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肝心宁对大鼠肝纤维化α-SMA、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响
目的 研究肝心宁对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响.方法 采用四氯化碳皮下注射并给予高脂低蛋白饲料、30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型.将68只雄性SD大鼠随机分为正常组11只,模型组15只,阳性对照组14只,肝心宁高剂量组14只,肝心宁低剂量组14只.6周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA、MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况.结果 与模型组比较,肝心宁高、低剂量组肝纤维化程度明显减轻,α-SMA及TIMP-1蛋白表达均明显降低,MMP-13表达明显升高.结论 肝心宁抑制大鼠肝纤维组织形成作用可能与其降低α-SMA、TIMP-1蛋白表达并促进MMP-13蛋白表达有关.
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腺相关病毒介导的klotho基因表达对去势大鼠骨Runx2及MMP-13表达的影响
目的 探讨腺相关病毒介导的klotho(KL)基因表达对去势骨质疏松大鼠的调控作用.方法 SD雌性大鼠随机分为假手术组(S组)和手术组,外科去势术后12周再随机分为模型组(O组)、17β-雌二醇组(E组)、KL基因组(KO组)和空质粒组(GO组),实验12周后处死.取股骨、胫骨测骨密度；冰冻切片及免疫组化法观察肾KL荧光及KL蛋白表达；RT-PCR和免疫组化法检测骨Runx2、MMP-13 mRNA及蛋白表达；HE染色观察骨组织形态学变化.结果 KO组和E组骨密度高于O组和GO组(P＜0.05)；KO组大鼠肾有小鼠KL基因特异性表达；与O组相比,KO组Runx2 mRNA表达明显上调,MMP-13 mRNA表达显著下调(P＜0.05)；免疫组化分析KO组Runx2吸光度值为411±96,显著高于O组的353±50(P＜0.05)；KO组MMP-13吸光度值为397±84,显著低于O组的656±89(P＜0.05).KO组、E组和S组大鼠骨小梁排列紧密,连接成网,形态结构较完整,明显优于O组和GO组.结论 KL基因表达上调可减缓去势大鼠骨质疏松症的发展及骨组织微结构的破坏,提示KL基因可能在骨质疏松症的发展中扮演重要角色.
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Th17细胞、IL-17和MMP-13在过敏性紫癜发病机制中的作用
目的:通过测定过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)患者急性期外周血中Th17细胞、IL-17、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的水平以及患者皮损处IL-17的表达,探讨HSP的免疫学发病机制.方法:应用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测HSP组和健康对照组外周血中Th17细胞比例;双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上述研究对象血浆中IL-17和MMP-13的浓度;免疫组织化学法检测HSP组皮损组织和健康对照组皮肤组织IL-17的表达情况.结果:HSP组急性期外周血中Th17细胞比例为(1.21±0.59)％,明显高于对照组的(0.71±0.26)％(t=4.907,P＜0.01);HSP组急性期血浆中IL-17和MMP-13浓度分别为(64.58±36.21) pg/ml和(17.57±5.40) ng/ml,均明显高于对照组的(26.16±14.90) pg/ml和(11.55±4.40) ng/ml(t=6.183,P＜0.01和t=5.022,P＜0.01);HSP组皮损组织中IL-17的免疫组织化学积分光密度值为(7.26±2.34),非常显著高于对照组的(4.61±1.82)(t=2.877,P＜0.01).结论:Th17细胞、IL-17以及MMP-13有可能参与过敏性紫癜的发病过程.
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αSMA、MMP -13及VEGF在应用口服枸杞多糖预防动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义
目的 探讨αSMA、MMP - 13及VEGF在应用枸杞多糖治疗动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义.方法 将24只雄性新西兰白兔随机分成3组:空白对照组、模型组、预防组,每组8只.空白对照组喂饲普通饲料,模型组喂饲含2％胆固醇的饲料,预防组喂饲含2％胆固醇的饲料,并在每天早晨饲料中按体重加入枸杞多糖(LBP)20mg/kg.第16周末空气栓塞处死所有动物并观察主动脉形态学变化及应用免疫组织化学染色进行指标的检测及分析.结果 与空白对照组相比,模型组全部形成动脉粥样硬化模型,预防组也形成了动脉粥样硬化,但是斑块厚度明显低于模型组.通过免疫组织化学染色发现:预防组与模型组比较,主动脉斑块厚度和斑块内平滑肌细胞明显减少；血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达降低,预防组与模型组相比,VEGF的阳性表达率显著减小(P＜0.05)；MMP-13(Matrix metalloproteinase 13)的表达降低,预防组与模型组相比,MMP - 13的阳性表达率显著减小(P＜0.05).结论 1.口服枸杞多糖能明显抑制高脂血症所诱发的VSMC增殖,促进已经增殖的VSMC凋亡；2.枸杞多糖能够降低动脉斑块内MMP - 13和VEGF的表达,从而抑制动脉粥样硬化的发生与发展；3.口服枸杞多糖能有效预防高脂饲料诱发的家兔主动脉AS斑块的形成.
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血清MMP-13和TIMP-2在骨肉瘤转移中的临床意义
目的 探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)在骨肉瘤患者中的表达情况及其在骨肉瘤转移中的临床意义.方法 选取52例骨肉瘤患者的标本,应用免疫组织化学法检测MMP-13与TIMP-2在骨肉瘤标本中的表达水平.结果 在各种组织学分型的骨肉瘤标本中均可见到MMP-13有不同程度的表达,其阳性表达率为77.8%~83.3%,而TIMP-2的阳性表达率较低,为30.0%~40.0%.不同组织学分型骨肉瘤患者的MMP-13和TIMP-2阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).MMP-13在男性和女性骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为79.4%和77.8%,TIMP-2在男性和女性骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为32.4%和27.8%,差异均无统计学意义(P﹥0.05).MMP-13在上肢、下肢和其他部位骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为80.0%、78.0%和100%,差异无统计学意义(P﹥0.05);TIMP-2在上肢、下肢和其他部位骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为30.0%、31.7%和0,差异无统计学意义(P﹥0.05).MMP-13在有转移和无转移的骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为100%和34.1%,TIMP-2在有转移和无转移的骨肉瘤患者中的阳性表达率分别为9.1%和61.0%,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 MMP-13和TIMP-2与骨肉瘤的转移密切相关,可作为判断骨肉瘤转移的指标.
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三阴性乳腺癌组织STAT3、AR、MMP-13表达与预后状况的关系研究
目的：探讨三阴性乳腺癌组织中信号转导因子及转录活化因子3（STAT3）、雄激素受体（AR）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）表达与预后状况的关系。方法选取三阴性乳腺癌患者组织180例作为研究组，同期选取行乳腺纤维腺瘤切除术患者正常乳腺组织160例作为对照组，采用免疫组织化学SP法检测STAT3、AR、MMP-13表达情况。结果研究组STAT3、AR、MMP-13阳性表达率明显高于对照组，两组比较差异具有统计学意义（P﹤0.05）。STAT3、AR、MMP-13评分与TNM分期、腋窝淋巴结转移呈正相关（P﹤0.05），与组织学分化程度呈负相关（P﹤0.05）。经Cox多因素分析显示，STAT3、AR、MMP-13阳性表达与TNM分期、组织学分级、淋巴结转移均为TNBC患者预后的影响因素。结论三阴性乳腺癌组织STAT3、AR、MMP-13阳性表达明显增高，且可能与临床病理特征与预后状况具有紧密的关系。
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MMP-12和MMP-13基因启动子区功能性多态与喉癌遗传易感相关性研究
目的:探讨基质金属蛋白酶-12(matrix metalloproteinases-12,MMP-12)基因启动子区-82A/G和MMP-13基因启动子区-77A/G基因多态(single nucleotide polymorphism,SNP)与中国北方汉族人群喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)发病易感性的相关性.方法:采用聚合酶链式反应-连接酶检测反应(PCR-LDR)技术检测148例LSCC患者和148例健康对照个体MMP-12-82A/G多态(rs2276109)、MMP-13-77A/G多态(rs2252070)的基因型.结果:患者组中MMP-12-82A/G多态的A、G等位基因频率(98.6％、1.4％)与对照组(93.6％、6.4％)相比差异有统计学意义,P=0.001;基因型频率分布与对照组相比差异有统计学意义,P=0.001;与A/A基因型相比,A/G基因型可显著增加喉鳞状细胞癌的发病风险,OR=5.30,95％CI:1.76～16.00.MMP-13-77A/G多态的A、G等位基因频率在患者组中为42.2％和57.8％,与对照组的32.4％和67.6％相比差异有统计学意义,P=0.01;但基因型频率分布与对照组相比差异无统计学意义,P=0.07.进一步分析发现,该遗传模型为显性遗传.结论:MMP-12-82A/G多态、MMP-13-77A/G多态与LSCC发病风险有关,-82G与-77A等位基因可能成为预测中国北方汉族人群喉鳞状细胞癌发病风险的独立危险因素.
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S100A4调节MMP-13表达对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响
目的 探讨靶向S100A4对甲状腺癌细胞侵袭和转移的影响.方法 以甲状腺癌BCPAP细胞或暴露于MMP-13抗体24 h后的BCPAP细胞为研究对象,将S100A4基因小干扰RNA (siRNA)或S100A4/cDNA通过脂质体转染法转染BCPAP细胞;48 h后采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测S100A4 mRNA、MMP-13 mRNA和蛋白水平;Transwell侵袭实验和划痕实验检测BCPAP细胞侵袭能力的改变.结果 转染S100A4 siRNA 48 h后,siRNA组S100A4mRNA表达量为(0.25,0.12),阴性对照组(NC)为(1.19,0.41),空白对照(Blank)组为(1.22,0.38),差异有统计学意义,H=13.68,P＜0.05;siRNA组S100A4蛋白表达量为(0.40,0.21),NC组为(0.88,0.29),Blank组为(0.91,0.36),差异有统计学意义,H=15.74,P＜0.05;siRNA组MMP-13mRNA表达量为(0.23,0.13),NC组为(1.08,0.28),Blank组为(1.12,0.37),差异有统计学意义,H=14.92,P＜0.05; siRNA组MMP-13蛋白表达量为(0.42,0.16),NC组为(1.03,0.35),Blank组为(1.07,0.41),差异有统计学意义,H=17.64,P＜0.05.质粒瞬时转染48 h后,S100A4 cDNA组S100A4蛋白表达量为(0.96,0.34),pCMV2-Myc组为(0.35,0.19),Blank组(0.37,0.22),差异有统计学意义,H=19.76,P＜0.05.S100A4 cDNA组MMP-13蛋白表达量为(1.21,0.47),pCMV2-Myc组为(0.38,0.21),Blank组为(0.37,0.23),差异有统计学意义,H=21.53,P＜0.05;anti-MMP-13组蛋白表达量为(0.25,0.14),与S100A4 cDNA组相比差异有统计学意义,z=5.89,P＜0.05.细胞转染siRNA 48 h后,Blank组穿膜细胞数为(37.86,3.52),NC组为(38.59,4.74),siRNA组为(11.38,2.16),差异有统计学意义,H=16.28,P＜0.05;Blank组划痕48 h后宽度为(0.24,0.11) cm,NC组为(0.28,0.05) cm,siRNA组为(1.98,0.13) cm,差异有统计学意义,H=16.65,P＜0.05.质粒瞬时转染细胞48 h后,Blank组穿膜细胞数为(39.68,3.76),pCMV2-Myc组为(41.66,8.02),S100A4 cDNA组为(70.14,7.85),差异有统计学意义,H=19.24,P＜0.05;anti-MMP-13组为(43.56,7.86),与S100A4 cDNA组相比差异有统计学意义,z=5.87,P＜0.05;Blank组划痕48 h后宽度为(0.31,0.11) cm,pCMV2-Myc组为(0.29,0.09) cm,S100A4 cD-NA组为0,差异有统计学意义,H=21.84,P＜0.05;anti-MMP-13组为(1.96,0.17) cm,与S100A4 cDNA组相比差异有统计学意义,z=12.03,P＜0.05.结论 S100A4通过调节MMP-13表达影响甲状腺癌细胞的侵袭能力,靶向S100A4可下调MMP-13表达抑制甲状腺癌的侵袭转移.
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肝心宁对大鼠肝纤维化α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响
目的 研究肝心宁对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响.方法 将68只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组.采用四氯化碳皮下注射并饲以高脂低蛋白饲料和30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型.各组分别处理,6周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA,MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况.结果 肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P<0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,α-SMA及TIMP-1均明显降低,P<0.05;肝心宁高剂量组、肝心宁低剂量组和秋水仙碱组与模型组相比,MMP-13显著升高,P<0.05;肝心宁高剂量组与肝心宁低剂量组和秋水仙碱组相比,MMP-13显著升高,P<0.05.结论 肝心宁抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA,TIMP-1蛋白表达并增强MMP-13蛋白表达有关.
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5种乳腺癌相关指标血清检测的临床价值分析
目的 了解hMAM、NF - κB、CA153、OPN和MMP - 135种血清指标诊断乳腺癌的临床价值.方法 ELISA法检测hMAM、NF -κB、OPN和MMP - 13,雅培i2000全自动发光仪检测CA153,比较乳腺癌组(59例)和正常对照组(35例)外周血中5种指标的表达特点,验证其临床价值.结果 与正常对照组比较,hMAM、NF - κB、CA153和OPN在乳腺癌中高表达,且差异有统计学意义；对乳腺癌的诊断价值,从高到低分别为:hMAM、NF - κB、CA153和OPN.不同病理分期中,CA153和OPN在乳腺癌晚期显著升高.结论 hMAM、NF - κB、CA153和OPN对乳腺癌诊断具有一定的价值,其中hMAM更好；当CA153和OPN明显升高,可能提示乳腺已进入中晚期.
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趋化生长因子受体4和基质金属蛋白酶-13在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义的研究
目的 探讨趋化生长因子受体4(CXCR4)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在喉鳞状细胞癌中的表达,并研究其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法和RT-PCR方法检测喉鳞状细胞癌组织及远离肿瘤组织的正常喉黏膜组织中CXCR4和MMP-13的蛋白及mRNA表达.结果 CXCR4和MMP-13在喉癌组织中呈过度表达,而自身正常喉黏膜弱表达或不表达;在肿瘤组织中,CXCR4的表达与患者的年龄、性别无关(P > 0.05),而与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移相关(P < 0.05);MMP-13的过度表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移相关(P < 0.05).蛋白表达水平情况与基因表达水平相一致.CXCR4和MMP-13在喉鳞状细胞癌的蛋白及mRNA表达水平呈显著正相关.结论 CXCR4和MMP-13可能参与了喉鳞状细胞癌的发生,在喉鳞癌的侵袭和转移中发挥着重要作用,联合检测 CXCR4和MMP-13有望成为喉鳞状细胞癌早起诊断和预后判断的分子指标之一.
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辛伐他汀对阿霉素致心衰兔心功能的影响
目的：探讨不同剂量辛伐他汀对阿霉素所致心衰兔保护作用及其抗心衰的机制。方法：雄性新西兰大耳白兔60只，随机数字表法分为正常对照组（CON）、CHF模型组（CHF）、CHF+辛伐他汀低剂量组（LD-SIM）、CHF+辛伐他汀中剂量组（MD-SIM）、CHF+辛伐他汀高剂量组（HD-SIM）。正常对照组（CON）给予耳缘静脉等体积生理盐水，每周1次，共10周。其余组均给予生理盐水注射液稀释的盐酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干预组同时给予低、中、高剂量辛伐他汀灌胃治疗，剂量分别为0.3 mg/（kg·d），1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。10周后测定大鼠心功能左室肥厚指数、ELISA测定血清中hs-CRP和MMP-13含量。结果：各药物治疗组可不同程度改善左室肥厚，其中辛伐他汀大剂量组与CHF模型组比较差异有统计学意义（P<0.01），而辛伐他汀中剂量组与其比较差异有统计学意义（P<0.05），而小剂量治疗组与之比较差异无统计学意义（P>0.05）；大中剂量治疗组心功能指标（±dp/dtmax）明显优于模型组，差异有统计学意义（P<0.01），辛伐他汀大剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义（P>0.05），而小剂量治疗组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）；各药物治疗组能降低血清中CRP、MMP-13含量（P<0.01或P<0.05）。结论：辛伐他汀能够预防左心肥厚，降低血浆CRP、MMP-13浓度，从而减缓细胞外基质（ECM）的降解改善心功能，这可能是辛伐他汀抗心衰作用机制之一。
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双氢青蒿素抑制四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的实验研究
目的：探讨双氢青蒿素（ DHA）对CCl4诱导的小鼠肝纤维化的抑制作用及其机制。方法2013年10月—2014年5月河北工程大学医学院中心实验室进行实验，将50只小鼠分为3组：对照组10只、模型组20只和治疗组20只。模型组与治疗组采用四氯化碳（ CCl4）腹腔注射的方法制备小鼠肝纤维化模型。治疗组小鼠按20μg／g体质量的DHA灌胃，每日1次，共12次；对照组、模型组小鼠给予等剂量的DMSO生理盐水灌胃，每日1次，共12次。HE和Masson三色染色法观察各组肝组织病理学变化；比色法测定肝组织中的羟脯氨酸的含量；Western blot方法检测基质金属蛋白13（MMP-13）及其组织抑制因子l（TIMP-1）的表达水平。结果 HE和Masson三色染色结果证实小鼠肝纤维化动物模型的成功建立。模型组小鼠肝内出现肝细胞脂肪变性，纤维组织明显增生，肝组织中MMP-13的表达降低，而羟脯氨酸含量和TIMP-1表达增加， MMP-13／TIMP-1值下降，与对照组相比差异均有统计学意义（ P ＜0构．05）。治疗组经过DHA治疗后，小鼠肝内纤维组织增生降低，肝组织中MMP-13的表达增加，而羟脯氨酸含量和TIMP-1表达降低，与模型组相比差异均有统计学意义（ P ＜0．05）。结论双氢青蒿素具有抗肝组织纤维化作用，提示可作为一种新型抗肝组织纤维化药物。
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封闭负压引流技术对人慢性创面组织中C-ski 及MMP-13mRNA 表达的影响
目的 研究人慢性创面在经封闭负压引流技术(vacuum-assisted closure,VAC) 治疗前后,创缘组织中C-ski 及基质金属蛋白酶MMP-13 表达的改变,从而探讨VAC 促进创面愈合的机制.方法 选取慢性创面病例共14 例,在治疗前,以及治疗后第1、4、7d 取创缘的全层皮肤组织,然后采用免疫组织化学检测样本组织的C-ski 及MMP-13 的表达变化,并应用RT-PCR 检测样本组织中C-ski mRNA 和MMP-13 mRNA 的变化.结果治疗前皮肤组织中C-ski 的表达较少,随着治疗时间的延长逐渐增加,治疗后第4d 起较治疗前显著增加(P <0.05).相反,治疗前皮肤组织中M M P -13 的表达较多,治疗第1d 后开始减少,治疗第4d 和7d 后显著减少(P<0.05),C-ski mRNA 和MMP-13 mRNA 的表达趋势同其蛋白表达变化一样.C-ski 阳性表达与MMP-13 阳性表达呈显著负相关(r=-0.891)(p<0.01).结论 VAC 治疗后,能够使创缘皮肤组织中的C-ski 表达增加,并且抑制了MMP-13 的表达,进而抑制MMP-13 的蛋白合成,抑制胶原和明胶的降解,促进慢性创面的愈合.
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温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响
目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制.方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组.采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材.采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达.结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P＜0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P＜0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关.
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补肾祛痰方对肥胖肾虚型骨关节炎大鼠相关因子表达的影响
目的:通过荧光定量分析法研究补肾祛痰方对肥胖肾虚型骨关节炎(Osteoarthritis,OA)大鼠leptin、Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE2 MMP-9、MMP-13与MMP-1的mRNA表达水平的影响.方法:大鼠分为正常组、模型组、补肾祛痰方低、中、高剂量组,硫酸氨基葡萄糖胶囊混悬液组.正常组与模型组ig生理盐水,各给药组按蠢量ig给药,连续7d.末次给药后,处死大鼠,在无菌条件下获取大鼠双膝关节软骨碎片,经脱钙处理后,用荧光定量分析法检测大鼠膝关节软骨碎片中的leptin、Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE2、MMP-9、MMP-13与MMP-1的mRNA水平.结果:与正常组比较,补肾祛痰方对肥胖肾虚型OA大鼠软骨组织中的Ob-Rb、TNFα、INFγ、PGE2、MMP-9与MMP-1表达的影响均无统计学意义,而对肥胖肾虚型OA大鼠软骨组织中的leptin与MMP-13表达的影响有统计学意义;其中模型组中大鼠软骨组织中的leptin与MMP-13的mRNA表达水平都有明显增加(P＜0.01);与模型组比较,补肾祛痰方组中、低剂量组与硫酸氨基葡萄糖胶囊混悬液组的LEP与MMP-13的mR-NA表达水平均有降低(P＜0.05),高剂量组中,LEP与MMP-13的mRNA表达水平均有明显降低(P＜0.01).结论:本试验所建立的肥胖肾虚型OA大鼠模型稳定,为国内OA大鼠的研究提供新模型;补肾祛痰方可显著降低肥胖肾虚型OA大鼠膝关节中leptin与MMP-13的mRNA水平,为该方后期的临床研究提供理论依据.
关键词： 补肾祛痰方 肥胖肾虚型膝关节炎大鼠 瘦素 MMP-13 荧光定量PCR -
医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎软骨MMP-1、MMP-3与MMP-13表达的影响
目的 观察医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶1/3/13(MMP-1/3/13)表达的影响.方法 成年新西兰大白兔36只,随机分为对照组12只、骨性关节炎组12只与医用臭氧水治疗组12只.采用Huhh法将骨性关节炎组与医用臭氧水治疗组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型.待造模成功后,医用臭氧水治疗组向兔膝关节腔内注射医用臭氧水2ml,注射浓度为20μg/ml,一周一次,共治疗3次,骨性关节炎组兔关节腔内注射空气;对照组实验动物不作处理.在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次干预1周后,用空气栓塞法处死实验兔,取下实验兔右膝关节软骨进行组织匀浆,采用Western blot与real time PCR方法测定关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的含量变化.结果 与对照组相比,造模成功后的骨性关节炎组和医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著降低,P＜0.01;与骨性关节炎组相比,采用医用臭氧水治疗后,医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著升高,P＜0.01.骨性关节炎组大鼠膝关节软骨组织中MMP-1、MMP-3与MMP-13的蛋白与mRNA表达水平比对照组明显升高,而医用臭氧水治疗组比骨性关节炎组显著降低,P＜0.01.结论 医用臭氧水对骨性关节炎的治疗作用可能与降低早期骨性关节炎关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的表达水平相关.
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骨关节炎滑膜组织中β-catenin和基质金属蛋白酶13的临床意义
背景:Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎病程中的作用已被大量动物实验和人标本试验验证.Wnt/β-catenin信号通路和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases,MMP-13)在骨关节炎的病理过程中都发挥重要作用,两者之间可能有某种潜在的联系.目的:检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎滑膜中的表达水平,探讨它们在骨关节炎发病过程中的相关性.方法:骨关节炎组取自行人工膝关节置换术或膝关节镜诊治术骨关节炎患者的关节滑膜组织,共54例;非骨关节炎组取创伤后行截肢术健康青年患者自愿捐赠的正常膝关节滑膜组织,共12例.根据改良的Mankin关节软骨病理评分标准分为非骨关节炎组及轻度、中度、重度骨关节炎组.采用免疫组化检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎患者滑膜组织中的表达,并进行相关性分析.结果与结论:①MMP-13免疫组化染色结果:非骨关节炎组全部为阴性;轻度骨关节炎组5例阳性、阳性率50%,中度骨关节炎组11例阳性、阳性率65%,重度骨关节炎组23例阳性、阳性率85%;②β-catenin免疫组化染色结果:非骨关节炎组1例染色阳性,阳性率为8%;轻度骨关节炎组7例阳性,阳性率70%;中度骨关节炎组14例阳性,阳性率82%;重度骨关节炎组25例阳性,阳性率93%;③β-catenin与MMP-13在骨关节炎患者滑膜中的含量呈现明显的正相关关系(r=0.806,P ＜ 0.001),其含量亦随着关节退变程度的加重而增加;④结果提示,MMP-13和β-catenin在骨关节炎组滑膜组织中均表现为高表达状态,两者在骨关节炎与非骨关节炎组表达差异有显著性意义,并且共同在骨关节炎病程中发挥作用.骨关节炎病变过程中β-catenin和MMP-13均发挥着重要的调控作用,并且MMP-13与β-catenin在参与骨关节炎软骨退变和滑膜炎症反应等病理变化过程中密切相关,这为骨关节炎的靶向基因治疗提供了新的理论方向和实验依据.
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种植体周围炎患者龈沟液中IL-18和MMP-13表达研究
目的 探讨龈沟液中白介素-18(IL-18)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达与种植体周围炎的关系,评价其作为种植体周围炎诊断客观指标的意义.方法 选择2011年5月至2013年5月在佳木斯大学口腔医学院口腔种植科行ITI种植体种植的患者30例作为研究对象(种植体40颗),根据种植体周围情况将其分为健康种植体组(28颗)和炎症种植体组(12颗);将对侧同名健康天然牙作为对照(健康天然牙组,40颗).分别检测各组的牙周探诊深度(PD)、出血指数(SBI)、龈沟液(GCF)量及GCF中的IL-18、MMP-13含量并进行分析.结果 炎症种植体组的PD、SBI值显著高于健康种植体组和健康天然牙组,差异有统计学意义(P＜0.05).炎症种植体组的GCF量以及GCF中IL-18和MMP-13含量均高于健康种植体组和健康天然牙组,差异有统计学意义(P＜0.05).健康种植体组与健康天然牙组比较,两组的PD、SBI、GCF量以及GCF中IL-18和MMP-13含量的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-18和MMP-13与种植体周围炎有密切关系,可作为种植体周围炎早期诊断的有效检测指标.
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补肾活血方对家兔骨关节炎滑液中IL-6和MMP-13表达的影响
目的：探讨补肾活血方对家兔骨关节炎滑液中基质金属蛋白酶13（MMP?13）和白介素6（IL?6）表达的影响，推断补肾活血方治疗骨关节炎的作用机制。方法选取新西兰家兔30只以改良型Hulth方法建立膝骨关节炎模型，随机分为空白组、模型组、补肾组、活血组和补肾活血组。分别给予对应的自拟汤剂，模型组给予生理盐水，在喂养后的第4周、第8周和第12周分批次提取膝关节滑液。应用ELISA法检测家兔膝骨关节滑液中MMP?13和IL?6的含量。结果家兔膝骨关节炎关节滑液中IL?6水平明显高于正常对照组，尤其第4周、第8周升高为明显（P<0.001），而第12周时IL?6与对照组比较无统计学差异；另外MMP?13水平在第4周、第8周及第12周均明显高于空白对照组（P<0.001）。给予自拟中药汤剂喂养第8周后补肾组、活血组、补肾活血组IL?6水平均明显下降，与模型组比较有统计学差异（P<0.001），但是在第12周时各组间无统计学差异，此外喂养第12周后3组的MMP?13水平也明显低于模型组（P<0.001）。结论 IL?6和MMP?13可能参与家兔膝骨关节炎发生发展。补肾活血方可以减少IL?6及MMP?13的表达，可能减轻骨关节炎的进展，并且优于单纯补肾方剂或活血方剂。
