（P＜0．01、P＜0．05）及蛋白（P＜0．001）表达均明显升高。（4）股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构：与正常组、假手术组比较，模型组骨小梁形态结构完整性差，有些部位破坏、断裂，余留骨重建空间较多；各给药组骨小梁形态结构均改善，结构较紧密，余留骨重建空间减少，其中以补肾益髓中药复方组改善明显。结论骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达降低可能是PMOP的发病机制之一；补肾益髓中药复方可能通过上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达有效防治PMOP，其作用优于钙尔奇D、骨疏康。
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miR-137靶向作用RUNX2调控MC3T3-E1细胞成骨分化
目的 探讨miR-137对RUNX2的靶向作用及其对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.方法 通过软件预测miR-137与成骨标志基因RUNX2的结合位点.检测MC3T3-E1细胞诱导成骨分化过程中miR-137的表达变化.转染miR-137 mimics或miR-137 inhibitor后,再诱导MC3T3-E1细胞成骨分化,检测成骨分化标志物(RUNX2、ALP、OPN、OCN及OSX)表达变化.结果 经软件预测,miR-137与靶基因RUNX2有结合位点.MC3T3-E1细胞成骨分化过程中,miR-137表达下调.转染miR-137mimics的MC3T3-E1细胞成骨标志基因表达受到抑制,而转染miR-137 inhibitor组成骨标志基因呈不同程度表达上调.结论 miR-137通过靶向作用RUNX2基因调控MC3T3-E1细胞成骨分化.
关键词： miR-137 Runx2 MC3T3-E1细胞 成骨分化 -
左归丸和右归丸对大鼠脂肪干细胞增殖及成骨分化影响的比较
目的：比较左归丸、右归丸对大鼠脂肪干细胞（ ASCs ）增殖和成骨性分化的影响。方法成年大鼠15只，随机分为3组，分别以左归丸（ ZGW组）、右归丸（ YGW组）和生理盐水（ CON组）连续灌胃后制备含药血清。胶原酶消化法分离大鼠脂肪干细胞，成骨诱导21 d后，茜素红染色对细胞进行鉴定。分别采用CCK-8法、PNPP法测定加药诱导后ASCs的增殖能力及碱性磷酸酶表达差异；比色法检测细胞外钙离子浓度。 Western Blot法测定加药诱导7 d后的Runx2蛋白表达量。结果 ASCs细胞呈长梭形生长，增殖旺盛；茜素红染色显示为阳性。 CCK-8法检测结果显示，加药24 h及48 h时， YGW组OD值显著高于ZGW组及CON组（ P＜0.05）；加药72 h时，ZGW组、YGW组OD值均显著高于CON组（ P＜0.05），而两个加药组间并无显著性差异（P＞0.05）。 PNPP检测结果显示，ZGW组、YGW组OD值均显著高于CON组（P＜0.05）；其中YGW组OD值显著高于ZGW组（P＜0.05）。 YGW组细胞外钙离子浓度显著升高（P＜0.05）。 Western Blot结果显示，YGW组Runx2蛋白表达显著上调（ P＜0.05）。结论与滋肾阴法相比，温肾阳法在促进ASCs增殖及成骨分化方面均表现出明显优势。
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辐射对成骨细胞系MC3T3-E1细胞增殖和功能基因表达的影响
目的 为了深入了解辐射对成骨细胞的影响,探讨成骨细胞系MC3T3-E1细胞受到辐射后的功能变化.方法 将MC3T3-E1细胞体外培养,诱导成骨前体细胞和成骨细胞,经137Csγ射线照射后,用MTT法分析细胞的存活率,用实时定量PCR方法分析ALP、RunX2和M-CSF基因的mRNA表达.结果 MTT实验表明,随照射剂量增加,正常MC3T3-E1细胞生长率明显下降,而经过诱导分化的MC3T3-E1细胞生长率变化越来越不明显.实时定量PCR实验结果表明,经过137Csγ射线照射后,MC3T3-E1细胞的ALP,RunX2和M-CSF基因的mRNA表达出现明显的降低;经过诱导分化为成骨前体细胞的,ALP,RunX2和M-CSF基因的mRNA表达与相应的正常组相比没有明显的规律变化;经过诱导进一步分化成为成骨细胞的,ALP和RunX2表达下降,M-CSF表达呈现升高趋势.结论 辐射抑制早期成骨细胞的增殖、发育和分化.随着成骨细胞的分化,辐射对成骨细胞的增殖和生长发育影响减小,但是对成骨细胞发挥调节破骨细胞功能的作用并没有减少.
关键词： MC3T3-E1细胞 辐射 ALP Runx2 M-CSF -
辛伐他汀对 BMSCs 成骨分化早期β-catenin 及 Runx2表达的影响
目的：观察辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期β-catenin、Runx2表达的影响，探讨辛伐他汀在此过程中的作用及其作用机制。方法20只4周龄雌性SD大鼠应用颈椎脱位法处死，无菌条件下取双侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养。取相同第二代细胞随机分为实验组和对照组，实验组加入10-7 mol/L的辛伐他汀（ Simvastatin， SIM）（SIM溶于DMSO后制成母液再用完全培养基进行稀释），对照组加入含有等量DMSO的完全培养基。两组细胞在加入SIM 12 h和36 h后分别提取蛋白质和RNA，采用Western Blot法检测两组细胞β-catenin、Runx2蛋白的表达。采用实时定量-PCR法检测β-catenin、Runx2mRNA的表达。结果（1） Western Blot 结果：辛伐他汀干预12h后β-catenin 和Runx2蛋白表达水平实验组与对照组相比无显著增高，两组间的差异均无统计学意义（ P＞0.05）；辛伐他汀干预36h后实验组与对照组相比β-catenin 和Runx2蛋白表达水平显著增高，两组间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）实时定量-PCR结果：辛伐他汀干预12 h和36 h后β-catenin mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达增高，两组间的差异有统计学意义（ P＜0.05）；辛伐他汀干预12 h和36 h后Runx2 mRNA的表达水平实验组与对照组相比表达有一定程度的增高，但两组间的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论辛伐他汀体外给药对大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化早期有一定作用，这涉及到Wnt信号通路的活化，但是在不同的时间点所起作用有所差别。
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瑞舒伐他汀对体外培养人成骨细胞增殖及 LRP5、Runx2基因表达的影响
目的：观察不同浓度的瑞舒伐他汀对体外培养的人成骨细胞增殖及LRP5、Runx2基因表达的影响，探讨瑞舒伐他汀影响骨代谢可能的分子机制。方法（1）成骨细胞的培养与鉴定；（2）给予不同浓度（0、10-6、10-7、10-8、10-9 mol/L）的瑞舒伐他汀刺激体外培养的人成骨细胞，24 h后采用CCK-8比色法检测细胞的增殖能力，用荧光定量PCR法检测LRP5、Runx2的相对表达水平。结果瑞舒伐他汀可明显促进细胞增殖（P＜0.05），并促进成骨细胞LRP5、Runx2基因的表达（P＜0.05），10-7 M增殖明显、基因的表达量高。结论瑞舒伐他汀可促进成骨细胞的增殖，可能与LRP5、Runx2基因表达增加有关。
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骨形成过程中两条重要的信号传导通路
Wnt信号通路与BMP-2信号通路能够促进成骨细胞的分化和成骨细胞分泌的胞外基质的生物矿化,在这一过程中起着极其重要的作用.本文主要综述了,近年来对这两条信号通路研究的新进展.
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骨髓脂肪细胞与成骨细胞分化的信号转导调控机制
骨髓基质干细胞具有多向分化潜能和自我增殖能力.在不同调节因子的作用下分化为多种细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞、神经细胞和血管内皮细胞等.近年研究发现,骨质疏松的发生可能与骨髓内环境中骨髓基质干细胞向成骨细胞分化能力的减弱,使得骨髓脂肪细胞的数量增多,脂肪细胞与成骨细胞的比例失调有关.骨髓基质干细胞纵向分化为成熟骨髓脂肪细胞及成骨细胞的过程受到多种通路的调控和影响,而分化成熟的成骨细胞和脂肪细胞在一定条件下也可以相互转化,这提示我们以后是否可以通过药物或其他手段来抑制BMS向脂肪细胞的分化、增殖能力进而使更多成骨细胞生成,甚至通过脂肪细胞去分化再分化为成骨细胞,从而有效地刺激骨形成,以达到治疗骨丢失和骨代谢异常的目的.基于此,本文结合新研究进展,重点叙述骨髓基质干细胞向成熟脂肪细胞与成骨细胞分化过程中的信号转导调节机制以及两条信号转导间信号转导因子的相互影响.同时叙述了成熟骨髓脂肪细胞和成骨细胞在一定条件下相互转化可能的机制,希望可以为以后研究开发骨组织合成代谢药物提供新思路.
