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Fish检测舌鳞状细胞癌中EGFR基因扩增及临床应用价值初步研究
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)在舌鳞状细胞癌病变中基因扩增及临床意义.方法 选取齐齐哈尔市第一医院2005年1月~12月手术切除并经病理诊断的舌鳞状细胞癌患者156例为研究对象,用荧光原位杂交(FISH)技术检测EGFR基因的扩增情况,并进一步分析EGFR基因扩增与患者临床病理生理特征的关系.结果 FISH结果显示,46.2%(72/156)的舌鳞状细胞癌患者存在EGFR基因扩增,而EGFR基因的扩增与患者的性别、年龄、吸烟状态、饮酒状态及是否存在转移无关,差异无统计学意义(P>0.05).结论 EGFR基因扩增与患者性别、吸烟饮酒状态、等临床特征无明显关系,与患者预后的相关性及舌鳞状细胞癌的临床应用价值有待进一步研究.
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超声、CT/MR在舌鳞状细胞癌诊断中的意义探讨
目的 分析超声、CT/MR检查在舌鳞状细胞癌临床诊断中的应用意义,以期为临床实践提供参考.方法 选取我院于2015年5月~2016年5月接治的原发性舌癌28例与复发性舌癌患者12例作为研究对象,给予患者相同的超声检查与CT/MR检查,对比两组患者舌癌肿块和颈部淋巴结病变状况.结果 在小病灶检出率与颈部淋巴结转移阳性的检出率方面,CT/MR检查与超声检查,差异无统计学意义(P>0.05),相比于超声检查,CT、MR在侵犯周围组织和骨骼的评估中明显优于前者(P<0.05).结论 超声诊断用于舌鳞状细胞癌的术前与术后诊断效果较佳,但对于侵袭范围广、骨质破坏且发生病变的患者,综合使用超声诊断与CT/MR检查效果更佳.
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miR-214对人舌鳞状细胞癌增殖能力影响的体外实验研究
目的 研究microRNA-214(miR-214)对舌癌AW13516细胞增殖能力的影响及其相关机制.方法 建立MIR(miR-214 mimics)组、NC(阴性转染)组及无转染对照(MOCK)组细胞.采用RT-PCR法检测各组miR-214水平;Western印迹法检测HM1、PCNA、cyclin D1的表达,采用MTT实验检测细胞增殖能力;采用软琼脂集落形成实验和平板克隆形成实验检测细胞形成克隆的能力;采用流式细胞术观察各组细胞凋亡比例变化.结果 与阴性转染组和无转染对照组相比,miR-214 mimics干预AW13516细胞后,MIR组miR-214表达水平明显升高(P＜0.05),PIMl、PCNA、cyclin D1蛋白表达水平降低,细胞增殖能力明显降低,克隆形成能力明显减弱,凋亡比例明显升高(P＜0.05).结论 miR-214可能通过降低PIM1水平下调PCNA、cyclin D1蛋白表达,抑制舌癌AW13516细胞的增殖能力并促进其凋亡.
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覆膜支架在颈动脉爆裂综合征治疗中的应用1例
患者，女性，63岁。因“舌鳞状细胞癌”于2013年11月13日在外院行“舌部分切除术＋舌瓣转移修补术＋舌成形术”，术后6个月发现右颈部包块，行针吸活检提示转移性癌细胞，于2014年7月8日行“右颌下肿物切除＋淋巴结清扫术”，术后多次接受大剂量放疗，右颈部皮肤逐渐破溃，持续不愈合，软组织缺损变大，来本院烧伤科就诊时见颈部放射性溃疡，大小约12 cm ×12 cm ×8 cm （见图1）。因软组织缺损距离右侧颈动脉较近，为保护右颈动脉就诊于本院血管外科。完善颈部CT血管造影（computed tomography angiography， CTA）检查：可见溃疡底部清晰的颈动脉，溃疡基底中心位于颈动脉分叉，且上下累及颈总动脉中远端及颈内、颈外动脉起始部分（见图2）。诊断：软组织缺损（右颈部）、颈动脉爆裂综合征（carotid blowout syndrome ， CBS ）、颈部软组织感染、舌鳞状细胞癌、右颈部转移性鳞状细胞癌。
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中性粒细胞/淋巴细胞比值对舌鳞状细胞癌患者预后的预测价值
目的 舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是常见的头颈部肿瘤之一,其生长较局限,早期易发生淋巴结转移.本研究探讨术前外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)对TSCC患者预后的评估价值.方法 回顾性分析广州医科大学附属肿瘤医院2011-01-01-2014-12-31行根治性手术治疗的56例TSCC患者临床资料,根据患者术前外周血NLR分为低NLR组(NLR≤1.94,28例)和高NLR组(NLR＞1.94,28例),分析两组患者NLR与临床病理因素之间的关系,比较两组患者的总生存率(overall survival,OS)和无瘤生存率(disease-free survival,DFS).结果 NLR升高与患者年龄、性别、不良嗜好、肿瘤生长部位、临床分期、复发无显著相关(P＞0.05),而与肿瘤分化程度(P=0.003)、淋巴结转移(P=0.035)密切相关;低NLR组患者的1、3、5年OS分别为96.4％、85.7％和85.7％,高NLR组分别为78.6％、57.1％和53.6％;两组5年DFS分别为82.1％和39.3％,差异有统计学意义,P＜0.05.单因素回归分析显示,肿瘤中低分化、肿瘤临床分期(Ⅲ～Ⅳ期)、复发和术前NLR(NLR＞1.94)与患者OS、DFS相关,是患者预后不良的影响因素;多因素Cox回归分析显示,肿瘤中低分化、肿瘤临床分期(Ⅲ～Ⅳ期)、复发术前NLR(NLR＞ 1.94)是影响患者总生存期的独立预后因素.结论 术前高NLR(NLR＞ 1.94)是影响TSCC患者预后的独立危险因素,术前NLR升高提示TSCC患者预后不良.
关键词： 头颈部鳞癌 舌鳞状细胞癌 中性粒细胞/淋巴细胞比值 预后 -
舌鳞状细胞癌组织microRNA-29b表达生物学意义研究
目的:探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)组织中的表达及其生物学意义.方法:收集2012-01 02-2013-03-15江西省肿瘤医院头颈外科行手术切除的45例TSCC及对应癌旁组织(距离切缘＞2 cm),qRT-PCR技术检测miR-29b在TSCC及对应癌旁组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系;应用miR-29b mimic转染人舌鳞癌Tca-8113细胞,MTT和流式细胞技术检测转染后细胞增殖和凋亡变化,qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-29b潜在靶点Bcl-2 mRNA及蛋白的表达变化.结果:qRT-PCR结果显示,miR-29b在TSCC组织中的表达量为0.213±0.071,显著低于对应癌旁组织的1.873±0.114,t=2.531,P=0.031;miR-29b低表达与肿瘤体积增大(≥3 cm,x2=4.022,P=0.033)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ,x2=3.398,P=0.036)具有显著相关性;MTT结果显示,在Tca-8113细胞中转染miR-29b 48 h后可显著降低细胞增殖能力,P＜0.05;同时,转染miR-29b 72 h后细胞凋亡率由(2.31±0.98)％增加到(11.83±1.36)％,t=2.237,P=0.034.Real-time PCR及蛋白质印迹结果显示,转染miR-29b后可显著下调Tca-8113细胞内Bcl-2 mRNA及蛋白表达,P＜0.05.结论:TSCC组织中miR-29b表达下调并与其临床病理特征相关,miR-29b可能通过下调Bcl-2的表达来抑制舌鳞癌Tca-8113细胞增殖并促进其凋亡.
关键词： microRNA-29b 舌鳞状细胞癌 增殖 凋亡 Bcl-2 -
热疗对舌鳞癌Tca 8113细胞多药耐药蛋白及耐药性的影响
目的 探讨热疗对舌鳞癌Tca 8113细胞和耐药的Tca 8113/CBDEA细胞多药耐药蛋白表达和耐药性的影响.方法 应用免疫组化SP法检测热疔对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance associate protein 1,MRP1)和谷胱甘肽硫-转移酶π(glutathione S-tranferaseπ,GST-π)表达的影响和检测放疗对细胞内阿霉素浓度的影响.结果 Tca 8113/CBDEA细胞在热疗后4 h和24hMDR1、MRP1、GST-π耐药蛋白表达量明显下降(P＜0.01),Tca 8113细胞的耐药基因表达在4 h和24 h时亦有明显下降.热疗以后肿瘤细胞内阿霉素(ADM)浓度有明显上升.结论 热疗抑制了耐药蛋白的表达,增加了细胞内的药物浓度,,热疗可能是逆转其耐药提高化疗效果的一种有效手段.
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人滋养层细胞表面抗原2基因表达对舌鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
目的 探讨抑制中人滋养层细胞表面抗原2 (human trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)基因表达对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制,以期为预防和治疗TSCC提供依据.方法 选取2014年2月至2016年5月于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科行TSCC根治手术的患者46例,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测TSCC组织及相应癌旁组织中Trop2 mRNA及蛋白表达.分别用阴性对照小干扰RNA(阴性对照小干扰RNA组)、Trop2小干扰RNA (Trop2小干扰RNA组)转染CAL-27细胞,另设空白对照组,转染48 h后行蛋白质印迹法检测Trop2、Ki-67增殖指数、细胞周期蛋白D1、裂解胱天蛋白酶3、Notch1蛋白和Hes1蛋白表达,细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率.结果 TSCC中Trop2基因mRNA (5.72±1.13)及蛋白(0.77±0.06)表达均显著高于癌旁组织(分别为0.92±0.15、0.11±0.01)(P＜0.05);转染Trop2小干扰RNA后CAL-27细胞中Trop2的蛋白表达(0.08±0.01)显著低于空白对照组(0.46±0.05),Trop2小干扰RNA组细胞存活率[(64.28±4.12)％]、S期细胞[(14.54±1.02)％]、Ki-67蛋白(0.12±0.01)、细胞周期蛋白D1 (0.04±0.01)表达均显著低于空白对照组[分别为(100.00±1.02)％、(27.33士1.11)％、0.24±0.02及0.20±0.02]和阴性空白对照小干扰RNA组[分别为(96.55±2.43)％、(26.67±1.23)％、0.26±0.03及0.21±0.02],细胞凋亡率(23.55±1.45)％、G0/G1期细胞[(72.32±0.94)％]及裂解胱天蛋白酶3(0.16±0.02)、Notch1蛋白(0.62±0.06)、Hes1蛋白(0.50±0.05)表达均显著高于空白对照组和阴性对照小干扰RNA组(P均＜0.05).结论 抑制TSCC细胞中Trop2基因表达可降低癌细胞增殖,阻滞细胞于G1期并促进细胞凋亡,与上调Notch1信号通路相关.
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大鼠舌鳞状细胞癌外周血淋巴细胞亚群的变化及其与肿瘤的关系
本研究通过建立舌鳞癌SD大鼠动物模型,采用双色荧光抗体标记流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群,探讨舌鳞癌SD大鼠的免疫功能状况及其与病变进展的关系,以期为临床上舌鳞癌患者的免疫治疗提供理论依据.
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严重联合免疫缺陷小鼠异种移植人舌鳞状细胞癌的初步研究
目的 建立稳定的人舌鳞状细胞癌(TSCC)严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠异种移植瘤模型,初步研究其组织形态学以及生物学行为.方法 将未经治疗的新鲜人TSCC标本移植于SCID小鼠腹部皮下,当肿瘤生长至10 ～ 15 mm时,取出移植瘤再次移植传代,对比研究各代移植瘤的组织学形态,原位杂交以及免疫组织化学法检测肿瘤组织的来源.结果 75%(8/12)标本成功建立起稳定移植瘤模型,长传至第5代.组织形态学对比显示移植瘤保持了原代瘤的组织学特征和异质性;免疫组织化学证实肿瘤细胞的人源性和基质细胞的宿主源性.结论 成功建立人TSCC SCID小鼠异种移植瘤模型,较好的保持了原代肿瘤的特性.
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转化生长因子β1诱导人舌鳞状细胞癌细胞上皮-间质转化及其顺铂耐药性研究
目的 利用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人舌鳞状细胞癌(TSCC)细胞CAL27、顺铂耐药细胞CAL27-res发生上皮-间质转化(EMT),建立TSCC细胞发生EMT的实验研究模型.研究EMT对TSCC细胞顺铂耐药性及细胞增殖、凋亡的影响.方法 10 ng/ml的TGF-β1处理CAL27、CAL27-res细胞8 d,观察细胞形态学变化,Western blot 和细胞免疫荧光验证EMT相关上皮标记蛋白及间质标记蛋白表达的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,MTT法检测细胞半抑制率(It50),免疫荧光检测MDR、MRP、Topo Ⅱβ的表达,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡.结果 TGF-β1 可诱导CAL27、CAL27-res向间质细胞形态转化,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin的表达,细胞的迁移能力明显增强.IE50分别提高2.31倍(CAL27)和1.72倍(CAL27-res),MDR和MRP表达升高,Topo Ⅱβ表达降低.细胞增殖指数(PI)均明显降低(CAL27:χ2=16.799,P<0.001;CAL27-res:χ2=25.375,P<0.001),细胞凋亡指数(AI)均明显升高(CAL27:χ2=165.0797,P<0.001;CAL27-res:χ2=196.5640,P<0.001).结论 TGF-β1能够成功诱导CAL27、CAL27-res发生EMT并且明显增强细胞对顺铂的耐药性,同时抑制细胞增殖,促进凋亡.
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人舌鳞状细胞癌顺铂耐药细胞发生上皮－间质转化的研究
目的初步探讨人舌鳞状细胞癌（TSCC）化疗耐药与上皮-间质转化（EMT）的关系。方法以人舌鳞状细胞癌细胞、SCC15及其顺铂耐药细胞株CAL27／CDDP、SCC15／CDDP为研究对象。 MTT检测两组亲本细胞及耐药细胞的半抑制率（IC50），显微镜下观察两组亲本细胞及耐药细胞的形态，免疫荧光和Weston blot检测EMT相关分子标记蛋白E-cadherin和Vimentin的表达，Weston blot检测EMT转录因子Twist1和Slug的表达，Transwell及划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力，结果采用单因素方差分析。结果CAL27／CDDP较CAL27 IC50提高7.5倍（χ2＝13.8043，P＜0.01），SCC15／CDDP较SCC15 IC50提高8.3倍（χ2＝10.464，P＜0.01）。 CAL27和SCC15均为上皮细胞形态，CAL27／CDDP和SCC15／CDDP呈间质细胞形态，且两组耐药细胞上皮标记蛋白E-cadherin表达下调，间质标记蛋白Vimentin表达上调，EMT转录因子Twist1、Slug表达上调，细胞的侵袭迁移能力明显增强。结论顺铂能成功诱导人舌鳞癌细胞发生EMT。
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着丝粒蛋白-H对舌鳞癌细胞增殖促进作用的研究
目的 探讨导致恶性肿瘤出现细胞染色体非整倍数现象的着丝粒蛋白-H(CENP-H)在舌鳞癌中的表达情况,及其对舌鳞癌细胞增殖的影响.方法 舌鳞状细胞癌组织及其癌旁舌黏膜组织组成配对子,采用RT-PCR、Western blot分别检测8对配对子的舌鳞癌系TSCCa、Tca8113及原代培养的舌黏膜细胞中CENP-H mRNA水平和蛋白的表达水平;采用免疫组织化学SP法检测同样8对配对子舌黏膜中CENP-H的表达;采用MTT法、克隆形成实验法分析转染CENP-H对TSCCa细胞增殖能力的影响.结果 舌鳞状细胞癌中CENP-H在mRNA、蛋白质水平的表达高于舌黏膜上皮,且差异有统计学意义;免疫组化显示CENP-H高表达,且阳性染色定位于肿瘤细胞的细胞核,而在舌黏膜鳞状上皮细胞中未见表达;MTT法、克隆形成试验显示转染CENP-H后舌鳞癌细胞增殖能力明显高于未转染的对照组细胞(P ＜ 0.001).结论 舌鳞癌细胞中高表达的CENP-H对舌鳞癌细胞增殖起到促进作用,在舌鳞癌的发生发展中可能扮演重要角色.
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舌鳞癌红细胞生成素及其受体的表达和临床意义
目的 探讨红细胞生成素(Epo)和红细胞生成素受体(EpoR)在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达水平及其与微血管密度的关系,并结合临床病理资料评价其临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测具有完整临床病理资料的65例TSCC组织中Epo和EpoR表达情况,并同时检测其微血管密度,以50例癌旁组织作为对照.分析Epo和EpoR表达水平对TSCC患者预后的评估价值.结果 TSCC组织中Epo和EpoR的表达高于癌旁组织(P<0.05).Epo的表达与患者的年龄、微血管的密度、肿瘤分期相关(P<0.05).EpoR的表达与微血管的密度相关(P<0.05).Kaplan-Meier生存分析显示Epo和EpoR阳性表达组患者总体生存率显著低于其阴性表达组.多因素Cox回归分析表明Epo和EpoR表达水平是TSCC患者预后判断的重要因子(P<0.05).结论 Epo和EpoR在TSCC发生发展及肿瘤微血管形成过程中起到重要作用,可能是评估TSCC患者预后的潜在标志物.
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127例舌鳞状细胞癌患者单纯手术治疗的生存和预后分析
目的 探讨单纯手术治疗影响舌鳞状细胞癌(TSCC)患者预后的临床病理因素.方法 选择1996年1月至2007年1月间在中山大学附属第二医院口腔科首治的,经病理确诊且随访资料完整的单纯手术治疗的TSCC患者共127例.应用Kaplan-Meier 法分析生存结果 ,通过Cox 回归模型确立影响预后的独立因素.结果 127例单纯手术治疗的TSCC患者的平均生存时间为40.19个月,5年生存率为52.0%.单因素分析显示,影响TSCC患者预后的因素包括年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤临床分期和肿瘤复发等.多因素分析得出影响预后的独立因素为肿瘤复发.结论 肿瘤复发为TSCC预后的独立影响因子;淋巴结转移阴性TSCC患者单纯手术预后较好,中晚期TSCC伴淋巴结转移阳性患者单纯手术预后差,需进行综合性序列治疗.
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《中华口腔医学研究杂志（电子版）》对论文中使用缩略语的要求
论文中尽量少用缩略语。已被公知公认的缩略语可以不加注释直接使用,例如：DNA、RNA、HbsAg、PCR等。尚未被公知公认的缩略语以及原词过长、在文中多次出现者,若为中文可于文中第一次出现时写出全称,在圆括号内写出缩略语；若为外文可于文中第一次出现时写出中文全称,在圆括号内写出外文全称及其缩略语。例如：舌鳞状细胞癌(舌鳞癌),引导骨再生术(guide bone regeneration,GBR)。不超过4个汉字的名词不宜使用缩略语,以免影响论文的可读性。
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舌鳞状细胞癌患者临床病理因素对预后的影响
目的 分析评价舌鳞状细胞癌患者的临床病理因素对预后的影响.方法 随访收集46例舌鳞状细胞癌患者的临床资料(包括年龄、性别、病理分级、淋巴结转移、肿瘤大小、肿瘤侵犯中线、临床分期、手术治疗等),采用Kaplan-Meier法计算累积生存率,采用log-rank检验法进行单因素生存分析,应用Cox比例风险模型进行多因素生存分析.结果 46例舌鳞状细胞癌患者1年和3年生存率分别为76.1%和58.7%,单因素分析表明:不同病理分级、有无淋巴结转移、肿瘤是否侵犯中线、是否手术治疗对生存率的影响有统计学意义(P＜0.05),多因素分析则只有是否手术治疗是影响预后的独立因素(P＜0.05).结论 以手术为主的综合治疗是改善舌鳞状细胞癌患者预后的关键.
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舌鳞状细胞中郎格罕细胞的免疫组织化学研究
本实验采用S-100蛋白特异性标记郎格罕细胞(Lc),以免疫组织化学PAP方法对25例舌鳞状细胞癌(LSCC)的上皮及间质与25例正常口腔粘膜内Lc分布特点进行观察.发现LSCC病损组织中Lc数目与正常口腔粘膜组织对比,前者为正常口腔粘膜组织的19.5倍.在细胞分布上,正常口腔粘膜组织中Lc紧贴基底细胞层,而病变组织中的Lc则散布于癌巢和癌巢间的淋巴细胞中.所有组织标本中均有淋巴细胞浸润带出现.
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VEGF与MMP-9在舌癌中的表达及其临床意义
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测50例舌鳞状细胞癌及20例正常舌组织手术切除标本中VEGF与MMP-9的表达.结果 VEGF与MMP-9在舌癌中的表达与淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05),有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期者、MMP-9、VEGF的表达分别明显高于无淋巴结转移、TNM分期为I+Ⅱ期者(P<0.05).舌癌组织中MMP-9与VEGF的表达呈正相关(P<0.05).结论 VEGF和MMP-9在胃癌生长、侵袭和转移过程中起着重要作用,且二者之间可能存在协同作用.
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大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡及细胞周期的影响
[目的]研究大蒜素对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡以及细胞周期的影响并初探其机制.[方法]取对数生长期Tca8113细胞设空白对照组、大蒜素(50、25、12.5μg/mL)组和顺铂(40μg/mL)组,给药48 h后流式细胞术分析细胞周期的改变并检测细胞凋亡状况,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测细胞周期相关调控蛋白周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达.[结果]与空白对照组比较,大蒜素(50、25μg/mL)组细胞周期G2/M期比例显著提高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达显著下调且Bax mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),Bax/Bcl-2值显著提高(P<0.01),cyclin B1蛋白和CDK1蛋白显著上调、cyclin D1蛋白和CDK2蛋白显著下调(P<0.05或P<0.01).[结论]大蒜素具有促进人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡、阻滞细胞有丝分裂的作用,其机制可能与大蒜素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关.
